動物實驗報告

1、實驗動物學(xué)實驗報告 學(xué) 院： 學(xué) 號： 姓 名 時 間：實驗一：小鼠實驗一、實驗?zāi)康?、掌握小鼠抓取、固定的基本方法；2、掌握小鼠的雌雄鑒別方法；3、掌握小鼠的標記方法；4、掌握小鼠的基本采血技術(shù)；5、掌握小鼠的常用給藥方法；6、掌握小鼠的解剖方法，熟悉內(nèi)部臟器的自然位置；二、實驗材料1、實驗動物：每組兩只雌鼠，兩只雄鼠；2、實驗器械及試劑：鼠籠；小鼠固定器和小鼠固定板；眼科剪；眼科鑷；解剖刀；1ml注射器；毛細玻璃管；灌胃針；苦味酸染料；葡萄糖液；2%水合氯醛；三、實驗內(nèi)容及方法1、小鼠的抓取和固定 抓取時先用右手抓取鼠尾提起，置于鼠籠或?qū)嶒炁_向后拉，在其向前爬行時，用左手拇指和食指抓住小鼠

2、的兩耳和頸部皮膚，將鼠體置于左手心中，把后肢拉直，以無名指按住鼠尾，小指按住后腿即可。這種在手中固定方式，能進行實驗動物的灌胃、皮下、肌肉和腹腔注射以及其他實驗操作。2、小鼠的雌雄鑒別 雄鼠的陰囊明顯，雄鼠可見陰道開口和五對乳頭。幼鼠或仔鼠則主要從外生殖器與肛門的距離判定，近者為雌，遠者為雄。另外，雌鼠肛門和生殖器之間有一無毛小溝，而雄鼠則在肛門和生殖器之間長毛。3、小鼠的標記方法 1）耳孔法 用耳號鉗在耳上打洞或者用剪刀在耳邊緣剪缺口，左耳為十位，右耳為個位。 2）剪趾法 適用于出生一周以內(nèi)新生仔鼠； 3）染色法用毛筆將苦味酸涂在動物的不同部位，注意逆著毛發(fā)生長方向刷。4、小鼠的基本采血 1

3、）剪尾采血 當所需血量很少時采用本法。固定動物并歷出鼠尾，將鼠尾在45溫水中浸泡數(shù)分鐘，也可用酒精棉球涂擦，使局新血管擴張。將鼠尾擦干，再用刀片剪去1-2mm，讓血液滴入盛器或直接用移液器吸取，同時自尾根部向尾尖按摩。取血后，先用棉球壓迫止血并立即用6液體火棉膠涂于尾巴傷口處，使傷口外結(jié)一層火棉膠薄膜，保護傷口。也可采用切割尾靜脈的方法采血，三根尾勢脈可交替切割，并自尾尖向尾根方向切割，每次可取0.20.3ml血，切割后用棉球壓迫止血。這種采血方法在大鼠進行較好，可以較長的間隔時間連續(xù)取血，進行血常規(guī)檢查。 2）眼眶后靜脈叢取血 當需中等量的血液，而又需避免動物死亡時采用此法。用左手固定鼠，盡

4、量捏緊頭部皮膚，使頭固定，并輕輕向下壓迫頸部兩側(cè)，引起頭部靜脈血液回流困難，使眼球充分外突（示眼眶后靜脈叢充血），右手持毛細玻璃管，沿內(nèi)眥眼眶后壁向喉頭方向旋轉(zhuǎn)刺入。刺入深度小鼠23mm。當感到有阻力時再稍后退，保持水平位，稍加吸引，由于血壓的關(guān)系，血液即流人玻璃管中。得到所需的血量后，撥出毛細管。若手法恰當，小鼠約可采血0.20.3ml。 3）心臟取血 動物仰臥固定在固定板上，剪去心前區(qū)部位的被毛，用碘酒酒精消毒皮膚。在左側(cè)第34肋間，用左手食指摸到心搏處，右手取連有45號針頭的注射器，選擇心搏最強處穿刺，當針刺入心臟時，血液由于心臟跳動的力量自動進人注射器。此法要求實驗者掌握以下要點：要迅

