微生物限度檢查法

1、1.非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查微生物計(jì)數(shù)法2.非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查控制菌檢查法3.非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查微生物限度標(biāo)準(zhǔn)微生物計(jì)數(shù)法系用于能在有氧條件下生長的嗜溫細(xì)菌和真菌的計(jì)數(shù)。當(dāng)本法用于檢查非無菌制劑及其原、輔料等是否符合規(guī)定的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，應(yīng)按下述規(guī)定進(jìn)行檢驗(yàn)，包括樣品的取樣量和結(jié)果的判斷等。除另有規(guī)定外，本法不適用于活菌制劑的檢查。 本檢查法可采用替代的微生物檢查法，包括自動(dòng)檢測(cè)方法，但必須證明替代方法等效于藥典規(guī)定的檢查方法。微生物計(jì)數(shù)試驗(yàn)應(yīng)在受控潔凈環(huán)境下的局部潔凈度不低于B 級(jí)的單向流空氣區(qū)域內(nèi)進(jìn)行。檢驗(yàn)全過程必須嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，防止再污染，防止污染的措施不得影響供試品中

2、微生物的檢出。單向流空氣區(qū)域、工作臺(tái)面及環(huán)境應(yīng)定期進(jìn)行監(jiān)測(cè)。如供試品有抗菌活性，應(yīng)盡可能去除或中和。供試品檢查時(shí), 若使用了中和劑或滅活劑，應(yīng)確認(rèn)其有效性及對(duì)微生物無毒性。供試液制備時(shí)如果使用了表面活性劑，應(yīng)確認(rèn)其對(duì)微生物無毒性以及與所使用中和劑或滅活劑的相容性。計(jì)數(shù)方法包括平皿法、薄膜過濾法和最可能數(shù)（Most-Probable-NumberMethod，簡稱MPN 法）。MPN 法用于微生物計(jì)數(shù)時(shí)精確度較差，但對(duì)于某些微生物污染量很小的供試品，MPN 法可能是更適合的方法。供試品檢查時(shí), 應(yīng)根據(jù)供試品理化特性和微生物限度標(biāo)準(zhǔn)等因素選擇計(jì)數(shù)方法，所選的方法必須具備檢測(cè)充足樣品量的能力，以保證

3、所獲得的試驗(yàn)結(jié)果能夠判斷供試品是否符合規(guī)定。所選方法的適用性須經(jīng)確認(rèn)。供試品微生物計(jì)數(shù)中所使用的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行適用性檢查。供試品的微生物計(jì)數(shù)方法應(yīng)進(jìn)行方法適用性試驗(yàn)，以確認(rèn)所采用的方法適合于該產(chǎn)品的微生物計(jì)數(shù)。若檢驗(yàn)程序或產(chǎn)品發(fā)生變化可能影響檢驗(yàn)結(jié)果時(shí)，計(jì)數(shù)方法應(yīng)重新進(jìn)行適用性試驗(yàn)。培養(yǎng)基培養(yǎng)基測(cè)試菌株測(cè)試菌株?duì)I養(yǎng)瓊脂大腸、金葡、枯草TSA銅綠、金葡、枯草、黑曲霉、白念TSB銅綠、金葡、枯草玫瑰紅鈉瓊脂黑曲霉、白念SDA黑曲霉、白念SDA+抗生素黑曲霉、白念銅綠、金葡、枯草應(yīng)不得生長試驗(yàn)菌株試驗(yàn)菌株試驗(yàn)菌液的試驗(yàn)菌液的制備制備計(jì)數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查計(jì)數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查計(jì)數(shù)方法適用性試驗(yàn)計(jì)數(shù)方法適用

4、性試驗(yàn)需氧菌總數(shù)計(jì)數(shù)霉菌和酵母菌總數(shù)計(jì)數(shù)需氧菌總數(shù)計(jì)數(shù)霉菌和酵母菌總數(shù)計(jì)數(shù)金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)CMCC(B)26003)胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基或胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度30 35，培養(yǎng)時(shí)1824小時(shí)胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基和胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度30 35，培養(yǎng)時(shí)間不超過3 天，接種量不大于100cfu胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基/胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基（MPN 法），培養(yǎng)溫度3035，培養(yǎng)時(shí)間不超過3 天，接種量不大于100cfu銅綠假單胞菌（PseudomonasaeruginosaCMCC（B10 104胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基或胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)

5、溫度30 35，培養(yǎng)時(shí)間1824小時(shí)胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基和胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度30 35，培養(yǎng)時(shí)間不超過3 天，接種量不大于100cfu胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基/胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基（MPN 法），培養(yǎng)溫度3035，培養(yǎng)時(shí)間不超過3 天，接種量不大于100cfu枯草芽孢桿菌枯草芽孢桿菌(Bacillus(Bacillussubtilis) subtilis) CMCC(B) CMCC(B) 63 50163 501胰酪大豆胨胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基瓊脂培養(yǎng)基或胰酪大豆胨或胰酪大豆胨液體培養(yǎng)液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫基，培養(yǎng)溫度度30 30 3535，培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間時(shí)間18182424小時(shí)小時(shí)胰酪大豆

6、胨胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基瓊脂培養(yǎng)基和胰酪大豆和胰酪大豆胨液體培養(yǎng)胨液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫基，培養(yǎng)溫度度30 30 3535，培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間不超過時(shí)間不超過3 3 天，接種量天，接種量不大于不大于100cfu100cfu胰酪大豆胨胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基瓊脂培養(yǎng)基/ /胰酪大豆胨胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基（MPN MPN 法），法），培養(yǎng)溫度培養(yǎng)溫度30303535，培，培養(yǎng)時(shí)間不超養(yǎng)時(shí)間不超過過3 3 天，接種天，接種量不大于量不大于100cfu100cfu白色念珠菌(Candidaalbicans)CMCC(F) 98 001沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基或沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度20 25，培養(yǎng)時(shí)間

