中藥化學(xué)-f甾體類化合物-5中藥化學(xué)甾

1、 第九章第九章 甾體化合物甾體化合物9.1 概述概述: 分類、甾體母核顏色反應(yīng)分類、甾體母核顏色反應(yīng)9.2 甾體皂苷甾體皂苷: 結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)、提結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)、提 取、檢識、結(jié)構(gòu)研究取、檢識、結(jié)構(gòu)研究9.3 強(qiáng)心苷強(qiáng)心苷: 結(jié)構(gòu)、重要理化性質(zhì)、結(jié)構(gòu)、重要理化性質(zhì)、 提取、檢識、結(jié)構(gòu)研究提取、檢識、結(jié)構(gòu)研究9.4 膽汁酸：重要性質(zhì)、提取膽汁酸：重要性質(zhì)、提取9.5 實例：實例：毛花洋地黃、蟾酥、牛黃毛花洋地黃、蟾酥、牛黃 麥冬、薤白、黃花夾竹桃、熊膽麥冬、薤白、黃花夾竹桃、熊膽9.1 概述概述 一、一、 定義：定義：甾體母核甾體母核: 環(huán)戊烷并多氫菲環(huán)戊烷并多氫菲312456789101112

2、13141819R151617ABCD二、分類二、分類 類別類別 C17 - R甾體皂苷甾體皂苷 含氧螺雜環(huán)含氧螺雜環(huán)強(qiáng)心苷強(qiáng)心苷 不飽和內(nèi)酯環(huán)不飽和內(nèi)酯環(huán)蟾毒配基蟾毒配基 六元不飽和內(nèi)酯六元不飽和內(nèi)酯C21甾醇甾醇 乙基衍生物乙基衍生物膽汁酸類膽汁酸類 戊酸戊酸甾醇甾醇 810個碳脂肪烴個碳脂肪烴昆蟲變態(tài)激素昆蟲變態(tài)激素 810個碳脂肪烴個碳脂肪烴天然甾體結(jié)構(gòu)特點天然甾體結(jié)構(gòu)特點: B/C反式反式C/D多為反式多為反式A/B順、反：順式順、反：順式正系正系 反式反式別系別系C3、 C10、C13、 C17多為多為-構(gòu)型構(gòu)型C3OH三、甾核的顏色反應(yīng)三、甾核的顏色反應(yīng) 機(jī)理：無水條件下與酸脫水

3、、機(jī)理：無水條件下與酸脫水、 縮合、氧化縮合、氧化1. Liebermann-Burchard反應(yīng)反應(yīng) 試劑：醋酐試劑：醋酐-濃硫酸（濃硫酸（20：1） 現(xiàn)象：紅現(xiàn)象：紅 紫紫 藍(lán)藍(lán) 綠綠 污綠，污綠， 最后褪色最后褪色Salkowski反應(yīng)反應(yīng) 試劑：硫酸試劑：硫酸/氯仿氯仿 現(xiàn)象：氯仿層現(xiàn)象：氯仿層血紅色或青色血紅色或青色 硫酸層硫酸層綠色熒光。綠色熒光。3. Rosen-Heimer反應(yīng)（紙片反應(yīng)）反應(yīng)（紙片反應(yīng)）: 試劑：試劑：25%三氯醋酸乙醇溶液三氯醋酸乙醇溶液 條件：加熱至條件：加熱至60 現(xiàn)象：顯紅色至紫色現(xiàn)象：顯紅色至紫色4、Tschugaer反應(yīng)：反應(yīng)： 試劑：氯化鋅、乙酰

4、氯試劑：氯化鋅、乙酰氯/冰醋酸冰醋酸 現(xiàn)象：紫紅現(xiàn)象：紫紅 藍(lán)藍(lán) 綠綠 5、Kahlenberg反應(yīng)（紙片反應(yīng)）：反應(yīng)（紙片反應(yīng)）： 試劑：試劑：20%五氯化銻氯仿溶液五氯化銻氯仿溶液 條件：加熱至條件：加熱至6070 現(xiàn)象：顯灰藍(lán)、藍(lán)、灰紫等顏色現(xiàn)象：顯灰藍(lán)、藍(lán)、灰紫等顏色 9.2 甾體皂苷甾體皂苷一、概述一、概述（一）定義（一）定義 螺甾烷及其相似生源的甾體化合物螺甾烷及其相似生源的甾體化合物的低聚糖苷，其水溶液經(jīng)強(qiáng)烈振搖后多的低聚糖苷，其水溶液經(jīng)強(qiáng)烈振搖后多產(chǎn)生大量持久性肥皂樣泡沫。產(chǎn)生大量持久性肥皂樣泡沫。（二）分布（二）分布單子葉植物：百合科、薯蕷科、石蒜單子葉植物：百合科、薯蕷科、

