誘變性雜質的評估和控制(ICHM7)

1、ICH法規(guī)培訓之第 2 頁誘變雜質的評估和控制概述1活性化學物質試劑溶劑其他工藝助劑催化劑合成產(chǎn)物降解產(chǎn)物雜質 絕大多數(shù)的人第 3 頁誘變雜質的評估和控制概述1ICH Q3A(R2) 新原料藥中的雜質ICH Q3B(R2) 新制劑中的雜質ICH M3(R2) 藥物人用臨床試驗和上市許可中的非臨床安全性研究EMA遺傳毒性雜質限度指導原則關于主要雜質定性和控制的指南ICH M7 為限制潛在致癌風險而對藥物中為限制潛在致癌風險而對藥物中DNA活性（誘變性）雜質進行的評估和控制活性（誘變性）雜質進行的評估和控制目的目的：提供使用框架，以應用于這些誘變雜質的鑒別、分類、定性和控制，對潛在致癌風險進行了控

2、制。強調強調：在建立誘變性雜質水平時考慮安全性安全性和質量風險質量風險管理兩方面人用條件下，給出對原料藥或制劑中殘留或可能殘留的誘變性雜質評估和控制的建議補充補充第 4 頁誘變雜質的評估和控制概述1何為基因毒性雜質、誘變雜質（何為基因毒性雜質、誘變雜質（Genotoxic Impurities，Mutagenic Impurities）？）？l 基因毒性雜質（或遺傳毒性雜質，Genotoxic Impurity ，GTI）是指化合物本身直接或間接損傷細胞DNA，產(chǎn)生基因突變或體內誘變，具有致癌可能或者傾向。l 在以DNA反應物質為主要研究對象的體內體外試驗中，如果發(fā)現(xiàn)它們對DNA具有潛在的破壞

3、性，及可稱之為基因毒性。如果有足夠后續(xù)試驗，可由單獨的體外試驗結果，可以對它的體內關聯(lián)性進行評估。若缺乏這些信息時，體外基因毒性物質經(jīng)常被考慮為假定的體內誘變劑和致癌劑。 -摘自EMA毒性雜質限度指南為何重點研究基因毒性雜質？為何重點研究基因毒性雜質？l 基毒雜質特點：很低濃度時即可造成人體遺傳物質的損傷，進而導致基因突變并可能促使腫瘤發(fā)生。第 5 頁誘變雜質的評估和控制適用范圍2l 研發(fā)期間和上市申報期間的新原料藥和新制劑的雜質l 已上市藥物的批準后申報，已經(jīng)之前已批準上市的制劑中同原料藥生產(chǎn)的另一制劑的新上市申報原料藥合成變更，導致產(chǎn)生新雜質或已有雜質可接受標準增加配方變更、組分變更或生產(chǎn)

4、工藝變更，導致產(chǎn)生新的降解產(chǎn)物或已有降解產(chǎn)物可接受標準增加指征變更或給藥方案變更，導致可接受癌癥風險水平受到重大影響l 首次用于藥物中的、化學合成的輔料中的雜質l 生物/生物技術制品、肽類、寡核苷酸、放射藥物、發(fā)酵產(chǎn)品、草藥制品和動物/植物來源的粗品l ICH S9中所定義的晚期癌癥指征用原料藥和制劑l 已上市藥物中使用的輔料、調味劑、著色劑和香料l 藥物包材中的可浸出雜質第 6 頁誘變雜質的評估和控制通用原則3在EMA遺傳毒性雜質限度指導原則中引入了可接受風險的攝入量，即毒性物質限量，或毒理學關注門檻（TTC，Threshold of Toxicological Concern）這個概念。設