7、2 3天胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度30 35，培養(yǎng)時(shí)間不超過5 天，接種量不大于100cfu沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度 2025，培養(yǎng)時(shí)間不超過5 天，接種量不大于100cfu胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基（MPN 法不適用），培養(yǎng)溫度3035，培養(yǎng)時(shí)間不超過5 天，接種量不大于100cfu沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度 2025，培養(yǎng)時(shí)間不超過5 天，接種量不大于100cfu黑曲霉(Aspergillusniger)CMCC(F) 98 003沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基或馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度2025，培養(yǎng)時(shí)間57天，或直到獲得豐富的孢子胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度30 35，培養(yǎng)時(shí)間不

8、超過5 天，接種量不大于100cfu沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度 2025，培養(yǎng)時(shí)間不超過5 天，接種量不大于100cfu胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基（MPN 法不適用），培養(yǎng)溫度3035，培養(yǎng)時(shí)間不超過5 天，接種量不大于100cfu沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度 2025，培養(yǎng)時(shí)間不超過5 天，接種量不大于100cfua.菌種 試驗(yàn)用菌株的傳代次數(shù)不得超過5 （從菌種保藏中心獲得的干燥菌種為第0 代），并采用適宜的菌種保藏技術(shù)進(jìn)行保存，以保證試驗(yàn)菌株的生物學(xué)特性。計(jì)數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查和計(jì)數(shù)方法適用性試驗(yàn)用菌株見表1。b.菌液制備 按表1 規(guī)定程序培養(yǎng)各試驗(yàn)菌株。取金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯

9、草芽孢桿菌、白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物，用pH7.0 無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或0.9%無菌氯化鈉溶液制成適宜濃度的菌懸液；取黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物加入35ml 含0.05聚山梨酯80 的pH7.0 無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或0.9%無菌氯化鈉溶液，將孢子洗脫。然后，采用適宜的方法吸出孢子懸液至無菌試管內(nèi)，用含0.05聚山梨酯80 的pH7.0 無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或0.9%無菌氯化鈉溶液制成適宜濃度的黑曲霉孢子懸液。菌液制備后若在室溫下放置，應(yīng)在2 小時(shí)內(nèi)使用；若保存在28，可在24小時(shí)內(nèi)使用。穩(wěn)定的黑曲霉孢子懸液可保存在28，在驗(yàn)證過的貯存期內(nèi)使用。為確認(rèn)試驗(yàn)條件是否符合要求，應(yīng)進(jìn)行陰性對(duì)照試

10、驗(yàn)， 陰性對(duì)照試驗(yàn)應(yīng)無菌生長。如陰性對(duì)照有菌生長，應(yīng)進(jìn)行偏差調(diào)查。微生物計(jì)數(shù)用的成品培養(yǎng)基、由脫水培養(yǎng)基或按處方配制的培養(yǎng)基均應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)基適用性檢查。按表 1 規(guī)定，接種不大于100cfu 的菌液至胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基管或胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基平板或沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板，置表1 規(guī)定條件下培養(yǎng)。每一試驗(yàn)菌株平行制備2 管或2 個(gè)平皿。同時(shí)，用相應(yīng)的對(duì)照培養(yǎng)基替代被檢培養(yǎng)基進(jìn)行上述試驗(yàn)。被檢固體培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)與對(duì)照培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)的比值應(yīng)在0.5-2 范圍內(nèi)，且菌落形態(tài)大小應(yīng)與對(duì)照培養(yǎng)基上的菌落一致；被檢液體培養(yǎng)基管與對(duì)照培養(yǎng)基管比較，試驗(yàn)菌應(yīng)生長良好。1.供試液制備2. 接種和稀釋

11、3.抗菌活性的去除或滅活4.供試品中微生物的回收5.結(jié)果判斷供試液制備 水溶性供試品 水不溶性非油脂類供試品 油脂類供試品需用特殊方法制備供試液的供試品(膜劑供試品、腸溶及結(jié)腸溶制劑供試品、氣霧劑、噴霧劑供試品、貼膏劑供試品)根據(jù)供試品的理化特性與生物學(xué)特性,采取適宜的方法制備供試液。供試液制備若需加溫時(shí),應(yīng)均勻加熱,且溫度不應(yīng)超過45。供試液從制備至加入檢驗(yàn)用培養(yǎng)基,不得超過1 小時(shí)。常用的供試液制備方法如下。如果下列供試液制備方法經(jīng)確認(rèn)均不適用，應(yīng)建立其他適宜的方法。 水溶性供試品 取供試品，用pH7.0 無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液，或pH7.2 磷酸鹽緩沖液，或胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基溶解或稀

12、釋制成1:10 供試液。若需要，調(diào)節(jié)供試液pH 值至68。必要時(shí)，用同一稀釋液將供試液進(jìn)一步10倍系列稀釋。水溶性液體制劑也可用混合的供試品原液作為供試液。 水不溶性非油脂類供試品 取供試品，用pH7.0 無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液，或pH7.2 磷酸鹽緩沖液，或胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基制備成1:10 供試液。分散力較差的供試品，可在稀釋劑中加入表面活性劑如0.1%的聚山梨酯80，使供試品分散均勻。若需要，調(diào)節(jié)供試液pH 值至68。必要時(shí)，用同一稀釋液將供試液進(jìn)一步10 倍系列稀釋。（3）需用特殊方法制備供試液的供試品膜劑供試品 取供試品,剪碎,加pH7.0 無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液，或pH7.2磷

