第七節(jié)-實驗室操作規(guī)范與安全(1205)

1、單擊此處添課程名醫(yī)學科研方法概論1單擊此處添課程名實驗室操作規(guī)范與安全實驗室操作規(guī)范與安全Manipulation & Biosafty in Biolaboratories2單擊此處添課程名3 實驗室規(guī)章制度實驗室規(guī)章制度 微生物和生物醫(yī)學實驗室生物安全通用準則微生物和生物醫(yī)學實驗室生物安全通用準則 實驗室感染事件四種類型實驗室感染事件四種類型 實驗室生物安全實驗室生物安全 生物危險度評估生物危險度評估 生物危害程度的分級生物危害程度的分級 生物安全水平分級生物安全水平分級 動物實驗室的生物安全動物實驗室的生物安全 對生物恐怖活動的防范對生物恐怖活動的防范 生物恐怖威脅的分級生物恐怖

2、威脅的分級 A級生物武器級生物武器 同位素的實驗室操作規(guī)范與安全同位素的實驗室操作規(guī)范與安全本節(jié)主要內容本節(jié)主要內容單擊此處添課程名4Biological laboratories are special, often unique work environments that may pose identifiable infectious disease risks to persons in or near them. Infections have been contracted in the laboratory throughout the history of microbiol

3、ogy. 生物實驗室是特別的，獨特的工作環(huán)境經常會對在生物實驗室是特別的，獨特的工作環(huán)境經常會對在其中或附近的人員產生可確認的傳染性疾病風險。其中或附近的人員產生可確認的傳染性疾病風險。在整個微生物學史中，實驗室中一直發(fā)生著感染事在整個微生物學史中，實驗室中一直發(fā)生著感染事件。件。單擊此處添課程名5實驗室感染事件時有發(fā)生，主要是因為從事專職實驗室感染事件時有發(fā)生，主要是因為從事專職微生物研究的人員比其他工作人員有更多接觸病微生物研究的人員比其他工作人員有更多接觸病原微生物的機會，稍有疏忽大意，就可能被試驗原微生物的機會，稍有疏忽大意，就可能被試驗的對象所感染。有人統(tǒng)計，從事病原微生物研究的對象

4、所感染。有人統(tǒng)計，從事病原微生物研究的工作人員傳染病發(fā)生率比普通人群高的工作人員傳染病發(fā)生率比普通人群高57倍。倍。實驗室感染事件的發(fā)生有可能成為傳染源，造成實驗室感染事件的發(fā)生有可能成為傳染源，造成危害公眾健康的嚴重后果。因此必須引起重視。危害公眾健康的嚴重后果。因此必須引起重視。單擊此處添課程名6 建立健全實驗室各種規(guī)章制度是科研工作有序進行的必建立健全實驗室各種規(guī)章制度是科研工作有序進行的必要前提。要前提。實驗室規(guī)章制度一般包括：實驗室規(guī)章制度一般包括： 人員規(guī)章制度，包括培訓制度。人員規(guī)章制度，包括培訓制度。 儀器使用制度。儀器使用制度。 動物使用制度。動物使用制度。 藥品使用及保管制

5、度。藥品使用及保管制度。 實驗室環(huán)境與生物安全制度。實驗室環(huán)境與生物安全制度。 緊急情況下應急制度。例如：生物實驗室里應備有急緊急情況下應急制度。例如：生物實驗室里應備有急救藥劑和用品如：創(chuàng)可貼，紗布，燙傷藥品等。救藥劑和用品如：創(chuàng)可貼，紗布，燙傷藥品等。單擊此處添課程名7 生物安全制度是所有制度中的最重要的制度，我生物安全制度是所有制度中的最重要的制度，我國也和其他國家一樣制訂了本項制度。國也和其他國家一樣制訂了本項制度。 中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準微生物和生物醫(yī)微生物和生物醫(yī)學實驗室生物安全通用準則學實驗室生物安全通用準則(WS 2332002) 該該通用準則是以

6、美國通用準則是以美國CDC/NIH微生物和生物醫(yī)學微生物和生物醫(yī)學實驗室的生物安全實驗室的生物安全第四版為藍本制定的。第四版為藍本制定的。單擊此處添課程名8微生物和生物醫(yī)學實驗室的生物安全微生物和生物醫(yī)學實驗室的生物安全基本內容基本內容 生物安全防護的基本原則、實驗室的分類、分級及生物安全防護的基本原則、實驗室的分類、分級及適用范圍、一般生物安全防護實驗室的基本要求、實驗適用范圍、一般生物安全防護實驗室的基本要求、實驗脊椎動物生物安全防護實驗室、生物危險標志及使用、脊椎動物生物安全防護實驗室、生物危險標志及使用、新建三級和四級生物安全防護實驗室的驗收和現(xiàn)有生物新建三級和四級生物安全防護實驗室的

7、驗收和現(xiàn)有生物安全防護實驗室的檢測、現(xiàn)有三級和四級生物安全實驗安全防護實驗室的檢測、現(xiàn)有三級和四級生物安全實驗室的使用和維護、附錄室的使用和維護、附錄A安全操作規(guī)程、附錄安全操作規(guī)程、附錄B二級生物二級生物安全柜的現(xiàn)場檢測、附錄安全柜的現(xiàn)場檢測、附錄C各國的微生物與生物安全防各國的微生物與生物安全防護實驗室適用級別表等。護實驗室適用級別表等。單擊此處添課程名9典型案例典型案例 安徽患者宋某和北京患者楊某曾同在中國疾病預防控制安徽患者宋某和北京患者楊某曾同在中國疾病預防控制中心病毒病預防控制所形態(tài)實驗室工作，專家初步判定，中心病毒病預防控制所形態(tài)實驗室工作，專家初步判定，此次沙斯疫情可能源于實驗