5、石蒜 科、龍舌蘭科等科、龍舌蘭科等,麥冬麥冬,薤白薤白,百合百合,玉竹玉竹,知母知母,重樓等重樓等; 海洋生物、動物海洋生物、動物（三）生物活性及應(yīng)用（三）生物活性及應(yīng)用心腦血管病心腦血管病地奧心血康膠囊（黃地奧心血康膠囊（黃 山藥）、心腦舒通（蒺藜）山藥）、心腦舒通（蒺藜）抗癌抗癌重樓皂苷重樓皂苷和和 降血糖、降膽固醇、調(diào)節(jié)免疫等降血糖、降膽固醇、調(diào)節(jié)免疫等甾體皂苷元甾體皂苷元合成甾體避孕藥和激合成甾體避孕藥和激素類藥物素類藥物二、結(jié)構(gòu)與分類二、結(jié)構(gòu)與分類（一）結(jié)構(gòu)特點（一）結(jié)構(gòu)特點1、皂苷元由皂苷元由27個碳組成，共有個碳組成，共有A.B.C.D.E和和F六個環(huán)，六個環(huán)，E和和F以螺縮以螺

6、縮酮的形式連接，形成螺甾烷結(jié)構(gòu)。酮的形式連接，形成螺甾烷結(jié)構(gòu)。A/B：順，反：順，反B/C：反：反C/D：反：反OOABCDEF58910141617181920212223242526272、個手性碳：、個手性碳： 20(S)、22(R)、2525(S)螺甾烷，甲基為直立鍵，螺甾烷，甲基為直立鍵，L型型25(R)異螺甾烷，甲基為平伏鍵，異螺甾烷，甲基為平伏鍵，D型型OOABCDEF589101416171819202122232426螺甾烷醇2527HO2726252423222120191817161410985FEDCBOOAHO異螺甾烷醇3、多有羥基：、多有羥基：3位及其他位及其他 羰

7、基：羰基：12位位 雙鍵：雙鍵：5-6位，位，9-11位，位，25-27位位 不含羧基：中性不含羧基：中性4、組成甾體皂苷的糖：組成甾體皂苷的糖：D-葡萄糖、葡萄糖、 D-半乳糖、半乳糖、 D-木糖、木糖、L-鼠李糖和鼠李糖和L-阿拉伯糖；多與阿拉伯糖；多與3位位羥基成苷，也可在羥基成苷，也可在1位和位和26位成苷。位成苷。（二）分類（二）分類1、螺甾烷醇型：、螺甾烷醇型：25(S) 約莫皂苷元約莫皂苷元OOABCDEFH5891014161718192021222324252627HO27252423222120191817161410985EDCBAOHOO2、異螺甾烷醇型：、異螺甾烷醇型

8、： 25(R) 薯蕷皂苷元薯蕷皂苷元222120191817161410985HHHHEDCBAOOglcHOOglcglcRhaglc246原菝契皂苷3、呋甾烷醇型、呋甾烷醇型4、變形螺甾烷醇型、變形螺甾烷醇型: 少少2 22 72 02 1O g l c 2 6O2 5H OO三、甾體皂苷的理化性質(zhì)三、甾體皂苷的理化性質(zhì)1、性狀：無色或白色無定形粉末；、性狀：無色或白色無定形粉末； 熔點均較高；均有旋光性，多為左旋。熔點均較高；均有旋光性，多為左旋。2、溶解性、溶解性甾體皂苷甾體皂苷易溶于熱水、稀醇，難溶于易溶于熱水、稀醇，難溶于 親脂性有機(jī)溶劑。親脂性有機(jī)溶劑。甾體皂苷元甾體皂苷元易溶于

9、甲醇、乙醇、氯仿等易溶于甲醇、乙醇、氯仿等 有機(jī)溶劑，難溶于水。有機(jī)溶劑，難溶于水。3、溶血性：呋甾烷醇型無溶血性。、溶血性：呋甾烷醇型無溶血性。4、發(fā)泡性、發(fā)泡性5、沉淀反應(yīng)：膽甾醇、堿式醋酸鉛等、沉淀反應(yīng)：膽甾醇、堿式醋酸鉛等 甾體皂苷甾體皂苷 + 膽甾醇膽甾醇 分子復(fù)合物沉淀分子復(fù)合物沉淀 乙醚回流乙醚回流 不溶物（皂苷）不溶物（皂苷）6、顏色反應(yīng)、顏色反應(yīng)(1)(1)醋酐醋酐-濃硫酸濃硫酸：三萜皂苷顯紅紫色：三萜皂苷顯紅紫色 甾體皂苷顯藍(lán)綠色甾體皂苷顯藍(lán)綠色 (2)(2)三氯醋酸三氯醋酸：三萜皂苷：三萜皂苷100顯色顯色 甾體皂苷甾體皂苷60顯色顯色(3)(3)鹽酸二甲氨基苯甲醛試劑鹽