13、酸鹽緩沖液，或胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基，浸泡，振搖，制成110 的供試液。若需要，調(diào)節(jié)供試液pH 值至68。必要時(shí)，用同一稀釋液將供試液進(jìn)一步10倍系列稀釋。 接種和稀釋按下列要求進(jìn)行供試液的接種和稀釋,制備微生物回收試驗(yàn)用供試液。所加菌液的體積應(yīng)不超過供試液體積的1%。為確認(rèn)供試品中的微生物能被充分檢出，首先應(yīng)選擇最低稀釋級(jí)的供試液進(jìn)行計(jì)數(shù)方法適用性試驗(yàn)。（1） 試驗(yàn)組 取上述制備好的供試液，加入試驗(yàn)菌液，混勻，使每1ml供試液或每張濾膜所濾過的供試液中含菌量不大于100cfu。（2） 供試品對(duì)照組 取制備好的供試液, 以稀釋液代替菌液同試驗(yàn)組操作。（3）菌液對(duì)照組 取不含中和劑及滅活劑的相應(yīng)稀

14、釋液替代供試液,按試驗(yàn)組操作加入試驗(yàn)菌液并進(jìn)行微生物回收試驗(yàn)。若因供試品抗菌活性或溶解性較差的原因?qū)е聼o法選擇最低稀釋級(jí)的供試液進(jìn)行方法適用性試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)采用適宜的方法對(duì)供試液進(jìn)行進(jìn)一步的處理。如果供試品對(duì)微生物生長的抑制作用無法以其他方法消除，供試液可經(jīng)過中和、稀釋或薄膜過濾處理后再加入試驗(yàn)菌懸液進(jìn)行方法適應(yīng)性試驗(yàn)。 抗菌活性的去除或滅活供試液接種后，按下列“微生物回收”規(guī)定的方法進(jìn)行微生物計(jì)數(shù)。若試驗(yàn)組菌落數(shù)減去供試品對(duì)照組菌落數(shù)的值小于菌液對(duì)照組菌數(shù)值的50%，可采用下述方法消除供試品的抑菌活性。 增加稀釋液或培養(yǎng)基體積。 加入適宜的中和劑或滅活劑。中和劑或滅活劑（表2）可用于消除抗菌劑的

15、抑菌活性， 最好在稀釋劑或培養(yǎng)基滅菌前加入。若使用中和劑或滅活劑，試驗(yàn)中應(yīng)設(shè)中和劑或滅活劑對(duì)照組，即取相應(yīng)量稀釋液替代供試品同試驗(yàn)組操作，以確認(rèn)其有效性和對(duì)微生物無毒性。中和劑或滅活劑對(duì)照組的菌落數(shù)與菌液對(duì)照組的菌落數(shù)的比值應(yīng)在0.52范圍內(nèi)。表2 2 常見干擾物的中和劑或滅活方法常見干擾物的中和劑或滅活方法干擾物干擾物可選用的中和劑或滅活方法可選用的中和劑或滅活方法戊二醛、汞制劑酚類、乙醇、醛類、吸附物醛類季銨化合物、對(duì)羥基苯甲酸、雙胍類化合物季銨化合物、碘、對(duì)羥基苯甲酸水銀水銀、汞化物、醛類EDTA、喹喏酮類抗生素磺胺類-內(nèi)酰胺類抗生素亞硫酸氫鈉稀釋法甘氨酸卵磷脂聚山梨醇酯巰基醋酸鹽硫代硫

16、酸鹽鎂或鈣離子對(duì)氨基苯甲酸-內(nèi)酰胺酶 采用薄膜過濾法。 上述幾種方法的聯(lián)合使用。若沒有適宜消除供試品抑菌活性的方法，對(duì)特定試驗(yàn)菌回收的失敗，表明供試品對(duì)該試驗(yàn)菌具有抗菌活性，同時(shí)也表明供試品不可能被該類微生物污染。但是，供試品也可能僅對(duì)特定試驗(yàn)菌株具有抑制作用，而對(duì)其他菌株沒有抑制作用。因此，根據(jù)供試品須符合的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)和菌數(shù)報(bào)告規(guī)則，在不影響檢驗(yàn)結(jié)果判斷的前提下，應(yīng)采用能使微生物生長的更高稀釋級(jí)的供試液進(jìn)行計(jì)數(shù)方法適用性試驗(yàn)。若方法適用性試驗(yàn)符合要求，應(yīng)以該稀釋級(jí)供試液作為最低稀釋級(jí)的供試液進(jìn)行供試品檢查。 供試品中微生物的回收表1 所列的計(jì)數(shù)方法適用性試驗(yàn)用的各試驗(yàn)菌應(yīng)逐一進(jìn)行微生物回