8、室工作人員感染。此次沙斯疫情可能源于實驗室工作人員感染。 在新加坡的在新加坡的2003年年9月，一名月，一名27歲的實驗室研究者感染沙歲的實驗室研究者感染沙斯。斯。 在同年的在同年的12月，一位月，一位44歲的臺灣軍事科學家也在實驗室歲的臺灣軍事科學家也在實驗室感染沙斯。幸好，這都是少數的沙斯個案。感染沙斯。幸好，這都是少數的沙斯個案。 單擊此處添課程名10 美國一實驗室感染黑死?。ㄊ笠撸┑娜粚嶒炇笙侣洳幻绹粚嶒炇腋腥竞谒啦。ㄊ笠撸┑娜粚嶒炇笙侣洳幻髅? 這三只老鼠是供新澤西醫(yī)學與牙科大學校園里的公共這三只老鼠是供新澤西醫(yī)學與牙科大學校園里的公共衛(wèi)生研究院為聯(lián)邦政府進行生物反恐研究用的，

9、黑死病衛(wèi)生研究院為聯(lián)邦政府進行生物反恐研究用的，黑死病的一種癥狀，就是患者的皮膚上會出許多黑斑，所以這的一種癥狀，就是患者的皮膚上會出許多黑斑，所以這種特殊的瘟疫被人們叫做種特殊的瘟疫被人們叫做“黑死病黑死病”。對于那些感染上。對于那些感染上該病的患者來說，痛苦該病的患者來說，痛苦 . 在在1348年年-1350年間，總共有年間，總共有2500萬歐洲人死于黑死病。萬歐洲人死于黑死病。單擊此處添課程名11實驗室感染事件有四種類型實驗室感染事件有四種類型 第一種是事故性感染，一般是因為試驗人員操作過程中第一種是事故性感染，一般是因為試驗人員操作過程中的疏忽，使本來接觸不到的微生物污染環(huán)境，直接或間

10、的疏忽，使本來接觸不到的微生物污染環(huán)境，直接或間接感染實驗人員。接感染實驗人員。 1956年前蘇聯(lián)的一個實驗室中，有年前蘇聯(lián)的一個實驗室中，有9支裝有委內瑞拉馬腦支裝有委內瑞拉馬腦炎病毒鼠腦的安瓿被打破。事后沒能很好地進行處理及炎病毒鼠腦的安瓿被打破。事后沒能很好地進行處理及采取必要的措施，也未進行徹底消毒，結果在幾天內造采取必要的措施，也未進行徹底消毒，結果在幾天內造成成24名工作人員感染。名工作人員感染。 單擊此處添課程名12 第二種是實驗室動物引起的感染，是由于實驗人員接觸了第二種是實驗室動物引起的感染，是由于實驗人員接觸了被微生物感染的實驗動物導致的感染。被微生物感染的實驗動物導致的感

11、染。 例如在例如在2009年我國沈陽的某高校在使用大白鼠進行試驗時，年我國沈陽的某高校在使用大白鼠進行試驗時，有兩名學生被大白鼠咬傷，還有一些學生給實驗的老鼠放有兩名學生被大白鼠咬傷，還有一些學生給實驗的老鼠放血、解剖。在實驗過程中，這些學生均未按照要求戴手套血、解剖。在實驗過程中，這些學生均未按照要求戴手套操作，結果在操作，結果在29名實驗人員中造成名實驗人員中造成9人感染了流行性出血人感染了流行性出血熱。熱。 單擊此處添課程名13 第三種類型是氣溶膠導致的感染，是由于實驗室中的病原第三種類型是氣溶膠導致的感染，是由于實驗室中的病原微生物以氣溶膠的形式飄散在空氣中，人呼吸了這種空氣微生物以氣

12、溶膠的形式飄散在空氣中，人呼吸了這種空氣造成的感染。造成的感染。 氣溶膠氣溶膠(aerosol) 指固體或指固體或/和液體微粒穩(wěn)定地懸浮于氣體介質中形成的分散體系。其中和液體微粒穩(wěn)定地懸浮于氣體介質中形成的分散體系。其中的氣體介質稱為連續(xù)相，通常為空氣；微粒的氣體介質稱為連續(xù)相，通常為空氣；微粒(particles)稱為分散相。稱為分散相。 最嚴重的一次實驗室氣溶膠感染事故是最嚴重的一次實驗室氣溶膠感染事故是1961年在莫斯科的一家研年在莫斯科的一家研究所發(fā)生的。他們的實驗人員從流行性出血熱疫區(qū)捕捉到一些野究所發(fā)生的。他們的實驗人員從流行性出血熱疫區(qū)捕捉到一些野鼠帶回實驗室，由于疏忽而把這些野

13、鼠放在了室內暴露的場所。鼠帶回實驗室，由于疏忽而把這些野鼠放在了室內暴露的場所。過了不久，該實驗室中有過了不久，該實驗室中有63人出現(xiàn)發(fā)熱的癥狀，開始被誤診為流人出現(xiàn)發(fā)熱的癥狀，開始被誤診為流感，感，1周內又增加了周內又增加了30人，才開始懷疑到是流行性出血熱。本次事人，才開始懷疑到是流行性出血熱。本次事故被認為是野鼠身上帶有的出血熱病毒以氣溶膠的形式污染了空故被認為是野鼠身上帶有的出血熱病毒以氣溶膠的形式污染了空氣所致。氣所致。單擊此處添課程名14 第四種類型是人為破壞，生物武器可以說是一種第四種類型是人為破壞，生物武器可以說是一種人為的實驗室感染。人為的實驗室感染。 日本侵華戰(zhàn)爭時期的日本

