《JL第四章酶》PPT課件

1、第四章 酶 主要內(nèi)容：介紹酶的概念、作用特點(diǎn)和分類、命名，討論酶的結(jié)構(gòu)特征和催化功能以及酶的作用機(jī)理，進(jìn)而討論影響酶作用的主要因素。對酶工程和酶的應(yīng)用作一般介紹。返回思考1醫(yī)學(xué)PPT目 錄第一節(jié) 酶的概念及作用特點(diǎn)第二節(jié) 酶的命名和分類第三節(jié) 酶的作用機(jī)理第四節(jié) 影響酶促反應(yīng)速度的因素第五節(jié) 酶的活性調(diào)節(jié)第六節(jié) 酶工程簡介2醫(yī)學(xué)PPT第一節(jié) 酶的概念及作用特點(diǎn)一 、酶及生物催化劑概念的發(fā)展二、 酶作用的特點(diǎn) 1. 與一般催化劑的共性 2. 酶的特性 極高的催化效率 高度的專一性 易失活 活性可調(diào)控 有的酶需輔助因子三 酶的化學(xué)本質(zhì)3醫(yī)學(xué)PPT酶及生物催化劑概念的發(fā)展酶的發(fā)展歷程 我國：八千年前

2、 西方國家 19世紀(jì)，對釀酒發(fā)酵過程進(jìn)行了大量研究 1833年 Payen和Persoz 淀粉酶制劑 1835-1837年酶催化作用概念 1878年 kuhne enzyme 1894年Fisher 鎖與鑰匙學(xué)說 1903年Henri 中間復(fù)合物學(xué)說 1913年Michaelis Menten: 米氏方程 1925年Briggs 和Handane: 穩(wěn)態(tài)學(xué)說 19301936Northrop和Kunitz: 酶是蛋白質(zhì) 80年代初Cech和Altman: 核酶酶的概念：酶（enzyme）是活細(xì)胞產(chǎn)生的具有催化功能的生物大分子4醫(yī)學(xué)PPT 酶專一性類型1 結(jié)構(gòu)專一性 概念：酶對所催化的分子（底物

3、，Substrate）化學(xué)結(jié)構(gòu)的特殊要求和選擇 類別：絕對專一性和相對專一性2 立體專一性 概念：酶除了對底物分子的化學(xué)結(jié)構(gòu)有要求外，對其立體異構(gòu)也有一定的要求 類別：立體異構(gòu)專一性和幾何異構(gòu)專一性5醫(yī)學(xué)PPT 絕對專一性和相對專一性 絕對專一性 有的酶對底物的化學(xué)結(jié)構(gòu)要求非常嚴(yán)格，只作用于一種底物，不作用于其它任何物質(zhì)。 相對專一性 有的酶對底物的化學(xué)結(jié)構(gòu)要求比上述絕對專一性略低一些，它們能作用于一類化合物或一種化學(xué)鍵。 1） 鍵專一性 有的酶只作用于一定的鍵，而對鍵 兩端的基團(tuán)并無嚴(yán)格要求。 2）基團(tuán)專一性 另一些酶，除要求作用于一定的鍵以外，對鍵兩端的基團(tuán)還有一定要求，往往是對其中一個(gè)基

4、團(tuán)要求嚴(yán)格，對另一個(gè)基團(tuán)則要求不嚴(yán)格。6醫(yī)學(xué)PPT立體異構(gòu)專一性和幾何異構(gòu)專一性立體異構(gòu)專一性（旋光異構(gòu)專一性） 胰蛋白酶只作用于L氨基酸殘基構(gòu)成 的肽鍵。幾何異構(gòu)專一性 當(dāng)一種底物有幾何異構(gòu)體時(shí)，酶只選擇其中一種進(jìn)行作用。 7醫(yī)學(xué)PPT酶作用專一性機(jī)理三點(diǎn)附著學(xué)說 A.Ogster在研究甘油激酶催化甘油時(shí)提出的鎖與鑰匙學(xué)說 1894年德國化學(xué)家Fisher 提出的誘導(dǎo)契合學(xué)說 1958年，Koshland 提出的“剛性模板”8醫(yī)學(xué)PPT 酶作用專一性機(jī)理 鎖鑰學(xué)說：將酶的活性中心比喻作鎖孔，底物分子象鑰匙，底物能專一性地插入到酶的活性中心。 誘導(dǎo)契合學(xué)說：酶的活性中心在結(jié)構(gòu)上具柔性，底物接近

