實(shí)驗(yàn)動(dòng)物手術(shù)及麻醉

1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物手術(shù)及麻醉一、概論實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程為減輕動(dòng)物的疼痛及緊迫，常需給予止痛或麻醉。動(dòng)物麻醉屬醫(yī)療行為， 因此不論是實(shí)驗(yàn)前對(duì)麻醉藥物與方式的選擇，或麻醉前中后對(duì)動(dòng)物生理心理狀態(tài)的評(píng)估， 均需獸醫(yī)師專業(yè)知識(shí)的建議。動(dòng)物的麻醉必須兼顧：（ 1） 不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果；（ 2）臨床實(shí)際可行；（ 3） 避免動(dòng)物承受非必要的痛苦。適當(dāng)?shù)穆樽聿坏軠p輕動(dòng)物的痛苦，也能減少研究人員承受過(guò)多的精神壓力。1. 名詞解釋：Analgesia:止痛，對(duì)疼痛失去敏感性。Tranquillization ： 精神安定，動(dòng)物呈現(xiàn)一種行為改變狀態(tài)，精神與動(dòng)作遲緩，松懈，對(duì)周圍環(huán)境的反應(yīng)冷淡、對(duì)小疼痛常不在意。Sedation ：鎮(zhèn)

2、靜，輕微程度的中樞神經(jīng)抑制狀態(tài)，保持醒覺(jué)，但安靜。Anesthesia:麻醉，以藥物或其他方式抑制動(dòng)物局部（周邊性）或全體（中樞性）神經(jīng)組織的活性，使動(dòng)物部分或整個(gè)身體完全失去感覺(jué)作用。Local anesthesia ：局部麻醉。General anesthesia ：全身麻醉。完全無(wú)知覺(jué)與感覺(jué)（中樞性）。Surgical anesthesia ： 外科手術(shù)麻醉。完全無(wú)知覺(jué)與感覺(jué)，并有充分的肌肉松弛和痛感消失。2. 手術(shù)分類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的手術(shù)可分為存活手術(shù)（Survival surgery ）和不存活手術(shù)（Nonsurvivalsurgery ）兩類，前者指麻醉后或所有手術(shù)結(jié)束后動(dòng)物還需生存著，

3、后者指麻醉后或所有手術(shù)結(jié)束后動(dòng)物即給與安樂(lè)死。進(jìn)行存活手術(shù)時(shí)，不論是剖腹、截肢或注射藥物、處理傷口，皆需嚴(yán)格執(zhí)行手術(shù)部位的剃毛消毒（beta-iodine scrub/alcohol ），材料滅菌（ autoclave ）及無(wú)菌操作（surgical glove & aseptic operation ）視實(shí)驗(yàn)需求動(dòng)物可在術(shù)前注射抗生素以避免感染。如進(jìn)行不存活手術(shù)，雖不需存活手術(shù)般嚴(yán)格無(wú)菌操作，但至少要行操作部位的剃毛消毒和戴手套。存活手術(shù)依對(duì)動(dòng)物的影響程度區(qū)分為Major與Minor。Major survival surgery指任何需將體腔暴露在外或嚴(yán)重影響動(dòng)物正常身體與生理功能的手術(shù)，例

4、 如：胸腔手術(shù)、關(guān)節(jié)手術(shù)、截肢手術(shù).等；Minor survival surgery 則是指不需暴露體腔或者對(duì)動(dòng)物生理影響很小的手術(shù)，例如：傷口縫合、安裝周邊血管的導(dǎo)管基于人道考量單一動(dòng)物不可執(zhí)行重復(fù)的Major survival surgery ，如有必要需于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)申請(qǐng)表內(nèi)提出詳細(xì)的說(shuō)明，取得 IACUC 同意后才可執(zhí)行。二、術(shù)前照顧犬、貓、靈長(zhǎng)類與豬在進(jìn)行麻醉前8至 12小時(shí)需禁食。而小型嚙齒類動(dòng)物及兔不易發(fā)生嘔吐，因此一般手術(shù)前不需禁食，天竺鼠的唾液分泌較多，需多加注意。任何懷孕或健康不良之動(dòng)物皆須審慎評(píng)估麻醉對(duì)動(dòng)物的影響。手術(shù)前也需有急救動(dòng)物的概念，預(yù)先準(zhǔn)備 Atropine 、 C

