草履蟲(chóng)論文(開(kāi)放實(shí)驗(yàn)室)

1、淮北師范大學(xué) 2010屆學(xué)士學(xué)位論文 草履蟲(chóng)的采集與培養(yǎng)學(xué)院、專(zhuān)業(yè) 生命科學(xué)學(xué)院 2006級(jí)生物工程 研 究 方 向 動(dòng) 物 學(xué) 學(xué) 生 姓 名 朱 力 力 學(xué) 號(hào) 06154304071 指導(dǎo)教師姓名 朱 艷 芳 指導(dǎo)教師職稱 講 師 2010年 5 月 25日9草履蟲(chóng)的采集與培養(yǎng)朱力力（淮北師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院）（指導(dǎo)老師：朱艷芳）摘 要：本文研究了大草履蟲(chóng)的采集、純化培養(yǎng)，及不同的培養(yǎng)溫度、pH值和培養(yǎng)液對(duì)草履蟲(chóng)生長(zhǎng)的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示草履蟲(chóng)在不同溫度條件下生長(zhǎng)繁殖速度不同，15不適合用于快速繁殖，但可用于草履蟲(chóng)形態(tài)觀察的培養(yǎng)；25可用于草履蟲(chóng)的中長(zhǎng)期培養(yǎng)；35可以用于草履蟲(chóng)的快速繁殖。

2、在種培養(yǎng)液中第號(hào)培養(yǎng)液即河水稻草煮液+米飯粒，最有利于草履蟲(chóng)的生長(zhǎng)繁殖。 pH值為7.0左右時(shí)草履蟲(chóng)的生長(zhǎng)速度最快，且峰值期維持的時(shí)間最長(zhǎng)?？偨Y(jié)出在現(xiàn)有條件下采集和培養(yǎng)草履蟲(chóng)的簡(jiǎn)捷有效方法，為實(shí)驗(yàn)室用草履蟲(chóng)培養(yǎng)提供相關(guān)參考，以便于相關(guān)實(shí)驗(yàn)教學(xué)與研究。關(guān)鍵詞：大草履蟲(chóng)；采集；培養(yǎng) Collection and Cultivation of Paramecium caudatumZhu Li-li（School of Life Sciences，Huaibei Normal University）(Tutored by Zhu Yan-fang)Abstract This paper contai

3、ned the collection and purifying culture of Paramecium caudatum . Different temperature ,pH level and medium were also studied. The results showed that in different temperature the Paramecium caudatum grew differently . 15 was not suitable for rapid propagation , but could be used as morphological o

4、bservation temperature ; 25 could be used for mid-long term cultivation ; 35 was suitable for rapid propagation . The ninth medium , boiled water from the river with straw and rice , was the best in the nine cultivation medium for the Paramecium caudatum rapid propagation . Around the 7.0 pH level w

5、as the optimum level, the number of Paramecium caudatum was earlyer reaching to the pick and the duration of peak was the longest in the three pH levels. This paper summarized the simple and effective method of Paramecium caudatum cultivation , and offered the material to experimental teaching and r

6、elated research .Key words Paramecium caudatum；Collection ；Cultivation目錄引言11 材料和方法111 材料112 方法1121 草履蟲(chóng)的采集1122 草履蟲(chóng)的擴(kuò)大培養(yǎng)1123 培養(yǎng)液的配制2124 草履蟲(chóng)的純化3125 溫度、培養(yǎng)液及pH值對(duì)草履蟲(chóng)的影響31251 溫度對(duì)草履蟲(chóng)的影響31252 培養(yǎng)液對(duì)草履蟲(chóng)的影響31253 pH值對(duì)草履蟲(chóng)的影響3126 草履蟲(chóng)的計(jì)數(shù)42 結(jié)果和討論421 溫度對(duì)草履蟲(chóng)的影響422 培養(yǎng)液對(duì)草履蟲(chóng)的影響623 pH值對(duì)草履蟲(chóng)的影響63 結(jié)論7參 考 文 獻(xiàn)8致謝10引言大草履蟲(chóng)（Parame