5、置了限度值 TTC(1.5 g/day)，即相當于每天攝入1.5 g的基因毒性雜質，被認為對于大多數(shù)藥品來說是可以接受的風險（一生中致癌的風險小于十萬分之一）。按照這個閾值，可以根據(jù)預期的每日攝入量計算出活性藥物中可接受的雜質水平。TTC是一個風險管理工具，采用的是概率的方法。TTC不能被理解為絕對無風險的保障。有些結構基團被識別為具有較高的效價，即使攝入低于TTC水平，從理論上來說也可能會導致顯著癌癥風險黃曲霉素N-亞硝基化合物烷基-氧化偶氮基化合物“關注隊列”第 7 頁誘變雜質的評估和控制線性外推舉例：類似于線性外推舉例：類似于TTC計算方法計算方法環(huán)氧乙烷計算：根據(jù)致癌效應數(shù)據(jù)庫，環(huán)氧乙

6、烷的TD50為21.3mg/kg體重/天（大鼠）和63.7mg/kg體重/天（小鼠）。在計算可接受攝入量時，采用了較低的大鼠值（即更保守）。計算十萬分之一概率致癌劑量，將該值除以50,000：21.3mg/kg50,000 = 0.42g/kg.計算人類每日總攝入量：0.42g/kg50kg體重 = 21.3g/人/天。因此，永久性每日服用21.3g環(huán)氧乙烷對應理論致癌風險為十萬分之一是環(huán)氧乙烷作為藥品中的雜質時可接受的攝入值。3通用原則單個雜質單個雜質的可接受日總攝入量的可接受日總攝入量治療期治療期1月月1-12月月1-10年年10年到終生年到終生日總攝入量（g/天）12020101.5治療

7、期治療期1月月1-12月月1-10年年10年到終生年到終生日總攝入量（g/天）12060305多個雜質的可接受日總攝入量多個雜質的可接受日總攝入量第 8 頁誘變雜質的評估和控制已上市藥品要考慮的問題44.1 上市后變更上市后變更原料藥研發(fā)、生產(chǎn)和控制原料藥研發(fā)、生產(chǎn)和控制包括包括：合成路線、試劑、溶劑、工藝條件發(fā)生變更時，誘變性雜質對潛在風險影響的評估原則原則：1、是否有新的誘變性雜質產(chǎn)生；2、受變更影響的步驟中已知誘變雜質含量是否升高3、上游步驟中的已知誘變性雜質是否升高不建議不建議：對不受變更影響的雜質重新評估不需評估不需評估：1、原料藥、中間體或起始物料的生產(chǎn)場所發(fā)生變更2、原料供應商發(fā)

8、生變更4.2 上市后變更上市后變更制劑研發(fā)、生產(chǎn)和控制制劑研發(fā)、生產(chǎn)和控制包括包括：制劑（如：成分、生產(chǎn)工藝、劑型）發(fā)生變更時原則原則：1、所有新的誘變性降解產(chǎn)物2、已有誘變性降解產(chǎn)物更高的可接受標準不建議不建議：原料藥未發(fā)生變更不需評估：不需評估：制劑生產(chǎn)場所變更第 9 頁誘變雜質的評估和控制已上市藥品要考慮的問題44.3 上市后藥品臨床使用變更上市后藥品臨床使用變更已上市藥品臨床應用變更拒收情節(jié)包括：重新評估誘變雜質限度時，1、使用劑量顯著增加2、用藥時長顯著增加3、病情嚴重或危及生命的病患狀態(tài)下可攝入量較高，變?yōu)椴荒敲磭乐氐牟』记闆r后，原有的可接受攝入量可能不再適當4、使用新的給藥途徑5