5、速而直接插入心臟，否則，心臟將從針尖處滑脫；如第一次沒刺準，將針頭抽出重刺，不要在心臟周圍亂探，以免損傷心、肺；要緩慢而穩(wěn)定的抽吸，否則，太多的真空反而使心臟塌陷。若不需保留動物生命時，也可麻醉后切開動物胸部，將注射器直接刺人心臟抽吸血液。5、小鼠的常用給藥方法1）經(jīng)口給藥：小鼠灌胃 左手抓住鼠背部及頸部皮膚將動物固定，右手持灌胃針，將灌胃針插入動物口中，沿咽后壁徐徐插入食道。動物應(yīng)固定成垂直體位，針插入時應(yīng)無阻力。若感到阻力或動物掙扎時，應(yīng)立即停止進針或?qū)⑨槹纬?，以兔損傷或穿破食道以及誤入氣管。一般當灌胃針插入小鼠34cm，常用的灌胃量小鼠為0.21ml；2）皮下注射給藥 皮下注射給藥部位以

6、頸部三角區(qū)最佳。操作時，常規(guī)消毒注射部位皮膚，然后將皮膚提起，注射針頭取一鈍角角度刺入皮下，把針頭輕輕向左右擺動，易擺動則表示已刺入皮下，再輕輕抽吸，如無回血，可緩慢地將藥物注入皮下。拔針時左手拇、食指捏住進針部位片刻，以防止藥物外漏。3）肌肉注射給藥 小鼠體積小，肌肉少，很少采用肌肉注射。當給小鼠注射不溶于水而混懸于油或其他溶劑中的藥物時，采用肌肉注射。操作時1人保定小鼠，另一人用左手抓 住小鼠的1條后肢，右手拿注射器。將注射器與半腱肌呈90角迅速插入1/4,注入藥液.用藥量不超過0.1ml/10g體重。4）腹腔注射給藥 左左手提起并固定小鼠，使鼠腹部朝上，鼠頭略低于尾部，右手持注射器將針頭

7、在下腹部靠近腹白線的兩惻進行穿刺，針頭刺入皮膚后進針3nm左右，接著使 注射針頭與皮膚呈45角刺入腹肌，穿過腹肌進入腹膜腔，當針尖穿過腹肌進入腹膜腔后抵抗感消失。固定針頭，保持針尖不動，回抽針栓，如無回血、腸液和尿液后即可注射藥液。5）尾靜脈注射給藥 鼠尾靜脈有兩根，左右兩側(cè)各一根。操作時先將動物固定在鼠筒內(nèi)或扣在燒杯中，使尾巴露出，尾部用4550的溫水浸潤半分鐘或用酒精擦拭使血管擴張，并可使表皮角質(zhì)軟化，以左手拇指和食指捏住鼠尾兩側(cè)，使靜脈充盈，用中指從下面托起尾巴，以無名指和小指夾住尾巴的末梢，右手持注射器，使針頭與靜脈平行（小于30），從尾下四分之一處（約距尾尖2-3厘米）處進針，此處皮

8、薄易于刺入，先緩注少量藥液，如無阻力，表示針頭已進入靜脈，可繼續(xù)注入。注射完畢后把 尾部向注射側(cè)彎曲以止血。如需反復(fù)注射，應(yīng)盡可能從末端開始，以后向尾根部方向移動注射。動進入注射器。6、小鼠的解剖 將小鼠放在解剖盤上，用大頭針將四肢固定在解剖盤上。用酒精棉球?qū)⑿∈蟾共康钠つw消毒。用手術(shù)剪沿腹中線將小鼠的腹部和胸部的皮膚剪開，然后用手術(shù)剪將腹腔和胸腔剪開，仔細觀察小鼠腹腔和胸腔的各內(nèi)臟器官。 內(nèi)部臟器觀察1）肺：分左右兩葉，右肺分為四葉，左肺為一整葉。2）心臟：呈圓錐狀，位于近胸骨端，心尖位于第四肋間。3）肝：附于隔上，呈暗褐色，分5葉。4）胃：分賁門、幽門、胃底及胃體。5）腸：分小腸和大腸。小

