自身抗體的檢測

1、一、概述自身免疫耐受。自身免疫耐受。自身免疫自身免疫（autoimmunityautoimmunity）自身抗體自身抗體（autoantibodyautoantibody）或自身或自身致敏淋巴細(xì)胞致敏淋巴細(xì)胞自身免疫性疾病自身免疫性疾病二、自身抗體的檢測二、自身抗體的檢測（一）抗核抗體（一）抗核抗體 （antinuclear antibodyantinuclear antibody，ANAANA） 泛指抗各種泛指抗各種細(xì)胞核成分（細(xì)胞核成分（DNADNA，RNARNA，蛋白質(zhì)和酶）蛋白質(zhì)和酶）的抗體。的抗體。1 1、ANAANA的類型的類型（1 1）抗核蛋白抗體抗核蛋白抗體（2 2）抗）抗DN

2、ADNA抗體抗體抗雙鏈抗雙鏈DNADNA抗體（抗抗體（抗dsDNAdsDNA）抗單鏈抗單鏈DNADNA抗體（抗抗體（抗ssDNAssDNA）。）。（3 3）抗抗ENAENA抗體抗體 可提取性核抗原（可提取性核抗原（extractable nuclear extractable nuclear antigensantigens，ENAENA）2 2、ANAANA的檢測方法的檢測方法間接免疫熒光法間接免疫熒光法用小鼠肝切片或印片作為細(xì)胞核基質(zhì)，用小鼠肝切片或印片作為細(xì)胞核基質(zhì)，還可用核質(zhì)豐富的培養(yǎng)細(xì)胞如還可用核質(zhì)豐富的培養(yǎng)細(xì)胞如Hep-2Hep-2，作作為抗原。為抗原。用熒光顯微鏡觀察用熒光顯微鏡

3、觀察ANAANA熒光著染強(qiáng)度和免熒光著染強(qiáng)度和免疫熒光圖形。疫熒光圖形。稀釋待檢血清可檢測稀釋待檢血清可檢測ANAANA效價(jià)。效價(jià)。3.常見的常見的ANAANA圖形及臨床意義圖形及臨床意義均質(zhì)型均質(zhì)型（homogeneohomogeneousus，H H）斑點(diǎn)型斑點(diǎn)型（speckledspeckled，S S）核膜型核膜型（membranousmembranous，M M）核仁型核仁型（nucheolarnucheolar，N N）4.4.抗抗dsDNAdsDNA的檢測的檢測常用間接免常用間接免疫熒光法檢疫熒光法檢測，常用的測，常用的抗原基質(zhì)是抗原基質(zhì)是馬疫錐蟲或馬疫錐蟲或綠蠅短膜蟲。綠蠅短膜

4、蟲。（二）抗（二）抗ENAENA抗體譜抗體譜不同的自身免疫病可產(chǎn)生不同的不同的自身免疫病可產(chǎn)生不同的抗抗ENAENA抗體。通過檢測抗抗體。通過檢測抗ENAENA抗體抗體的類型及其組合，可綜合診斷自的類型及其組合，可綜合診斷自身免疫病的類型。身免疫病的類型。 1 1、檢測方法、檢測方法雙向免疫擴(kuò)散雙向免疫擴(kuò)散對(duì)流免疫電泳對(duì)流免疫電泳斑點(diǎn)酶免疫技術(shù)斑點(diǎn)酶免疫技術(shù)免疫印跡技術(shù)免疫印跡技術(shù)免疫印跡技術(shù)（最常用）免疫印跡技術(shù)（最常用）先將先將ENAENA混合抗原作凝膠電泳，混合抗原作凝膠電泳，分離開不同的區(qū)帶，然后把這些分離開不同的區(qū)帶，然后把這些區(qū)帶轉(zhuǎn)印到硝酸纖維膜上，加入?yún)^(qū)帶轉(zhuǎn)印到硝酸纖維膜上，加入

5、待檢血清，最后用酶標(biāo)待檢血清，最后用酶標(biāo)抗體使相抗體使相應(yīng)的抗原帶顯色應(yīng)的抗原帶顯色2 2、抗、抗ENAENA抗體的主要類型及抗體的主要類型及 臨床意臨床意義義（1 1）抗）抗SmSm抗體抗體 抗抗SmSm是是SLESLE的特異性標(biāo)志之一的特異性標(biāo)志之一 （2 2）抗核）抗核RNPRNP抗體（抗抗體（抗nRNPnRNP抗體）抗體）又稱抗又稱抗U U1 1RNPRNP抗體?？贵w。 抗抗U U1 1RNPRNP抗體是診斷混合性結(jié)締抗體是診斷混合性結(jié)締組織病組織病（ MCTD MCTD）的重要血清學(xué)的重要血清學(xué)依據(jù)，是依據(jù)，是MCTDMCTD的診斷標(biāo)準(zhǔn)之一的診斷標(biāo)準(zhǔn)之一。 （3 3）抗）抗SSA/R