5、aCl2 10%、 Dexamethasone 、 Dopamine 、 Doxapram 、 Epinephrineate 等急救藥物。（一 ） 麻醉前給藥鎮(zhèn)靜劑(Tranquillizers/Sedatives )、止痛劑(Analgesics )、抗乙酰膽堿( Anticholinergics )等藥品統(tǒng)稱為麻醉前給藥。鎮(zhèn)靜劑及止痛劑可誘導(dǎo)麻醉平緩進(jìn)行，降低 (或直接跨越)麻醉興奮期的反應(yīng)，間接可減少麻醉藥品使用量，降低動(dòng)物死亡率?？挂阴Ｄ戭愃幤房梢种泼宰呱窠?jīng)的興奮，避免手術(shù)期間動(dòng)物嘔吐及過(guò)度流涎現(xiàn)象。1. Anticholinergics Atropine抑制呼吸道及唾液腺分泌物，防止

6、心臟受到迷走神經(jīng)的興奮所產(chǎn)的心跳徐緩。注意：已有心律不整的動(dòng)物避免使用。2. Tranquillizers Sedatives Phenothiazines ： Chlorpromazine, Acepromazine, Promazine抑制腦干及大腦皮質(zhì)，產(chǎn)生安靜和減低運(yùn)動(dòng)性作用。注意：因血管擴(kuò)張而易造成血壓降低，高劑量時(shí)會(huì)有肌肉僵直、震顫等現(xiàn)象?？膳c解離性麻醉劑(ketamine )共享來(lái)降低副作用。 Butyrophenones ： Droperidol, Fluanisone, Azaperone效果比 Penothiazine 強(qiáng)。注意：易造成血壓降低。 Benzodiazepin

7、es ： Diazepam(Valium), Midazolam控制及預(yù)防癲癇，可使用于老年、肥胖動(dòng)物，它可解除Ketamine 引起之痙攣。注意：靜脈注射太快時(shí)會(huì)休克。皮下及肌肉注射效果不佳，且刺激性強(qiáng)。 Alpha-2-adrenargic agonist tranquillizer ： Xylazine ( Rompun )常使用于貓科動(dòng)物與靈長(zhǎng)類，肌肉松弛效果佳。注意：刺激嘔吐中樞，會(huì)使90% 貓嘔吐。適合與Ketamine 合用。3. Narcotic analgesics ( Opioids )Morphine, Pethidine, Buprenorphine, Methadon

8、e, Fentanyl屬管制藥品，精神性安定鎮(zhèn)痛作用。注意：低劑量會(huì)引起中樞神經(jīng)抑制現(xiàn)象，較高劑量會(huì)產(chǎn)生興奮，超高劑量會(huì)引起中樞神經(jīng)過(guò)度抑制而死亡。三、麻醉及手術(shù)(一 ) 麻醉期監(jiān)控1. 麻醉分期：第一期無(wú)痛期：開(kāi)始失去知覺(jué)。第二期興奮期：呼吸急促，狂亂或喊叫，對(duì)外界刺激異常反應(yīng)。第三期手術(shù)麻醉期：分成四節(jié)，最適合進(jìn)行手術(shù)。第四期休克死亡期：呼吸、心跳幾乎停止，1至5分鐘內(nèi)可能死亡。一般來(lái)說(shuō)麻醉希望越快進(jìn)入第三期(手術(shù)麻醉期)狀態(tài)，此期的第一、第二節(jié)足夠大部分手術(shù)所需。第三、第四節(jié)已是動(dòng)物接近死亡的高危險(xiǎn)期，此時(shí)必須暫停手術(shù)進(jìn)行 急救，否則一旦進(jìn)入第四期休克期，動(dòng)物80%以上會(huì)死亡。麻醉各期生