5、活性中心時(shí)，可誘導(dǎo)酶蛋白構(gòu)象發(fā)生變化，這樣就使使酶活性中心有關(guān)基團(tuán)正確排列和定向，使之與底物成互補(bǔ)形狀有機(jī)的結(jié)合而催化反應(yīng)進(jìn)行。9醫(yī)學(xué)PPT酶專一性的“鎖鑰學(xué)說”10醫(yī)學(xué)PPT酶專一性的“誘導(dǎo)契合學(xué)說”11醫(yī)學(xué)PPT酶活性的調(diào)節(jié)與控制調(diào)節(jié)酶的濃度通過激素調(diào)節(jié)酶活性反饋抑制調(diào)節(jié)酶活性抑制劑和激活劑對酶活性的調(diào)節(jié)其他調(diào)節(jié)方式 別構(gòu)調(diào)控、酶原的激活、酶的可逆共價(jià)修飾和同工酶12醫(yī)學(xué)PPT酶的化學(xué)本質(zhì) 具有催化活性的蛋白質(zhì)及部分核酸蛋白質(zhì)的依據(jù)：1）水解產(chǎn)物時(shí)氨基酸，且能被蛋白酶水解失活2）使之變性的因素為與蛋白質(zhì)相同3）酶是兩性電介質(zhì)4）膠體性質(zhì)5）化學(xué)成色反應(yīng)核酸：RNA，DNA具有剪切、修飾、加

6、工和催化分子間反應(yīng)等活性13醫(yī)學(xué)PPT據(jù)酶分子組成分類單純酶結(jié)合酶酶蛋白質(zhì)輔助因子金屬離子金屬有機(jī)物小分子有機(jī)物據(jù)酶蛋白特征分類單體酶寡聚酶多酶復(fù)合體酶的化學(xué)組成及類別14醫(yī)學(xué)PPT第二節(jié) 酶的命名和分類（略講）一、 命名：（一）習(xí)慣命名: 1961年以前的命名方式 原則根據(jù)酶作用的底物： 淀粉酶，蛋白酶（胃蛋白酶）根據(jù)酶催化反應(yīng)的性質(zhì)及類型： 水解酶，氧化酶結(jié)合：琥珀酸脫氫酶15醫(yī)學(xué)PPT（二）系統(tǒng)命名：以整體反應(yīng)為基礎(chǔ)，規(guī)定每種酶的名稱應(yīng)當(dāng)明確標(biāo)明酶的底物及催化反應(yīng)的性質(zhì)。 如果一種酶催化兩個(gè)底物起反應(yīng)，應(yīng)在他們的系統(tǒng)名稱中包括兩種底物名稱并以“：”將他們隔開（若底物之一是水時(shí)，水可略去）

7、 例：習(xí)慣名稱 系統(tǒng)名稱 催化的反應(yīng) 乙醇脫氫酶 乙醇：NAD氧化還原酶 乙醇+ NAD乙醛NADH脂肪酶 脂肪：水解酶 脂肪H2O脂肪酸甘油16醫(yī)學(xué)PPT二、國際系統(tǒng)分類法及編號(hào)*國際生物化學(xué)會(huì)酶學(xué)委員會(huì)（Enzyme Commsion）將酶分成六大類（P146148） 1.氧化還原酶類，2.轉(zhuǎn)移酶類，3.水解酶類 4.裂合酶類5.異構(gòu)酶類，6.合成酶類 *每一種酶有一個(gè)編號(hào),如乙醇脫氫酶EC 1. 1. 1. 27 大類 亞類 亞亞類 序號(hào)17醫(yī)學(xué)PPT 第三節(jié) 酶的作用機(jī)理一、 酶的結(jié)構(gòu)二、 酶原和酶原激活三、 酶的作用機(jī)制18醫(yī)學(xué)PPT酶的結(jié)構(gòu)酶活性部位 定義：特異的氨基酸殘基比較集中