10、酸二甲氨基苯甲醛試劑(Ehrlich) (Ehrlich) 呋甾烷醇型雙糖鏈皂苷顯紅色，呋甾烷醇型雙糖鏈皂苷顯紅色，其他類型甾體皂苷不顯色。其他類型甾體皂苷不顯色。(4)(4)茴香醛試劑（茴香醛試劑（AnisaldehydeAnisaldehyde）：黃色）：黃色四、甾體皂苷的提取分離四、甾體皂苷的提取分離1、提取、提取 丙酮、乙醚沉淀丙酮、乙醚沉淀甲醇、稀乙醇提取甲醇、稀乙醇提取 水飽和的正丁醇萃取水飽和的正丁醇萃取 大孔樹脂柱大孔樹脂柱2、分離、分離沉淀法：丙酮或乙醚，膽甾醇，吉拉得試劑沉淀法：丙酮或乙醚，膽甾醇，吉拉得試劑色譜法：硅膠、大孔樹脂、羥丙基葡聚糖凝色譜法：硅膠、大孔樹脂、羥丙

11、基葡聚糖凝 膠、制備膠、制備HPLC五、甾體皂苷的檢識五、甾體皂苷的檢識1、理化檢識、理化檢識 顯色反應(yīng)、泡沫試驗、溶血試驗顯色反應(yīng)、泡沫試驗、溶血試驗2、色譜檢識、色譜檢識 硅膠薄層色譜：硅膠薄層色譜： 氯仿氯仿-甲醇甲醇-水（水（65：35：10，下層），下層） 正丁醇正丁醇-醋酸醋酸-水（水（4：1：5，上層），上層） 顯色：顯色： 25%三氯醋酸；三氯醋酸；10%硫酸；硫酸； 5%磷鉬酸等磷鉬酸等六、結(jié)構(gòu)研究六、結(jié)構(gòu)研究（一）化學(xué)法（一）化學(xué)法同三萜皂苷同三萜皂苷（二）波譜法（二）波譜法1、UVC=C: 205225nm C=O: 285nmC=C-C=C: 235nmC=C-C=O:

12、 240nm甾體皂苷元甾體皂苷元 + 濃硫酸濃硫酸 270275nm 可用于定量?？捎糜诙?。2、IR螺縮酮結(jié)構(gòu)：螺縮酮結(jié)構(gòu)：4個特征吸收帶個特征吸收帶cm-1: 980(A)，920(B)，900(C)，860(D)C25-S構(gòu)型構(gòu)型(螺甾烷醇型螺甾烷醇型): B帶強(qiáng)度帶強(qiáng)度 C帶帶C25-R構(gòu)型構(gòu)型: B帶強(qiáng)度帶強(qiáng)度 C帶帶3 、MSEI-MS: m/z: 139(基峰基峰); 115(中強(qiáng)中強(qiáng)); 126(弱弱) 推測推測F環(huán)取代情況環(huán)取代情況FD-MS: M+Na+, M+Na-162 +, M+Na-146 +, M+2H-162 + M+2Na 2+ 推測分子量推測分子量4、NMR

13、1 H-NMR: 4個個-CH3信號：信號： 18，19-CH3為單峰，為單峰，21，27-CH3為雙峰為雙峰27-CH3 : C25-R (0.7ppm); C25-S (1.1ppm)13 C-NMR: C22螺原子螺原子 螺甾烷醇型：螺甾烷醇型：109.5ppm 呋甾烷醇型：呋甾烷醇型：90.3ppm 變形螺甾烷醇型：變形螺甾烷醇型：120.9ppm5、ORD C11、C12、 C15 =O: (+) cotton C7、C16 =O: (-) cotton 無無C=O: 平坦曲線平坦曲線9.3 強(qiáng)心苷強(qiáng)心苷一、概述一、概述定義定義：對心臟有顯著生理活性的甾體：對心臟有顯著生理活性的甾體

14、 苷類苷類,由強(qiáng)心苷元與糖縮合而成。由強(qiáng)心苷元與糖縮合而成。分布：玄參科、百合科、蘿摩科、十分布：玄參科、百合科、蘿摩科、十 字花科、夾竹桃科、毛茛科、字花科、夾竹桃科、毛茛科、 衛(wèi)矛科、?？频刃l(wèi)矛科、?？频?00多種植物多種植物活性：加強(qiáng)心肌收縮性，減慢竇性頻活性：加強(qiáng)心肌收縮性，減慢竇性頻 率，有一定毒性。率，有一定毒性。二、結(jié)構(gòu)與分類二、結(jié)構(gòu)與分類1、苷元的結(jié)構(gòu)特點、苷元的結(jié)構(gòu)特點（1） 甾核：甾核： A/B 、C/D多順式；多順式；B/C反式反式 （2）取代：）取代： C10-CH3 , -CH2OH, -CHOC13-CH3 C14-OH -構(gòu)型構(gòu)型C17-不飽和內(nèi)酯環(huán)不飽和內(nèi)酯環(huán)3