7、cium caudatum）是原生動(dòng)物的代表動(dòng)物，也是動(dòng)物細(xì)胞生理、生化和遺傳學(xué)研究的模型動(dòng)物，在揭示生命的一些基本規(guī)律中顯示出極大的科學(xué)價(jià)值，已成為教學(xué)和科研必備的單細(xì)胞實(shí)驗(yàn)動(dòng)物1。國(guó)內(nèi)學(xué)者從重金屬離子23、農(nóng)藥4、洗滌液5等有毒物質(zhì)對(duì)草履蟲(chóng)耐受性的影響以及其生殖67等方面做了一定的研究，還探討了溫度8 9、pH810、培養(yǎng)液11等不同培養(yǎng)條件對(duì)草履蟲(chóng)的生長(zhǎng)繁殖的影響。本論文著重探討草履蟲(chóng)的長(zhǎng)期培養(yǎng)及快速繁殖方法，研究在現(xiàn)有實(shí)驗(yàn)室條件下不同生長(zhǎng)條件對(duì)草履蟲(chóng)生長(zhǎng)狀況的影響。1 材料和方法11 材料 稻草，牛奶（蒙牛牌純牛奶），米飯粒，水樣（天象公寓鐵道旁的水塘），顯微鏡，解剖鏡，光照培養(yǎng)箱，氫

8、氧化鈉溶液（1mol/L），鹽酸溶液（1mol/L ），0100L微量移液器。12 方法121 草履蟲(chóng)的采集草履蟲(chóng)生活在陽(yáng)光充足，帶有腐草的水溝、池塘或水田里12 13，尤喜生活于細(xì)菌豐富的水中14。在水溫030情況下能正常生活，最佳水溫為242713。本文草履蟲(chóng)的采集在15左右的溫度條件下進(jìn)行采集。用廣口瓶從水塘中采集水樣，采集時(shí)應(yīng)盡量靠近雜草較多的池邊。122 草履蟲(chóng)的擴(kuò)大培養(yǎng)水樣采回后，分別倒入2個(gè)1000mL的大燒杯中進(jìn)行培養(yǎng)，并標(biāo)記為、號(hào)燒杯，在每個(gè)燒杯中各加入10粒米飯，用兩層紗布封住燒杯口，放在陽(yáng)光充足的實(shí)驗(yàn)室里培養(yǎng)，每天觀察水樣的變化情況。剛開(kāi)始可以看到燒杯里有少量的水生物在游

9、動(dòng)。以后每天定時(shí)觀察一次。培養(yǎng)到第7d可以觀察到草履蟲(chóng)的數(shù)量明顯增加?？梢钥吹剿娓浇邪咨苿?dòng)的水紋，取之可作為草履蟲(chóng)純化培養(yǎng)的種源15。123 培養(yǎng)液的配制 （1）河水煮液 取新鮮的河水1000mL置于大燒杯中加熱煮沸1020min，放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上靜置2d，作為1、2、3號(hào)培養(yǎng)液的母液。然后往2號(hào)燒杯中滴加牛奶（每10mL溶液加1滴牛奶），往3號(hào)燒杯中加米飯粒（每50mL溶液加5粒米飯），備用。為了防止空氣中其它原生動(dòng)物的包囊落人和蚊蟲(chóng)產(chǎn)卵，用三層紗布封口，然后在溫暖明亮處放置2d進(jìn)行細(xì)菌繁殖。 （2）河水稻草煮液17 取新鮮的河水1000mL，稱取10g稻草置于大燒杯中加熱煮沸1020mi

10、n，放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上靜置2d，作為4號(hào)和9號(hào)培養(yǎng)液的母液。然后往9號(hào)中加入米飯粒（每50mL溶液加5粒米飯），室溫下靜置2d，備用。 （3）自來(lái)水培養(yǎng)液 取自來(lái)水1000mL置于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上靜置2d，作為5號(hào)、6號(hào)培養(yǎng)液的母液。然后往5號(hào)燒杯中加入牛奶（每10mL溶液加1滴牛奶），往6號(hào)燒杯中加米飯粒（每50mL溶液加5粒米飯），用三層紗布封口，室溫下靜置2d，備用。（4）開(kāi)水培養(yǎng)液 取自來(lái)水1000mL加熱煮沸1020min，置于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上靜置2d，作為7號(hào)、8號(hào)培養(yǎng)液的母液。然后往7號(hào)中加入牛奶（每10mL溶液加1滴牛奶），往8號(hào)中加米飯粒（每50mL溶液加5粒米飯），用三層紗布封口，室溫下靜置2d