8、的區(qū)域，即與酶活力直接相關(guān)的區(qū)域 組成：結(jié)合部位和催化部位 結(jié)合酶中的輔酶或輔基也參與活性中心的組成 主要有：His的咪唑基，Ser的羥基，Cys的巰基，Glu的 -羧基 負(fù)責(zé)與底物結(jié)合決定酶的專一性負(fù)責(zé)催化鍵的斷裂形成新鍵，決定酶的催化能力19醫(yī)學(xué)PPT酶的結(jié)構(gòu)酶活性部位特點(diǎn) *只占酶分子的小部分 *是一個(gè)三維實(shí)體 *誘導(dǎo)契合 *位于酶分子表面的裂縫內(nèi) *底物通過次級(jí)鍵較弱地結(jié)合到酶上 *具有柔性和可運(yùn)動(dòng)性實(shí)例；胰凝乳蛋白酶（chymotrypsin） 羧肽酶（ribonuclease）20醫(yī)學(xué)PPTAspHisSer胰凝乳蛋白酶的活性中心活性中心重要基團(tuán): His57 , Asp102 ,

9、 Ser19521醫(yī)學(xué)PPT為Tyr 248為Arg 145為Glu 270為底物ZnZn羧肽酶活性中心示意圖22醫(yī)學(xué)PPT酶的結(jié)構(gòu)酶活性中心的研究方法 *酶分子側(cè)鏈基團(tuán)的化學(xué)修飾法 *動(dòng)力學(xué)參數(shù)測定法 *X射線晶體結(jié)構(gòu)分析法 *定點(diǎn)誘變法23醫(yī)學(xué)PPT酶原和酶原激活酶原：無活性酶的前體稱為酶原酶原激活：由酶原轉(zhuǎn)變?yōu)橛谢钚悦傅倪^程（一）蛋白酶原激活（二）凝血酶原激活24醫(yī)學(xué)PPT酶催化的中間產(chǎn)物理論E+SP+ EES能量水平反應(yīng)過程GE1E2 酶（E）與底物（S）結(jié)合生成不穩(wěn)定的中間物（ES），再分解成產(chǎn)物（P）并釋放出酶，使反應(yīng)沿一個(gè)低活化能的途徑進(jìn)行，降低反應(yīng)所需活化能，所以能加快反應(yīng)速度

10、。25醫(yī)學(xué)PPT與酶的高效率、專一性有關(guān)的理論 1、 鄰近與定向效應(yīng) 2、 誘導(dǎo)契合與底物扭曲變形 3、 共價(jià)催化 4、 酸堿催化 5、微環(huán)境影響 6、金屬離子催化 7、多元催化和協(xié)同效應(yīng)實(shí)例: 胰凝乳蛋白酶 26醫(yī)學(xué)PPT鄰近與定向效應(yīng) 酶和底物結(jié)合形成復(fù)合物并催化形成產(chǎn)物得過程中,既包含酶對底物得專一性識(shí)別,又包含分子間反應(yīng)轉(zhuǎn)變?yōu)榉肿觾?nèi)反應(yīng)。這個(gè)過程中酶與底物存在鄰近效應(yīng)和定向效應(yīng)指酶與底物結(jié)合形成EI后，使底物和底物之間、酶得催化基團(tuán)與底物之間結(jié)合于同一分子上而使有效濃度得以極大提高，從而使反應(yīng)速率大大增加指底物分子以特定得方向?qū)Ｒ坏亟Y(jié)合于酶的活性中心時(shí)，他們發(fā)生反應(yīng)的概率就會(huì)顯著增加。