15、-羥基與糖成苷羥基與糖成苷（3）根據(jù)）根據(jù)C17上內(nèi)酯環(huán)結(jié)構(gòu)分兩類上內(nèi)酯環(huán)結(jié)構(gòu)分兩類 甲型強(qiáng)心苷元甲型強(qiáng)心苷元（強(qiáng)心甾烯類）：（強(qiáng)心甾烯類）： C17上為五元不飽和內(nèi)酯環(huán)，上為五元不飽和內(nèi)酯環(huán)， 多多OOOHHHHHO20212223 乙型強(qiáng)心苷元乙型強(qiáng)心苷元（海蔥甾二烯類、（海蔥甾二烯類、蟾蜍甾二烯類）：蟾蜍甾二烯類）： C17上為六元不飽和內(nèi)酯，上為六元不飽和內(nèi)酯， 少少OOHHOHHHO20212223242、糖的結(jié)構(gòu)特點、糖的結(jié)構(gòu)特點（1）2-羥基糖（羥基糖（-羥基糖）：羥基糖）： D-glc; L-rha; L-夫糖；夫糖；D-雞納糖；雞納糖；D-洋地黃糖；洋地黃糖； L-黃花夾竹桃

16、糖黃花夾竹桃糖（2）2-去氧糖（去氧糖（-去氧糖）：去氧糖）： L-夾竹桃糖；夾竹桃糖； D-洋地黃毒糖；洋地黃毒糖； D-加拿大麻糖；加拿大麻糖； D-沙門糖沙門糖OHOH(H)3CHOHOH3CHOH3OCHOHOH(H)OHOH(H)3CH3OCHHO3CHOH(H)HOOOOOD-洋地黃洋地黃毒糖毒糖D-加拿大加拿大麻糖麻糖D-洋地黃糖洋地黃糖L-夫糖夫糖3、苷元與糖的連接方式、苷元與糖的連接方式型：型： 苷元苷元-（2，6-去氧糖）去氧糖）x -（D-葡萄糖）葡萄糖）y型型： 苷元苷元-（6-去氧糖）去氧糖）x -（D-葡萄糖）葡萄糖）y型型： 苷元苷元-（D-葡萄糖）葡萄糖）x 多

17、為低聚糖苷多為低聚糖苷 型、型、型多，型多， 型少型少OOOH33CHCH3CHHOHOHOOH2CHHOHOOOOOOOHOOO紫花洋地黃苷A三、結(jié)構(gòu)與活性的關(guān)系三、結(jié)構(gòu)與活性的關(guān)系1、 C/D環(huán)順式稠合，環(huán)順式稠合， 14- 羥基羥基2、 A/B順式稠合的甲型，順式稠合的甲型，3-羥基羥基3、 C17-不飽和內(nèi)酯環(huán)，不飽和內(nèi)酯環(huán)，構(gòu)型構(gòu)型4、10位甲基轉(zhuǎn)化為醛基或羥甲基后位甲基轉(zhuǎn)化為醛基或羥甲基后活性增強(qiáng)，轉(zhuǎn)化為羧基或無甲基后活性增強(qiáng)，轉(zhuǎn)化為羧基或無甲基后則活性減弱。則活性減弱。5、5 ,11 ,12,12-OH，4（5）： 活性活性增強(qiáng)；增強(qiáng)；1,6,16 -OH，16（17） ： 活活

18、性降低。性降低。6、糖的數(shù)目、種類與毒性的關(guān)系、糖的數(shù)目、種類與毒性的關(guān)系（1）甲型：）甲型： 三糖苷三糖苷二糖苷二糖苷苷元苷元 單糖苷：單糖苷： 葡萄糖苷葡萄糖苷甲氧基糖苷甲氧基糖苷6-去氧糖苷去氧糖苷2,6-二去氧糖苷二去氧糖苷（2）乙型：）乙型： 苷元苷元單糖苷單糖苷二糖苷二糖苷 乙型乙型甲型甲型四、理化性質(zhì)四、理化性質(zhì)1、性狀：、性狀： 無定形粉末或結(jié)晶。味苦（無定形粉末或結(jié)晶。味苦（ C17-），），對粘膜有刺激性，有旋光性。對粘膜有刺激性，有旋光性。2、溶解性：、溶解性： 可溶于水、醇及丙酮等極性溶劑，可溶于水、醇及丙酮等極性溶劑，不溶于乙醚等親脂性有機(jī)溶劑。不溶于乙醚等親脂性有機(jī)