9、腸包括回腸、空腸和十二指腸。6）脾：脾斜臥在胃的左側(cè)，呈暗紅色，長條扁平狀。7）胰：在十二指腸附近，呈粉紅色。8）腎：右腎比左腎位置稍高 ，腎臟前方有腎上腺，每腎內(nèi)側(cè)各有一根輸尿管，開口于膀胱背側(cè)。9）卵巢和子宮：卵巢形似綠豆狀，粉紅色，左右各一，位于腎臟下方。小鼠為雙角子宮，為Y字形。10）睪丸：小鼠睪丸有一對，幼年時睪丸位于腹腔內(nèi)，性成熟后則下降至陰囊內(nèi)。實驗二：大鼠實驗一、實驗?zāi)康?、掌握大鼠抓取、固定的基本方法；2、掌握大鼠的雌雄鑒別方法；3、掌握大鼠的標記方法；4、掌握大鼠的基本采血技術(shù)（尾靜脈采血、心臟釆血、腹主動脈采血）；5、掌握大鼠的常用給藥方法（灌胃、腹腔注射、尾靜脈注射、皮

10、下注射、皮內(nèi)注射、麻醉）；6、掌握大鼠的解剖方法，熟悉內(nèi)部臟器的自然位置；二、實驗材料1、實驗動物：每組SD大鼠2只（1雌1雄）；2、實驗器械及試劑：鼠籠、大鼠固定器、大鼠固定板、1ml注射器、5ml注射器、眼科剪、彎頭鑷、灌胃針、10%水合氯醛、生理鹽水；三、實驗內(nèi)容及步驟1. 抓取和固定 右手從鼠籠將大鼠尾巴上段抓住并提起，放在鼠籠上部。輕輕向后拉鼠尾，大鼠向前掙脫時，用左手拇指和食指抓住兩耳后和勁部大部分皮膚。其余手指及掌心夾住背部和尾部，將大鼠尾巴鉤繞于小指上，將尾巴固定。注意不要用力過大使大鼠窒息死亡。2. 性別鑒定 成年雄鼠的睪丸沉降至陰囊中，故其陰囊明顯，成年雌鼠可見陰道開口和乳

11、頭，幼鼠或仔鼠則主要從外生殖器與肛門的距離判定，雄性：距離長，毛發(fā)密（和其他部位一樣），雌性：距離短，毛發(fā)稀疏。3. 給藥1）灌胃: 將注射器裝入藥物溶液，裝上灌胃針。抓取固定大鼠后，使大鼠頭部朝上，從大鼠口角一側(cè)進針，沿咽后壁緩緩插入食道。若感到巨大阻力或動物掙扎時，應(yīng)立即停止進針或?qū)⑨槹纬觯悦鈸p傷或穿破食道以及誤入氣管。一般當灌胃針插入大鼠45cm，常用的灌胃量大鼠為0.51ml；（若藥物灌入肺中，大鼠死亡）。 2）腹腔注射：左手固定大鼠后，右手持針，45度沿腹白線兩側(cè)進針，刺入腹肌，穿過腹肌進入腹膜腔，當針尖穿過腹肌進入腹膜腔后有落空感。針頭刺入皮膚后進針3nm左右，將注射針頭朝上，減

12、少與皮膚間的傾斜角度，繼續(xù)進針。固定針頭，保持針尖不動，回抽針栓，如無回血、腸液和尿液后即可注射藥液。3）尾靜脈注射：鼠尾靜脈有兩根，左右兩側(cè)各一根。操作時先將動物固定在鼠筒內(nèi)，使其尾巴露出，尾部用4550的溫水浸潤半分鐘或用酒精擦拭使血管擴張，并可使表皮角質(zhì)軟化，以左手拇指和食指捏住鼠尾兩側(cè)，使靜脈充盈，用中指從下面托起尾巴，以無名指和小指夾住尾巴的末梢，右手持注射器，使針頭與靜脈平行（小于30），從尾上三分之一處進針，此處皮薄易于刺入，回抽出血液后，表示針頭已進入靜脈，可緩慢將藥物注入小鼠尾靜脈中。注射完畢后用干棉球壓迫尾部向注射以止血。如需反復(fù)注射，應(yīng)盡可能從末端開始，以后向尾根部方向移