17、收試驗(yàn)。微生物的回收可采用平皿法、薄膜過濾法或MPN 法。 平皿法 平皿法包括傾注法和涂布法。表1 中每株試驗(yàn)菌每種培養(yǎng)基至少制備2 個(gè)平皿，以算術(shù)均值作為計(jì)數(shù)結(jié)果。傾注法 取照上述“供試液的制備”、“接種和稀釋”和“抑菌活性的去除或滅活”制備的供試液1ml，置直徑90mm 的無菌平皿中, 注入1520ml 溫度不超過45熔化的胰酪大豆胨瓊脂或沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，混勻，凝固，倒置培養(yǎng)。若使用直徑較大的平皿，培養(yǎng)基的用量應(yīng)相應(yīng)增加。按表1 規(guī)定條件培養(yǎng)、計(jì)數(shù)。同法測(cè)定供試品對(duì)照組及菌液對(duì)照組菌數(shù)。計(jì)算各試驗(yàn)組的平均菌落數(shù)。涂布法 取1520ml 溫度不超過45的胰酪大豆胨瓊脂或沙氏葡萄糖瓊脂培

18、養(yǎng)基，注入直徑90mm 的無菌平皿，凝固，制成平板，采用適宜的方法使培養(yǎng)基表面干燥。若使用直徑較大的平皿，培養(yǎng)基用量也應(yīng)相應(yīng)增加。每一平板表面接種上述照“供試液的制備”、“接種和稀釋”和“抑菌活性的去除或滅活”制備的供試液不少于0.1ml。按表1 規(guī)定條件培養(yǎng)、計(jì)數(shù)。同法測(cè)定供試品對(duì)照組及菌液對(duì)照組菌數(shù)。計(jì)算各試驗(yàn)組的平均菌落數(shù)。 薄膜過濾法薄膜過濾法所采用的濾膜孔徑應(yīng)不大于 0.45m,直徑一般為50mm,若采用其他直徑的濾膜,沖洗量應(yīng)進(jìn)行相應(yīng)的調(diào)整。選擇濾膜材質(zhì)時(shí)應(yīng)保證供試品及其溶劑不影響微生物的充分被截留。濾器及濾膜使用前應(yīng)采用適宜的方法滅菌。使用時(shí),應(yīng)保證濾膜在過濾前后的完整性。水溶性

19、供試液過濾前先將少量的沖洗液過濾以潤濕濾膜。油類供試品,其濾膜和濾器在使用前應(yīng)充分干燥。為發(fā)揮濾膜的最大過濾效率,應(yīng)注意保持供試品溶液及沖洗液覆蓋整個(gè)濾膜表面。供試液經(jīng)薄膜過濾后,若需要用沖洗液沖洗濾膜,每張濾膜每次沖洗量一般為100ml?？倹_洗量不得超過1000ml,以避免濾膜上的微生物受損傷。取照上述 “供試液的制備”、“接種和稀釋”和“抑菌活性的去除或滅活”制備的供試液適量（一般取相當(dāng)于1g、1ml 或10cm2 的供試品, 若供試品中所含的菌數(shù)較多時(shí)，供試液可酌情減量），加至適量的稀釋液中,混勻,過濾。用適量的沖洗液沖洗濾膜。u 若測(cè)定需氧菌總數(shù)，轉(zhuǎn)移濾膜菌面朝上貼于胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)

20、基平板上；u若測(cè)定霉菌和酵母總數(shù)，轉(zhuǎn)移濾膜菌面朝上貼于沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上。按表1 規(guī)定條件培養(yǎng)、計(jì)數(shù)。每株試驗(yàn)菌每種培養(yǎng)基至少制備一張濾膜。同法測(cè)定供試品對(duì)照組及菌液對(duì)照組菌數(shù)。 MPN 法 MPN 法的精密度和準(zhǔn)確度不及薄膜過濾法和平皿計(jì)數(shù)法，僅在供試品需氧菌總數(shù)沒有適宜計(jì)數(shù)方法的情況下使用，本法不適用于霉菌計(jì)數(shù)。若使用MPN 法，按下列步驟進(jìn)行。取照上述 “供試液的制備”、“接種和稀釋”和“抑菌活性的去除或滅活”制備的供試液至少3 個(gè)連續(xù)稀釋級(jí)，每一稀釋級(jí)取3 份1ml 分別接種至3 管裝有910ml 胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基中，同法測(cè)定菌液對(duì)照組菌數(shù)。必要時(shí)可在培養(yǎng)基中加入表面活性劑

21、、中和劑或滅活劑。接種管置3035培養(yǎng)3 天，逐日觀察各管微生物生長情況。如果由于供試品的原因使得結(jié)果難以判斷，可將該管培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種至胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基或胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基，在相同條件下培養(yǎng)12 天，觀察是否有微生物生長。根據(jù)微生物生長的管數(shù)從表3 查對(duì)被測(cè)供試品每1g 或每1ml 中需氧菌總數(shù)的最可能數(shù)。 結(jié)果判斷計(jì)數(shù)方法適用性試驗(yàn)中，采用平皿法或薄膜過濾法或時(shí)，試驗(yàn)組菌落數(shù)減去供試品對(duì)照組菌落數(shù)的值與菌液對(duì)照組菌落數(shù)的比值應(yīng)在0.52 范圍內(nèi)；采用MPN 法，試驗(yàn)組菌數(shù)應(yīng)在菌液對(duì)照組菌數(shù)的95%置信限內(nèi)。若各試驗(yàn)菌的回收試驗(yàn)均符合要求，照所用的供試液制備方法及計(jì)數(shù)方法進(jìn)行該供試品的需氧菌