11、，備用。9種培養(yǎng)液配方見(jiàn)表1。表1 培養(yǎng)液的主要成份Tab. 1 The composition of medium培養(yǎng)液成分培養(yǎng)液湖 水(mL)自來(lái)水(mL)開(kāi) 水（mL）稻 草（g）米飯粒（粒）牛 奶（滴）1河水煮液502河水煮液+牛奶5053河水煮液+米飯粒5054河水稻草煮液5015自來(lái)水+牛奶5056自來(lái)水+米飯粒5057涼開(kāi)水+牛奶5058涼開(kāi)水+米飯粒5059河水稻草煮液+米飯粒5015124 草履蟲(chóng)的純化用膠頭滴管吸取、號(hào)燒杯中培養(yǎng)液，滴一滴至干凈的載玻片上，用顯微鏡觀察草履蟲(chóng)。若發(fā)現(xiàn)有草履蟲(chóng)，則用滴管吸取草履蟲(chóng)，滴在另一塊加一滴培養(yǎng)液的載玻片上，重復(fù)46次，高倍顯微鏡觀察，看

12、是否有其他水生生物，如果有就繼續(xù)重復(fù)上述步驟，直至僅能看到一個(gè)草履蟲(chóng)；若未發(fā)現(xiàn)草履蟲(chóng)，則重新吸取培養(yǎng)液重復(fù)上述操作。然后把純化的一個(gè)草履蟲(chóng)放入100mL錐形瓶中，用河水煮液置于25光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。在培養(yǎng)液中加入米飯粒（每50mL溶液加5粒米飯）為草履蟲(chóng)提供充足的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。每天取樣觀察草履蟲(chóng)的數(shù)量變化，取樣觀察三天后，可以觀察到有草履蟲(chóng)存在，繼續(xù)培養(yǎng)到第7d可以觀察到草履蟲(chóng)數(shù)量有明顯增加。該草履蟲(chóng)作為進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)的材料。125 溫度、培養(yǎng)液及pH值對(duì)草履蟲(chóng)的影響1251 溫度對(duì)草履蟲(chóng)的影響以河水稻草煮液作為培養(yǎng)液，每個(gè)錐形瓶取50mL培養(yǎng)液，分別在15、25、35下培養(yǎng)，每個(gè)溫度3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重

13、復(fù)接種2個(gè)純化的草履蟲(chóng)。每24 h取樣制成臨時(shí)裝片，在解剖鏡下觀察計(jì)數(shù)，每瓶取樣兩次進(jìn)行計(jì)數(shù)，并對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象進(jìn)行描述、記錄。多數(shù)培養(yǎng)液中草履蟲(chóng)基本結(jié)構(gòu)清晰可見(jiàn)時(shí)，開(kāi)始在解剖鏡下用微量記數(shù)法進(jìn)行計(jì)數(shù)18。1252 培養(yǎng)液對(duì)草履蟲(chóng)的影響用已經(jīng)配制好的9種培養(yǎng)液培養(yǎng)，每瓶取50mL培養(yǎng)液，接種2個(gè)純化后的草履蟲(chóng)。每種培養(yǎng)液做三個(gè)重復(fù)，并做好標(biāo)記。把培養(yǎng)液放在25光照培養(yǎng)箱培養(yǎng)，在取樣計(jì)數(shù)時(shí)每瓶取樣兩次進(jìn)行計(jì)數(shù)。1253 pH值對(duì)草履蟲(chóng)的影響以9號(hào)培養(yǎng)液作為母液，分成3份，分別用NaOH(1mol/L)、HCl(1mol/L)標(biāo)準(zhǔn)液調(diào)節(jié)pH值為5.5、7.0和8.5左右，每個(gè)pH值做三個(gè)重復(fù)。兩天后每瓶