13、動注射。（切勿從后3/1處注射，此處大鼠易發(fā)生斷尾現(xiàn)象）。4）皮下注射：將大鼠以俯臥位固定，將腹部皮膚去毛后，左手拇指和食指捏住腹部皮膚，右手持針沿縱軸方向刺入皮下，進針時感覺有阻力，繼續(xù)刺入后突然阻力消失，判斷針頭可活動后注射入藥液。注射成功后可見一個小丘狀隆起，經(jīng)過段時間后注射入的藥物可被吸收。5）皮內(nèi)注射：小鼠以俯臥位固定，將腹部皮膚去毛后，左手拇指和食指捏住腹部皮膚，右手持針沿皮膚平行方向刺入捏住的皮膚，注射藥液。若感覺注射時有阻力，注射部位局部形成光亮泛白的皮丘即為注射成功。為避免藥液流出，停留片刻后將針頭拔出，用干棉球按壓針孔。4. 麻醉： 抓取固定大鼠后，通過腹腔注射的方式（按1

14、0%水合氯醛2ml/kg的用量）將適量的麻醉劑注射如大鼠體內(nèi)，等待幾分鐘后觀察大鼠反應(yīng)。若大鼠行動遲緩或幾乎不動為麻醉成功。若注射過量麻醉劑會造成大鼠死亡。5. 釆血1）尾靜脈采血先將大鼠固定在鼠筒內(nèi)，使其尾巴露出，尾部用4550的溫水浸潤半分鐘或用酒精擦拭使血管擴張，并可使表皮角質(zhì)軟化，以左手拇指和食指捏住鼠尾兩側(cè)，使靜脈充盈，用中指從下面托起尾巴，以無名指和小指夾住尾巴的末梢，右手持注射器，使針頭與靜脈平行（小于30），從尾上三分之一處進針，此處皮薄易于刺入，回抽出血液后繼續(xù)采集血液，每次0.1ml。2）心臟釆血：將麻醉后的小鼠以仰臥位放置，用指腹觸摸觀察確定小鼠心臟的位置（為搏動為劇烈處

15、）。右手持注射器，左手在左側(cè)固定心臟，針頭緊貼劍突下以30度角向前刺入2.5cm左右，邊進針邊回抽針管，可見血液借心臟搏動的力量進入注射器內(nèi)。此時固定針管及心臟的位置，繼續(xù)采血。采血完成后拔出針頭，用干棉球按壓住針頭的位置。（每次采血量可達23ml）。3）腹主動脈采血：將大鼠麻醉固定后，用手術(shù)剪沿腹正中線剪開腹腔，將腹主動脈充分暴露后（腹主動脈與腹主靜脈伴行，緊貼脊柱），右手持注射器，針尖斜面朝下，入針角度約2530度，朝向心端方向刺入，深度以5mm左右為宜，抽吸血液，若觀察到針管中血液為鮮紅色即為進針成功，繼續(xù)采血。一般體重200300g大鼠可采集血液810ml，采樣過程迅速。6. 大鼠解剖

16、；將大鼠麻醉后放至在解大鼠固定板上，仰位放置，充分暴露頸部、胸部和腹部。用酒精棉球?qū)⑿∈蟾共康钠つw消毒。用手術(shù)剪沿腹中線將小鼠的腹部和胸部的皮膚剪開，然后用手術(shù)剪將腹腔和胸腔剪開，仔細觀察小鼠腹腔和胸腔的各內(nèi)臟器官。內(nèi)部臟器觀察：1）肺：分左右兩葉，右肺分為四葉，左肺為一整葉。2）心臟：呈圓錐狀，位于近胸骨端，心尖位于第六肋間。（乳白色胸腺附于主動脈弓前部）。3）肝：緊鄰隔下，呈暗褐色，分7葉，無膽囊。4）胃：分賁門、幽門、胃底及胃體。5）腸：分小腸和大腸。小腸包括回腸、空腸和十二指腸。6）脾：脾斜臥在胃的左側(cè)，呈深紅色，長條扁平狀。7）胰：在十二指腸附近，不規(guī)則狀且呈粉紅色，與脂肪相似但顏色