9、、擴大使用患者群，從而包括孕婦和/或小兒4.4 已上市藥物的其它需考慮問題已上市藥物的其它需考慮問題兩種情況，需要考慮對雜質進行評估：1、新雜質的相關危害性數(shù)據(jù)所采用的研究方法具有高質量科學性，且與相關法規(guī)測試指南一致，其數(shù)據(jù)記錄或報告易于獲得2、新的雜質被確知屬于第1類或第2類誘變性此時，申報人需要實施本指南所要求的評估第 10 頁誘變雜質的評估和控制原料藥和制劑雜質評估5雜質產(chǎn)生：對于原料藥雜質產(chǎn)生：對于原料藥，合成過程中、儲存過程、生產(chǎn)過程對于制劑，對于制劑，儲存條件雜質評估分為兩個階段：雜質評估分為兩個階段：1、已被鑒定的實際存在的雜質應考慮其潛在誘變性（已知雜質）2、可能存在于原料藥

10、中的潛在雜質進行評估，已確定是否需要對其潛在誘變性進行進一步評估第 11 頁誘變雜質的評估和控制原料藥和制劑雜質評估55.1 合成雜質合成雜質實際雜質實際雜質：原料藥中超出ICH Q3A報告閾的雜質（若雜質水平超過了ICH Q3A鑒別閾，則需進行鑒別）潛在雜質潛在雜質：原料藥中起始物料、試劑和從起始物料到原料藥合成路線中的中間體（需評估）原料藥合成后期引入的起始物料，需要評估起始物料合成的最終步驟中的潛在誘變性雜質已知結構和這些潛在雜質均按照第第6部分部分要求評估其潛在誘變性5.2 降解產(chǎn)物降解產(chǎn)物原料藥和制劑中的潛在降解產(chǎn)物是指經(jīng)過合理推測，在長期存儲條件下可能會形成的物質，也包括在加速穩(wěn)定

11、性試驗中和ICH Q1B光照穩(wěn)定性試驗中形成的超出ICH Q3A/B的鑒別限，但尚未確認的物質原料藥：存在于內包裝和外包裝內，擬定的長期儲存條件下觀察到高于ICH Q3A報告閾的物質制劑：存在于內包裝和外包裝內，擬定的長期儲存條件下觀察到高于ICH Q3B報告閾的物質；生產(chǎn)過程中產(chǎn)生的雜質。相關降解途徑的知識有助于指導選擇性的評估潛在雜質的誘變性，如：降解化學原料、相關強降解試驗和研發(fā)穩(wěn)定性研究。只要知道結構，存在于原料藥和制劑中的降解產(chǎn)物，亦按照第第6部分部分要求評估其誘變性第 12 頁誘變雜質的評估和控制危害性評估要素6采用數(shù)據(jù)庫和誘變以及細菌誘變數(shù)據(jù)文獻數(shù)據(jù)庫和誘變以及細菌誘變數(shù)據(jù)文獻檢

12、索檢索對實際和可能雜質進行分析，根據(jù)分類表將其分類為1類、2類或5類；若無法獲得這樣的分類數(shù)據(jù)無法獲得這樣的分類數(shù)據(jù)，則應進行結構-活性關系（SAR）評估。著重關注細菌誘變性預期?？赡軐е卤环诸悶?類、4類或5類。(Q)SAR方法計算兩個互補方法：1、依據(jù)專家規(guī)則2、基于統(tǒng)計方式未發(fā)現(xiàn)警示結構，足以得出結論無誘變可能（Q）SAR方法使用基于預定義規(guī)則的預測計算機建模描述化學結構和化學相關生物活性之間的關系，或用于發(fā)現(xiàn)生物活性和分子結構或化合物特性之間的相關性的統(tǒng)計工具。主要應用于風險評估、藥物開發(fā)和監(jiān)管決策。-摘自(Q)SAR: A Tool for the Toxicologist.第 13

13、 頁誘變雜質的評估和控制危害性評估要素6關于基因雜質警示結果的具體詳細信息科參考歐盟發(fā)布的警示結構Development of structure alerts for the in vivo micronucleus assay in rodents?；蜻M入 The Carcinogenic Potency Database (CPDB)，里面有 1547 種致癌物質的列表，結構式，CAS 號，作用部位，TTC 值等一系列信息。應當注意，應當注意， 含有警示結含有警示結構并不意味著該雜質一定具有遺傳毒性，構并不意味著該雜質一定具有遺傳毒性， 而確而確認有遺傳毒性的物質也不一定會產(chǎn)生致癌作用認