19、溶劑。 與分子中糖的數(shù)目、種類及苷元上與分子中糖的數(shù)目、種類及苷元上羥基的數(shù)目、位置有關(guān)。羥基的數(shù)目、位置有關(guān)。3、水解反應(yīng)、水解反應(yīng) （1）溫和酸水解溫和酸水解 試劑：試劑：0.020.05mol/L的鹽酸或硫酸的鹽酸或硫酸條件：在含水醇中短時間加熱回流條件：在含水醇中短時間加熱回流結(jié)果：結(jié)果：型強(qiáng)心苷水解成苷元、型強(qiáng)心苷水解成苷元、2-去去 氧糖和氧糖和/或低聚糖?；虻途厶恰?型、型、型不水解。型不水解。 OOOH33CHCH3CHHOHOHOOH2CHHOHOOOOOOOHOOO紫花洋地黃苷A（2）強(qiáng)烈酸水解）強(qiáng)烈酸水解試劑：試劑：3%5%無機(jī)酸無機(jī)酸條件：長時間加熱或加壓條件：長時間加

20、熱或加壓結(jié)果：生成單糖和脫水苷元結(jié)果：生成單糖和脫水苷元應(yīng)用：應(yīng)用： 型、型、型強(qiáng)心苷型強(qiáng)心苷（3）氯化氫）氯化氫-丙酮法丙酮法試劑：試劑：1%氯化氫的丙酮溶液氯化氫的丙酮溶液條件：條件：20放置二周放置二周結(jié)果：苷元和糖的衍生物結(jié)果：苷元和糖的衍生物應(yīng)用：應(yīng)用： 多數(shù)多數(shù)型強(qiáng)心苷型強(qiáng)心苷（4）酶水解）酶水解 無水解無水解-去氧糖的酶去氧糖的酶 型、型、型強(qiáng)心苷型強(qiáng)心苷次級苷和葡萄糖次級苷和葡萄糖 型強(qiáng)心苷型強(qiáng)心苷苷元和葡萄糖苷元和葡萄糖（5）堿水解）堿水解 1）?；乃猓；乃?碳酸氫鈉（鉀）碳酸氫鈉（鉀）2-去氧糖上的酰基去氧糖上的?；鶜溲趸}（鋇）氫氧化鈣（鋇）羥基糖或苷元上的羥基

21、糖或苷元上的 ?；；?2）內(nèi)酯環(huán)的水解）內(nèi)酯環(huán)的水解試劑：氫氧化鈉（鉀）試劑：氫氧化鈉（鉀） 溶劑：水溶液或醇溶液溶劑：水溶液或醇溶液結(jié)果：結(jié)果： 堿性水溶液中內(nèi)酯開環(huán)，酸化后閉環(huán)堿性水溶液中內(nèi)酯開環(huán)，酸化后閉環(huán) 堿性醇溶液中內(nèi)酯環(huán)開環(huán)后生成異構(gòu)堿性醇溶液中內(nèi)酯環(huán)開環(huán)后生成異構(gòu)化苷化苷 甲型強(qiáng)心苷內(nèi)酯環(huán)雙鍵轉(zhuǎn)位，形甲型強(qiáng)心苷內(nèi)酯環(huán)雙鍵轉(zhuǎn)位，形成成C22活性亞甲基?；钚詠喖谆?。4、顏色反應(yīng)、顏色反應(yīng)（1）甾體母核的顯色反應(yīng)）甾體母核的顯色反應(yīng)（2）五元不飽和內(nèi)酯環(huán)的反應(yīng)）五元不飽和內(nèi)酯環(huán)的反應(yīng) 堿性醇溶液中甲型強(qiáng)心苷堿性醇溶液中甲型強(qiáng)心苷C22活活性亞甲基的反應(yīng)：性亞甲基的反應(yīng)： 1）Lega

22、l反應(yīng)反應(yīng)(亞硝酰鐵氰化鈉反應(yīng)亞硝酰鐵氰化鈉反應(yīng)) 樣品樣品12mg，溶在，溶在23滴吡啶中，滴吡啶中，加加1滴滴3%亞硝酰鐵氰化鈉和亞硝酰鐵氰化鈉和1滴滴2mol/L氫氧化鈉液，顯深紅色并逐漸氫氧化鈉液，顯深紅色并逐漸褪去。褪去。 2）kedde反應(yīng)反應(yīng) 試劑：試劑：3，5-二硝基苯甲酸試劑二硝基苯甲酸試劑 現(xiàn)象：紅色或紫紅色現(xiàn)象：紅色或紫紅色3）Raymond 反應(yīng)反應(yīng) 試劑：間二硝基苯試劑試劑：間二硝基苯試劑 現(xiàn)象：紫紅色現(xiàn)象：紫紅色4）Baljet反應(yīng)反應(yīng) 試劑：堿性苦味酸試劑試劑：堿性苦味酸試劑 現(xiàn)象：橙色或橙紅色（現(xiàn)象：橙色或橙紅色（15min）（3） -去氧糖的反應(yīng)去氧糖的反應(yīng)