17、不同。 8）腎：為黃豆大小，右腎比左腎位置稍高 ，腎臟前方有腎上腺（米粒大?。磕I內(nèi)側(cè)各有一根輸尿管，開口于膀胱背側(cè)。9）卵巢和子宮：在腎臟前方見肉色帶有顆粒樣突起的腺體為卵巢，兩側(cè)卵巢下方各連有一條輸卵管，輸卵管連接于下方子宮，兩側(cè)子宮結(jié)合形成“V”字形，經(jīng)陰道開口于體外。10）睪丸：小鼠睪丸有一對，幼年時睪丸位于腹腔內(nèi)，性成熟后則下降至陰囊內(nèi)。11）頜下腺：打開頸部皮膚后在口腔底部可見兩對橢圓形暗紅色腺體為頜下腺。實驗三：豚鼠、家兔的基本實驗操作一、實驗?zāi)康耐ㄟ^實際操作，掌握豚鼠和家兔的一般操作方法，包括豚鼠的抓取和固定、性別鑒定、灌胃、腹腔注射、心臟釆血、豚鼠解剖；家兔的抓取和固定、性

18、別鑒定、耳緣靜脈采血、耳緣靜脈注射、耳緣靜脈空氣栓塞法注射、家兔解剖，了解豚鼠和家兔的各臟器解剖學(xué)位置。二、實驗材料1、實驗動物：豚鼠1只（雌性）、家兔1只（雄性）2、實驗器械及試劑：鼠籠、鼠板、家兔固定器、兔板、頭皮針、5ml注射器、眼科剪、彎頭鑷、導(dǎo)尿管、10%水合氯醛、生理鹽水、手術(shù)剪、三、實驗步驟1、豚鼠的抓取和固定 豚鼠的抓取和固定：左手拇指和食指抓住豚鼠兩耳后和頸部大部分皮膚。其余手指及掌心夾住背部和尾部，豚鼠四肢不會阻礙實驗操作即為抓取固定成功，注意不要用力過大使豚鼠窒息死亡。2、豚鼠性別鑒定 將豚鼠抓取固定后使其腹面朝上，用手按壓豚鼠的會陰部，觀察是否有陰莖出現(xiàn)即可判斷雌雄。雄

19、性豚鼠可觀察到陰莖，雌性豚鼠可觀察到會陰部。3、豚鼠麻醉 左手抓取固定豚鼠后使其腹面朝上，右手持針，于豚鼠腹部呈30度沿腹白線兩側(cè)進針，刺入腹肌，穿過腹肌進入腹膜腔，當針尖穿過腹肌進入腹膜腔后有落空感。針頭刺入皮膚后進針3nm左右，將注射針頭朝上，減少與皮膚間的傾斜角度，繼續(xù)進針。固定針頭，保持針尖不動，回抽針栓，如無回血、腸液和尿液后即可注射麻醉劑（按10%水合氯醛4ml/kg的用量，豚鼠體重260g，故需注射1.1ml10%水合氯醛）。將適量的麻醉劑注射入豚鼠體內(nèi)，等待幾分鐘后觀察豚鼠反應(yīng)。若豚鼠全身癱軟幾乎不動為麻醉成功。若注射過量麻醉劑易造成豚鼠死亡。4、豚鼠心臟釆血 將麻醉后的豚鼠以

20、仰臥位放置，用指腹觸摸觀察確定豚鼠心臟的位置（為搏動為劇烈處，通常在胸骨左緣）。右手持注射器，左手在左側(cè)固定心臟，在三四肋間進針以30度角向左上刺入2.5cm左右，邊進針邊回抽針管，可見血液借心臟搏動的力量進入注射器內(nèi)。此時固定針管及心臟的位置，繼續(xù)采血。采血完成后拔出針頭，用干棉球按壓住針頭的位置。（每次采血量可達45ml）。5、豚鼠解剖 將通過心臟采血處死后的豚鼠放至在鼠板上，仰臥位放置，充分暴露頸部、胸部和腹部。用酒精棉球?qū)㈦嗍蟾共康钠つw消毒。用手術(shù)剪沿腹中線將豚鼠腹部和胸部的皮膚剪開，然后用手術(shù)剪將腹腔和胸腔剪開，仔細觀察豚鼠腹腔和胸腔的各內(nèi)臟器官。內(nèi)部臟器觀察：1）肺：共七葉，右肺四