14、有遺傳毒性的物質也不一定會產(chǎn)生致癌作用。雜質的理化性質和其他結構特點（如相對分子質量、親水性、分子對稱性 / 空間位阻、反應活性以及生物代謝速率等）會對其毒性產(chǎn)生抑制或調節(jié)作用。分類分類定義定義擬定控制措施（詳見擬定控制措施（詳見7部分）部分）1已知誘變致癌性控制不高于化合物可接受限度2已知具有誘變性，致癌效應未知（細菌誘變呈陽性*，無嚙齒動物致癌數(shù)據(jù)控制不高于可接受限度（適當?shù)腡TC）3警示結構，與原料藥結構無關，無誘變數(shù)據(jù)控制不高于可接受限度（適當?shù)腡TC）或檢測細菌誘變含量：如無誘變性=第5類具有誘變性=第2類4警示結構，與原料藥或有關物質有相同警示（如，工藝中間體），經(jīng)測試為無誘變性與

15、非誘變性雜質同等對待5無警示結構，或警示結果具有充分數(shù)據(jù)證明其不具備誘變性和致癌性與非誘變性雜質同等對待*或其他相關陽性誘變數(shù)據(jù)，說明與誘導基因編寫的DNA反應活性（例如，體內基因誘變研究顯示陽性）第 14 頁誘變雜質的評估和控制控制7- 物料特性控制（原料、起始物料、中間體、試劑、溶劑、內包材）- 設施和設備操作條件- 生產(chǎn)工藝設計中的控制內涵- 中控（包括中控檢測和工藝參數(shù)）- 原料藥和制劑控制（如放行檢測）分類為分類為1、2或或3類的雜質時，控制策略十分類的雜質時，控制策略十分重要。重要?？刂茝牧鶄€方面闡述1、工藝相關雜質的控制2、控制方法需考慮的問題3、定期檢測要考慮的問題4、降解產(chǎn)物

16、的控制5、生命周期管理6、臨床研發(fā)要考慮的問題第 15 頁誘變雜質的評估和控制控制78.1 工藝相關雜質的控制工藝相關雜質的控制-四種方法供選擇應用原料藥控制策略四種方法供選擇應用原料藥控制策略方法一方法二方法三方法四原料藥質量標準中加入雜質檢測并制定質量標準?？捎糜诙ㄆ跈z測。（ICH Q6A）-當原料藥誘變雜質在至少6個連續(xù)的中試批次或3個連續(xù)的生產(chǎn)批次中，測定結果均低于可接受限度的30%，則可論述進行定期確認檢查（ periodic verification testing ）。否則建議常規(guī)檢查。在原料、起始物料或中間體的質量標準中加入對雜質的檢測，或作為中控檢測同時制定可接受標準，或采用

17、適當?shù)姆治龇椒ǎ瑢㈦s質控制在可接受限度以下。在原料、起始物料或中間體的質量標準中加入對雜質的檢測，或作為中控檢測，同時制定一個高于原料藥中可接受限度的質量標準，采用適當?shù)姆治龇椒?，配合?jīng)過證明雜質致命知識、雜質在后續(xù)工藝中被清除的知識，并對后續(xù)工藝進行控制。-實驗室級實驗數(shù)據(jù)限制原料藥中雜質水平低于可接受限度的30%當誘變雜質殘留可風險評估已確定是可以忽略的，可采用對工藝的控制來取代分析方法控制。-適用于本質上來說不穩(wěn)定的雜質（亞硫酰氯等）、合成路線早起引入但已被有效清除的雜質。第 16 頁誘變雜質的評估和控制控制78.2 控制方法要考慮的問題控制方法要考慮的問題1、采用第4種方法時，需分析數(shù)