14、50mL培養(yǎng)液接種2個(gè)草履蟲(chóng)，在25的條件下培養(yǎng)，從第2d開(kāi)始觀察計(jì)數(shù)，每瓶取樣兩次進(jìn)行計(jì)數(shù)。并記錄草履蟲(chóng)的生長(zhǎng)狀況。126 草履蟲(chóng)的計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)均從草履蟲(chóng)接種后第二天開(kāi)始計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)是本實(shí)驗(yàn)?zāi)芊癯晒Φ年P(guān)鍵，在計(jì)數(shù)中，取樣工具的選用，計(jì)數(shù)工具的選用等均能影響到數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性19。本實(shí)驗(yàn)采用微量移液器取樣，當(dāng)蟲(chóng)體密度小于100個(gè)/mL時(shí)可直接每次取50L滴在載玻片上，用解剖鏡觀察計(jì)數(shù)；當(dāng)蟲(chóng)體數(shù)量較多時(shí)可以用寫(xiě)字法計(jì)數(shù)，即用微量移液器取樣10L，均勻連續(xù)地在干凈載玻片上擠出微量移液器中的含草履蟲(chóng)的培養(yǎng)液，擠樣過(guò)程如同寫(xiě)字，在玻片上寫(xiě)出“一”字或倒寫(xiě)的“U”字，鏡檢寫(xiě)“字”內(nèi)的蟲(chóng)數(shù)；當(dāng)蟲(chóng)體密度大于1000個(gè)

15、/mL時(shí)，用標(biāo)點(diǎn)法計(jì)數(shù)，即用微量移液器取樣10L，均勻不連續(xù)地在干凈載玻片上全部擠出微量移液器中的含草履蟲(chóng)的培養(yǎng)液，點(diǎn)樣過(guò)程如同鋼筆寫(xiě)標(biāo)點(diǎn)，在玻片上點(diǎn)出“一”字或倒的“U”字，鏡檢所寫(xiě)各點(diǎn)內(nèi)的蟲(chóng)數(shù)，把各點(diǎn)內(nèi)的蟲(chóng)數(shù)相加即為10L內(nèi)的總數(shù)。然后再計(jì)算出1mL培養(yǎng)液中草履蟲(chóng)的個(gè)數(shù)。2 結(jié)果和討論21 溫度對(duì)草履蟲(chóng)的影響在15條件下培養(yǎng)，草履蟲(chóng)個(gè)體很大，但繁殖速度很低，而且運(yùn)動(dòng)緩慢。在25條件下，草履蟲(chóng)個(gè)體大小均勻適中，運(yùn)動(dòng)較快。在35條件下，草履蟲(chóng)個(gè)體大小在數(shù)量達(dá)到峰值之前較大，運(yùn)動(dòng)迅速，在第10d數(shù)量最先達(dá)到最大值，但之后蟲(chóng)體數(shù)量開(kāi)始逐漸減少，個(gè)體變小，運(yùn)動(dòng)逐漸減慢。這可能是由于蟲(chóng)體密度太大，培養(yǎng)

16、液中的氧氣不能滿足它的耗氧量，而且培養(yǎng)液中隨著草履蟲(chóng)的衰亡積累產(chǎn)生大量的有害物質(zhì)20，導(dǎo)致草履蟲(chóng)數(shù)量急劇下降，最終數(shù)量保持在很低的密度。由圖(1)可知：l)各溫度條件下，草履蟲(chóng)的密度都是隨時(shí)間的推移從開(kāi)始密度較小逐漸增大，達(dá)到各自高峰后，逐漸下降。2)各溫度條件下都有高峰期，其出現(xiàn)時(shí)間不同，峰值高低不一樣。在15條件下，峰值最低，且達(dá)到峰值所需時(shí)間最長(zhǎng)為24d，峰值為800個(gè)/mL。在25條件下，第17天為高峰期，峰值為1533個(gè)/mL。在35的條件下，第9天為高峰期，且35的峰值最大，峰值為2407個(gè)/mL，是15峰值的三倍。說(shuō)明高溫對(duì)草履蟲(chóng)的繁殖有加速作用，溫度越高，草履蟲(chóng)的生長(zhǎng)速度越快，

17、后期密度下降也快。原因是高溫下生命活動(dòng)旺盛，隨著種群密度的增大，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和能量消耗大、生命體活性衰竭快8。結(jié)果表明三種溫度下草履蟲(chóng)的種群密度變化差異較大，與余世金的研究溫度對(duì)草履蟲(chóng)的影響很明顯結(jié)果相同8。圖(1)溫度對(duì)草履蟲(chóng)的影響Fig. (1) The effect of temperature on the growth of Paramecium caudatum圖(2) 培養(yǎng)液對(duì)草履蟲(chóng)的影響Fig. (2) The effect of medium on the growth of Paramecium caudatum22 培養(yǎng)液對(duì)草履蟲(chóng)的影響從圖(2)可以看出，9號(hào)培養(yǎng)液中培養(yǎng)的草