22、總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)計(jì)數(shù)。方法適用性確認(rèn)時(shí),若采用上述方法還存在一株或多株試驗(yàn)菌的回收達(dá)不到要求,那么選擇回收最接近要求的方法和試驗(yàn)條件進(jìn)行供試品的檢查。供試品檢查檢驗(yàn)量檢驗(yàn)量即一次試驗(yàn)所用的供試品量（g、ml 或cm2）。一般應(yīng)隨機(jī)抽取不少于 2 個(gè)最小包裝的供試品，混合，取規(guī)定量供試品進(jìn)行檢驗(yàn)。除另有規(guī)定外,一般供試品的檢驗(yàn)量為10g 或10ml；膜劑為100cm2；貴重藥品、微量包裝藥品的檢驗(yàn)量可以酌減。檢驗(yàn)時(shí),應(yīng)從2 個(gè)以上最小包裝單位中抽取供試品,大蜜丸還不得少于4 丸,膜劑還不得少于4 片。供試品的檢查按計(jì)數(shù)方法適用性試驗(yàn)確認(rèn)的計(jì)數(shù)方法進(jìn)行供試品中需氧菌總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)的測(cè)

23、定。胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基或胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基用于測(cè)定需氧菌總數(shù)；沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基用于測(cè)定霉菌和酵母菌總數(shù)。陰性對(duì)照試驗(yàn) 以稀釋劑代替供試液進(jìn)行陰性對(duì)照試驗(yàn)，陰性對(duì)照試驗(yàn)應(yīng)無菌生長。如果陰性對(duì)照有菌生長，應(yīng)進(jìn)行偏差調(diào)查。 平皿法平皿法包括傾注法和涂布法。除另有規(guī)定外，取規(guī)定量供試品，按方法適用性試驗(yàn)確認(rèn)的方法進(jìn)行供試液制備和菌數(shù)測(cè)定，每稀釋級(jí)每種培養(yǎng)基至少制備2個(gè)平皿。 培養(yǎng)和計(jì)數(shù) 除另有規(guī)定外，胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基平板在 3035培養(yǎng)35 天，沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板在2025培養(yǎng)57 天， 觀察菌落生長情況,點(diǎn)計(jì)平板上生長的所有菌落數(shù)，計(jì)數(shù)并報(bào)告。菌落蔓延生長成片的平皿不宜計(jì)數(shù)。點(diǎn)計(jì)菌

24、落數(shù)后，計(jì)算各稀釋級(jí)供試液的平均菌落數(shù)，按菌數(shù)報(bào)告規(guī)則報(bào)告菌數(shù)。若同稀釋級(jí)兩個(gè)平皿的菌落數(shù)平均值不小于15，則兩個(gè)平皿的菌落數(shù)不能相差1 倍或以上。菌數(shù)報(bào)告規(guī)則需氧菌總數(shù)測(cè)定宜選取平均菌落數(shù)小于 300cfu 的稀釋級(jí)、霉菌和酵母菌總數(shù)測(cè)定宜選取平均菌落數(shù)小于100cfu 的稀釋級(jí)，作為菌數(shù)報(bào)告（取兩位有效數(shù)字）的依據(jù)。取最高的平均菌落數(shù)，計(jì)算1g、1ml 或10cm2 供試品中所含的微生物數(shù)。如各稀釋級(jí)的平皿均無菌落生長，或僅最低稀釋級(jí)的平板有菌落生長，但平均菌落數(shù)小于1 時(shí)，以1 乘以最低稀釋倍數(shù)的值報(bào)告菌數(shù)。 薄膜過濾法除另有規(guī)定外，按計(jì)數(shù)方法適用性試驗(yàn)確認(rèn)的方法進(jìn)行供試液制備。取相當(dāng)于

25、1g、1ml 或10cm2 供試品的供試液，若供試品所含的菌數(shù)較多時(shí)，可取適宜稀釋級(jí)的供試液，照方法適用性試驗(yàn)確認(rèn)的方法加至適量稀釋液中，立即過濾，沖洗，沖洗后取出濾膜，菌面朝上貼于胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基或沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)。培養(yǎng)和計(jì)數(shù)培養(yǎng)條件和計(jì)數(shù)方法同平皿法，每張濾膜上的菌落數(shù)應(yīng)不超過100cfu。菌數(shù)報(bào)告規(guī)則以相當(dāng)于 1g、1ml 或10cm2 供試品的菌落數(shù)報(bào)告菌數(shù)；若濾膜上無菌落生長，以1 報(bào)告菌數(shù)（每張濾膜過濾1g、1ml 或10cm2 供試品）,或1 乘以最低稀釋倍數(shù)的值報(bào)告菌數(shù)。 MPN MPN 法法取規(guī)定量供試品，按方法適用性試驗(yàn)確認(rèn)的方法進(jìn)行供試液制備和供試品接種，所

26、有試驗(yàn)管在3035培養(yǎng)35 天，如果需要確認(rèn)是否有微生物生長，按方法適應(yīng)性試驗(yàn)確定的方法進(jìn)行。記錄每一稀釋級(jí)微生物生長的管數(shù)，從表3查對(duì)每1g 或1ml 供試品中需氧菌總數(shù)的最可能數(shù)。結(jié)果判斷需氧菌總數(shù)是指胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基上生長的總菌落數(shù)（包括真菌菌落數(shù)）；霉菌和酵母菌總數(shù)是指沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上生長的總菌落數(shù)（包括細(xì)菌菌落數(shù)）。若因沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上生長的細(xì)菌使霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù)結(jié)果不符合微生物限度要求，可使用含抗生素（如氯霉素、慶大霉素）的沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基或其他選擇性培養(yǎng)基（如玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基）進(jìn)行霉菌和酵母菌總數(shù)測(cè)定。使用選擇性培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)基適用性檢查。若采用MP

