14種腸道菌群選擇培養(yǎng)基(大連醫(yī)科大學(xué)版本)

1、腸道菌群分離培養(yǎng)1、大腸桿菌培養(yǎng)基（EMB）（伊紅美蘭瓊脂成品培養(yǎng)基）：蛋白胨10g、乳糖5g、K2HPO42g、伊紅Y0.4g、美蘭0.065g、水1000ml、PH7.2。DHL培養(yǎng)基：成分及調(diào)整方法:Meatextrct3100g,蛋白胨20g,乳糖10g，蔗糖10g，脫氧膽酸鈉1g，Sodiumthiosrlfate2.30g檸檬酸氨1g，檸檬酸鈉1g，中性紅0.03g，瓊脂15g，蒸餾水1000ml，pH7.4，將以上成分加溫溶解，倒平板。培養(yǎng)基長期放置（3周以上），分注前有必要滅菌。2、鏈球菌培養(yǎng)（TATAC）:蛋白胨15g、胰蛋白胨10g、酵母浸膏10g、蔗糖1g、七葉苷1g、瓊

2、脂16g、蒸餾水1000ml，PH7.67.8，馬血清50ml。TATAC添加液I22m1，TATAC添加液II20m1。將馬血清及各添加液以外的成分加溫溶解，將其pH調(diào)整至7.6-7.8后，121.3°C20min滅菌。待其冷至50°C左右，加入馬血清及各添加液，充分混合后，分注于平皿中。添加液I：疊氮鈉0.45g，谷氨酸鈉30g，蒸餾水100ml溶解：100C30min煮沸，冷藏添加液II：吖啶橙0.01g、TTC0.1g、結(jié)晶紫（0.65%液）1.0ml、硫酸亞鉈1.65g，蒸餾水100ml，溶解后冷藏3、葡萄球菌培養(yǎng)基（BP）：營養(yǎng)瓊脂粉41g、氯化理5g、苯乙醇2

3、.5ml、卵黃液50ml、精制水1000ml。（10%15%NaCl）將卵黃液以外的成分加溫溶解后，121.3C20分鐘滅菌。待其冷至50C左右，加入卵黃液，充分混合后，分注于平皿中。葡萄球菌選擇性培養(yǎng)基（Mannitolsaltagar高鹽甘露醇）：牛肉膏1.0g、蛋白胨10.0g、NaCl75.0g、甘露醇10.0g、酚紅0.025g、瓊脂15.0g、蒸餾水1000ml、PH7.54、酵母菌選擇性培養(yǎng)基：土豆浸出液4.0g、葡萄糖20.0g、瓊脂15.0g、蒸餾水1000ml，PH6.0，制作方法：加熱溶解一PH調(diào)整一滅菌、加入10%酒石酸14ml5、Lbs（LC）（乳桿菌培養(yǎng)基）：瓊脂2

4、5g，蛋白胨10g，肉膏10g，酵母浸膏5g，葡萄糖20g，吐溫-80lml，K2HPO42g，醋酸鈉5g，檸檬酸三氨2g，MgSO47H2O200mg，MnSO44H2O50mg，醋酸3.7ml,精制水1000ml。加熱溶解修正PH6.0至6.5,121.3°C,20分鐘滅菌。待冷至50°C左右，加入醋酸。充分混合后，分注于平板。6、優(yōu)桿菌選擇性培養(yǎng)基（CS培養(yǎng)基）：成分及調(diào)整方法：基礎(chǔ)EG培養(yǎng)基1000ml,CS添加液50ml,L-半胱氨酸HC1H2O0.5g,馬血（羊血）50ml。充分混合后,分注于平皿中。CS添加液：丙酸鈉30g，用約80ml的滅菌蒸餾水溶解。將硫酸