23、1）K.K反應(yīng)反應(yīng)操作：樣品操作：樣品1mg溶于溶于5ml冰醋酸中，加冰醋酸中，加1 滴滴20%三氯化鐵水溶液，混勻，三氯化鐵水溶液，混勻， 漫漫加入濃硫酸。漫漫加入濃硫酸?，F(xiàn)象：醋酸層漸顯蘭色，界面的顏色隨現(xiàn)象：醋酸層漸顯蘭色，界面的顏色隨 苷元羥基、雙鍵的位置和數(shù)目不同苷元羥基、雙鍵的位置和數(shù)目不同 而異（紅、綠、黃）。而異（紅、綠、黃）。范圍：游離范圍：游離-去氧糖或此條件下能水解去氧糖或此條件下能水解 出出-去氧糖的強(qiáng)心苷。去氧糖的強(qiáng)心苷。 苷元苷元-（-去氧糖去氧糖)x-(葡萄糖）葡萄糖）y (x1) 苷元苷元-（-去氧糖去氧糖)x2）口口占噸氫醇（占噸氫醇（Xanthydrol）反

24、應(yīng)）反應(yīng) 試劑：試劑：口口占噸氫醇試劑占噸氫醇試劑條件：水浴加熱條件：水浴加熱3分鐘分鐘現(xiàn)象：紅色現(xiàn)象：紅色范圍：分子中有范圍：分子中有-去氧糖即可去氧糖即可3）對）對-二甲氨基苯甲醛反應(yīng)（紙片）二甲氨基苯甲醛反應(yīng)（紙片）試劑：對試劑：對-二甲氨基苯甲醛二甲氨基苯甲醛條件：條件：90加熱加熱30秒秒現(xiàn)象：灰紅色斑點現(xiàn)象：灰紅色斑點范圍：分子中有范圍：分子中有-去氧糖即可去氧糖即可4）過碘酸）過碘酸-對硝基苯胺反應(yīng)（紙片對硝基苯胺反應(yīng)（紙片反應(yīng)）：反應(yīng)）： 噴過碘酸鈉水溶液，放置噴過碘酸鈉水溶液，放置10分鐘，噴對硝基苯胺試液，灰分鐘，噴對硝基苯胺試液，灰黃背景下出現(xiàn)深黃斑點（紫外燈黃背景下出現(xiàn)

25、深黃斑點（紫外燈下為棕色背景下黃色熒光斑點），下為棕色背景下黃色熒光斑點），噴噴5%氫氧化鈉甲醇液，斑點變氫氧化鈉甲醇液，斑點變?yōu)榫G色。為綠色。五、提取分離五、提取分離1、提取、提取 一般用一般用7080%乙醇提取乙醇提取，濃，濃縮，初步純化：縮，初步純化： （1）石油醚脫脂后再提取。）石油醚脫脂后再提取。 （2）醇提液濃縮，保留適量醇，）醇提液濃縮，保留適量醇，放置使葉綠素成膠狀析出。放置使葉綠素成膠狀析出。 （3）吸附法：活性炭、氧化鋁、）吸附法：活性炭、氧化鋁、 聚酰胺聚酰胺 次生苷的提?。捍紊盏奶崛。?先發(fā)酵酶解，然后用醋酸乙酯或乙先發(fā)酵酶解，然后用醋酸乙酯或乙醇提取，也可先用乙醇提

26、取，再酶解。醇提取，也可先用乙醇提取，再酶解。3、分離、分離系統(tǒng)溶劑萃取法粗分系統(tǒng)溶劑萃取法粗分色譜法：硅膠、中性氧化鋁色譜法：硅膠、中性氧化鋁 單糖苷、次生苷、苷元單糖苷、次生苷、苷元有機(jī)溶劑有機(jī)溶劑 洗脫洗脫 極性大的強(qiáng)心苷極性大的強(qiáng)心苷含水系統(tǒng)洗脫含水系統(tǒng)洗脫六、檢識六、檢識1、理化檢識、理化檢識醋酐醋酐-濃硫酸反應(yīng)濃硫酸反應(yīng)甾核甾核口口占噸氫醇反應(yīng)占噸氫醇反應(yīng)-去氧糖去氧糖kedde反應(yīng)反應(yīng)五元不飽和內(nèi)酯環(huán)（甲型）五元不飽和內(nèi)酯環(huán)（甲型）2、色譜檢識、色譜檢識硅膠板硅膠板: 乙酸乙酯乙酸乙酯-甲醇甲醇-水水; 水飽和的丁酮水飽和的丁酮硅藻土或纖維素硅藻土或纖維素: 甲酰胺或乙二醇作固定