27、N 法，測(cè)定結(jié)果為需氧菌總數(shù)。各品種項(xiàng)下規(guī)定的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)解釋如下：101cfu： 可接受的最大菌數(shù)為20；102cfu： 可接受的最大菌數(shù)為200；103cfu： 可接受的最大菌數(shù)為2000：依此類推。若供試品的需氧菌總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)的檢查結(jié)果均符合該品種項(xiàng)下的規(guī)定，判供試品符合規(guī)定；若其中任何一項(xiàng)不符合該品種項(xiàng)下的規(guī)定，判供試品不符合規(guī)定。2010版1.細(xì)菌數(shù)營養(yǎng)瓊脂2。霉菌和酵母菌數(shù)玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基2015版1.需氧菌總數(shù)（TAMC）胰酪大豆胨瓊脂（TSA）或TSB生長在TSA上所有菌落（包括霉菌和酵母菌）2.霉菌和酵母菌（TYMC）沙氏葡萄糖瓊脂（SDA）生長在SDA上的所有

28、菌落（包括細(xì)菌）控制菌檢查法系用于在規(guī)定的試驗(yàn)條件下，檢查供試品中是否存在特定的微生物。當(dāng)本法用于檢查非無菌制劑及其原、輔料是否符合相應(yīng)的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，應(yīng)按下列規(guī)定進(jìn)行檢驗(yàn)，包括樣品取樣量和結(jié)果判斷等。本檢查法可采用替代的微生物檢查法，包括自動(dòng)檢測(cè)方法，但必須證明替代方法等效于藥典規(guī)定的檢查方法。供試液制備及實(shí)驗(yàn)環(huán)境要求同“非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：微生物計(jì)數(shù)法”（通則1105）。如果供試品具有抗菌活性，應(yīng)盡可能去除或中和。供試品檢查時(shí), 若使用了中和劑或滅活劑，應(yīng)確認(rèn)有效性及對(duì)微生物無毒性。供試液制備時(shí)如果使用了表面活性劑，應(yīng)確認(rèn)其對(duì)微生物無毒性以及與所使用中和劑或滅活劑的相容性。供試品

29、控制菌檢查中所使用的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行適用性檢查。供試品的控制菌檢查方法應(yīng)進(jìn)行方法適用性試驗(yàn)，以確認(rèn)所采用的方法適合于該產(chǎn)品的控制菌檢查。若檢驗(yàn)程序或產(chǎn)品發(fā)生變化可能影響檢驗(yàn)結(jié)果時(shí)，控制菌檢查方法應(yīng)重新進(jìn)行適用性試驗(yàn)。菌種 試驗(yàn)用菌株的傳代次數(shù)不得超過5 代（從菌種保藏中心獲得的干燥菌種為第0 代），并采用適宜的菌種保藏技術(shù)進(jìn)行保存，以保證試驗(yàn)菌株的生物學(xué)特性。金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)CMCC（B）26 003銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa)CMCC（B）10104大腸埃希菌(Escherichia coli)CMCC（B）44 102

30、乙型副傷寒沙門菌(Salmonella paratyphi B)CMCC（B)50094白色念珠菌(Candida albicans)CMCC（F）98 001生孢梭菌（Clostridium sporogenes）CMCC（B）64 941菌液制備 將金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌、沙門菌分別接種于胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基中或在胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基上，3035培養(yǎng)1824小時(shí)；將白色念珠菌接種于沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上或沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基中，2025培養(yǎng)23 天；將生孢梭菌接種于梭菌增菌培養(yǎng)基中置厭氧條件下3035培養(yǎng)2448 小時(shí)或接種于硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基中3035培養(yǎng)1824 小

31、時(shí)。上述培養(yǎng)物用pH7.0 無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或0.9%無菌氯化鈉溶液制成適宜濃度的菌懸液。菌液制備后若在室溫下放置，應(yīng)在2 小時(shí)內(nèi)使用；若保存在28，可在24 小時(shí)內(nèi)使用。生孢梭菌孢子懸液可替代新鮮的菌懸液，穩(wěn)定的孢子懸液可保存在28，在驗(yàn)證過的貯存期內(nèi)使用。陰性對(duì)照為確認(rèn)試驗(yàn)條件是否符合要求，應(yīng)進(jìn)行陰性對(duì)照試驗(yàn)， 陰性對(duì)照試驗(yàn)應(yīng)無菌生長。如陰性對(duì)照有菌生長，應(yīng)進(jìn)行偏差調(diào)查。培養(yǎng)基適用性檢查控制菌檢查用的成品培養(yǎng)基、由脫水培養(yǎng)基或按處方配制的培養(yǎng)基均應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)基的適用性檢查。控制菌檢查用培養(yǎng)基的適用性檢查項(xiàng)目包括促生長能力、抑制能力及指示特性的檢查。各培養(yǎng)基的檢測(cè)項(xiàng)目及所用的菌株見表1

32、?？刂凭鷻z查控制菌檢查培養(yǎng)基培養(yǎng)基 特性特性 試驗(yàn)菌株試驗(yàn)菌株耐膽鹽革蘭陰性菌腸道菌增菌液體培養(yǎng)基紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基促生長能力抑制能力促生長能力+指示特性大腸埃希菌銅綠假單胞菌金黃色葡萄球菌大腸埃希菌銅綠假單胞菌大腸埃希菌麥康凱液體培養(yǎng)基麥康凱瓊脂培養(yǎng)基促生長能力抑制能力促生長能力+指示特性大腸埃希菌金黃色葡萄球菌大腸埃希菌沙門菌RV 沙門菌增菌液體培養(yǎng)基木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基促生長能力抑制能力促生長能力+指示特性指示能力乙型副傷寒沙門菌金黃色葡萄球菌乙型副傷寒沙門菌乙型副傷寒沙門菌液體培養(yǎng)基促生長能力檢查 分別接種不大于100cfu 的試驗(yàn)菌（見表1）于被檢培養(yǎng)

