機(jī)能學(xué)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)急性腎衰竭動物模型的建立

1、 急性腎衰竭動物模型的建立 【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?1.1.學(xué)習(xí)復(fù)制急性腎衰竭動物模型的方法 。 2.2.觀察急性腎衰竭時機(jī)體的典型表現(xiàn)及血酐水平的變化。 3.3.掌握急性腎衰竭的概念及發(fā)病機(jī)制 ?！緦?shí)驗(yàn)原理】 急性腎功能衰竭急性腎功能衰竭 指各種原因在短期內(nèi)引起腎臟泌尿功能指各種原因在短期內(nèi)引起腎臟泌尿功能急劇障礙，以致機(jī)體內(nèi)環(huán)境出現(xiàn)嚴(yán)重紊亂的急劇障礙，以致機(jī)體內(nèi)環(huán)境出現(xiàn)嚴(yán)重紊亂的病理過程，臨床表現(xiàn)有水中毒、氮質(zhì)血癥、病理過程，臨床表現(xiàn)有水中毒、氮質(zhì)血癥、高鉀血癥和代謝性酸中毒等高鉀血癥和代謝性酸中毒等急性腎功能不全的分類急性腎功能不全的分類 根據(jù)病因?qū)W，臨床上將急性腎功能不全根據(jù)病因?qū)W，臨床上將急性

2、腎功能不全分為腎前性、腎性、腎后性三種。分為腎前性、腎性、腎后性三種。急性腎功能的發(fā)病機(jī)制急性腎功能的發(fā)病機(jī)制腎缺血腎缺血腎中毒腎中毒血流動力學(xué)異常血流動力學(xué)異常腎小管損傷腎小管損傷濾過膜受損濾過膜受損皮質(zhì)缺氧皮質(zhì)缺氧髓質(zhì)充血髓質(zhì)充血腎小管阻塞腎小管阻塞原尿反漏原尿反漏濾過系數(shù)濾過系數(shù)外髓部供氧外髓部供氧 GRF 少尿少尿【實(shí)驗(yàn)動物】 健康家兔，雄性，體重1.51.8Kg【實(shí)驗(yàn)器材和藥品】 20%烏拉坦溶液、慶大霉素注射液（1ml:4萬單位）、150U/ml肝素、0.9%生理鹽溶液、苦味酸 BL-420F實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)、哺乳動物手術(shù)器械一套、動脈導(dǎo)管、動脈夾、膀胱導(dǎo)尿管、注射器（2ml、5ml）、皮

3、頭針一套、水浴箱、離心機(jī)、絲線 【實(shí)驗(yàn)步驟】家兔稱重、分組家兔稱重、分組-體重相似為一組，并且實(shí)驗(yàn)組和對照組體重相同或相似體重相似為一組，并且實(shí)驗(yàn)組和對照組體重相同或相似生理鹽水作靜脈點(diǎn)滴輸液生理鹽水作靜脈點(diǎn)滴輸液-耳緣靜脈滴注耳緣靜脈滴注家兔固定家兔固定-仰臥位固定仰臥位固定剪去頸部和上腹部毛、麻醉剪去頸部和上腹部毛、麻醉- 20%氨基甲酸乙酯注射液氨基甲酸乙酯注射液4ml/kg，耳緣靜，耳緣靜脈注射麻醉脈注射麻醉在麻醉狀態(tài)下，做頸總動脈插管，并連接到試驗(yàn)系統(tǒng)在麻醉狀態(tài)下，做頸總動脈插管，并連接到試驗(yàn)系統(tǒng)-在麻醉狀態(tài)下，自恥骨聯(lián)合上方腹部正中線切開皮膚，切口長在麻醉狀態(tài)下，自恥骨聯(lián)合上方腹部

4、正中線切開皮膚，切口長46cm 夾閉腎動脈夾閉腎動脈-沿腹白線打開腹腔，將內(nèi)臟推向左側(cè)，打開后腹膜，暴露沿腹白線打開腹腔，將內(nèi)臟推向左側(cè)，打開后腹膜，暴露腎蒂，分離腎動脈，實(shí)驗(yàn)兔和夾閉腎動脈腎蒂，分離腎動脈，實(shí)驗(yàn)兔和夾閉腎動脈30分鐘，對照組腎臟不夾閉。分鐘，對照組腎臟不夾閉。二組家兔耳緣靜脈注入慶大霉素二組家兔耳緣靜脈注入慶大霉素4萬萬U/Kg每隔每隔10分鐘，取一次尿液，測定尿量，并做尿肌酐試驗(yàn)。共取三分鐘，取一次尿液，測定尿量，并做尿肌酐試驗(yàn)。共取三次。次。頸總動脈取血，做血肌酐試驗(yàn)頸總動脈取血，做血肌酐試驗(yàn)最后將家兔一并處死，取出腎臟，觀察并比較家兔的腎臟。最后將家兔一并處死，取出腎臟

5、，觀察并比較家兔的腎臟。血、尿肌酐測定方法（見表1）和內(nèi)生肌酐清除率的計(jì)算從頸總動脈取血置盛有肝素的離心管內(nèi)，離心后取血漿，按下表進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。 表1 血漿和尿液肌酐含量測定 試劑（ml）標(biāo)準(zhǔn)管S標(biāo)準(zhǔn)空白管S0測定管R測定空白管R0肌酐標(biāo)準(zhǔn)液025025-血漿或尿液-02500250血漿或尿液0.5-0.5-空白苦味酸-0.5-計(jì)算：mol/L 88.402mg%)( ml/minml/min mg%10023. 001. 0S01. 0R2 mg%23. 00.01S0.01R2 肌酐）尿量（血中肌酐含量尿中肌酐含量內(nèi)生肌酐清除率：尿中肌酐含量：血中肌酐含量：【觀察項(xiàng)目】表2 處理前和處理后對照

6、組家兔各指標(biāo)變化組 血壓 呼吸 尿量 心率 血肌酐 尿肌酐 內(nèi)生肌酐清除率別 （mmHg) （滴/分） （次/分） （ %） （%） （%） 處理前處理后 處理前處理后 處理前處理后 處理前處理后 處理前處理后1兔2兔3兔4兔5兔6兔表3 處理前和處理后實(shí)驗(yàn)組家兔各指標(biāo)變化組 血壓 呼吸 尿量 心率 血肌酐 尿肌酐 內(nèi)生肌酐清除率別 （mmHg) （滴/分） （次/分） （ %） （%） （%） 處理前處理后 處理前處理后 處理前處理后 處理前處理后 處理前處理后7兔8兔9兔10兔11兔12兔【預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果】 二組家兔兔子血壓升高，呼吸加深加快，心率加快，尿量減少，血/尿肌酐的濃度增高，內(nèi)生肌酐清除率升高，各項(xiàng)癥狀明顯易于測定。正常腎臟切面圖急性腎衰竭腎臟切面圖急性腎衰竭鏡下圖毒素引起的腎小管壞死通常彌散性累及腎小管，而由缺血（如心衰引起的嚴(yán)重低血壓）引起的腎小管壞死則成片狀受累?！咀⒁馐马?xiàng)】 1.選擇體重相差不超過250g的家兔進(jìn)行對照 2.注意麻醉藥的劑量與注入劑量、觀察麻醉情況。 3.專