27、相甲酰胺或乙二醇作固定相 氯仿氯仿-丙酮丙酮; 氯仿氯仿-正丁醇正丁醇顯色劑顯色劑:（1）2% 3，5-二硝基苯甲酸乙醇液與二硝基苯甲酸乙醇液與2mol/L氫氧化鉀等體積混合噴霧氫氧化鉀等體積混合噴霧紅色紅色（2）1%苦味酸水溶液與苦味酸水溶液與10%氫氧化氫氧化鈉水溶液（鈉水溶液（95：5）混合噴霧，）混合噴霧，90-100加熱加熱4-5min4-5min橙紅色橙紅色（3 3）2%SbCl2%SbCl3 3/CHCl/CHCl3 3溶液溶液噴霧，噴霧，100加熱加熱5min5min不同強(qiáng)心苷顯不同顏色不同強(qiáng)心苷顯不同顏色七、結(jié)構(gòu)研究七、結(jié)構(gòu)研究1、UV光譜特征光譜特征甲型：甲型：217220

28、nm（log4.204.24)乙型：乙型：295300nm（ log3.93） 甲型如果增加甲型如果增加16（17）則紅移至則紅移至270nm；增加增加14（15） 、16（17）則則紅移至紅移至330nm。2、IR 在在18001700cm-1有有2個羰基峰，甲個羰基峰，甲型在較高波數(shù)區(qū)（較高波數(shù)的峰隨溶型在較高波數(shù)區(qū)（較高波數(shù)的峰隨溶劑極性增大而減弱或消失），乙型在劑極性增大而減弱或消失），乙型在較低波數(shù)區(qū)。較低波數(shù)區(qū)。3、1H-NMR甲型：甲型：21-H(2H, br.S / t /dd): 4.55ppm22-H(1H, br.S): 5.66ppmO OO O2 20 02 22 2

29、2 21 1乙型：乙型： 21-H(1H, S ): 7.2ppm左右左右 22-H(1H, d ): 7.8ppm左右左右 23-H(1H, d ): 6.3ppm左右左右18, 19-CH3: 1.0 ppm左右左右(18位在較低場位在較低場)3-H(1H, m): 3.9ppm左右左右糖糖5-CH3(3H, d/m): 1.01.5 ppm左右左右糖糖-OCH3(3H, S): 3.5 ppm左右左右O OO O2 20 02 21 12 22 22 23 34、13C-NMR伯碳伯碳 1224 ppm仲碳仲碳 2041 ppm叔碳叔碳 3557 ppm季碳季碳 2743 ppm醇碳醇碳

30、 6591 ppm烯碳烯碳 119172 ppm羰基碳羰基碳 177220 ppmMSFD-MS, FAB-MS: 推測分子量和糖的連接順序。推測分子量和糖的連接順序。EI-MS: M-H2O+; M-162 +;M-146 +;M-130 +9.4 膽汁酸類膽汁酸類一、結(jié)構(gòu)特征及分布一、結(jié)構(gòu)特征及分布甾核：甾核：A/B順反順反; B/C反反; C/D反反取代：取代：3，6，7，12-羥基或羰基；羥基或羰基； C17-戊酸常與甘氨酸或?；撬嵛焖岢Ｅc甘氨酸或牛磺酸 結(jié)合，以鈉鹽形式存在。結(jié)合，以鈉鹽形式存在。不同膽汁酸區(qū)別：羥基數(shù)目、位置、不同膽汁酸區(qū)別：羥基數(shù)目、位置、 構(gòu)型不同構(gòu)型不同分布：

31、動物的膽汁、膽結(jié)石分布：動物的膽汁、膽結(jié)石H HH HO OHHHOHOHCONHCH2CH2SO3H牛 磺 膽 酸712去氧膽酸：去氧膽酸：3，12-OH12-OH-豬去氧膽酸：豬去氧膽酸：33，6-OH6-OH鵝去氧膽酸：鵝去氧膽酸： 3 3，7-OH7-OH熊去氧膽酸：熊去氧膽酸： 3 3，7-OH 7-OH 二、理化性質(zhì)二、理化性質(zhì)1、酸性：難溶于水，能溶于堿、酸性：難溶于水，能溶于堿水，易溶于有機(jī)溶劑。水，易溶于有機(jī)溶劑。2、酯化反應(yīng)：、酯化反應(yīng)： 羧基酯化后成為結(jié)晶，在酸水羧基酯化后成為結(jié)晶，在酸水中回流數(shù)小時，又可得到游中回流數(shù)小時，又可得到游離膽汁酸。離膽汁酸。3、羥基和羰基的

32、反應(yīng)、羥基和羰基的反應(yīng)羥基乙?；Y(jié)晶，水解，羥基。羥基乙?；?，結(jié)晶，水解，羥基。羥基氧化為羰基，還原除去羰基，羥基氧化為羰基，還原除去羰基，得到去氧膽汁酸。得到去氧膽汁酸。4、顏色反應(yīng)、顏色反應(yīng)（1）甾核反應(yīng)）甾核反應(yīng)（2）Pettenkofer反應(yīng)：反應(yīng)：試劑：試劑：10%蔗糖，濃硫酸蔗糖，濃硫酸現(xiàn)象：界面出現(xiàn)紫色環(huán)現(xiàn)象：界面出現(xiàn)紫色環(huán)（3）Gregory Pascoe反應(yīng)反應(yīng)試劑：試劑：45%硫酸，硫酸，0.3%糠醛糠醛條件：條件：65 30min現(xiàn)象：蘭色現(xiàn)象：蘭色用途：檢識、定量用途：檢識、定量（4）Hammarsten反應(yīng)反應(yīng)試劑：試劑：20%鉻酸鉻酸現(xiàn)象：紫色現(xiàn)象：紫色三、檢識三

