定31菊花的組織培養(yǎng)[通用]

1、3.1菊花的組織培養(yǎng)(一)、植物組織培養(yǎng)的基本過程1理論基礎(chǔ)：_。2細胞分化：植物的個體發(fā)育過程中，細胞在_、結(jié)構(gòu)、生理功能上出現(xiàn)_的過程。細胞的全能性形態(tài)穩(wěn)定性差異一、基礎(chǔ)知識3過程：_的植物組織或細胞脫分化,愈傷組織再分化,根、芽完整植株。離體離體的植物器官、組織、細胞脫分化愈傷組織再分化根、芽植物體植物組織培養(yǎng)的基本過程移栽(1)愈傷組織的特點：細胞排列疏松而無規(guī)則，是高度_的呈無定形狀態(tài)的_細胞。(2)脫（去）分化：由高度分化的植物組織或細胞產(chǎn)生_的過程。(3)再分化：_繼續(xù)培養(yǎng)，重新分化成根或芽等器官的過程。 (4)如何控制細胞的脫分化與去分化？液泡化薄壁愈傷組織愈傷組織閱讀32頁解

2、決下列問題：通過激素控制1外植體的選取不同植物的組織培養(yǎng)難度 _ 差別很大如煙草和胡蘿卜的組織培養(yǎng)較為容易,而枸杞愈傷組織的芽誘導(dǎo)比較難如菊花的組織培養(yǎng)，一般選擇_植株莖_。對于同一種植物材料，材料的_、 _等也會影響實驗結(jié)果。年齡保存時間的長短（二）影響植物組織培養(yǎng)的因素未開花上部新萌生的側(cè)枝 外植體的生理狀態(tài)是成功進行組織培養(yǎng)的重要條件之一。生長旺盛的嫩枝生理狀況好，容易誘導(dǎo)脫分化和再分化。思 考？ 在選取菊花莖段的時候，為什么要選取生長旺盛的嫩枝？2.培養(yǎng)基的配制常用的一種培養(yǎng)基為_其主要成分包括：_元素：C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S_元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I

3、、Co_ ：甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等_ ：生長素、細胞分裂素、赤霉素等MS培養(yǎng)基大量微量有機物植物激素思 考？ 各種營養(yǎng)物質(zhì)的作用嗎？同專題2中微生物培養(yǎng)基的配方相比，MS培養(yǎng)基的配方有哪些明顯的不同？ 微量元素和大量元素提供植物細胞生活所必需的無機鹽； 蔗糖提供碳源，同時能夠維持細胞的滲透壓； 甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是為了滿足離體植物細胞對特殊營養(yǎng)的需求。 微生物培養(yǎng)基以有機營養(yǎng)為主。與微生物的培養(yǎng)不同，MS培養(yǎng)基則需提供大量無機營養(yǎng)。 在植物組織培養(yǎng)的過程中，為什么需要無菌操作？思 考？ 植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗性差，對培養(yǎng)條件的要求較高。 用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)

4、基同樣適合于某些微生物的生長。使用順序?qū)嶒灲Y(jié)果先使用生長素，后使用細胞分裂素有利于_，但_先使用細胞分裂素，后使用生長素細胞既分裂又分化同時使用_提高細胞分裂細胞不分化分化頻率3.植物激素植物激素中_和_是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性因素。_、_以及_等，都會影響實驗結(jié)果。 生長素細胞分裂素植物激素的濃度使用的先后順序用量的比例生長素/細胞分裂素比值高時 促進_，抑制_生長素/細胞分裂素比值低時促進_，抑制_生長素/細胞分裂素比值適中時促進_ 根分化芽形成芽分化根形成促進愈傷組織生長使用量 實驗結(jié)果4.環(huán)境因素 (pH、溫度、光照)不同的植物對各種條件的要求往往_。 如進行菊花的組織培

5、養(yǎng)，一般將pH控制在_左右；溫度控制在_ ；并且每天用日光燈照射_ 。 不同5.81822 12h5.無菌環(huán)境在培養(yǎng)的整個過程中，都需要是一個無菌環(huán)境。無菌技術(shù)包括對_和_ 的消毒滅菌培養(yǎng)基外植體制備MS固體培養(yǎng)基外植體消毒 接種培養(yǎng)栽培移栽二、實驗操作（一）制備MS固體培養(yǎng)基 實驗室一般使用_保存的配制好的培養(yǎng)基母液來制備1.配制各種母液 配制母液時，大量元素濃縮_ ，微量元素濃縮_ ，常溫保存。激素類、維生素類以及用量比較小的有機物可以按照_的質(zhì)量濃度單獨配制母液。 用母液配制培養(yǎng)基時，需要根據(jù)各種母液的濃縮倍數(shù)，計算用量。1mg/ml410倍100倍二、實驗操作2.配制培養(yǎng)基。植物激素在