14、侵華戰(zhàn)爭時期的731細菌部隊在中國犯下了細菌部隊在中國犯下了制造實驗室感染和細菌武器的滔天罪行。制造實驗室感染和細菌武器的滔天罪行。2001年年以來在美國境內屢屢制造炭疽的恐慌事件，造成以來在美國境內屢屢制造炭疽的恐慌事件，造成幾十人染病，數人死亡，美國白宮和國會先后成幾十人染病，數人死亡，美國白宮和國會先后成為被襲擊的目標?，F(xiàn)已有證據表明，該事件是來為被襲擊的目標?，F(xiàn)已有證據表明，該事件是來自美國軍隊的生化實驗室。自美國軍隊的生化實驗室。單擊此處添課程名15一、生物危害評估一、生物危害評估 當實驗室活動涉及傳染或潛在傳染性生物因當實驗室活動涉及傳染或潛在傳染性生物因子時，應進行危害程度評估。

15、危害程度評估應由子時，應進行危害程度評估。危害程度評估應由適當的有經驗的專業(yè)人員進行。適當的有經驗的專業(yè)人員進行。 實驗室生物安全實驗室生物安全單擊此處添課程名16 危害程度評估所涉及的內容：危害程度評估所涉及的內容： 生物因子的種類（已知的、未知的、基因生物因子的種類（已知的、未知的、基因修飾的或未知傳染性的生物材料）、來源、傳修飾的或未知傳染性的生物材料）、來源、傳染性、致病性、傳播途徑、在環(huán)境中的穩(wěn)定性、染性、致病性、傳播途徑、在環(huán)境中的穩(wěn)定性、感染劑量、濃度、動物實驗數據、預防和治療。感染劑量、濃度、動物實驗數據、預防和治療。單擊此處添課程名172. 生物危險度評估生物危險度評估1）微

16、生物的致病性和感染數量微生物的致病性和感染數量 2）暴露的潛在后果）暴露的潛在后果3）自然感染途徑）自然感染途徑4）實驗室操作所致的其他感染途徑（非消化道途）實驗室操作所致的其他感染途徑（非消化道途徑、空氣傳播、食入）徑、空氣傳播、食入）5）微生物在環(huán)境中的穩(wěn)定性）微生物在環(huán)境中的穩(wěn)定性 單擊此處添課程名186）所操作微生物的濃度和濃縮標本的容量）所操作微生物的濃度和濃縮標本的容量7）適宜宿主（人或動物）的存在）適宜宿主（人或動物）的存在8）從動物研究和實驗室感染報告或臨床報告中得）從動物研究和實驗室感染報告或臨床報告中得到的信息到的信息9）計劃進行的實驗室操作（如超聲處理、氣溶膠）計劃進行的

17、實驗室操作（如超聲處理、氣溶膠化、離心等）化、離心等）10）可能會擴大微生物的宿主范圍或改變微生物對）可能會擴大微生物的宿主范圍或改變微生物對于已知有效治療方案敏感性的所有基因技術于已知有效治療方案敏感性的所有基因技術11）當地是否能進行有效的預防或治療干預）當地是否能進行有效的預防或治療干預單擊此處添課程名19二、生物危害程度的分級二、生物危害程度的分級根據對個體和群體的危害性分四級：根據對個體和群體的危害性分四級：級：指危害性最低的病毒、細菌、真菌和寄生級：指危害性最低的病毒、細菌、真菌和寄生 蟲等生物因子；蟲等生物因子；級：指中等危害的生物因子，多為條件致病菌或級：指中等危害的生物因子，

18、多為條件致病菌或機會致病菌；機會致病菌；級：指能引起個體的嚴重感染，但不易在人群中級：指能引起個體的嚴重感染，但不易在人群中傳播擴散的生物因子；可用抗生素治療；傳播擴散的生物因子；可用抗生素治療；級：指能引起個體和群體嚴重感染，難治療。級：指能引起個體和群體嚴重感染，難治療。單擊此處添課程名20四級操作規(guī)范四級操作規(guī)范 除下列修改以外，應采用三級生物安全水平的操作除下列修改以外，應采用三級生物安全水平的操作規(guī)范：規(guī)范： 實行雙人工作制，任何情況下嚴禁任何人單獨在實驗室實行雙人工作制，任何情況下嚴禁任何人單獨在實驗室內工作。這一點在防護服型四級生物安全水平實驗室中內工作。這一點在防護服型四級生物

19、安全水平實驗室中工作時尤其重要。工作時尤其重要。 在進入實驗室之前以及離開實驗室時，要求更換全部衣在進入實驗室之前以及離開實驗室時，要求更換全部衣服和鞋子。服和鞋子。 工作人員要接受人員受傷或疾病狀態(tài)下緊急撤離程序的工作人員要接受人員受傷或疾病狀態(tài)下緊急撤離程序的培訓。培訓。 在四級生物安全水平的最高防護實驗室中的工作人員與在四級生物安全水平的最高防護實驗室中的工作人員與實驗室外面的支持人員之間，必須建立常規(guī)情況和緊急實驗室外面的支持人員之間，必須建立常規(guī)情況和緊急情況下的聯(lián)系方法。情況下的聯(lián)系方法。單擊此處添課程名21三、生物安全水平分級及相應的實驗設備要求三、生物安全水平分級及相應的實驗設