33、、檢識1、理化檢識、理化檢識2、色譜檢識、色譜檢識硅膠板：硅膠板：游離膽汁酸：游離膽汁酸： 異辛烷異辛烷-乙酸乙酯乙酸乙酯-冰醋酸冰醋酸(17:7:5)結(jié)合膽汁酸：結(jié)合膽汁酸： 異戊醇異戊醇-冰醋酸冰醋酸-水水(18:5:3)顯色：顯色：10%磷鉬酸，磷鉬酸，30%硫酸，碘硫酸，碘四、提取分離四、提取分離 動物膽汁動物膽汁 10%NaOH皂化，過濾皂化，過濾 濾液濾液 30%H2SO4調(diào)調(diào)PH23 有機(jī)溶劑萃取有機(jī)溶劑萃取 總膽汁酸總膽汁酸9.5 實例實例一、毛花洋地黃一、毛花洋地黃來源來源 玄參科毛花洋地黃玄參科毛花洋地黃Digitalis lanata成分成分 強(qiáng)心苷強(qiáng)心苷原生苷：毛花洋地

34、黃苷原生苷：毛花洋地黃苷甲甲, 乙乙, 丙丙, 丁丁, 戊等戊等次生苷：洋地黃毒苷、羥基次生苷：洋地黃毒苷、羥基、異羥基、異羥基 （地高辛（地高辛digoxin）、雙羥基）、雙羥基（一）結(jié)構(gòu)特點（一）結(jié)構(gòu)特點: 甲型甲型; 型型洋地黃毒苷元洋地黃毒苷元-(洋地黃毒糖洋地黃毒糖)2-3-乙酰洋地乙酰洋地黃毒糖黃毒糖-葡萄糖葡萄糖O OO OO OH HR R1 1R R2 2O OO OC CH H3 3O OH HO OO OC CH H3 3O OH HO OO OC CH H3 3O OO OC CO OC CH H3 3O OC CH H2 2O OH HO OH HO OH HOH洋

35、地 黃 毒 苷 元 H H R1 R2羥 基 洋 地 黃 毒 苷 元 H OH異 羥 基 洋 地 黃 毒 苷 元 OH H 雙 羥 基 洋 地 黃 毒 苷 元 OH OH 吉 它 洛 苷 元 H OCHO（二）提取分離及應(yīng)用（二）提取分離及應(yīng)用應(yīng)用：制備應(yīng)用：制備西地藍(lán)西地藍(lán)(cediland-D) 去乙酰毛花洋地黃苷丙去乙酰毛花洋地黃苷丙提取分離：毛花洋地黃葉粗粉提取分離：毛花洋地黃葉粗粉 70%EtOH, CHCl3 總強(qiáng)心苷總強(qiáng)心苷 CHCl3-MeOH-H2O 毛花洋地黃苷丙毛花洋地黃苷丙 Ca(OH)2水解去乙酰基水解去乙?；?西地藍(lán)西地藍(lán)二、蟾酥二、蟾酥來源來源 蟾蜍科中華大蟾蜍蟾

36、蜍科中華大蟾蜍Bufo bufo gargarizans或黑眶蟾蜍或黑眶蟾蜍Bufo bufo melanostictus的耳下腺及皮膚腺分的耳下腺及皮膚腺分泌的白色漿液，經(jīng)加工干燥而成。泌的白色漿液，經(jīng)加工干燥而成。功效功效 解毒、止痛、開竅醒神解毒、止痛、開竅醒神成分成分 蟾蜍甾二烯類蟾蜍甾二烯類 強(qiáng)心甾烯類強(qiáng)心甾烯類 蟾毒色胺類（吲哚類生物堿）蟾毒色胺類（吲哚類生物堿） （一）主要成分及結(jié)構(gòu)（一）主要成分及結(jié)構(gòu)1、蟾蜍甾二烯類、蟾蜍甾二烯類游離：蟾毒配基類游離：蟾毒配基類乙型強(qiáng)心苷元乙型強(qiáng)心苷元 蟾毒靈、華蟾毒精、蟾毒它靈、蟾毒靈、華蟾毒精、蟾毒它靈、 脂蟾毒配基、日蟾毒它靈等脂蟾毒配基、日蟾毒它靈等結(jié)合：結(jié)合： 脂肪酸脂肪酸 3-OH與與 脂肪酸氨基酸脂肪酸氨基酸 成酯成酯 硫酸硫酸O OO OO OH HO OC CO O