9、理變化呼吸瞳孔眼球移動(dòng)反射肌肉張力脈膊血壓I無(wú)痛期規(guī)則正常隨意存在正常脈膊血壓TII興奮期不規(guī)則1|擴(kuò)張不隨意存在激動(dòng)緊張脈膊血壓TIII手術(shù)麻醉期（輕度）深度T 速度T收縮不隨意或固定不動(dòng)眼結(jié)膜 喉咽輕微松弛脈膊血壓正常第F （中度）正常正常固定/、動(dòng)喉咽中等松弛脈膊血壓正常第三節(jié) （深度）深度J 速度J輕微擴(kuò)張固定/、動(dòng)極度松弛脈膊/、整， 血壓J第四節(jié) （過(guò)量）腹式 呼吸中等擴(kuò)張固定/、動(dòng)脈膊微弱， 血壓J JIV休克死亡期腹式 呼吸極度擴(kuò)張固定不動(dòng)1 11脈膊、血壓至零注：勿將進(jìn)入第二期興奮期的動(dòng)物反應(yīng)（狂亂喊叫、呼吸急促），以及第三期第四節(jié)的腹式 呼吸（腹壁的突然收縮）誤判為麻醉不足

10、而追加藥量，導(dǎo)致動(dòng)物死亡。2.動(dòng)物麻醉深度評(píng)估項(xiàng)目：（1） 呼吸：動(dòng)物在麻醉過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)停止呼吸數(shù)秒，然后又有一深呼吸，此為麻醉過(guò)度現(xiàn) 象，須注意（注射ketamine氯胺酮后動(dòng)物暫時(shí)性呈現(xiàn)停止呼吸數(shù)秒，之后恢復(fù) 正常呼吸，需小心區(qū)別）。一般而言胸式呼吸為輕度麻醉，麻醉越深，越接近腹式呼吸。不規(guī)則的呼吸表示動(dòng)物快要蘇醒或麻醉過(guò)深。（2）黏膜顏色：正常麻醉狀態(tài)下黏膜（口腔、肛門）為粉紅色，表示氧氣足夠；如呈現(xiàn)紫色，則為 發(fā)疳（cyanosis）現(xiàn)象，表示缺氧。（3） 微血管再充血時(shí)間（CRT）:手指壓牙齦后放開(kāi)，牙齦再恢復(fù)正常粉紅色為止所需時(shí)間，正常要小于2 s,超過(guò)則顯示心臟輸出功能不佳。（4

11、）脈膊：監(jiān)測(cè)后腿股骨動(dòng)脈、下顆動(dòng)脈（大動(dòng)物）、心跳數(shù)（嚙齒類）。（5）反射：肛門反射及趾間痛覺(jué)反射皆可做為麻醉指標(biāo)，口咽反射亦可做為使用氣體麻醉時(shí)恢復(fù)的指標(biāo)。（6）眼反射：眼球震顫表示麻醉過(guò)淺。麻醉初期興奮時(shí)瞳孔放大， 然后隨著麻醉程度加深而縮?。宦樽磉^(guò)量時(shí)瞳孔會(huì)極度擴(kuò)大。(二)麻醉麻醉可分為局部和全身兩種，局部麻醉較常使用于大型動(dòng)物(如牛，馬)，一般動(dòng) 物常使用全身麻醉。全身麻醉有注射性麻醉劑和吸入性麻醉劑兩類。1 .注射性麻醉劑：誘導(dǎo)快，方便省時(shí)，無(wú)需復(fù)雜昂貴的設(shè)備；但藥物注入體內(nèi)后不易控制其深度， 須于體內(nèi)代謝排泄后才能緩解。? Barbiturates : Pentobarbital,