20、備要求生物安全水平生物安全水平(biosafety level, BSL)分級：分級：1. BSL-1實驗室：基礎實驗室，無特殊要求。實驗室：基礎實驗室，無特殊要求。 適用于本科生和實驗人員繼續(xù)培訓的教學實驗室，以及適用于本科生和實驗人員繼續(xù)培訓的教學實驗室，以及處理那些已熟悉其特征、但通常對健康成人不致病的活微生處理那些已熟悉其特征、但通常對健康成人不致病的活微生物的實驗室。許多病原體屬機會性病原體，可使兒童、老年物的實驗室。許多病原體屬機會性病原體，可使兒童、老年人以及免疫缺陷或兔疫抑制患者引起感染。通過多次動物體人以及免疫缺陷或兔疫抑制患者引起感染。通過多次動物體內傳代而得到的減毒株，亦

21、屬于這一類，但不應將免疫株簡內傳代而得到的減毒株，亦屬于這一類，但不應將免疫株簡單地看做無毒株單地看做無毒株。單擊此處添課程名BSL一級水平代表了防擴散的基本水平，它依賴于無特殊一級水平代表了防擴散的基本水平，它依賴于無特殊初級或二級屏障存在的標準微生物學操作，而不是簡單地初級或二級屏障存在的標準微生物學操作，而不是簡單地依賴于洗手盆等清潔設施。依賴于洗手盆等清潔設施。2. BSL-2實驗室：基礎實驗室。配備高壓滅菌設備，實驗室：基礎實驗室。配備高壓滅菌設備，著專用工作服，帶乳膠手套，生物安全柜著專用工作服，帶乳膠手套，生物安全柜(A2級級)內內操作。操作。 適用于臨床、診斷、教學和其他處理多

22、種具中等危險適用于臨床、診斷、教學和其他處理多種具中等危險的當地病原體的當地病原體(存在于本社區(qū)并引起不同程度的人類疾病存在于本社區(qū)并引起不同程度的人類疾病)的的實驗室。乙肝病毒、實驗室。乙肝病毒、HIV、沙門氏菌以及弓形體等便是這、沙門氏菌以及弓形體等便是這種防擴散水平的代表微生物。種防擴散水平的代表微生物。單擊此處添課程名 BSL-2級適用于對人血液、體液、組織或原代人級適用于對人血液、體液、組織或原代人細胞系等未知其傳染病原體存在與否的標本進行細胞系等未知其傳染病原體存在與否的標本進行的操作。二級屏障如洗手盆和廢物消毒設施必須的操作。二級屏障如洗手盆和廢物消毒設施必須完備，以減少潛在的環(huán)

23、境污染。完備，以減少潛在的環(huán)境污染。單擊此處添課程名24單擊此處添課程名2525單擊此處添課程名2626單擊此處添課程名27單擊此處添課程名28單擊此處添課程名29單擊此處添課程名生物安全柜生物安全柜一級、二級和三級三種類型一級、二級和三級三種類型一級生物安全柜一級生物安全柜 可保護工作人員和環(huán)境而不保護樣品。其氣可保護工作人員和環(huán)境而不保護樣品。其氣流原理和實驗室通風櫥基本相同，不同之處在于流原理和實驗室通風櫥基本相同，不同之處在于排氣口安裝有高效空氣過濾器排氣口安裝有高效空氣過濾器(HEPA過濾器過濾器)，將，將外排氣流過濾進而防止微生物氣溶膠擴散造成污外排氣流過濾進而防止微生物氣溶膠擴散

24、造成污染。一級生物安全柜本身無風機，依賴外接通風染。一級生物安全柜本身無風機，依賴外接通風管中的風機帶動氣流，由于不能保護柜內產品，管中的風機帶動氣流，由于不能保護柜內產品，目前已較少使用。目前已較少使用。單擊此處添課程名二級生物安全柜二級生物安全柜 依照入口氣流風速、排氣方式和循環(huán)方式可分為依照入口氣流風速、排氣方式和循環(huán)方式可分為4個級別：個級別：A1型，型，A2型，型，B1型和型和B2型。所有的二級生物安全柜都可提型。所有的二級生物安全柜都可提供工作人員、環(huán)境和產品的保護。適用于供工作人員、環(huán)境和產品的保護。適用于生物危險度生物危險度1、2、3級的媒質操作。級的媒質操作。三級生物安全柜三

25、級生物安全柜 是為生物安全防護等級為是為生物安全防護等級為4級實驗室而設計的，柜體完級實驗室而設計的，柜體完全氣密，工作人員通過連接在柜體的手套進行操作，俗稱手全氣密，工作人員通過連接在柜體的手套進行操作，俗稱手套箱套箱(Golvebox)，試驗品通過雙門的傳遞箱進出安全柜以確，試驗品通過雙門的傳遞箱進出安全柜以確保不受污染，適用于高風險的生物試驗，如進行保不受污染，適用于高風險的生物試驗，如進行SARS、埃、埃博拉病毒相關實驗等博拉病毒相關實驗等。適用于適用于生物危險度生物危險度1、2、3、4級的媒級的媒質操作質操作 。單擊此處添課程名生物安全柜與超凈工作臺的區(qū)別生物安全柜與超凈工作臺的區(qū)別