11、27醫(yī)學(xué)PPT共價(jià)催化定義：酶在催化反應(yīng)時(shí)，本身能放出或吸取電子并作用于底物的缺電子或負(fù)電子中心，并與底物形成共價(jià)連結(jié)的中間復(fù)合物。攻擊的基團(tuán)不同親核催化親電子催化28醫(yī)學(xué)PPT酸堿催化定義：酶在催化過程中，通過瞬時(shí)反應(yīng)向底物提供質(zhì)子或從反應(yīng)物接受質(zhì)子以穩(wěn)定過渡態(tài)，加速反應(yīng)的機(jī)制。酸催化:質(zhì)子供體堿崔化:質(zhì)子受體29醫(yī)學(xué)PPT胰凝乳蛋白酶分子中催化三聯(lián)體構(gòu)象His57Asp102Ser195Asp102His57Ser195His57102AspSer195A.酶分子中的電荷中繼網(wǎng)B.加上底物后，從Ser轉(zhuǎn)移一個(gè)質(zhì)子給His，帶正電荷的咪唑基通過帶負(fù)電荷的Asp靜電相互作用被穩(wěn)定Ser1951

12、02AspHis57底物30醫(yī)學(xué)PPT第四節(jié) 影響酶促反應(yīng)速度的因素 （酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)）一、酶促反應(yīng)速度的測定與酶的活力單位二、酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)31醫(yī)學(xué)PPT酶促反應(yīng)速度的測定與酶的活力單位1、酶促反應(yīng)速度的測定 初速度的概念2、酶活力3、酶活力的表示方法4、酶活力測定方法：終點(diǎn)法 動(dòng)力學(xué)法 檢測酶含量及存在，很難直接用酶的“量”（質(zhì)量、體積、濃度）來表示，而常用酶催化某一特定反應(yīng)的能力來表示酶量，即用酶的活力表示。 酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力稱酶活力，酶活力通常以最適條件下酶所催化的化學(xué)反應(yīng)的速度來確定。32醫(yī)學(xué)PPT酶活力測定方法 終點(diǎn)法: 酶反應(yīng)進(jìn)行到一定時(shí)間后終止其反應(yīng)，再用化學(xué)或物理方法

13、測定產(chǎn)物或反應(yīng)物量的變化。 動(dòng)力學(xué)法:連續(xù)測定反應(yīng)過程中產(chǎn)物底物或輔酶的變化量，直接測定出酶反應(yīng)的初速度。33醫(yī)學(xué)PPT 酶活力的表示方法活力單位（active unit） 習(xí)慣單位（U）: 底物(或產(chǎn)物)變化量 / 單位時(shí)間 國際單位（IU）: 1moL變化量 / 分鐘 Katal（Kat）：1moL變化量 / 秒比活力=總活力單位總蛋白mg數(shù)= U(或IU) mg蛋白量度酶催化能力大小轉(zhuǎn)換系數(shù)（Kcat） 底物（ moL）/ 秒每個(gè)酶分子量度酶純度比活力（specific activity）量度轉(zhuǎn)換效率34醫(yī)學(xué)PPT化學(xué)動(dòng)力學(xué)基礎(chǔ)1.反應(yīng)速率及其測定 反應(yīng)速率是以單位時(shí)間內(nèi)反應(yīng)物或生成物濃

14、度的改變來表示2.反應(yīng)分子數(shù)和反應(yīng)級(jí)數(shù) 反應(yīng)分子數(shù)是在反應(yīng)中真正相互作用的分子的數(shù)目 單分子反應(yīng)：僅有1個(gè)反應(yīng)的分子參加的反應(yīng) v=-dc/dt=kc 雙分子反應(yīng)：有兩個(gè)反應(yīng)物分子參加的反應(yīng) v=-dc/dt=kc1c2 反應(yīng)級(jí)數(shù):整個(gè)化學(xué)反應(yīng)的速率服從哪種分子反應(yīng)速率 方程式，則這個(gè)反應(yīng)即為幾級(jí)反應(yīng) 一級(jí)反應(yīng)，二級(jí)反應(yīng)，零級(jí)反應(yīng)35醫(yī)學(xué)PPT酶促反應(yīng)初速度的概念斜率=P/ t = V（初速度）Pt36醫(yī)學(xué)PPT影響對酶反應(yīng)速度的因素1、底物濃度2、酶濃度3、pH （最適 pH的概念）4、 溫度 （最適溫度的概念）5、激活劑6、抑制劑37醫(yī)學(xué)PPT底物濃度對酶反應(yīng)速度的影響1、酶反應(yīng)速度與底物