33、基和對(duì)照培養(yǎng)基中，在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度及不長于規(guī)定的最短培養(yǎng)時(shí)間下培養(yǎng)，與對(duì)照培養(yǎng)基管比較，被檢培養(yǎng)基管試驗(yàn)菌應(yīng)生長良好。固體培養(yǎng)基促生長能力檢查 用涂布法分別接種不大于100cfu 的試驗(yàn)菌（見表1）于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基平板上，在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度及不長于規(guī)定的最短培養(yǎng)時(shí)間下培養(yǎng)，被檢培養(yǎng)基與對(duì)照培養(yǎng)基上生長的菌落大小、形態(tài)特征應(yīng)一致。培養(yǎng)基抑制能力檢查 接種不少于100cfu 的試驗(yàn)菌（見表1）于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基中，在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度及不短于規(guī)定的最長培養(yǎng)時(shí)間下培養(yǎng)，試驗(yàn)菌應(yīng)不得生長。培養(yǎng)基指示特性檢查 用涂布法分別接種不大于100cfu 的試驗(yàn)菌

34、（見表1）于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基平板上，在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度及不長于規(guī)定的最短培養(yǎng)時(shí)間下培養(yǎng)，被檢培養(yǎng)基上試驗(yàn)菌生長的菌落大小、形態(tài)特征、指示劑反應(yīng)情況等應(yīng)與對(duì)照培養(yǎng)基一致。1.供試液制備2.試驗(yàn)菌3.適用性試驗(yàn)4.結(jié)果判斷1. 供試液制備 按下列“供試品檢查”中的規(guī)定制備供試液。2. 試驗(yàn)菌根據(jù)各品種項(xiàng)下微生物限度標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定檢查的控制菌選擇相應(yīng)試驗(yàn)菌株，確認(rèn)耐膽鹽革蘭陰性菌檢查方法時(shí),采用大腸埃希菌和銅綠假單胞菌為試驗(yàn)菌。3.適用性試驗(yàn) 按控制菌檢查法取規(guī)定量供試液及不大100cfu 的試驗(yàn)菌接入規(guī)定的培養(yǎng)基中；采用薄膜過濾法時(shí),取規(guī)定量供試液,過濾,沖洗,試驗(yàn)菌應(yīng)加在最后一次沖

35、洗液中,過濾后,注入規(guī)定的培養(yǎng)基或取出濾膜接入規(guī)定的培養(yǎng)基中。依相應(yīng)的控制菌檢查方法，在規(guī)定的溫度及最短時(shí)間下培養(yǎng)，應(yīng)能檢出所加試驗(yàn)菌相應(yīng)的反應(yīng)特征。4.結(jié)果判斷 上述試驗(yàn)若檢出試驗(yàn)菌，按此供試液制備法和控制菌檢查方法進(jìn)行供試品檢查；若未檢出試驗(yàn)菌，應(yīng)消除供試品的抑菌活性（見非無菌產(chǎn)品微生物檢查：微生物計(jì)數(shù)法（通則1105）中的“抗菌活性的去除或滅活”），并重新進(jìn)行方法適用性試驗(yàn)。如果經(jīng)過試驗(yàn)確證供試品對(duì)試驗(yàn)菌的抗菌作用無法消除，可認(rèn)為受抑制的微生物不可能存在于該供試品中，選擇抑菌成份消除相對(duì)徹底的方法進(jìn)行供試品的檢查。供試品的控制菌檢查應(yīng)按經(jīng)方法適用性試驗(yàn)確認(rèn)的方法進(jìn)行。陽性對(duì)照試驗(yàn) 陽性對(duì)

36、照試驗(yàn)方法同供試品的控制菌檢查,對(duì)照菌的加量應(yīng)不大于100cfu。陽性對(duì)照試驗(yàn)應(yīng)檢出相應(yīng)的控制菌。陰性對(duì)照試驗(yàn) 以稀釋劑代替供試液照相應(yīng)控制菌檢查法檢查，陰性對(duì)照試驗(yàn)應(yīng)無菌生長。如果陰性對(duì)照有菌生長，應(yīng)進(jìn)行偏差調(diào)查。1.耐膽鹽革蘭陰性菌(Bile-Tolerant Gram-Negative Bacteria)2.大腸埃希菌(Escherichia coli)3.沙門菌（Salmonella）4.銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa）5.金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）6.梭菌（Clostridia）7.白色念珠菌（Candida albica

37、ns）1.耐膽鹽革蘭陰性菌(Bile-Tolerant Gram-Negative Bacteria)供試液制備和預(yù)培養(yǎng) 取供試品，用胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基作為稀釋劑照“非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：微生物計(jì)數(shù)法” （通則1105）制成1：10 供試液，混勻，在2025培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間應(yīng)使供試品中的細(xì)菌充分恢復(fù)但不增殖（約2 小時(shí)）。未檢出試驗(yàn)除另有規(guī)定外，取相當(dāng)于1g 或1mL 供試品的上述預(yù)培養(yǎng)物接種至適宜體積（經(jīng)方法適用性試驗(yàn)確定）腸道菌增菌液體培養(yǎng)基中，3035培養(yǎng)2448 小時(shí)后，劃線接種于紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上，3035培養(yǎng)1824 小時(shí)。如果平板上無菌落生長，判供試品未檢出耐膽鹽