26、 適用范圍適用范圍 生物安全柜生物安全柜：操作原代培養(yǎng)物、菌毒株以及診斷性標本等具：操作原代培養(yǎng)物、菌毒株以及診斷性標本等具有感染性的實驗材料有感染性的實驗材料超凈工作臺超凈工作臺：一般細菌、細胞實驗：一般細菌、細胞實驗 功能功能 生物安全柜生物安全柜：保護操作者本人、實驗室環(huán)境以及實驗材料，：保護操作者本人、實驗室環(huán)境以及實驗材料，有效減少由于氣溶膠暴露所造成的實驗室感有效減少由于氣溶膠暴露所造成的實驗室感染以及培養(yǎng)物交叉污染，同時也能保護工作染以及培養(yǎng)物交叉污染，同時也能保護工作環(huán)境環(huán)境超凈工作臺超凈工作臺：除去大于：除去大于0.3 m的塵埃、真菌和細菌孢子等，的塵埃、真菌和細菌孢子等，保

27、護樣品不被污染保護樣品不被污染單擊此處添課程名3333單擊此處添課程名34B2 型型生生物物安安全全柜柜單擊此處添課程名35單擊此處添課程名3. BSL-3 實驗室：高度安全實驗室實驗室：高度安全實驗室 適用于臨床、診斷、教學、科研或生產設施適用于臨床、診斷、教學、科研或生產設施等，涉及內源或外源性的具有潛在呼吸道傳染性等，涉及內源或外源性的具有潛在呼吸道傳染性的病原體，且這些病原體可能引起嚴重的致死性的病原體，且這些病原體可能引起嚴重的致死性感染。結核分枝桿菌、圣路易斯腦炎病毒以及貝感染。結核分枝桿菌、圣路易斯腦炎病毒以及貝納柯克斯體等是應用納柯克斯體等是應用3級生物安全水平的代表。進級生物

28、安全水平的代表。進行這些病原體操作的人員主要危險源于經皮膚破行這些病原體操作的人員主要危險源于經皮膚破損處自身接種、經口攝人和吸人傳染性氣溶膠。損處自身接種、經口攝人和吸人傳染性氣溶膠。單擊此處添課程名在在BSL-3級水平，防范重點在于，通過初級和二級級水平，防范重點在于，通過初級和二級屏障保護實驗室附近人員、社區(qū)及環(huán)境避免受傳屏障保護實驗室附近人員、社區(qū)及環(huán)境避免受傳染性氣溶膠的污染。這一安全水平的二級屏障包染性氣溶膠的污染。這一安全水平的二級屏障包括受控的實驗室進入通道和通風設施，從而將釋括受控的實驗室進入通道和通風設施，從而將釋放出去的傳染性氣溶膠減少到最低程度。放出去的傳染性氣溶膠減少

29、到最低程度。單擊此處添課程名38BSL-3 實驗室實驗室選址：建筑物中可隔離的區(qū)域或獨立建筑物選址：建筑物中可隔離的區(qū)域或獨立建筑物分布：清潔區(qū)、半污染區(qū)、污染區(qū)，各區(qū)之間設緩分布：清潔區(qū)、半污染區(qū)、污染區(qū)，各區(qū)之間設緩沖區(qū)沖區(qū)通風：獨立的負壓通風保護系統(tǒng)，通風：獨立的負壓通風保護系統(tǒng)， 氣流方向：清潔區(qū)氣流方向：清潔區(qū)半污染區(qū)半污染區(qū)污染區(qū)污染區(qū)安全柜：安全柜：B2級級單擊此處添課程名4. BSL-4 實驗室：最實驗室：最(高度高度)安全實驗室安全實驗室 適用于進行非常危險的外源性病原體的操作，適用于進行非常危險的外源性病原體的操作，這些病原體對個體有很高的致死性，并且可通過空這些病原體對個

30、體有很高的致死性，并且可通過空氣途徑進行傳播，同時對這些病原體尚無有效的疫氣途徑進行傳播，同時對這些病原體尚無有效的疫苗域治療措施。那些與苗域治療措施。那些與BSL-4級水平病原體具有相級水平病原體具有相似或相同特點的病原體，在其被鑒定之前，也應該似或相同特點的病原體，在其被鑒定之前，也應該按此級水平進行操作。當有足夠的鑒定資料時，可按此級水平進行操作。當有足夠的鑒定資料時，可仍然按此水平，或根據已有的資料適當降低安全水仍然按此水平，或根據已有的資料適當降低安全水平。馬爾堡病或剛果克里米亞出血熱等應在平。馬爾堡病或剛果克里米亞出血熱等應在BSL-4級水平進行操作。級水平進行操作。單擊此處添課程

31、名進行進行BSL-4級水平相關病原體操作的人員，其主級水平相關病原體操作的人員，其主要危險是通過呼吸道吸入傳染性氣溶膠、通過粘要危險是通過呼吸道吸入傳染性氣溶膠、通過粘膜或破損的皮膚接觸到傳染性液滴以及自動接種。膜或破損的皮膚接觸到傳染性液滴以及自動接種。凡涉及傳染性材料、分離物和經自然或實驗途徑凡涉及傳染性材料、分離物和經自然或實驗途徑感染的動物的操作，均對實驗人員、社區(qū)和環(huán)境感染的動物的操作，均對實驗人員、社區(qū)和環(huán)境造成很大的感染危險。實驗室人員與傳染性氣溶造成很大的感染危險。實驗室人員與傳染性氣溶膠的完全隔離，主要是通過應用三類生物安全櫥膠的完全隔離，主要是通過應用三類生物安全櫥或正壓供

