微生物學實驗ppt課件

1、微生物學實驗指點教師：袁洪生 李蘭芬 臧淑萍實驗一實驗一 細菌的形狀察看細菌的形狀察看 目的要求：見實驗教程 P.16實驗二-1 根本原理：見實驗教程P.16 實驗二-1 實驗內(nèi)容 1.實驗室環(huán)境及體表微生物檢查(檢查手指、頭發(fā)、錢幣等攜帶微生物的情況4人一個培育皿) 2.記錄三種細菌的菌落特征 3.繪制三種細菌個體形狀圖，并對革藍氏染色結(jié)果小結(jié) 4思索題：實驗2-(一)、二題 三種細菌的菌落特征 微生物名稱 大小 形狀 含水程度 顏色 與培養(yǎng)基結(jié)合程度 嗅味 枯草芽孢桿菌 金黃色葡萄球菌 大腸桿菌 繪制三種細菌個體形狀圖，并對革藍氏染色結(jié)果小結(jié) 微生物名稱 革藍氏染色 總結(jié)枯草芽孢桿菌 金黃

2、色葡萄球菌 大腸桿菌 實驗二實驗二 放線菌的形狀察看放線菌的形狀察看 目的要求：見實驗教程P.24 實驗二-3 根本原理：見實驗教程P.24 實驗二-3 實驗內(nèi)容 1.記錄三種放線菌的菌落特征 2.記錄并繪制三種放線菌的個體形狀及生殖方式圖 3.思索題：在平板上如何識別細菌和放線菌的菌落？ 三種放線菌的菌落特征 微生物名稱 大小 含水程度 菌落顏色 與培養(yǎng)基結(jié)合程度 嗅味 灰色鏈霉菌 正面背面 淡紫灰鏈霉菌 正面背面地中海諾卡氏菌 正面背面繪制三種放線菌的個體形狀及生殖方式圖 微生物名稱 制片法 生殖方式觀察 灰色鏈霉菌 印片法或直接觀察法 示氣生菌絲、孢子絲(直)及孢子(球形) 淡紫灰鏈霉菌

3、 印片法或直接觀察法 示氣生菌絲、孢子絲(螺旋狀)及孢子(橢圓形) 地中海諾卡氏菌 印片法或直接觀察法 示菌絲斷裂、柱形或球形孢子 實驗三實驗三 酵母菌形狀察看及細胞酵母菌形狀察看及細胞計數(shù)計數(shù) 目的要求： 察看并掌握酵母菌的菌落特征、個體形狀及生殖方式。 根本原理： 見實驗教程 P.26實驗3-1, P.97 實驗8-1 實驗內(nèi)容 1.記錄兩種酵母菌的菌落特征 2.記錄并繪制二種酵母菌的個體形狀及生殖方式圖 3. (1)用血球計數(shù)板計算酵母菌懸液的細胞數(shù) (2)用顯微鏡測微尺丈量酵母菌細胞的大小 4. 思索題：在同一平板上如何識別細菌和酵母菌的菌落？ 兩種酵母菌的菌落特征 微生物名稱 大小

4、含水程度菌落顏色與培養(yǎng)基結(jié)合程度 嗅味釀酒酵母 紅酵母 二種酵母菌的個體形狀及生殖方式圖 微生物名稱 制片法 生殖方式觀察 釀酒酵母水浸法制片示芽殖熱帶假絲酵母壓片法制片示假菌絲實驗四實驗四 霉菌的形狀察看霉菌的形狀察看 目的要求： 1.察看霉菌的菌落特征。 2.掌握霉菌制片方法，察看霉菌個體形 態(tài)及各種無性和有性孢子。根本原理：見實驗教程P.29, 實驗三-2 實驗內(nèi)容 1. 記錄三種霉菌的菌落特征 2. 對三種霉菌制片、察看、記錄并繪制 三張霉菌個體形狀及生殖方式圖3.四大類微生物形狀特征總結(jié)三種霉菌的菌落特征 微生物名稱 大小 表面形狀 顏色 與培養(yǎng)基結(jié)合程度 嗅味 黑根霉(產(chǎn)糖化酶,釀