6、菊花組織培養(yǎng)中，可以不添加_ ，原因是菊花莖段組織培養(yǎng)_ 。比較容易配制培養(yǎng)液調(diào)PH培養(yǎng)基的分裝 3.滅菌將分裝好的培養(yǎng)基連同其他器械一起進行_。高壓蒸汽滅菌（二）外植體消毒 將菊花嫩枝莖段用流水沖洗后，用無菌吸水紙吸干外植體表面的水分，先用70%的酒精消毒67 s，再用_清洗，然后用0.1%的氯化汞溶液消毒12 min，最后再用無菌水至少清洗3次。流水沖洗酒精無菌水氯化汞無菌水濃度_搖動_次時間_s濃度_時間_min至少清洗_次漂凈_無菌水70%23670.1%123消毒液 不是。對外植體進行表面消毒時，既要考慮到消毒效果，又要考慮到植物的耐受能力。 在外植體消毒過程中，是不是強度越大越好，

7、為什么？ 思 考？（三）接種 接種操作都必須在_旁進行。將菊花莖段插入_時應(yīng)注意方向，不要倒插。酒精燈培養(yǎng)基（四）培養(yǎng) 接種后的錐形瓶最好放在_中培養(yǎng)。培養(yǎng)期間定期進行_，溫度控制在_，并且每天用日光燈光照_h。無菌箱消毒182212（五）移栽和栽培：移栽前用流水清洗根部的_，將幼苗移植到消過毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境下生活一段時間，等幼苗長壯后再移栽到土壤中。將幼苗移栽后，每天觀察并記錄幼苗生長情況，適時燒水，施肥，直至開花。培養(yǎng)基1、培養(yǎng)基的滅菌（高壓蒸汽滅菌）2、外植體的消毒（酒精、氯化汞）3、接種的無菌操作（酒精、酒精燈灼燒）4、無菌箱中的培養(yǎng)；5、移栽到消過毒的環(huán)境中生存一段時間。在整個

8、操作過程中，是如何來實現(xiàn)無菌環(huán)境的？思 考？你打算做幾組重復(fù)？你打算設(shè)置對照實驗嗎？ 每種材料或配方至少要做一組以上的重復(fù)。設(shè)置對照實驗可以取用一個經(jīng)過滅菌的裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，與接種操作后的錐形瓶一同培養(yǎng)，用以說明培養(yǎng)基制作合格，沒有被雜菌污染。思 考？植物組織培養(yǎng)過程:離體組織或細胞植物體脫分化細胞分裂素生長素愈傷組織芽根細胞分裂素生長素細胞分裂素生長素再分化植物細胞培養(yǎng)不需要光需要光(1)分離出來的胡蘿卜根細胞成為細胞團是通過_分裂方式來完成的。(2)細胞團中相同的細胞在發(fā)育成胚狀體和植株的過程中，形態(tài)結(jié)構(gòu)和生理功能逐漸向不同的方向發(fā)生了變化，這種現(xiàn)象叫做細胞的_。(3)本實驗說明了植物

9、細胞具有_。(4)圖示培育新的胡蘿卜植株的技術(shù)在生物學(xué)上屬于何種生殖方式？_。1.美國科學(xué)家將分離得到的成熟胡蘿卜根的韌皮部細胞進行培養(yǎng)，由單個細胞發(fā)育成完整的新植株，如圖所示，開花的胡蘿卜，胡蘿卜根的切片，從根的切片分離的細胞，由單個細胞分裂后形成的細胞團，胚狀體，試管植物。請分析：無性生殖有絲分化全能性A3.回答下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的問題。(1)用于植物組織培養(yǎng)的植物材料稱為_.(2)組織培養(yǎng)中的細胞，從分化狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)槲捶只癄顟B(tài)的過程稱為 _。(3)在再分化階段所用的培養(yǎng)基中，含有植物激素X和植物激素Y，逐漸改變培養(yǎng)基中這兩種植物激素的濃度比，未分化細胞群的變化情況如圖所示，據(jù)圖指出兩種激

10、素的不同濃度比與形成芽、根、愈傷組織的關(guān)系：脫分化外植體當(dāng)植物激素X與植物激素Y的濃度比等于1時，_；_。(4)若植物激素Y是生長素，在植物組織培養(yǎng)中其主要作用是_；則植物激素X的名稱是_。(5)生產(chǎn)上用試管苗保留植物的優(yōu)良性狀，其原因是_。未分化細胞群經(jīng)分裂形成愈傷組織當(dāng)植物激素X與植物激素Y的濃度比大于1時，未分化細胞群分化形成芽當(dāng)植物激素X與植物激素Y的濃度比小于1時，未分化細胞群分化形成根促進細胞的生長、分裂和分化細胞分裂素組織培養(yǎng)形成試管苗的過程屬于無性繁殖，后代不發(fā)生性狀分離【解析】本題主要考查植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識。(1)用于植物組織培養(yǎng)的材料叫外植體。(2)植物組織培養(yǎng)的核心過程是脫分化與再分化，脫分化指由分化狀態(tài)變?yōu)槲捶只癄顟B(tài)，再分化指由未分化狀態(tài)變?yōu)榉只癄顟B(tài)。(3)仔細分析所給示意圖，可知植物激素X與植物激素Y濃度比為l時，利于愈傷組織的形成，大于l時利于細胞群分化出芽，小于1時利于細胞群分化出根。(4)生長素在植物組織培養(yǎng)中主要作用是促進細胞生長、分裂和分化，植物組織培養(yǎng)過程中除需要生長素外還需細胞分裂素，二者