18、履蟲(chóng)，其生長(zhǎng)速度最快，在第5d時(shí)數(shù)量開(kāi)始迅速增加，在第17d達(dá)到最大值，峰值為1533個(gè)/mL，而且在操作中發(fā)現(xiàn)草履蟲(chóng)個(gè)體較大，運(yùn)動(dòng)活躍。隨著種群密度的增大，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和能量消耗大、生命體活性衰竭快。所以之后蟲(chóng)體數(shù)量迅速減少，但數(shù)量相對(duì)其他培養(yǎng)液來(lái)說(shuō)還是很高的。3號(hào)培養(yǎng)液雖然在第15d草履蟲(chóng)數(shù)量最先達(dá)到峰值，但種群數(shù)量還是比9號(hào)培養(yǎng)液要低得多，是9號(hào)培養(yǎng)液15d的73%。其他的培養(yǎng)基草履蟲(chóng)數(shù)量基本上都沒(méi)有太大的升高，且達(dá)到峰值所需時(shí)間長(zhǎng)。所以可以確定，在9種培養(yǎng)液中第9號(hào)培養(yǎng)液最適合于草履蟲(chóng)的培養(yǎng)。與其他培養(yǎng)液2122相比本實(shí)驗(yàn)的培養(yǎng)液簡(jiǎn)單易制取，方便實(shí)驗(yàn)室的操作。從培養(yǎng)效果看，與潘志崇、童麗娟

19、的研究結(jié)果23相同。即濃度為每1000mL水加入1020g稻草的培養(yǎng)液最適宜于草履蟲(chóng)的生長(zhǎng)、繁殖。而且培養(yǎng)出的草履蟲(chóng)個(gè)體大，運(yùn)動(dòng)活躍。圖(3) pH對(duì)草履蟲(chóng)的影響Fig. (3) The effect of pH level on the growth of Paramecium caudatum23 pH值對(duì)草履蟲(chóng)的影響從圖(3)可以看出：在25下培養(yǎng)，草履蟲(chóng)在pH 7.0左右和8.5左右條件下生長(zhǎng)均較迅速，而且最先達(dá)到峰值，峰值分別為2450個(gè)/mL和2375個(gè)/mL；在pH 5.5左右條件下培養(yǎng)草履蟲(chóng)生長(zhǎng)速度最慢，在第14d達(dá)到峰值，峰值為2437.5個(gè)/mL。三種條件下的峰值相差很小，

20、說(shuō)明在25條件下pH對(duì)草履蟲(chóng)的影響不是太大，與余世金的研究論文中說(shuō)的在25下培養(yǎng)，pH對(duì)草履蟲(chóng)生長(zhǎng)影響不是很大的結(jié)論基本相同。但是相對(duì)來(lái)說(shuō)在pH 7.0左右的條件下培養(yǎng)峰值出現(xiàn)的早且可以保持相對(duì)較長(zhǎng)的一段時(shí)間，有利于為草履蟲(chóng)的相關(guān)研究提供大量及時(shí)而穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)材料。同時(shí)也可以得知草履蟲(chóng)對(duì)酸堿的耐受范圍很大。在野外采集時(shí)，草履蟲(chóng)是廣布性種類(lèi)，在各種水體甚至污染很?chē)?yán)重的污水溝中均能正常生活，也說(shuō)明了這一點(diǎn)(在污水溝中除了草履蟲(chóng)幾乎沒(méi)有其他的生物生存)，由于草履蟲(chóng)的耐受性較強(qiáng)，而且能適應(yīng)較為惡劣的生存環(huán)境，所以它能夠作為嚴(yán)重環(huán)境污染的生物指標(biāo)，對(duì)環(huán)境檢測(cè)有一定的應(yīng)用價(jià)值10。3 結(jié)論 通過(guò)以上分析可以