5、酒) 上部(孢子)下部(菌絲) 產(chǎn)黃青霉(產(chǎn)青霉素) 中心(孢子頭) 邊緣(菌絲) 黃曲霉(產(chǎn)蛋白酶,制醬油)中心(孢子頭) 邊緣(菌絲) 三種霉菌個體形狀及生殖方式 微生物名稱菌絲結(jié)構(gòu)(分化結(jié)構(gòu)) 孢子 黑根霉示無隔菌絲、假根、匍匐枝、孢子囊梗產(chǎn)黃青霉示有隔菌絲、分生孢子梗、小梗黃曲霉示有隔菌絲、足細胞、頂囊、小梗實驗調(diào)查 (1)如何從菌落特征上識別四類菌? (2)四類菌在制片上有何特點? 實驗五實驗五 培育基的配制與滅培育基的配制與滅菌菌 目的要求：1. 學習和掌握分別四類菌常用的培育基配制方法。2. 學會四類菌稀釋分別和計數(shù)時所用物品滅菌前后的預備任務。3. 了解實驗室常用的消毒滅菌方法

6、，掌握高壓蒸汽滅菌技術(shù)。 根本原理：見實驗5-1、5-2、5-3、5-5及附錄三 實驗內(nèi)容 配制四類菌分別用培育基(留意調(diào)pH)、分裝。 (按卡片每三人一組配制其中一種培育基，但要求四種都會配) 2. 預備大小槍頭、小離心管、玻璃刮刀、無菌水等，培育基的配制量及分裝方法見實驗臺上卡片。3. 高壓蒸汽滅菌，滅菌后擺放斜面。 先檢查高壓鍋內(nèi)水量，封鎖高壓鍋蓋時用力要均勻， 放氣2-3分鐘后封鎖放氣閥，待壓力接近0.1Mpa時調(diào)理 成小火并計時,堅持20分鐘后關(guān)火,自然冷卻待壓力降為0時翻開放氣閥后再翻開高壓鍋。 4. 實驗室常用消毒滅菌方法(示范) 干熱滅菌、紫外滅菌、過濾除菌、化學消毒法等。 實

7、驗記錄 1. 記錄他所配的培育基稱號、成分、pH及配制分裝方法。 2.留意高壓蒸汽滅菌操作過程及關(guān)鍵 實驗六實驗六 土壤中微生物的分別土壤中微生物的分別與培育與培育 目的要求：見P.66實驗6-1 根本原理：見P.66實驗6-1 實驗內(nèi)容 1.先按卡片配制生理生化、噬菌體效價測定用培育基，滅菌2稀釋分別： 3. 劃線分別：取10-2菌懸液做劃線分別每人做四塊平皿: 三種稀釋度各一塊、劃線分別一塊4菌落計數(shù)：下周做只數(shù)可認定的菌落，三人結(jié)果取平均。 5. 斜面接種及培育：下周做每人自不同平板上分別各接一支四類菌斜面，培育后檢查接種結(jié)果。 6. 菌種保藏(示范)：斜面轉(zhuǎn)接法、低溫保藏法 、沙土管保

8、藏法、冷凍枯燥保藏法。 稀釋分別 分離對象 取樣稀釋度 分離方法 細菌 1克土10-4 、10-5、 10-6 02ml菌懸液，傾注法分離 放線菌 1克土10-2 、10-3、 10-4 02ml菌懸液，傾注法分離 酵母菌 1克酵母粉 10-5 、10-6、 10-7 0.1ml菌懸液，涂布法分離 霉菌 5克土 10-2、 10-3、 10-4 02ml菌懸液，傾注法分離 本卷須知 分別放線菌在99ml無菌水中加10滴10%苯酚 (抑制細菌生長) 分別霉菌在馬丁培育基熔化冷卻后參與2ml去氧膽酸鈉(2%)和0.4ml鏈霉素(1萬單位/ml) 實驗記錄 P.73實驗6-1表(二)、 (三) 、(