15、濃度的關(guān)系曲線 （MichaelisMenten曲線）2、米氏方程的提出及推導(dǎo)3、米氏常數(shù)的意義4、米氏常數(shù)的測定38醫(yī)學(xué)PPT酶反應(yīng)速度與底物濃度的關(guān)系曲線一級(jí)反應(yīng)混合級(jí)反應(yīng)零級(jí)反應(yīng)Vmax中間絡(luò)合物學(xué)說39醫(yī)學(xué)PPT酶促反應(yīng)的米氏方程及Km推導(dǎo)原則：從酶被底物飽和的現(xiàn)象出發(fā)，按照 “穩(wěn)態(tài)平 衡”假說的設(shè)想進(jìn)行推導(dǎo)。米氏方程:米氏常數(shù): E+S ES E+P k1k2k3k4Km=k1k2+k340醫(yī)學(xué)PPT米氏方程的推導(dǎo)令：將（4）代入（3），則：ES生成速度：，ES分解速度：即：則：(1)經(jīng)整理得：由于酶促反應(yīng)速度由ES決定，即，所以(2)將（2）代入（1）得：(3)當(dāng)酶反應(yīng)體系處于恒態(tài)

16、時(shí)：當(dāng)Et=ES時(shí)，(4)所以 E+S ES E+P k1K-1k2K-2Et-ESSES41醫(yī)學(xué)PPT米氏常數(shù)的意義* 當(dāng)v=Vmax/2時(shí)，Km=S（ Km的單位為濃度單位）* 是酶在一定條件下的特征物理常數(shù)，通過測定Km的數(shù)值，可鑒別酶。* 可近似表示酶和底物親合力，Km愈小，E對S的親合力愈大，Km愈大，E對S的親合力愈小。*在已知Km的情況下，應(yīng)用米氏方程可計(jì)算任意s時(shí)的v，或任何v下的s。（用Km的倍數(shù)表示） 練習(xí)題：已知某酶的Km值為0.05mol.L-1，要使此酶所催化的反應(yīng)速度達(dá)到最大反應(yīng)速度的80時(shí)底物的濃度應(yīng)為多少？ 42醫(yī)學(xué)PPT 米氏常數(shù)的測定基本原則： 將米氏方程變

17、化成相當(dāng)于y=ax+b的直線方程，再用作圖法求出Km。 例：雙倒數(shù)作圖法（Lineweaver-Burk法） 米氏方程的雙倒數(shù)形式： 1 Km 1 1 = . + v Vmax S Vmax 43醫(yī)學(xué)PPT酶動(dòng)力學(xué)的雙倒數(shù)圖線44醫(yī)學(xué)PPT酶濃度對酶促反應(yīng)速率的影響S E時(shí)，V與E成正比關(guān)系VK3SKm+SE45醫(yī)學(xué)PPTpH對酶反應(yīng)速度的影響過酸過鹼導(dǎo)致酶蛋白變性影響底物分子解離狀態(tài)影響酶分子解離狀態(tài)影響酶的活性中心構(gòu)象pH最適 pHv46醫(yī)學(xué)PPT溫度與酶反應(yīng)速度的關(guān)系 在達(dá)到最適溫度以前，反應(yīng)速度隨溫度升高而加快 酶是蛋白質(zhì)，其變性速度亦隨溫度上升而加快 酶的最適溫度不是一個(gè)固定不變的常