21、得到以下的結(jié)論：(1) 15條件下不太適合草履蟲(chóng)的快速繁殖，但可以考慮作為長(zhǎng)期培養(yǎng)的溫度。25可以作為草履蟲(chóng)中長(zhǎng)期大量培養(yǎng)的理想溫度。35可以作為草履蟲(chóng)短期快速增殖的培養(yǎng)溫度。(2)9號(hào)培養(yǎng)液在達(dá)到峰值時(shí)平均每毫升含草履蟲(chóng)的數(shù)量為1533個(gè)，比其他幾種培養(yǎng)液要高出很多，所以說(shuō)9號(hào)培養(yǎng)液培養(yǎng)草履蟲(chóng)效果最好。(3)在25條件下草履蟲(chóng)在pH 7.0左右時(shí)，培養(yǎng)液中的草履蟲(chóng)達(dá)到高峰時(shí)平均每毫升含有2450個(gè)，比在pH5.5、8.5左右時(shí)要高，維持的時(shí)間最長(zhǎng)，所以在pH7.0左右的培養(yǎng)液最適合草履蟲(chóng)的生長(zhǎng)。參 考 文 獻(xiàn)1 馬惠欽，周洪顯，石玉珍對(duì)草履蟲(chóng)培養(yǎng)和觀察實(shí)驗(yàn)的改進(jìn) J四川動(dòng)物，2006，(1)

22、：190 2 胡好遠(yuǎn)，郝家勝，靳璐Cd+對(duì)草履蟲(chóng)種群的毒性作用 J生物學(xué)雜志，2006，23(1)：19-21，303 潘志崇，劉云，孫平躍銅、鋅離子對(duì)尾草履蟲(chóng)的急性毒性試驗(yàn) J水產(chǎn)科學(xué)，2005，24(10)：19-21 4 張燕萍，朱慧芳，盧祥云3種農(nóng)藥對(duì)草履蟲(chóng)的毒性研究 J安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，37(34)：16880-168815 張文勝，王學(xué)麗，陸江等潔潔靈對(duì)草履蟲(chóng)生活狀態(tài)的影響 J生物學(xué)通報(bào)，2002，37(3)：576 史新柏草履蟲(chóng)的無(wú)性生殖和無(wú)性系的衰老 J生物學(xué)通報(bào)，1998，33(10)：11-137 史新柏草履蟲(chóng)的有性生殖 J 生物學(xué)通報(bào)，1998，33(9)，9-12

23、8 余世金，梅梅不同溫度、pH值對(duì)草履蟲(chóng)Logistic增長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)效應(yīng)的影響 J安慶師范學(xué)院學(xué)報(bào) 2007，13(2)：71-739 于寶霞培養(yǎng)溫度和保存時(shí)間對(duì)草履蟲(chóng)密度的影響 J生物學(xué)通報(bào)，2006，41(8)：5610 黃林pH值對(duì)草履蟲(chóng)種群增長(zhǎng)的影響 J皖西學(xué)院學(xué)報(bào)2005，21（2）：59-60 11 李淑梅，李季平不同培養(yǎng)液對(duì)大草履蟲(chóng)生長(zhǎng)的影響 J周口師范學(xué)院學(xué)報(bào)，2008，25(5)：96-9812 張今是大草履蟲(chóng)的采集和觀察 J武漢教育學(xué)院學(xué)報(bào)，1998，(3)：64-68 13 福山草履蟲(chóng)采集與培養(yǎng)方法的研究 J內(nèi)蒙古民族大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，15（2）：86-87 14 龔軍輝草

24、履蟲(chóng)的采集、培養(yǎng)和觀察方法 J高等函授學(xué)報(bào)，2003，16（1）：41-43 15 涂斌，易艷瓊，李盟等草履蟲(chóng)常年培養(yǎng) J生物學(xué)通報(bào)，2005，40(4)：56-57 16 周燕，鄧晗嵩，詹孝慈草履蟲(chóng)的采集、培養(yǎng)及實(shí)驗(yàn)探究 J黔西南民族師范高等專(zhuān)科學(xué)校學(xué)報(bào)，2008，(4)：119-122 17 杜天奎，丁華，牛永強(qiáng)培養(yǎng)草履蟲(chóng)的幾種方法比較 J寧夏農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào)，2003，(2)：2418 郭峰，張軍，李文芳一種簡(jiǎn)便實(shí)用的原生動(dòng)物分離和計(jì)數(shù)方法 J同濟(jì)大學(xué)學(xué)報(bào):醫(yī)學(xué)版，2001，22(4)：73-74 19 李妍，許梅 草履蟲(chóng)培養(yǎng)的繁盛期與水質(zhì)相關(guān)性的研究 J上饒師范學(xué)院學(xué)報(bào)，2003，23（3）：65-69 20 石玉珍狼尾草在草履蟲(chóng)培養(yǎng)和保存中的