32、氣全身防護服實現(xiàn)的。或正壓供氣全身防護服實現(xiàn)的。單擊此處添課程名41BSL-4 實驗室實驗室選址：遠離人口密集區(qū)，獨立建筑，周圍有選址：遠離人口密集區(qū)，獨立建筑，周圍有 密封的安全隔離帶密封的安全隔離帶著裝：正壓防護服著裝：正壓防護服安全柜：安全柜： 型型(全密封型全密封型)單擊此處添課程名42III級BSC單擊此處添課程名43正正壓壓防防護護服服單擊此處添課程名44四、個人生物安全防護裝備四、個人生物安全防護裝備實驗室防護服實驗室防護服面部防護：安全護目鏡、面罩面部防護：安全護目鏡、面罩手套：乳膠手套手套：乳膠手套呼吸防護：口罩呼吸防護：口罩單擊此處添課程名45五、安全工作行為五、安全工作行

33、為1. 有相應的危害分級標準和與之相應的實驗室條有相應的危害分級標準和與之相應的實驗室條件；件；2. 對工作人員進行生物安全知識培訓；對工作人員進行生物安全知識培訓；3. 制定相關的實驗室安全管理條例和操作細則；制定相關的實驗室安全管理條例和操作細則；4. 實驗操作時要遵守操作規(guī)程，如有危險樣品泄實驗操作時要遵守操作規(guī)程，如有危險樣品泄漏，應立即報告，及時處理。漏，應立即報告，及時處理。單擊此處添課程名46動物實驗室的生物安全防護設施應參照動物實驗室的生物安全防護設施應參照BSL-1BSL-4實實驗室的相應要求驗室的相應要求,還應考慮對動物呼吸、排泄、毛發(fā)、抓還應考慮對動物呼吸、排泄、毛發(fā)、抓

34、咬、掙扎、逃逸、動物實驗咬、掙扎、逃逸、動物實驗(如染毒、醫(yī)學檢查、取樣、如染毒、醫(yī)學檢查、取樣、解剖、檢驗等人動物飼養(yǎng)、動物尸體及排泄物的處置等解剖、檢驗等人動物飼養(yǎng)、動物尸體及排泄物的處置等過程產生的潛在生物危害的防護。應特別注意對動物源過程產生的潛在生物危害的防護。應特別注意對動物源性氣溶膠的防護性氣溶膠的防護,例如對感染動物的剖檢應在負壓剖檢臺例如對感染動物的剖檢應在負壓剖檢臺上進行。上進行。六、動物實驗室的生物安全六、動物實驗室的生物安全單擊此處添課程名47 應根據動物的種類、身體大小、生活習性、實驗目應根據動物的種類、身體大小、生活習性、實驗目的等選擇具適當防護水平專用于動物并符合

35、國家相的等選擇具適當防護水平專用于動物并符合國家相關標準的生物安全柜、動物飼養(yǎng)設施、動物實驗設關標準的生物安全柜、動物飼養(yǎng)設施、動物實驗設施、消毒設施和清洗設施等。施、消毒設施和清洗設施等。 實驗室建筑應確保實驗動物不能逃逸實驗室建筑應確保實驗動物不能逃逸,非實驗室動物非實驗室動物(如野鼠、昆蟲等如野鼠、昆蟲等)不能進入。實驗室設計不能進入。實驗室設計(如空間、如空間、迸出通道等迸出通道等)應符合所用動物的需要。應符合所用動物的需要。動物實驗室的生物安全動物實驗室的生物安全單擊此處添課程名48實驗室中標本的安全操作實驗室中標本的安全操作 移液管和移液輔助器的移液管和移液輔助器的使用使用 避免感

36、染性物質的擴散避免感染性物質的擴散生物安全柜的使用生物安全柜的使用避免感染性物質的食入以及與皮膚和眼睛的接觸避免感染性物質的食入以及與皮膚和眼睛的接觸 避免感染性物質的注入血清的分離避免感染性物質的注入血清的分離離心機的使用離心機的使用操作技術規(guī)范操作技術規(guī)范單擊此處添課程名49 勻漿器、搖床、攪拌器和超聲處理器的使用勻漿器、搖床、攪拌器和超聲處理器的使用 組織研磨器的使用組織研磨器的使用 冰箱與冰柜的維護和使用冰箱與冰柜的維護和使用 裝有凍干感染性物質安瓿的開啟裝有凍干感染性物質安瓿的開啟 裝有感染性物質安瓿的儲存對血液和其他體裝有感染性物質安瓿的儲存對血液和其他體 液、組織及排泄物的標準防

37、護方法液、組織及排泄物的標準防護方法 對可能含有朊蛋白對可能含有朊蛋白(不含核酸而僅由蛋白質構成不含核酸而僅由蛋白質構成 的可自我復制并具感染性的因子的可自我復制并具感染性的因子)物質的防護物質的防護單擊此處添課程名50一、生物恐怖威脅的分級一、生物恐怖威脅的分級按美國按美國CDC的標準分三級：的標準分三級：A 級：最大危害級：最大危害B 級：中等危害級：中等危害C 級：最低危害級：最低危害 對生物恐怖活動的防范對生物恐怖活動的防范單擊此處添課程名51二、二、A級生物武器及其防范級生物武器及其防范(一一) 炭疽芽胞桿菌炭疽芽胞桿菌1. 來源：氣溶膠來源：氣溶膠2. 所致疾?。禾烤也∷录膊。禾?/p>