12、 Thiopentone, Methohexitone, 廣范使用,抗痙攣性佳，作用時(shí)間長(zhǎng)(Pentobarbital : 2-3hrs ; Phenobarbital : 6hrs)。屬管制藥品。注意：有嚴(yán)重的呼吸、心血管抑制作用，此藥物作用屬非可逆性，無(wú)特殊拮抗藥物可緩解，一旦過(guò)量，極易死亡。對(duì)貓會(huì)造成呼吸暫停現(xiàn)象。肝腎毒性高。? Steroid anesthetic : Alphaxalone / Alphadolone誘導(dǎo)作用溫和，適用于綿羊、豬、靈長(zhǎng)類、貓。注意：對(duì)貓狗會(huì)產(chǎn)生過(guò)敏反應(yīng)。不可與 Barbiturates共享。? Dissociative anesthetic : Ket

13、amine, Tiletamine解離型麻醉劑， 使用廣范(尤其貓科動(dòng)物)，投藥方便。屬管制藥品。注意：?jiǎn)为?dú)使用時(shí)肌肉松弛效果差，全身肌肉呈僵直反應(yīng)(可與 Xylazine或Diazepam共 享)。有過(guò)度垂涎、呼吸暫停現(xiàn)象。麻醉中眼瞼不閉合，需投予眼藥膏保護(hù)眼球。? Neuroleptanalgesics : Fentanyl/Fluanisone精神安定性鎮(zhèn)靜劑，可與其他麻醉劑合用(Fentanyl + Droperidol = Innovar-Vet )。注意：麻醉中聽(tīng)覺(jué)對(duì)外界聲音特別敏感。血壓降低，呼吸抑制。? Others ： Chloral Hydrate, Tribromoeth

14、anol, Urethane, Alpha- Choralose 。2 .吸入性麻醉劑：對(duì)麻醉深度與時(shí)間的掌控性佳，蘇醒快；但需較昂貴的設(shè)備(汽化器、連接管、 口罩或氣管套管)，而有些吸入性藥劑對(duì)動(dòng)物及操作人員的呼吸道和肝腎等器官有傷 害性。(1) Ether ：肌肉松弛效果佳，易使用，準(zhǔn)備瓶子、藥劑、棉花既可在抽氣柜內(nèi)使用。注意：易燃、易爆，易揮發(fā)。人員必須要在Fume hood (有抽氣罩之操作臺(tái))內(nèi)操作，絕不可與電器設(shè)備一起使用，以 Ether處理后之動(dòng)物尸體需儲(chǔ)藏在有防爆裝置的冰柜。乙醒味道刺激性強(qiáng)，易使鼠類呼吸道疾病惡化。 基于安全與健康理由，非常不推薦采用Ether 做為麻醉劑。(

15、2) Methoxyflurane :無(wú)爆性或易燃性，肌肉松弛效果及止痛效果佳，使用于小型鼠 類時(shí)可直接使用麻醉箱進(jìn)行動(dòng)物麻醉。注意：誘導(dǎo)及恢復(fù)期慢，因此在較大型動(dòng)物建議 先使用注射性麻醉藥誘導(dǎo)，之后以吸入性麻醉藥維持麻醉期。在體內(nèi)代謝會(huì)產(chǎn)生氟化物 造成肝臟傷害。(3) Halothane :誘導(dǎo)及恢復(fù)期快，不易燃或爆炸，但需配合氣體麻醉機(jī)及汽化器相關(guān)設(shè)備。注意：周邊血管擴(kuò)張易造成低血壓。動(dòng)物及人員長(zhǎng)期曝露在halothane下易造成肝功能受損。在較大型動(dòng)物建議先使用注射性麻醉藥誘導(dǎo)，之后以吸入性麻醉藥維持麻 醉，而嚙齒類動(dòng)物則直接使用麻醉箱或口罩誘導(dǎo)并維持麻醉狀態(tài)。(4) Isofluran

