壓力蒸汽消毒鍋滅菌驗證

1、 壓力蒸汽消毒鍋滅菌驗證壓力蒸汽消毒鍋滅菌驗證 孫雪奇 2006年6月消毒 n用物理或化學(xué)方法殺滅物體上大部分或所有病原微生物(芽胞除外)的過程。是指殺滅細(xì)菌的繁殖體, 使活體細(xì)菌的絕大部分或全部被殺滅而不致引起感染或致病,但不能殺滅細(xì)菌芽胞。在外界環(huán)境適宜時,芽胞會引起細(xì)菌的繁殖，因而消毒潛伏著再致病或感染的因素。 不同微生物對消毒因子的敏感性n最強(qiáng) 朊病毒（感染性蛋白質(zhì)）n 細(xì)菌芽孢n 分支桿菌n 親水病毒（非脂類病毒）：甲肝Vn 真菌n 細(xì)菌繁殖體n 親脂病毒：流感V、HBV 、HIVn最弱滅菌 n用物理或化學(xué)的方法清除殺滅所有形式的微生物。使物品無任何類型的存活微生物存在的過程。即使其

2、達(dá)到無菌。驗證 n按照規(guī)定的程序，評價滅菌周期所采用的滅菌工藝參數(shù)是否達(dá)到滅菌要求的過程和方法。 滅菌的方法n目前常用的滅菌方法有高溫濕熱滅菌、高溫干熱滅菌、氣體滅菌、輻射滅菌、等離子體協(xié)同滅菌、過濾除菌等。 如何確保滅菌效果n適當(dāng)?shù)?清潔，洗滌n 準(zhǔn)備，包裝n 滅菌鍋裝載及排列n 正確的滅菌方法n 滅菌鍋操作n 滅菌監(jiān)測:化學(xué),生物和物理n 物品儲存n 滅菌記錄n為什么要監(jiān)控滅菌過程?n是否無菌 無法看到n滅菌過程監(jiān)控n 物理監(jiān)測 n 化學(xué)監(jiān)測 n 生物監(jiān)測 滅菌過程的物理監(jiān)控n即滅菌器的機(jī)械指示 指滅菌器本身的狀態(tài)，如:壓力,溫度,時間等n直接表明滅菌狀態(tài)是否已達(dá)到,以及滅菌器是否正常工作

3、，不能保證在滅菌器內(nèi)的被滅菌物是否已處在要求的滅菌過程和滅菌條件下滅菌過程的化學(xué)監(jiān)測 n生產(chǎn)時用，如EO滅菌時捆在產(chǎn)品外的指示紙帶，壓力蒸氣消毒鍋一般不用滅菌過程的生物監(jiān)測滅菌過程的生物監(jiān)測n將最難殺滅的微生物，放在滅菌器內(nèi)最難殺滅部位和標(biāo)準(zhǔn)測試包內(nèi)，是滅菌質(zhì)量最可靠的保證。n滅菌過程的生物監(jiān)測不同于無菌試驗生物監(jiān)測常用兩種菌n嗜熱脂肪桿菌芽胞：壓力蒸汽滅菌n枯草桿菌黑色變種芽胞： EO和干熱滅菌滅菌生物監(jiān)測的目的：滅菌生物監(jiān)測的目的：n達(dá)到： 無菌保證水平 (SAL) 10-6n在滅菌試驗中，為便于給結(jié)果做出評價，除有特殊規(guī)定外，將試驗菌芽孢（菌量 106 cfu/片）滅菌指數(shù)達(dá)到106 ，

4、也就是說，滅菌后1000000（一百萬）件滅菌物中，只允許有一件以下有活的微生物存在，或自然微生物全部殺滅者為滅菌合格99.9999% 。壓力蒸氣滅菌原理壓力蒸氣滅菌原理n組成菌體的蛋白質(zhì)分子的功能取決于它的特殊結(jié)構(gòu)，在一定高溫條件下受熱時，沾染在被滅菌物品上的菌體蛋白質(zhì)和核酸間分子內(nèi)氫鍵發(fā)生斷裂,影響了分子空間構(gòu)型的重排,尤其是其中的酶失活，從而導(dǎo)致微生物的死亡。 n高溫高濕的環(huán)境能使一切微生物的蛋白質(zhì)發(fā)生凝固和變性n試驗表明,飽和蒸汽的穿透性比干熱空氣及過熱蒸汽穿透強(qiáng)得多,蒸汽冷凝時放出的潛熱傳給待滅菌品,使之升溫并使待滅菌品所帶的微生物尤其是表面的微生物發(fā)生水合作用, 從而加速了它們的死