38、疽病(人畜共患人畜共患)l肺炭疽肺炭疽(出血性肺炎出血性肺炎):發(fā)熱、頭痛、胸痛，咳嗽，無卡他發(fā)熱、頭痛、胸痛，咳嗽，無卡他癥狀癥狀 l腸炭疽腸炭疽(出血性腸炎出血性腸炎)：惡心、嘔吐、發(fā)熱、血便、腹痛：惡心、嘔吐、發(fā)熱、血便、腹痛l皮膚炭疽皮膚炭疽(黑炭狀壞死黑炭狀壞死)：丘疹、水泡、潰瘍、發(fā)黑：丘疹、水泡、潰瘍、發(fā)黑3. 應急措施：立即離開氣溶膠污染區(qū)，帶口罩應急措施：立即離開氣溶膠污染區(qū)，帶口罩4. 預防：注射炭疽減毒疫苗預防：注射炭疽減毒疫苗5. 治療：及早使用環(huán)丙沙星，強力霉素治療：及早使用環(huán)丙沙星，強力霉素單擊此處添課程名52(二二) 鼠疫耶氏菌鼠疫耶氏菌(Yersinia pes

39、tis)1. 來源：氣溶膠來源：氣溶膠2. 所致疾?。菏笠咚录膊。菏笠?人畜共患人畜共患)l腺鼠疫腺鼠疫 (淋巴節(jié)炎淋巴節(jié)炎)：人蚤：人蚤l肺鼠疫肺鼠疫 (黑死病黑死病)：發(fā)熱、干咳、胸痛：發(fā)熱、干咳、胸痛l敗血癥鼠疫：源于腺鼠疫或肺鼠疫敗血癥鼠疫：源于腺鼠疫或肺鼠疫3. 應急措施：應急措施： 不要進入疫區(qū)；帶口罩不要進入疫區(qū)；帶口罩4. 預防：滅鼠、滅蚤預防：滅鼠、滅蚤5. 治療：早期足量氨基糖苷類抗生素。治療：早期足量氨基糖苷類抗生素。單擊此處添課程名53(三三) 出血熱病毒出血熱病毒1. 來源：氣溶膠來源：氣溶膠2. 所致疾?。撼鲅獰崴录膊。撼鲅獰崤R床表現(xiàn)：高熱、頭痛、咽痛、出血、腎

40、臟損害和免疫功臨床表現(xiàn)：高熱、頭痛、咽痛、出血、腎臟損害和免疫功能紊亂為主，三紅能紊亂為主，三紅(面、頸、上胸部潮紅面、頸、上胸部潮紅)、三疼、三疼(頭痛、眼頭痛、眼眶痛、腰痛眶痛、腰痛), 五期五期(發(fā)熱、低血壓、少尿、多尿、恢復期發(fā)熱、低血壓、少尿、多尿、恢復期)病死率高。病死率高。 3. 治療：無特異性治療，嚴禁使用阿斯匹林類藥物治療：無特異性治療，嚴禁使用阿斯匹林類藥物單擊此處添課程名54(四四) 天花病毒天花病毒單擊此處添課程名55(五五) 兔熱病兔熱病1. 來源：氣溶膠來源：氣溶膠2. 病原菌：土拉弗朗西斯菌病原菌：土拉弗朗西斯菌(Francisella)3. 臨床表現(xiàn)：肺兔熱病表

41、現(xiàn)為突然發(fā)熱，頭痛、臨床表現(xiàn)：肺兔熱病表現(xiàn)為突然發(fā)熱，頭痛、 肌痛、咽痛、干咳；傷寒型為腹痛、肌痛、咽痛、干咳；傷寒型為腹痛、 腹瀉腹瀉4. 治療：早期足量氨基糖苷類抗生素及環(huán)丙沙星、治療：早期足量氨基糖苷類抗生素及環(huán)丙沙星、 氧氟沙星等。氧氟沙星等。單擊此處添課程名56(六六) T2毒枝菌素毒枝菌素(T2毒素毒素)1. 來源：鐮刀菌屬的真菌產生的毒素，可制成各種來源：鐮刀菌屬的真菌產生的毒素，可制成各種 劑型劑型2. 吸收途徑：呼吸道、消化道粘膜；皮膚吸收途徑：呼吸道、消化道粘膜；皮膚3. 作用機理：阻斷作用機理：阻斷DNA的合成與轉錄的合成與轉錄4. 臨床表現(xiàn)：不同吸收途徑局部臨床表現(xiàn)不同

42、；出臨床表現(xiàn)：不同吸收途徑局部臨床表現(xiàn)不同；出現(xiàn)的全身癥狀，肌無力、頭暈、共濟現(xiàn)的全身癥狀，肌無力、頭暈、共濟失調、低血壓休克，失調、低血壓休克， 一般一般24小時內死小時內死亡。亡。單擊此處添課程名57研究人員應考慮的生物安全因素研究人員應考慮的生物安全因素 生物安全和重組生物安全和重組DNA技術技術 生物表達系統(tǒng)的生物安生物表達系統(tǒng)的生物安全考慮全考慮 表達載體的生物安全考慮表達載體的生物安全考慮 用于基因轉移的病毒載體用于基因轉移的病毒載體 轉基因動物和轉基因動物和“基因敲基因敲除除”動物動物 轉基因植物轉基因植物 遺傳修飾生物體的危險度評估和進一遺傳修飾生物體的危險度評估和進一步的考慮