18、數(shù)v溫度47醫(yī)學(xué)PPT激活劑對酶作用的影響類別 金屬離子：K+、Na+、 Mg2+、Cu2+、Mn2+、Zn2+、Se3+ 、 Co2+、Fe2+ 陰離子： Cl-、Br- 有機(jī)分子 還原劑：抗壞血酸、半胱氨酸、谷胱甘肽 金屬螯合劑：EDTA凡是能提高酶活性的物質(zhì)，稱為酶的激活劑（activator）48醫(yī)學(xué)PPT 抑制劑對酶作用的影響 凡是使酶的必需基團(tuán)或酶的活性部位中的基團(tuán)的化學(xué)性質(zhì)改變而降低酶活力甚至使酶完全喪失活性的物質(zhì)，叫酶的抑制劑（inhibitor） 。 類型：不可逆抑制劑 可逆抑制劑 0vE123區(qū)分49醫(yī)學(xué)PPT抑制劑類型和特點(diǎn) 競爭性抑制劑可逆抑制劑 非競爭性抑制劑 反競爭

19、性抑制劑 非專一性不可逆抑制劑不可逆抑制劑 專一性不可逆抑制劑50醫(yī)學(xué)PPT+IEIESP+ EE+S競爭性抑制作用 實(shí)例：磺胺藥物的藥用機(jī)理H2N- -SO2NH2對氨基苯磺酰胺H2N- -COOH對氨基苯甲酸對氨基苯甲酸谷氨酸蝶呤葉酸51醫(yī)學(xué)PPT非競爭性抑制作用+IEI+SESIESP+ EE+S+I實(shí)例：重金屬離子（Cu2+、Hg2+、Ag+、Pb2+） 金屬絡(luò)合劑（EDTA、F-、CN-、N3-）52醫(yī)學(xué)PPT反競爭性抑制作用ESIESP+ EE+S+I53醫(yī)學(xué)PPT競爭性抑制作用非競爭性抑制作用競爭性非競爭性抑制作用機(jī)理示意圖底物與酶專一性結(jié)合54醫(yī)學(xué)PPT競爭性抑制曲線V=Vma

20、xEKm(1+I/Ki)+S55醫(yī)學(xué)PPT非競爭性抑制曲線V=VmaxE(Km+S)(1+I/Ki)56醫(yī)學(xué)PPT反競爭性抑制曲線V=VmaxEKm+S(1+I/Ki)57醫(yī)學(xué)PPT非專一性不可逆抑制劑 抑制劑作用于酶分子中的一類或幾類基團(tuán)，這些基團(tuán)中包含了必需基團(tuán)，因而引起酶失活。類型：58醫(yī)學(xué)PPT專一性不可逆抑制劑 這類抑制劑選擇性很強(qiáng)，它只能專一性地與酶活性中心的某些基團(tuán)不可逆結(jié)合，引起酶的活性喪失。 實(shí)例：有機(jī)磷殺蟲劑-Ser-OH-Ser-OPO-RO-ROPO-RO-ROX59醫(yī)學(xué)PPT第五節(jié) 酶的活性調(diào)節(jié)一、 別構(gòu)酶及酶的別構(gòu)（變構(gòu)）效應(yīng)二、 酶的多種分子形式 同工酶（isoe

21、nzyme）三、 酶原的激活60醫(yī)學(xué)PPT酶的別構(gòu)（變構(gòu)）效應(yīng)概念：有些酶分子表面除了具有活性中心外，還存在被稱為調(diào)節(jié)位點(diǎn)（或變構(gòu)位點(diǎn)）的調(diào)節(jié)物特異結(jié)合位點(diǎn)，調(diào)節(jié)物結(jié)合到調(diào)節(jié)位點(diǎn)上引起酶的構(gòu)象發(fā)生變化，導(dǎo)致酶的活性提高或下降，這種現(xiàn)象稱為別構(gòu)效應(yīng)（allosteric effect）,具有上述特點(diǎn)的酶稱別構(gòu)酶（allosteric enzyme）。實(shí)例：天冬氨酸轉(zhuǎn)氨甲酰酶 （anspartate transcarbamoylase，ATCase）別構(gòu)酶活性調(diào)節(jié)機(jī)理：序變模型和齊變模型61醫(yī)學(xué)PPT酶的別構(gòu)（變構(gòu)）效應(yīng)示意圖效應(yīng)劑別構(gòu)中心活性中心62醫(yī)學(xué)PPTa-非調(diào)節(jié)酶 b-正協(xié)同別構(gòu)酶 的S

