實驗動物基本知識及基本實驗操作 實驗方法

1、精選課件1實驗動物基本知識及 基本操作、實驗方法 熟練的技術(shù)是實驗成功的基礎(chǔ)熟練的技術(shù)是實驗成功的基礎(chǔ)寧波天一職業(yè)技術(shù)學院寧波天一職業(yè)技術(shù)學院機能學實驗教研組機能學實驗教研組 實驗動物是生命科學研究最重要的和不可替代的實驗材料。實驗動物和動物實驗是研究包括人類在內(nèi)的生命活動及其疾病防治規(guī)律的基本手段。一、一、 實驗動物（實驗動物（experimental animal）婚墊雄蟾（一）實驗動物的種類。（一）實驗動物的種類。蟾蜍（Toad） 蟾蜍屬兩棲動物，其一些基本生命活動與哺乳動物近似，其離體組織和器官所需的生理環(huán)境比較簡單 (無須供氧和恒溫)。 蟾蜍常用于神經(jīng)生理、肌肉生理、心臟生理，微循環(huán)

2、、水腫等實驗。雄蟾雌蟾（一）實驗動物的種類。（一）實驗動物的種類。小鼠（Mouse )小鼠被廣泛的用于生物學、醫(yī)學、獸醫(yī)學、生理學、遺傳學、藥理、毒理、腫瘤、放射性、食品、生物制品等的科研、生產(chǎn)和教學。（一）實驗動物的種類。（一）實驗動物的種類。大鼠（Rat )大鼠應(yīng)用于生理學、藥理學、免疫學，內(nèi)分泌學、神經(jīng)生理、營養(yǎng)學、傳染病、腫瘤和肝外科等的研究。（一）實驗動物的種類。（一）實驗動物的種類。豚鼠（Guinea pig )常用于免疫學、微生物學、傳染病學、聽覺生理、實驗性壞血癥等研究。 （一）實驗動物的種類。（一）實驗動物的種類。家兔(Rabbit )常用于免疫學、腫瘤、實驗生理學、生殖生理

3、、遺傳性疾病等的方面的研究，制造生物制品。 （一）實驗動物的種類。（一）實驗動物的種類。貓（Cat） 貓的神經(jīng)系統(tǒng)和循環(huán)系統(tǒng)較發(fā)達，與人很相似。常用于神經(jīng)、循環(huán)和呼吸方面的實驗。 （一）實驗動物的種類。（一）實驗動物的種類。犬(Dog ) 常用于基礎(chǔ)醫(yī)學、藥理、毒理學、實驗外科學、行為學、腫瘤學等方面研究 在 以 犬 為實 驗 動 物的 研 究 成果 中 ， 只有應(yīng)用Beagle 才能 被 國 際公認。 （一）實驗動物的種類。（一）實驗動物的種類。豬(Pig)常應(yīng)用于皮膚燒傷、腫瘤學、免疫學、心血管及糖尿病、遺傳性和營養(yǎng)性疾病、移植、外科手術(shù)等方面的研究 （一）實驗動物的種類。（一）實驗動物的

4、種類。猴(Monkey)主要用于傳染病學、藥理學和毒理學、生殖生理、口腔醫(yī)學）營養(yǎng)、代謝、行為學和高級神經(jīng)活動研究及老年病、器官移植、眼科、內(nèi)分泌病和畸胎學、腫瘤學（二）實驗動物的分類（二）實驗動物的分類近交系 近交系一般是指采用20代以上全同胞兄弟妹妹或親子（子女與年青的父母）進行交配，而培養(yǎng)出來的遺傳基因純化的品系。（F98.6% ）雜交一代 由兩個近交系雜交產(chǎn)生的子一代稱為雜交一代。它既有近交系動物的特點，又獲得了雜交優(yōu)勢。封閉群 在同一血緣品系內(nèi)，不以近交方式，而進行隨機交配繁衍，經(jīng)五年以上育成的相對維持同一血緣關(guān)系的種群。1.按遺傳學特征分類突變品系 在育種過程中，由于單個基因的突變

5、，或?qū)⒛硞€基因?qū)?，或通過多次回交“留種”，而建立一 個同類突變品系，此類個體中有具同樣遺傳缺陷或病態(tài)。非純系 即一般任意交配繁殖的雜種動物。雜種動物具有旺盛的生命力，適應(yīng)性強，繁殖率高，生長快，易于飼養(yǎng)管理。個體差異大，反應(yīng)性不規(guī)則，實驗結(jié)果的重復性差。但其中包含有最敏感的與最不敏感的兩種極端的個體。（二）實驗動物的分類（二）實驗動物的分類普通動物（Conventional animals ,CV） 又稱一級動物，是微生物控制要求中最低的一個級別的動物，要求不帶有動物烈性傳染病和人畜共患病原體 。清潔動物（Clean animals ,CL） 又稱二級動物，除不帶有普通動物應(yīng)排除的病原體外，