9、五) .思索題： P.74實驗6-1二、四、 (五) 實驗七幾種細菌的生理生化反實驗七幾種細菌的生理生化反響實驗響實驗 目的要求：見實驗教程 P85 ,P88根本原理：見實驗教程 P85 ,P88 實驗 實驗菌種 實驗菌種實驗菌種接種方式 分工 淀粉水解 枯草芽孢桿菌 大腸桿菌 產(chǎn)氣桿菌 平板劃點 每人一皿接兩種菌 油脂水解 金黃色葡萄球菌 大腸桿菌 產(chǎn)氣桿菌 平板劃線 每人一皿接兩種菌 EMB 大腸桿菌 產(chǎn)氣桿菌 平板劃線 每人一皿接兩種菌 葡萄糖發(fā)酵 大腸桿菌 產(chǎn)氣桿菌 液體一環(huán) 兩人1組每人1支試管各接一種菌 甘露醇發(fā)酵 金黃色葡萄球菌 產(chǎn)氣桿菌 半固體穿刺 兩人1組每人1支試管各接一種

10、菌 H2S 大腸桿菌 變形桿菌 半固體穿刺 兩人1組每人1支試管各接一種菌 檸檬酸鹽 大腸桿菌 產(chǎn)氣桿菌 斜面劃線 兩人1組每人1支試管各接一種菌 M.R 大腸桿菌 產(chǎn)氣桿菌 液體一環(huán) 兩人1組每人1支試管各接一種菌 V.P 大腸桿菌 產(chǎn)氣桿菌 液體一環(huán) 兩人1組每人1支試管各接一種菌 吲哚 大腸桿菌 產(chǎn)氣桿菌 液體一環(huán) 兩人1組每人1支試管各接一種菌 生理生化實驗結(jié)果察看生理生化實驗結(jié)果察看 實驗名稱 反應物 代謝產(chǎn)物 枯草金黃大腸產(chǎn)氣變形淀粉水解 油脂水解EMB葡萄糖發(fā)酵甘露醇發(fā)酵H2S檸檬酸鹽M.RV.P吲哚 實驗八實驗八 噬菌體效價測定噬菌體效價測定 目的要求：見實驗教程 P36 根本

11、原理：見實驗教程 P36 實驗內(nèi)容 培育敏感細菌T6-13至對數(shù)生長期 熔化下層培育基每人倒三塊平版約 10ml/塊 用蛋白胨水稀釋噬菌體原液10 6 pfa/ml至 10 710 810-9三個稀釋度備用 取0.2ml噬菌體稀釋液于小離心管中參與0.2ml T6-13菌懸液混均，室溫放置2-3分鐘后將混合液加至倒好下層培育基的培育皿中心迅速倒入熔化好已冷卻至55的上層培育基，快速混合均勻。待培育基徹底凝固后30倒置培育，16-24小時內(nèi)察看結(jié)果。 實驗九實驗九 紫外線對淀粉酶產(chǎn)生紫外線對淀粉酶產(chǎn)生菌枯草芽孢桿菌的誘變效應菌枯草芽孢桿菌的誘變效應 目的要求：見p.117 根本原理：見p.118

12、 實驗內(nèi)容 枯草芽孢桿菌BF7658 接種到新穎牛肉膏培育基中活化(37，20hr) 取1ml菌液參與裝有玻璃珠的99ml無菌水的錐形瓶中，用手(或搖床)猛烈振蕩，打散菌體，制成菌懸液。 取樣時一定要搖均勻 翻開紅光燈，避光操作 取大約10ml菌懸液至無菌平皿中(內(nèi)裝有磁力攪拌) 紫外線照射處置 功率20w 間隔30cm 0min 1min 2min 3min 稀釋度 10-510-610-7 10-410-510-6 10-310-410-5 10-210-310-4 各取0.1ml涂平板，37，培育 48hr 初篩(加碘液，丈量HC值，計算存活率及致死率) 兩人做一個照射時間，六人共用對照

13、，平均每人四塊平板 Xo#r%v(y0B3E6I9LcOgRjVmYp!t&w)z1C4G7JaMePhSkWnZq$u*x+A2D5H8KbNfQiUlXo#s%v(y0B3F6I9LdOgRjVmYq!t&w-z1C4G7JbMePhTkWnZr$u(x+A2E5H8KcNfRiUlXp#s%v)y0C3F6IaLdOgSjVmYq!t*w-z1D4G7JbMeQhTkWoZr$u(x+B2E5H9KcNfRiUmXp#s&v)y0C3F7IaLdPgSjVnYq$t*w-A1D4G8JbNeQhTlWoZr%u(x+B2E6H9KcOfRiUmXp!s&v

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