18、據(jù)來支持。分析數(shù)據(jù)主要包括：后續(xù)化學反應中雜質的結構去向、中試批次分析數(shù)據(jù)以及加標實驗。重點證明該雜質的去向/清除論證是嚴謹?shù)摹?、不能采用第3、4種方法時，申報資料中應包括原料、起始物料或中間體質量標準對雜質進行的檢測，或中控（方法2）或原料藥（方法4）在可接受限度水平所進行的測試。3、在較后合成的步驟中引入雜質方法18.3 定期檢測要考慮的問題定期檢測要考慮的問題定期檢測方法1-不需要對每批均進行放行例行檢測。-當檢測結果顯示，誘變性雜質的水平無法符合定期檢測所建議的可接受標準，則藥品生產(chǎn)商要立即實施全檢，直至找出超標的原因、實施糾正措施，并且所記錄工藝重新處于受控狀態(tài)-若定期確認性檢測失

19、敗，需通知法規(guī)當局，以對之前為進行檢測的批次進行風險/利益評估。8.4 降解產(chǎn)物的控制降解產(chǎn)物的控制首先了解該降解途徑是否與原料藥和制劑的生產(chǎn)工藝和/或其所擬的包裝和儲存條件有關。（加速試驗）若有關，則監(jiān)控采用所擬儲存條件長期穩(wěn)定性試驗中原料藥或制劑的質量。第 17 頁誘變雜質的評估和控制雜質可接受性雜質可接受性的評估決策樹的評估決策樹第 18 頁誘變雜質的評估和控制附錄3：可以采用的控制方法舉例案例案例1：第：第3種控制策略舉例種控制策略舉例差2步到原料藥時，生成了中間體X，雜質A在中間體X中常規(guī)檢出。雜質A是一個穩(wěn)定的化合物，會被帶入原料藥。在實驗室中，將雜質A以不同濃度加入中間體X進行加

20、樣研究，發(fā)現(xiàn)該雜質即使在1%的水平時，也能被持續(xù)地從原料藥中去除直到根據(jù)TTC制訂的限度的30%以下。由于中間體X的形成離原料藥只有2步，雜質A在中間體X中的水平相對較高，因此另外又通過檢測不同中試規(guī)模批次中，原料藥里的雜質A水平確認了工藝清除率，獲得的結果為根據(jù)TTC制訂的限度的30%以下。因此，對中間體X中雜質A控制在1.0%水平是可以接受的，不需要在原料藥標準中對該雜質進行檢測 案例案例2：第：第3種控制策略舉例：根據(jù)種控制策略舉例：根據(jù)加樣研究采用標準分析方法所獲得的預期清除數(shù)據(jù)加樣研究采用標準分析方法所獲得的預期清除數(shù)據(jù)一個5步合成工藝中，起始物料Y在第3步引入，采用標準分析方法在起

21、始物料Y中檢出雜質B通常低于0.1%。為了確定0.1%的標準是否可接受，在實驗室里進行了清除研究。將雜質B以不同濃度（最高10%）加入起始物料Y中，通過最后3步工藝步驟，得到清除系數(shù)500倍。該清除系數(shù)應用于起始物料Y含雜質B為0.1%時，雜質B在原料藥中的期望水平低于2ppm。由于該值低于根據(jù)TTC限度計算的原料藥中該雜質允許水平50ppm，因此認為起始物料Y中雜質B為0.1%的質量標準是可接受的，不需要再提交中試生產(chǎn)數(shù)據(jù)或商業(yè)放大批數(shù)據(jù)。 第 19 頁誘變雜質的評估和控制附錄3：可以采用的控制方法舉例案例案例3：第：第2種和第種和第4種控制策略舉例：結構相似的誘變性雜質種控制策略舉例：結構相似的誘變性雜質一個5步合成工藝中第1步中間體是一個硝基芳烴化合物，可能含有較高