21、葉，左肺三葉； 2）心臟：呈圓錐狀，位于近胸骨端，心尖位于第六肋間。（乳白色胸腺附于主動脈弓前部）； 3）肝：緊鄰隔下，呈暗紅色，分四個主葉和四個小葉，可見一光亮的膽囊附著于肝下； 4）胃：分兩部，賁門部和幽門部，胃容量約20-30g； 5）腸：分小腸和大腸。小腸包括回腸、空腸和十二指腸，大腸包括結(jié)腸、盲腸和直腸。盲腸特別發(fā)達，占腹腔容積的1/3，占體重的15%； 6）脾：脾斜臥在胃的左側(cè)，呈深紅色，長條扁平狀； 7）胰：一端緊貼脾臟，一端鄰近十二指腸，不規(guī)則狀且呈粉紅色； 8）腎：為黃豆大小，右腎比左腎位置稍高 ，腎臟前方有腎上腺（米粒大?。磕I內(nèi)側(cè)各有一根輸尿管，開口于膀胱背側(cè)； 9）卵

22、巢和子宮：在腎臟前方見肉色帶有顆粒樣突起的腺體為卵巢，兩側(cè)卵巢下方各連有一條輸卵管，輸卵管連接于下方子宮，兩側(cè)子宮結(jié)合形成“V”字形，經(jīng)陰道開口于體外。6、家兔的抓取和固定 自籠內(nèi)取出時，用手抓住家兔頸部被毛與皮膚，另一手托住其臀部，將其中心承托在掌上。切忌強提兔耳或某一肢體。用兔盒將家兔的頭部及四肢固定，使其頭部無法向后縮即為固定成功。 7、家兔的性別鑒定 家兔的性別鑒定類似于豚鼠的性別鑒定。將家兔抓取后使其腹面朝上，用手按壓家兔的會陰部，觀察是否有陰莖出現(xiàn)即可判斷雌雄。雄性家兔可觀察到陰莖，雌性家兔可觀察到會陰部。 8、家兔耳緣靜脈采血 用兔盒固定家兔后，先拔去耳緣靜脈注射部位的被毛，用手

23、指輕彈兔耳使靜脈充盈?；蛘哂镁凭薏潦枚夓o脈注射區(qū)使靜脈充盈后，左手食指與中指夾住靜脈的近心端，阻止靜脈回流，用拇指和無名指固定耳緣靜脈遠心端，右手持5ml注射器從遠端刺入，然后移動左手拇指固定針頭，回抽注射器，若有血液進去注射器即為采血成功，繼續(xù)緩慢采血。一次最多可采5ml。9、家兔灌胃給藥 兔灌胃系用導(dǎo)尿管配以一根粗的棉繩，用棉繩固定家兔開口，將導(dǎo)尿管從家兔牙齒外側(cè)緩慢沿上顎插入食道。插入約導(dǎo)尿管的2/3的位置。回抽針管，觀察到無氣體進去針管后注射藥物。灌胃完畢后先取出導(dǎo)尿管后松開棉繩。10、家兔麻醉 以耳緣靜脈采血的方式在耳緣靜脈處進針，回抽針管后若有回血，則可將適量麻醉劑（按10%水

24、合氯醛4ml/kg的用量）。將適量的麻醉劑注射入家兔體內(nèi)，等待幾分鐘后觀察家兔反應(yīng)。若家兔全身癱軟幾乎不動為麻醉成功。11、家兔處死（空氣栓塞法） 以耳緣靜脈采血的方式在耳緣靜脈處進針，向耳緣靜脈中注入一定量的空氣（5ml即可），使之發(fā)生空氣栓塞而致死。觀察到注入空氣的家兔掙扎了兩下后瞳孔擴散。12、家兔解剖將通過空氣栓塞法處死后的家兔放至在兔板上，仰臥位放置，充分暴露頸部、胸部和腹部。用水將家兔的胸腹部的被毛充分潤濕。用手術(shù)剪沿腹中線將家兔腹部和胸部的皮膚剪開，然后用手術(shù)剪將腹腔和胸腔打開，仔細觀察家兔腹腔和胸腔的各內(nèi)臟器官。內(nèi)部臟器觀察：1）肺：共七葉，右肺四葉，左肺三葉。胸腔中間有縱膈將