16、e :誘導(dǎo)及恢復(fù)期快，肝毒性較小，適合藥物代謝或毒理試驗(yàn)時(shí)使用。注意：呼吸抑制作用較 Halothane嚴(yán)重，心血管抑制作用較小。在較大型動(dòng)物建議先使用注射性麻醉藥誘導(dǎo)，之后以吸入性麻醉藥維持麻醉，而嚙齒類動(dòng)物則直接使用麻醉箱或口罩誘導(dǎo)并維持麻醉狀態(tài)。（ 5 ） Others ： Nitrous Oxide, Carbon Dioxide （ CO2）（三 ） 影響麻醉的因素1. 動(dòng)物種類、品種2. 性別、年齡、體重3. 動(dòng)物的營(yíng)養(yǎng)狀況和健康情況4. Methoxyflurane 對(duì) F344大鼠會(huì)造成糖尿病樣癥后群（ Diabetes-like syndrome ）。5. 天竺鼠注射Inno

17、var-Vet 可能造成肌肉組織壞死。6. 貓及馬使用Morphine 可能有中樞神經(jīng)性?shī)^作用，須特別注意。7. 靈長(zhǎng)類動(dòng)物的保定絕不能單獨(dú)只使用鎮(zhèn)靜劑類藥物。（四 ） 外科手術(shù)手術(shù)前應(yīng)對(duì)參與人員之執(zhí)掌做出適當(dāng)規(guī)劃，并對(duì)不同學(xué)歷及技術(shù)人員給予適切 之訓(xùn)練。動(dòng)物手術(shù)期間也應(yīng)具備無(wú)菌概念，降低動(dòng)物在手術(shù)操作過(guò)程被微生物感染之機(jī)率，在環(huán)境許可下采用最好的無(wú)菌程序。麻醉手術(shù)中動(dòng)物的狀況應(yīng)持續(xù)監(jiān)控，包括體溫的維持、心臟血管與呼吸系統(tǒng)之功能，對(duì)異常狀況采用適當(dāng)?shù)募本忍幹谩Ｋ?、術(shù)后照顧1. 必須確保動(dòng)物由麻醉狀態(tài)蘇醒，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后需至少留下一位研究人員監(jiān)視動(dòng)物的生理狀況，并持續(xù)陪伴動(dòng)物直到動(dòng)物能自行翻身或站立

18、為止，才可將動(dòng)物送回代養(yǎng)房。2. 動(dòng)物體溫調(diào)節(jié)中樞在麻醉時(shí)/ 后暫時(shí)失控，因此注意維持動(dòng)物的體溫（燈泡、 電毯、毛巾）。3. 皆需以電毯或保溫?zé)粢跃S持體溫。4. 在監(jiān)視動(dòng)物其間必須維持動(dòng)物的正常生理狀況，必要時(shí)給予動(dòng)物適當(dāng)輸液、止痛劑、消炎劑或抗生素。5. 維持呼吸道暢通，插管的動(dòng)物需在動(dòng)物出現(xiàn)吞咽反射或開(kāi)始咀嚼管子時(shí)拔管。側(cè)臥4小時(shí)以上時(shí)，應(yīng)翻另一側(cè)，以免肺臟郁血及重力性肺炎，必要時(shí)以藥物（Doxapram ）刺激呼吸或給予氧氣。6. 所有麻醉中及麻醉后動(dòng)物皆需維持頸部水平，勿使頸部彎曲，并盡可能拉 出舌頭于口腔外，以免阻塞咽喉部位，影響呼吸。如動(dòng)物嘔吐，則將頭部置于低于頸部和腹部的位置，以

19、免造成窒息或吸入性肺炎。7. 正常動(dòng)物每日約需40 至 80ml / kg 液體， 麻醉蘇醒后，有些動(dòng)物往往無(wú)法進(jìn)食或喝水，此時(shí)必須以人工方式經(jīng)口喂食、或經(jīng)靜脈、腹腔、皮下注射生理食鹽水或乳酸林格液補(bǔ)充體液（30至 50ml / kg ）。8. 依據(jù)動(dòng)物術(shù)后呈現(xiàn)之疼痛及不適癥狀，評(píng)估給予止痛劑、抗生素。9. 手術(shù)部位需確定無(wú)大量流血、異常腫脹等異常狀況。10. 為防止動(dòng)物術(shù)后當(dāng)日傷口受糞、尿、墊料污染，或眼睛沾染墊料或污物，中大型動(dòng)物需以干凈墊布?jí)|于籠內(nèi)，嚙齒類動(dòng)物則于PC盒內(nèi)墊料上放置一張干凈之拭紙。11. 待動(dòng)物蘇醒后送回原飼養(yǎng)房舍后，動(dòng)物籠標(biāo)示卡上需注明該動(dòng)物之注意事項(xiàng)及緊急聯(lián)絡(luò)人電話，