5、亡。 飽和蒸汽飽和蒸汽n干燥度在0.85 與1.0之間的蒸汽 (即液體水含量不超過15%(m/m) n溫度與汽化壓力相對應(yīng)。飽和蒸汽的壓力和溫度存在以下關(guān)系n溫度T（ ）=106+143*壓力（MP a）n表壓（MP a） 0.07 0.11 0.14 0.21 n蒸汽溫度（ ） 115 121 126 134 n如有水分或冷空氣，一定壓力下相應(yīng)溫度要低一些-排冷凝水和冷空氣濕熱滅菌的對數(shù)規(guī)則濕熱滅菌的對數(shù)規(guī)則n滅菌時微生物的死亡遵循對數(shù)規(guī)則,滅菌過程可以用阿倫烏絲的一級反應(yīng)式來描述。根據(jù)質(zhì)量作用定律，在恒定溫度及保持其它條件不變的情況下，單位時間內(nèi)被殺滅的微生物數(shù)正比于t0時的原有的數(shù)目 D

6、 D值值-對數(shù)單位滅菌時間對數(shù)單位滅菌時間nD值, 用以定量地描寫一定溫度下某種微生物在滅菌過程中的熱忍耐性參數(shù)，系指一定溫度下將微生物殺滅 90%或使之下降一個對數(shù)單位所需的時間 （min）。Z Z值值-滅菌溫度系數(shù)滅菌溫度系數(shù)Z值系指使某一種微生物的D值下降一個對數(shù)單位， 滅菌溫度應(yīng)升高的度數(shù)。不同的微生物孢子，在不同的溶液中有各不相同的Z值。 Z值越大，微生物對溫度變化的“敏感性”就越弱， Z值被用于定量地描述微生物對滅菌溫度變化的“敏感性”。此時，企圖通過升高滅菌溫度的方式來加速殺滅微生物收效就不明顯。F Ft t值值-T-T滅菌滅菌值值指一個給定Z值下，滅菌程序在溫度T下的等效滅菌時

7、間。可以把 FT 理解為“T滅菌值” 即 “滅菌程序所賦予待滅菌品在T下的滅菌時間”。 由于D值隨溫度的變化而變化，所以不同溫度下達(dá)到相同滅菌效果時, FT值將隨D值的變化而變化。滅菌溫度高時，所需的“T滅菌時間”就短；滅菌溫度較低時，則所需的“T滅菌時間”就長。F F0 0值值-標(biāo)準(zhǔn)滅菌值標(biāo)準(zhǔn)滅菌值F0系T=121及Z=10下的FT值。如果把121理解為“標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)”,那么F0可理解為“標(biāo)準(zhǔn)滅菌值”。 蒸汽滅菌的F0值以分鐘表示的滅菌值。系指對具有Z值為10的微生物而言,滅菌過程賦予產(chǎn)品的標(biāo)準(zhǔn)滅菌時間。滅菌率LFo和FT的比值比較110和121的滅菌率，可以得出結(jié)論： -110滅菌12.6mi

8、n和121滅菌1min等效。 -滅菌時間相同，110滅菌效果只有121滅菌效果的7.9%。n微生物的種類和數(shù)量n滅菌前和滅菌中微生物所處的環(huán)境 n被滅菌產(chǎn)品中任何單個產(chǎn)品的無菌程度只能用總體中存在非無菌產(chǎn)品的概率來表示 一定的F0值下，滅菌的效果除了與藥液中待殺滅的微生物的D值有關(guān)外， 還與產(chǎn)品的帶菌量有關(guān)；產(chǎn)品滅菌前的含菌量越高，無菌保證的可信度就越小。n藥典規(guī)定：濕熱滅菌條件通常采用n12115min，121 30min或116 n40min的程序，也可以采用其它溫度和時間參數(shù)，但必須保證物品滅菌后的nSAL10-6n對熱穩(wěn)定的物品，可采用過度殺滅法，其SAL10-12 。n熱穩(wěn)定性較差的