5、新霉素0.4g、粘菌素0.02g、硫酸鏈霉素1.0g、蒸餾水100ml溶解后，加入燒瓶中。再用滅菌蒸餾水將液體的總量補(bǔ)至100ml。7、VS（韋榮氏小球菌）：胰胨5g,酵母浸膏3g,硫乙醇酸鈉0.75g,煌綠（0.1%）lml,吐溫-801g,50%乳酸鈉25ml，瓊脂20g,夾竹桃霉素（1%）3ml，羊血50ml,PH75。后兩者后加,倒成平板。8、PMS（消化球菌、巨球形菌選擇培養(yǎng)基）：EG瓊脂培養(yǎng)基1000ml,PMS添加液10ml。PMS添加液：結(jié)晶紫70mg，無色粘菌霉素50mg，溶于100ml精制水內(nèi)。9、Bds（類桿菌選擇性培養(yǎng)基）：配方一：EG瓊脂培養(yǎng)基1000ml,Bds+添

6、加液50ml。EG瓊脂培養(yǎng)基：牛心浸液930ml,胰胨10g,酵母浸膏5g,Na2HPO44g,葡萄糖0.5g,可溶性淀粉0.5g,L-半胱氨酸0.2g（預(yù)先用1/10NHCl溶解），瓊脂20g,L半胱氨酸HCI.H2O0.5g，羊血50ml,pH7.6至7.8。除L一半胱氨酸及羊血以外的成份，加熱溶解修正PH,121.3C20分鐘滅菌，冷至50C時,加L-半胱氨酸及血。Bds添加液：?；悄懰徕c5g，加入80ml溫水中使之溶解，然后加0.5%煌綠水溶液lml和新霉素1g,再以10%NaOH調(diào)PH使液體呈透明的綠色為止。最后用精制水加至100ml。配方二：10、梭狀芽孢桿菌選擇性培養(yǎng)基（NN培養(yǎng)

7、基）：蛋白胨40g、Na2HPO4g、KH2PO41.0g、NaCl2.0g、MgSO40.1g、葡萄糖2.0g、瓊脂25g、蒸餾水1000ml。PH7.6制作：加熱溶解PH調(diào)整滅菌添加液：純卵黃液50ml、硫酸新霉素（2%）10ml混勻11、梭菌選擇性培養(yǎng)基（Clostrisel瓊脂）?Cd（RCN）（梭菌選擇性培養(yǎng)基）：EG瓊脂1000m1,吐溫800.5g,1%利福平（RifamPicin）0.5ml,1%粘桿菌素（Colimycin）1ml,1%新霉素20ml,pH7.6。除血、抗菌素外，加熱溶解，冷至50°C時，再加血及抗菌素。制備：水浴中加熱溶解，調(diào)PH7.0,121.3

8、C滅菌15分鐘12、EC（腸球菌培養(yǎng)基）:胰胨2g,酵母浸膏005g,葡萄糖0.2g,Na2HPO40.04g,KH2PO40.04g,瓊脂2g,精制水100ml,PH7.4。加熱溶解修正PH,8磅15分鐘滅菌，冷至45C-50C時加NaN3,TTC°NaN340mg（0.4mg/ml）和TTC10mg（0.1mgml）。13、BS（改良法）雙歧桿菌選擇培養(yǎng)基：西紅柿汁（500g西紅柿加1000ml水，熬成粘稠汁，紗布過濾，而后濾紙過濾，高壓滅菌，4C保存）200ml,蛋白胨15g,酵母浸膏6g,葡萄糖20g,NaCl5g,吐溫801g,可溶性淀粉0.5g,瓊脂20g，精制水800ml。溶解后，冷至50C左右時，力口BS添加液50ml,倒平板，PH6.8。BS添加液：丙酸鈉30g加90ml水，充分溶解，然后加新霉素400mg，巴龍霉素100mg，氯化理6g,最后加精制水至100ml,冰箱內(nèi)保存。14、FS（梭桿菌選擇性培養(yǎng)基）：EG1000ml,FS添加液10m