25、胸腔分為左右兩部，互不相通。2）心臟：呈圓錐狀，位于近胸骨端，由左心房、左心室、右心房、右心室組成。3）肝：緊鄰隔下，呈暗紅色，可見一墨綠色的膽囊附著于肝下。 4）胃：分兩部，賁門部和幽門部。5）腸：分小腸和大腸，其總長度為體長的10倍。盲腸非常大，長約0.5米。在回腸和盲腸相接處膨大呈一個后壁，呈圓形，為圓小囊。6）脾：脾斜臥在胃的左側(cè)，呈深紅色，長條扁平狀。7）胰：一端緊貼脾臟，一端鄰近十二指腸，為分布零散而不規(guī)則狀且呈粉紅色，與脂肪相似但顏色不同。8）腎：為扁豆大小，右腎比左腎位置稍高 ，腎臟前方有腎上腺（米粒大?。?，每腎內(nèi)側(cè)各有一根輸尿管，開口于膀胱背側(cè)。9）雄兔睪丸下降到陰囊，兩側(cè)陰

26、囊為乳白色。實驗四：孕鼠剖腹取胎、近交系小鼠皮膚移植及小鼠卵巢和睪丸切除手術(shù)技巧操作一、實驗?zāi)康?、小鼠的睪丸及卵巢切除是目前實驗動物手術(shù)操作中最基礎(chǔ)的技巧，要求初步掌握手術(shù)操作的基本流程、術(shù)中的細節(jié)及了解術(shù)后護理；2、掌握尾尾直皮的操作方法；3、通過實際操作，了解通過剖腹取胎術(shù)得到幼鼠的基本原理、操作和用途；二、實驗材料1、實驗動物：試驗用孕鼠、清潔級小鼠（雌雄各一只）；2、實驗器械與試劑：鼠籠、鼠板、5ml注射器、眼科剪、彎頭鑷、10%水合氯醛、手術(shù)剪、干棉球、酒精棉球；三、實驗內(nèi)容1、小鼠的睪丸切除手術(shù) 小鼠常規(guī)麻醉，采用俯仰臥位，置于固定臺上。尿道口上5mm處脫毛，常規(guī)消毒。在腹白線左

27、或右2-3mm處平行于腹白線開一個5-8mm手術(shù)口直達腹腔。進入腹腔可見包裹在睪丸周圍的脂肪組織。將脂肪組織拉至腹腔，分離附睪并結(jié)扎相關(guān)血管，即可切除睪丸。將腹膜與肌層一起縫合，縫合皮膚。2、小鼠卵巢切除手術(shù) 小鼠卵巢切除術(shù)多采用背部切口。小鼠常規(guī)麻醉，采用俯臥或側(cè)臥位，置于固定臺上，以肋下0.5cm，脊柱處1cm為中心剪除或拔出長毛，常規(guī)消毒，切口約0.5cm，切開皮膚，一邊擴張一邊鈍性分離，用眼科鑷夾住創(chuàng)口看到的肌層，在離脊柱肋下剪開腰肌，長約0.5切口，立即可見兩側(cè)包繞卵巢的脂肪組織及緊密相連的子宮角，用彎鑷帶環(huán)鑷輕輕夾住脂肪組織將其拉出創(chuàng)口，在子宮角上部及下部的輸卵管的部位做兩個結(jié)扎，

28、結(jié)扎后用環(huán)形鑷或眼科剪切斷子宮角，將卵巢摘除，檢查有無出血，把脂肪組織推回腹腔內(nèi)，將腹膜與肌層一起縫合，縫合皮膚。背部切口創(chuàng)傷小，直觀，視野清楚，易操作，不需牽拉其它臟器，手術(shù)時間短。3、近交系小鼠皮膚移植實驗 尾尾植皮法是在一組近郊系內(nèi)，將小鼠尾部的皮膚輪換移植到另外一個小鼠的尾部。此方法一個可以同時做幾只，省時間。而且有自體移植，可以用于鑒別植皮的脫落是排斥反應(yīng)，還是手術(shù)失敗造成的。麻醉動物，用75%的酒精棉球，消毒動物的尾部以及手術(shù)者的雙手，隨后用左手食指與中指夾住小鼠尾根，拇指與無名指夾緊鼠尾的尖部。右手用手術(shù)刀在尾皮上割一塊長約0.75cm長的尾皮，刀口深度應(yīng)露出白色的健，但又不割壞