38、革蘭陰性菌。定量試驗(yàn)選擇和分離培養(yǎng) 取相當(dāng)于0.1g、0.01g 和0.001g（或0.1mL、0.01mL 和0.001mL）供試品的預(yù)培養(yǎng)物或其稀釋液分別接種至適宜體積（經(jīng)方法適用性試驗(yàn)確定）腸道菌增菌液體培養(yǎng)基中，3035培養(yǎng)2448 小時(shí)。上述每一培養(yǎng)物分別劃線接種于紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上，3035培養(yǎng)1824 小時(shí)。結(jié)果判斷 若紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上有菌落生長，則對(duì)應(yīng)培養(yǎng)管為陽性，否則為陰性。根據(jù)各培養(yǎng)管檢查結(jié)果，從表2 查對(duì)1g 或1ml 供試品中含有耐膽鹽革蘭陰性菌的可能菌數(shù)。表2 耐膽鹽革蘭陰性菌的可能菌數(shù)（N）各供試品量的檢查結(jié)果各供試品量的檢查結(jié)果每每1g(

39、1g(或或1mL)1mL)供試品中可供試品中可能的菌數(shù)能的菌數(shù)cfucfu0.1g 或0.1ml0.01g 或0.001g 或+N103+_102N103+_10N102_N102015Chp（定性or定量）1:10TSB供試液（20-25 2h）腸道增菌肉湯 紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂 24-48h 18-24h2010Chp：取1:10供試液至乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基18-24hMaC瓊脂18-24h乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基24-48h2.大腸埃希菌(Escherichia coli)供試液制備和增菌培養(yǎng) 取供試品，照“非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：微生物計(jì)數(shù)法” （通則1105）制成1：10 供試液。取相當(dāng)于1g

40、或1mL 供試品的供試液，接種至適宜體積（經(jīng)方法適用性試驗(yàn)確定）的胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基中，混勻，3035培養(yǎng)1824 小時(shí)。選擇和分離培養(yǎng) 取上述培養(yǎng)物1mL 接種至100mL 麥康凱液體培養(yǎng)基中，4244培養(yǎng)2448 小時(shí)。取麥康凱液體培養(yǎng)物劃線接種于麥康凱瓊脂培養(yǎng)基平板上，3035培養(yǎng)1872 小時(shí)。結(jié)果判斷 若麥康凱瓊脂培養(yǎng)基平板上有菌落生長，應(yīng)進(jìn)行分離、純化及適宜的鑒定試驗(yàn), 確證是否為大腸埃希菌；若麥康凱瓊脂培養(yǎng)基平板上沒有菌落生長，或雖有菌落生長但鑒定結(jié)果為陰性，判供試品未檢出大腸埃希菌。2015Chp：取1:10供試品至TSB（適宜體積）（18-24h）MaC肉湯 MaC瓊脂42

41、-44 24-48h 18-72h2010Chp：取1:10供試品至BL（18-24h）MUG培養(yǎng)基 5h、24hMaC瓊脂18-24h3.沙門菌（Salmonella）供試液制備和增菌培養(yǎng) 取10g 或10mL 供試品直接或處理后接種至適宜體積（經(jīng)方法適用性試驗(yàn)確定）的胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基中，混勻，3035培養(yǎng)1824小時(shí)。選擇和分離培養(yǎng) 取上述培養(yǎng)物0.1mL 接種至10mL RV 沙門增菌液體培養(yǎng)基中，3035培養(yǎng)1824 小時(shí)。取少量RV 沙門菌增菌液體培養(yǎng)物劃線接種于木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基平板上，3035培養(yǎng)1848 小時(shí)。沙門菌在木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基平板上生長良好

42、，菌落為淡紅色或無色、透明或半透明、中心有或無黑色。用接種針挑選疑似菌落于三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基高層斜面上進(jìn)行斜面和高層穿刺接種，培養(yǎng)1824 小時(shí)，或采用其它適宜方法進(jìn)一步鑒定。2015Chp：10gTSB供試液（18-24h） RV肉湯 XLD瓊脂（18-24h） （18-48h）2010Chp：10g營養(yǎng)肉湯供試液（18-24h） TTB SS/MaC瓊脂（18-24h） （18-48h）非無菌藥品的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)是基于藥品的給藥途徑和對(duì)患者健康潛在的危害以及藥品的特殊性而制訂的。藥品生產(chǎn)、貯存、銷售過程中的檢驗(yàn)，藥用原料、輔料及中藥提取物的檢驗(yàn)，新藥標(biāo)準(zhǔn)制訂，進(jìn)口藥品標(biāo)準(zhǔn)復(fù)核，考察藥品質(zhì)量及仲裁等，除另有規(guī)定外，其微生物限度均以本標(biāo)準(zhǔn)為依據(jù)。1.制劑通則、品種項(xiàng)下要求無菌的制劑及標(biāo)示無菌的制劑和原輔料 應(yīng)符合無菌檢查法規(guī)定。2.用于手術(shù)、燒傷或嚴(yán)重創(chuàng)傷的局部給藥制劑 應(yīng)符合無菌檢查法規(guī)定。3. 非無菌化學(xué)藥品制劑、生物制品制劑、不含藥材原粉的中藥制劑的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)（見表1）4. 非無菌含藥材原粉的中藥制劑微生物限度標(biāo)準(zhǔn)（見表2）5. 非無菌的藥用原料及輔料微生物限度標(biāo)準(zhǔn)（見表3）6. 中藥提取物及中藥飲片的微生