22、形曲線 別構(gòu)酶的動(dòng)力學(xué)曲線63醫(yī)學(xué)PPTATCase的結(jié)構(gòu)及其催化鏈的別構(gòu)過度作用無催化活性構(gòu)象(T-型)CCCCCC R R R R R R有催化活性構(gòu)象(R-型) CCCCCCR R R R R RATP（正效應(yīng)劑）CTP（負(fù)效應(yīng)劑）64醫(yī)學(xué)PPT別構(gòu)酶的序變模型SSSSSSSSSSSSSS亞基全部處于R型亞基全部處于T型依次序變化65醫(yī)學(xué)PPT別構(gòu)酶的齊變模型SSSSSSSSSST狀態(tài)（對稱亞基）T狀態(tài)（對稱亞基）SSSS對稱亞基對稱亞基齊步變化66醫(yī)學(xué)PPT酶的多種分子形式同工酶 概念：存在于同一種屬或不同種屬，同一個(gè)體的不同組織或同一組織、同一細(xì)胞，具有不同分子形式但卻能催化相同的化

23、學(xué)反應(yīng)的一組酶，稱之為同工酶（isoenzyme） 類別：原級(jí)同工酶；次級(jí)同工酶 實(shí)例：乳酸脫氫酶 研究意義：作為遺傳的標(biāo)志；作為臨床診斷指標(biāo)；研究某些代謝調(diào)節(jié)機(jī)制67醫(yī)學(xué)PPT乳酸脫氫酶同工酶形成示意圖多肽亞基mRNA四聚體結(jié)構(gòu)基因a b乳酸脫氫酶同工酶電泳圖譜+H4MH3M2H2M3HM4點(diǎn)樣線68醫(yī)學(xué)PPT不同組織中LDH同工酶的電泳圖譜LDH1(H4)LDH2(H3M)LDH3(H2M2)LDH4(HM3)LDH5(M4)心肌 腎 肝 骨骼肌 血清-+原點(diǎn)69醫(yī)學(xué)PPT 酶 原 的 激 活 在體內(nèi)處于無活性狀態(tài)的酶前身物（酶原，zymogen）在一定條件下被修飾轉(zhuǎn)變成有活性的酶的過程稱

24、酶原的激活。其實(shí)質(zhì)是酶原被修飾時(shí)形成了正確的分子構(gòu)象和活性中心，由此可見酶分子的特定結(jié)構(gòu)和酶的活性中心的形成是酶分子具有催化活性的基本保證。實(shí)例：胰蛋白酶原的激活70醫(yī)學(xué)PPT胰蛋白酶原胰蛋白酶六肽腸激酶活性中心胰蛋白酶原的激活示意圖71醫(yī)學(xué)PPT第六節(jié) 酶工程簡介一、化學(xué)酶工程 天然酶 固定化酶 化學(xué)修飾酶 人工模擬酶二、生物酶工程 克隆酶 突變酶 新酶 將酶學(xué)和工程學(xué)相結(jié)合，產(chǎn)生了酶工程(enzyme engineering)這樣一個(gè)新的領(lǐng)域。酶工程主要研究酶的生產(chǎn)、純化、固定化技術(shù)、酶分子結(jié)構(gòu)的修飾和改造以及在工農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和理論研究等方面的應(yīng)用。72醫(yī)學(xué)PPT固定化酶 將水溶性酶用物理或化學(xué)方法處理，固定于高分子支持物(或載體)上而成為不溶于水，但仍有酶活性的一種酶制劑形式，稱固定化酶(immobilized enzyme)。包埋法 吸附法共價(jià)偶聯(lián)法交聯(lián)法73醫(yī)學(xué)PPT溴化氰亞氨碳酸基偶聯(lián)法OHOHBrCNH2OOOC=N-EO-CO-NH-EOHO-C-NH-E NHOHH2N-E