20、以利房舍負(fù)責(zé)人掌握動(dòng)物狀況并通知研究人員。12. 術(shù)后三日內(nèi)研究人員需密集觀察動(dòng)物狀況（每日1 至 2次 ），確定動(dòng)物的手術(shù)部位有無(wú)異常、有無(wú)并發(fā)癥狀。如動(dòng)物有任何異常狀況而需特殊治療，則與獸醫(yī)師商擬治療內(nèi)容。五、急救處理1 .呼吸停止：Doxapram點(diǎn)于鼻腔或靜脈注射。2 . 心跳停止：Epinephrine或Adrenaline （1ml/kg, 1:10000 ）靜脈注射或氣管內(nèi)投入。3 . 大量出血：壓迫止血，血管結(jié)扎。4 .休克：Dexamethasone, Prednisolone 注射。5 . 過(guò)敏現(xiàn)象：Epinephrine, Antihistamine 。6 .胸腔或腹腔穿

21、透性外傷：止血，縫合，防止二次性感染。7 .昏迷：高濃度氧氣，保溫，抗休克藥物。8 .急性中毒：高量Atropine ,輸液，對(duì)癥療法。9 .急性敗血癥：廣效性抗生素。六、有關(guān)止痛劑之使用1 .動(dòng)物對(duì)疼痛的耐受性與人類不同，但外科手術(shù)或有侵略性之實(shí)驗(yàn)對(duì)動(dòng)物而言絕非舒服。2 .疼痛會(huì)引起一連串的生理反應(yīng)，嚴(yán)重時(shí)會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。3 .站在人道立場(chǎng)，在不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的條件下，建議在術(shù)前、術(shù)后24至72小時(shí)給予止痛劑。4 .動(dòng)物在疼痛時(shí)，其活動(dòng)能力變差，性情改變，發(fā)出聲音（呻吟或異常叫聲），行為 或姿勢(shì)怪異，飲水及食量減少，呼吸速率改變。嚴(yán)重者會(huì)發(fā)生心衰竭性休克，周邊神經(jīng) 反射作用弱而緩慢，四肢及黏膜

22、無(wú)血色、蒼白、冰冷、無(wú)彈性，此時(shí)已威脅生命，必須 立刻處理。5 .常用藥物為麻醉性鎮(zhèn)痛劑和非類固醇類抗炎癥藥物（ NSAID）。Recommendation of Analgesics for Use in Small Mammals and Larger AnimalsAnalgesicMouseRatRabbitDogPigCatOpioidsBuprenorphine0.1 mg/kgSC0.05 mg/kg SC0.01-0.05 mg/kg SC0.005-0.02 mg/kg IM SC or IV every 6-12 hours0.005-0.02 mg/kg IM or IV

23、every 6-12 hours0.005-0.01 mg/kg IM, SC or IV every 6-12 hoursButorphanol1-5mg/kg SC2 mg/kg SC0.1-0.5 mg/kg SC0.2-0.4 mg/kg SC or IM, every 3-4 hoursunknown0.4 mg/kg SC, every 3-4 hoursMorphine2-5 mg/kg SC or IM every 4 hours2-5 mg/kg SC or IM every 4 hours2-5 mg/kg SC or IM every 4 hours0.5-5 mg/kg IM, every 4 hours0.2-1mg/kg IM, every 4 hours0.1 mg/kg IM, every 4 hoursPethidine10-20 mg/kg SC or IM every 2-3 hours10-20 mg/kg SC or IM every 2-3 hours10 mg/kg SC or IM every 2-3 hours10 mg/kg IM or IV every 2-4 hours2 mg/kg IM or IV every 2-4 hou