9、產(chǎn)品的的標(biāo)準(zhǔn)滅菌時間F0【指滅菌溫度為121.1，生物指示菌的耐熱參數(shù)D值為1分，滅菌溫度系數(shù)Z值為10.0 時的標(biāo)準(zhǔn)滅菌時間】一般不低于8分鐘。n如產(chǎn)品的熱穩(wěn)定性很差可允許F0低于8，此情況下，應(yīng)在生產(chǎn)全過程中，對產(chǎn)品中污染的微生物嚴(yán)加監(jiān)控，并采取各種措施降低微生物污染水平，確保被滅菌產(chǎn)品達(dá)到無菌保證要求。如何進(jìn)行滅菌效果的驗證如何進(jìn)行滅菌效果的驗證n1 .溫度均勻性實驗（熱分布試驗）n2.滅菌效果的生物驗證（熱穿透試驗）壓力蒸汽消毒鍋滅菌驗證壓力蒸汽消毒鍋滅菌驗證n原則n目的n要求原則原則n驗證是GMP的重要組成部分，應(yīng)按預(yù)定的方案進(jìn)行，總結(jié)驗證的結(jié)果應(yīng)記錄在案備查。生產(chǎn)工藝和程序應(yīng)建立在

10、驗證的基礎(chǔ)上，并進(jìn)行定期的再驗證，以確保它們能達(dá)到預(yù)期的結(jié)果。目的目的滅菌器及滅菌程序驗證的目的是:調(diào)查確定滅菌過程中冷點的位置,設(shè)定滅菌程序有關(guān)參數(shù),用試驗來證實運(yùn)行的可靠性及滅菌程序的重現(xiàn)性,以確保產(chǎn)品滅菌后達(dá)到低于百萬分之一的微生物污染率?；疽蠡疽筮\(yùn)行確認(rèn)運(yùn)行確認(rèn)運(yùn)行確認(rèn)包括設(shè)備的檢查及通過試運(yùn)行對滅菌性能的調(diào)查檢查, 及設(shè)定滅菌程序的重復(fù)性試驗。 運(yùn)行確認(rèn)中應(yīng)保證: 在設(shè)定的蒸汽壓力和溫度范圍內(nèi),蒸汽、水、壓縮空氣和液體無滲漏; 門的聯(lián)鎖系統(tǒng)安全可靠;熱分布試驗熱分布試驗該試驗分兩步進(jìn)行:一是作空載的熱分布試驗,二是裝載的熱分布試驗。試驗要點如下: 將溫度探頭(或留點溫度計)編

11、好號,固定在滅菌器腔室的不同位置，溫度探頭的放置應(yīng)包括可能的高溫點及低溫點。應(yīng)有一個探頭放在滅菌器溫度控制探頭處，一個放在靠近溫度記錄控制探頭附近，其余均勻分布于滅菌器腔室內(nèi)，以使溫度的監(jiān)測具有好的代表性。在裝載熱分布試驗中，裝載應(yīng)盡可能使用待滅菌產(chǎn)品或類似物，按設(shè)定的滅菌程序如121 30min或115 40min進(jìn)行滅菌，試驗中采用的參數(shù)及裝載方式與正常生產(chǎn)所采用的相同; 每種裝載方式進(jìn)行3次重復(fù)試驗,確定空載的冷點位置; 試驗前后溫度探頭都要進(jìn)行校正。 通過試驗證明:最冷點和腔室平均溫度間差值應(yīng)2.0。熱穿透試驗熱穿透試驗在滅菌器負(fù)載狀態(tài)下(一般為最大負(fù)載),將5支經(jīng)過校正的標(biāo)準(zhǔn)熱電阻（留點溫度計）和生物指示劑插入