分光光度法測鐵3

1、分光光度法測鐵分光光度法測鐵一、一、 實驗目的實驗目的二、二、實驗原理實驗原理 在在 pH=911.5 的的 NH3.H2O-NH4Cl 溶液中溶液中，Fe3+與與磺基水楊酸反應生成磺基水楊酸反應生成組成比組成比1:3的黃色的黃色穩(wěn)定穩(wěn)定配合物配合物。Fe3+3COO-OHSO3-Fe36-COO-O-SO3-+ 3 H+(黃色配合物) 該該配合物在堿性溶液中的最大吸收波長為配合物在堿性溶液中的最大吸收波長為 420 nm，可在此波長下測量吸光度可在此波長下測量吸光度，由朗伯，由朗伯-比耳定律計算鐵含比耳定律計算鐵含量。量。（1 1）分光光度計儀器結構）分光光度計儀器結構三、分光光度計的使用方

2、法三、分光光度計的使用方法（2 2）分光光度計使用方法）分光光度計使用方法 通電通電-儀器自檢儀器自檢-預熱預熱20 min； 用用鍵設置測試模式為透射比（鍵設置測試模式為透射比（T）MODE MODE 鍵鍵透射比（透射比（T T） 波長選擇：用波長調節(jié)旋鈕設置所需的波長波長選擇：用波長調節(jié)旋鈕設置所需的波長 調零調零 打開樣品室蓋，在打開樣品室蓋，在T方式下按方式下按“0%”鍵，此時儀鍵，此時儀器自動校正后顯示器自動校正后顯示“0.000”。“0%”鍵鍵T T模式模式 調滿調滿 在比色皿槽中，依次放入參比液，樣品液在比色皿槽中，依次放入參比液，樣品液1 1和樣品液和樣品液2 2等，蓋上樣品室

3、蓋等，蓋上樣品室蓋( (注意透光截面垂直于光路方向注意透光截面垂直于光路方向) )。參比液參比液樣品液樣品液1 1樣品液樣品液2 2樣品液樣品液3 3 將參比液拉入光路中，按將參比液拉入光路中，按“100%T”鍵調鍵調T為為100%，此，此時儀器顯示時儀器顯示“BLA”，表示儀，表示儀器正在自動校正，校正完畢后器正在自動校正，校正完畢后顯示顯示“100.0”。 樣品測定：樣品測定： 將將MODE轉換為轉換為“ABSORBANCE”，顯色屏讀數，顯色屏讀數為為0.000，然后將樣品液分別拉入光路中，此時顯示，然后將樣品液分別拉入光路中，此時顯示測得的樣品吸光度。測得的樣品吸光度。分光光度計的使用

4、注意事項：分光光度計的使用注意事項： (1) 比色皿的清潔程度，直接影響實驗結果。因此，比色皿的清潔程度，直接影響實驗結果。因此，特別要將比色皿清洗干凈。裝樣前處理：自來水反復沖特別要將比色皿清洗干凈。裝樣前處理：自來水反復沖洗洗蒸餾水漂洗蒸餾水漂洗2次次待裝溶液漂洗待裝溶液漂洗2次。必要時，需用次。必要時，需用濃硝酸或鉻酸洗液短時間浸泡。濃硝酸或鉻酸洗液短時間浸泡。 用完后用自來水和蒸餾用完后用自來水和蒸餾水洗凈并用檫鏡紙檫干放回比色皿盒中。水洗凈并用檫鏡紙檫干放回比色皿盒中。 (2) 拿放比色皿時，應持其拿放比色皿時，應持其“毛面毛面”，不要接觸，不要接觸“光光面面”。光面光面毛面毛面（3

5、）若比色皿外表面有液體，應用擦鏡紙朝同一方向）若比色皿外表面有液體，應用擦鏡紙朝同一方向拭干，以保證吸光度測量不受影響。拭干，以保證吸光度測量不受影響。 (4) 比色皿內盛液應為其容量的比色皿內盛液應為其容量的2/3，過少會影響實，過少會影響實驗結果，過多易在測量過程中外溢，污染儀器。驗結果，過多易在測量過程中外溢，污染儀器。容容量量的的2/32/3 (5) 比色皿的光面要與光源在一條線上。比色皿的光面要與光源在一條線上。光透過窗口光透過窗口四、實驗步驟四、實驗步驟 取系列取系列50 mL容量瓶容量瓶并編號，按下表配制系列溶液。并編號，按下表配制系列溶液。以以試劑空白試劑空白作參比溶液作參比溶液，在，在420 nm波長下波長下測定測定各溶液各溶液的吸光度。的吸光度。xA 以