6、還不應(yīng)攜帶對動物危害大和對科學實驗干擾大的病原體。2.按微生物學分類無特殊病原體動物（Specific pathogens free animal，SPF動物） SPF動物又稱三級動物，除不帶有普通動物、清潔動物應(yīng)排除的病原體外，還應(yīng)排除有潛在感染或條件性致病的病原體，以及對實驗干擾大的病原。 無菌動物（Germfree animals，GF）和悉生動物（Gnotobiotic animals，GN） 四級動物。無菌動物是指采用當前的技術(shù)手段無法在動物體表、體內(nèi)檢出一切其他生物體。 例如，過敏反應(yīng)或變態(tài)反應(yīng)的研究宜選用豚鼠，因為豚鼠易于致敏。因家兔體溫變化靈敏，故常用于發(fā)熱、熱原檢定、解熱藥和

7、過熱的實驗。狗、大鼠、 家兔常用于高血壓的研究。實驗動物的種屬選擇 應(yīng)注意影響動物實驗效果的各種因素。盡可能選擇其結(jié)構(gòu)、功能和代謝特點接近于人類的動物，不同種屬的動物對于同一刺激的反應(yīng)也不同。 實驗動物品系的選擇 同一種屬動物的不同品系，對同一刺激的反應(yīng)也有很大差異。（三）實驗動物的種、系選擇。例如：DBA2小鼠100的可發(fā)生聽源性癲癇發(fā)作；而C57BL小鼠根本不出現(xiàn)這種反應(yīng) 實驗動個體的選擇 同一品系的實驗動物，對同一刺 激物反應(yīng)存在著個體差異。年齡、體重、性別、生理 狀態(tài)和健康情況不同，往往導致對同一刺激的不同結(jié) 果。敏感性：幼年老年成年 1028周齡小鼠老年小鼠 有些犬因饑餓、創(chuàng)傷等原因

8、尚未正式做休克實驗時，即已進入休克 氯丙嗪血糖升高血糖降低56周齡的雄性大鼠56周齡的雌性大鼠麥角新堿有鎮(zhèn)痛效果無鎮(zhèn)痛效果動物血壓高動物血壓低降壓藥降壓不降壓動物的捉拿、固定動物性別的辨別實驗動物的編號常用給藥方法二、實驗動物的基本操作二、實驗動物的基本操作蟾蜍（一）動物的捉拿、固定（一）動物的捉拿、固定AB圖3-2-1 青蛙(或蟾蜍)捉拿法 圖3-2-2 青蛙(或蟾蜍)固定法小鼠（一）動物的捉拿、固定（一）動物的捉拿、固定圖3-2-2小白鼠的捉拿法大鼠、豚鼠家兔（一）動物的捉拿、固定（一）動物的捉拿、固定圖3-2-5 兔捉拿方法AB圖3-2-4 大鼠和豚鼠的捉拿和固定蟾蜍小白鼠家兔（二）動物

9、性別的辨別（二）動物性別的辨別雄 雌圖3-2-7 小鼠性別的特征染色法掛牌法（三）動物的編號（三）動物的編號213456789102030407050806090圖3-2-8小鼠背部的編號方法（四）常用給藥方法（四）常用給藥方法n經(jīng)消化道給藥法n自動攝取法n喂藥法n灌胃給藥法n經(jīng)直腸給藥圖3-2-9 小鼠灌胃法胃管開口器圖3-2-10 兔灌胃方法（四）常用給藥方法（四）常用給藥方法n注射給藥法n皮下注射n腹腔注射 圖3-2-11小鼠腹腔注射方法（四）常用給藥方法（四）常用給藥方法n注射給藥法n肌肉注射n靜脈注射8.5cm3.5cm 1cm圖3-2-12 小鼠尾靜脈注射法（四）常用給藥方法（四）

10、常用給藥方法n涂布給藥法n藥物經(jīng)皮膚吸收、局部作用或致敏n作用時間根據(jù)藥物性質(zhì)和要求定（五）動物被毛的去除法（五）動物被毛的去除法n拔毛法n剪毛法n剃毛法n脫毛法三、實驗動物的麻醉三、實驗動物的麻醉n常用麻醉藥n氨基甲酸乙酯n氯醛糖n巴比妥類n乙醚n局部麻醉藥三、實驗動物的麻醉三、實驗動物的麻醉n常用麻醉方法n全身麻醉n吸入麻醉n注射麻醉n局部麻醉三、實驗動物的麻醉三、實驗動物的麻醉n麻醉操作要求n麻醉的基本原則n注意不同個體的耐受性n及時判斷麻醉的深淺n靜脈麻醉堅持先快后慢原則n補充麻醉n麻醉注意事項四、實驗動物手術(shù)四、實驗動物手術(shù)n術(shù)前準備n理論準備：了解結(jié)構(gòu)、方法、應(yīng)急措施等n材料準備：動物準備、器械準備 藥品準備、其他準備 儀器準備四、