6、oSSA/Ro和抗和抗SSB/LaSSB/La 這兩種抗體是干燥綜合癥這兩種抗體是干燥綜合癥（SSSS）患者最常見的兩種自身抗患者最常見的兩種自身抗體體（4 4）抗）抗J J0 0 -1-1抗體抗體 最常見于多發(fā)性肌炎（最常見于多發(fā)性肌炎（PMPM）患者?；颊?。（5 5）抗）抗Scl-70Scl-70抗體抗體 幾乎僅出現(xiàn)在幾乎僅出現(xiàn)在PSSPSS（進(jìn)行性進(jìn)行性系統(tǒng)性硬皮?。┗颊唧w內(nèi)，是系統(tǒng)性硬皮病）患者體內(nèi)，是PSSPSS的特征抗體的特征抗體（三）類風(fēng)濕因子（三）類風(fēng)濕因子（rheumatoid factorrheumatoid factor，RFRF）RFRF是以變性是以變性IgGIgG為靶

7、抗原的抗體，為靶抗原的抗體，它能與人或動(dòng)物的變性它能與人或動(dòng)物的變性IgGIgG結(jié)合，結(jié)合，而不與正常而不與正常IgGIgG結(jié)合，結(jié)合，RFRF主要出主要出現(xiàn)在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者?，F(xiàn)在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者。 RF RF的檢測最常用的檢測最常用IgGIgG致敏的膠乳致敏的膠乳顆粒凝集試驗(yàn)，或速度散射比濁顆粒凝集試驗(yàn)，或速度散射比濁法，但只能檢測法，但只能檢測IgMIgM類的類的RFRF。IgGIgG類，類，IgAIgA類和類和IgEIgE類類RFRF需需ELISAELISA等等方法檢測。方法檢測。（四）其他自身抗體四）其他自身抗體 1.1.抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體 （anineutro

8、phil cytoplasmic anineutrophil cytoplasmic antibodiesantibodies，ANCAANCA） 以人中性粒細(xì)胞胞質(zhì)為靶抗原，以人中性粒細(xì)胞胞質(zhì)為靶抗原，與臨床多種小血管炎性疾病有關(guān)。與臨床多種小血管炎性疾病有關(guān)。分胞質(zhì)型（分胞質(zhì)型（cANCAcANCA）和核周型和核周型（pANCApANCA）。）。可用可用ELISAELISA或間接免或間接免疫熒光法測定。疫熒光法測定。2.2.抗心磷脂抗體（抗心磷脂抗體（anti-anti-phospholipid antibodyphospholipid antibody，APLAAPLA）靶抗原是血漿中的

9、磷脂結(jié)合蛋白。靶抗原是血漿中的磷脂結(jié)合蛋白。APLAAPLA包括一組自身抗體，如抗心包括一組自身抗體，如抗心磷脂抗體（磷脂抗體（ACLAACLA），），抗磷脂酸抗抗磷脂酸抗體（體（APAAAPAA）和抗磷脂酰絲氨酸抗和抗磷脂酰絲氨酸抗體等。體等。3.3.抗平滑肌抗體（抗平滑肌抗體（anti-smooth anti-smooth muscle antibodymuscle antibody，ASMAASMA） 是自身免疫性肝炎的血清學(xué)標(biāo)志是自身免疫性肝炎的血清學(xué)標(biāo)志性抗體。常用間接免疫熒光分析性抗體。常用間接免疫熒光分析檢測。檢測。4.4.抗角蛋白抗體（抗角蛋白抗體（anti-keratin anti-keratin antibodyantibody，AKAAKA）主要見于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者，主要見于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者，對(duì)于早期診斷對(duì)于早期診斷RARA有重要意義。可有重要意義。可用間接免疫熒光法檢測。但敏感用間接免疫熒光法檢測。但敏感性較低。與性較低。與RFRF不平行。不平行。5.5.抗乙酰膽堿受體抗體抗乙酰膽堿受體抗體是重癥肌無力的標(biāo)志性自身抗體，是重癥肌無力的標(biāo)志性自身抗體，對(duì)重癥肌無力的診斷有特異性。對(duì)重癥肌無力的診斷有特異性?？捎每捎肊LISAELISA檢測。檢測。6