29、血管。這樣即提供了一塊供體植皮，又得到一處受體植床。取下皮片后，將皮片手術(shù)刀從右手方向轉(zhuǎn)到左手方向，這樣皮片也就旋轉(zhuǎn)了180度，使皮片上的毛與尾部的毛長向相反，然后用眼科鑷將植皮鑲嵌到異體的尾部植床上，用濾紙輕輕地來回按幾下皮片，使其盡可能緊貼在上面，本次實驗由于時間限制，不進行結(jié)果觀察。4、孕鼠剖腹取胎實驗1）以頸椎脫臼法將孕鼠處死后，取仰臥位固定小鼠于動物固定板上，暴露腹部手術(shù)部位進行酒精消毒；（注意處死動作要快，勿用力按壓腹部，防止胎兒受損。）2）用剪刀沿腹中線剪開腹部皮膚、腹肌和腹膜，暴露子宮，用止血鉗分別夾住子宮頸部和兩側(cè)卵巢韌帶，剪斷后取出子宮。取下子宮用鹽水沖洗下，剪開子宮盡快將

30、胎兒連胎盤一同取出。3）用棉球擦拭幼鼠，輕輕按摩腹腔和腹部促使新生鼠開始呼吸，待新生鼠呼吸，血循環(huán)正常后，以止血鉗扎斷臍帶。4）本組孕鼠經(jīng)剖腹產(chǎn)手術(shù)得到18只小鼠。新生小鼠體表無毛，皮膚紅潤，眼閉，胸前有一個深紅色胎盤附于其上，體表略濕。實驗五 大鼠陰道涂片、肺水腫模型及其它試教實驗一、實驗?zāi)康?通過實際操作，掌握大鼠陰道涂片的制作方法及性周期的觀察；強化實驗動物疾病模型的基本概念，掌握誘發(fā)性急性肺水腫動物模型的建立方法，觀察肺臟的病理變化；通過試教初步了解裸鼠腫瘤接種的流程及操作技巧，金黃地鼠的頰囊及比格犬的年齡判斷、前肢背橈外側(cè)靜脈和后肢側(cè)皮下小靜脈的采血操作。二、實驗材料1. 實驗動物：

31、SD大鼠，裸鼠，金黃地鼠，比格犬；2. 實驗材料：毛細滴管、載玻片、酒精燈、生理鹽水、吉姆薩染色液、846合劑、手術(shù)剪、手術(shù)鑷、2ml注射器、5ml注射器、干棉球、酒精棉球、繃帶、橡皮綁帶、顯微鏡。三、實驗內(nèi)容1. 大鼠陰道涂片及性周期觀察2. 大鼠急性肺水腫模型的建立3. 裸鼠腫瘤接種的試教實驗4. 比格犬年齡判斷5. 比格犬前肢背橈外側(cè)靜脈、后肢側(cè)皮下小靜脈采血6. 金黃地鼠頰囊的觀察四、實驗方法與步驟1. 大鼠陰道涂片及性周期觀察哺乳類動物在性成熟后出現(xiàn)動情周期變化，其中嚙齒類動物在動情周期不同階段引導(dǎo)粘膜發(fā)生比較典型的變化。因此可將陰道分泌物涂片染色，根據(jù)圖片的細胞學(xué)改變來鑒別性周期的不同階段。左手抓住大鼠，食指和中指卡緊大鼠頸部，無名指與小拇指握住胸部，小指壓住腹部，右手拉住尾巴稍用力向后拉，以充分暴露雌鼠陰道。用滴管吸生理鹽水1-2滴，然后插入大鼠陰道深部反復(fù)沖洗，吸出洗液滴一滴涂于載玻片上，用酒精將片子烘干，吸陰道分泌物時，要反復(fù)沖洗4-5次，確保吸到陰道分泌物。用吉姆薩染液染色20min，水洗，在顯微鏡下觀察。顯微鏡下看到大量角化細胞，沒有找到明顯有核細胞和分葉細胞，可能是烘干片子時細胞結(jié)構(gòu)被破壞。實驗中觀察到聚集的有核細胞，無核細胞均有，且細胞量少，估計該大