43、步的考慮單擊此處添課程名58也要考慮：也要考慮： 意外事故應對方案和應急程序意外事故應對方案和應急程序 意外事故應對方案意外事故應對方案 微生物實驗室應急程序微生物實驗室應急程序 實驗室材料的清潔實驗室材料的清潔 化學殺菌劑化學殺菌劑 清除局部環(huán)境的污染清除局部環(huán)境的污染 清除生物安全柜的污染清除生物安全柜的污染 洗手清除手部污染洗手清除手部污染 熱力消毒和滅菌熱力消毒和滅菌單擊此處添課程名59 焚燒廢棄物處理焚燒廢棄物處理 感染性物質的運輸感染性物質的運輸 國際運輸規(guī)定國際運輸規(guī)定 基本的三層包裝系統(tǒng)基本的三層包裝系統(tǒng) 溢出清除程序溢出清除程序 危害性化學品危害性化學品 暴露途徑暴露途徑 化

44、學品的儲存化學品的儲存 關于不相容化學品的一般原則化學關于不相容化學品的一般原則化學品的毒性作用品的毒性作用 爆炸性化學品爆炸性化學品 化學品溢出化學品溢出 壓縮氣體和液化氣壓縮氣體和液化氣單擊此處添課程名60同位素實驗室操作規(guī)范與安全同位素實驗室操作規(guī)范與安全-同位素管理條例同位素管理條例 放射性物質及輻射技術已經廣泛應用于醫(yī)療放射性物質及輻射技術已經廣泛應用于醫(yī)療衛(wèi)生、教學科研和工農業(yè)等領域，由于放射物對衛(wèi)生、教學科研和工農業(yè)等領域，由于放射物對人身和環(huán)境存在一定的危險性，因此，必須進行人身和環(huán)境存在一定的危險性，因此，必須進行科學管理，否則就會給社會帶來危害，給操作者科學管理，否則就會給

45、社會帶來危害，給操作者和公眾的身體健康帶來損害，甚至造成社會恐慌。和公眾的身體健康帶來損害，甚至造成社會恐慌。 單擊此處添課程名61第一條第一條 根據根據中華人民共和國放射性污染防治法中華人民共和國放射性污染防治法，放射形同位素與射線裝置安全和防護條例放射形同位素與射線裝置安全和防護條例，為保證放射性同位素使用的安全，制定本條例。為保證放射性同位素使用的安全，制定本條例。遺傳與發(fā)育所同位素管理條例遺傳與發(fā)育所同位素管理條例第二條第二條 管理機構管理機構一、設立以各單位主管領導負責的一、設立以各單位主管領導負責的“放射性同位素安全放射性同位素安全管理工作委員會管理工作委員會”，委員會包括相關部門

46、人員和專，委員會包括相關部門人員和專職管理員組成。職管理員組成?！胺派湫酝凰匕踩芾砉ぷ魑瘑T放射性同位素安全管理工作委員會會”組成人員按要求報當地環(huán)保局、衛(wèi)生局、公安組成人員按要求報當地環(huán)保局、衛(wèi)生局、公安局備案。局備案。單擊此處添課程名62二二、放射性同位素安全管理工作委員會負責整個放射性同位素安全管理工作委員會負責整個單位同位素管理條例、操作規(guī)程和應急預案單位同位素管理條例、操作規(guī)程和應急預案的制定和修改。的制定和修改。三、放射性同位素安全管理工作委員會負責監(jiān)督三、放射性同位素安全管理工作委員會負責監(jiān)督整個單位放射性同位素管理條例的實施。對整個單位放射性同位素管理條例的實施。對實施中出現(xiàn)

47、的問題提出建議，供領導決策參實施中出現(xiàn)的問題提出建議，供領導決策參考。考。單擊此處添課程名63四四、放射性同位素專職管理員負責放射性同位素放射性同位素專職管理員負責放射性同位素許可證申報、審驗、變更、同位素轉入、轉許可證申報、審驗、變更、同位素轉入、轉出協(xié)議的辦理等手續(xù)。負責與當地環(huán)保局、出協(xié)議的辦理等手續(xù)。負責與當地環(huán)保局、衛(wèi)生局、公安局等主管放射性工作部門的協(xié)衛(wèi)生局、公安局等主管放射性工作部門的協(xié)調工作，確保同位素使用符合法律規(guī)定。調工作，確保同位素使用符合法律規(guī)定。單擊此處添課程名64第三條第三條 放射性工作場所放射性工作場所一、設立符合一、設立符合防治法防治法規(guī)定的放射性工作場所。規(guī)定

48、的放射性工作場所。二、放射性工作場所配備必要的防護設備、檢測二、放射性工作場所配備必要的防護設備、檢測設設 備、個人防護用具。備、個人防護用具。三、放射性工作場所標有國家規(guī)定的警示標志。三、放射性工作場所標有國家規(guī)定的警示標志。四、放射性工作場所設有專人管理，建立嚴格的四、放射性工作場所設有專人管理，建立嚴格的使用登記制度。使用登記制度。五、嚴禁在普通實驗室內存儲和進行同位素操作。五、嚴禁在普通實驗室內存儲和進行同位素操作。單擊此處添課程名65第四條第四條 放射性同位素使用放射性同位素使用 一、一、使用核素種類嚴格控制在環(huán)保部門審批的輻射安全使用核素種類嚴格控制在環(huán)保部門審批的輻射安全許可范圍

49、以內，專職管理員按法規(guī)要求統(tǒng)一與有經許可范圍以內，專職管理員按法規(guī)要求統(tǒng)一與有經營資質的經銷商簽定轉入、轉出協(xié)議并報上級主管營資質的經銷商簽定轉入、轉出協(xié)議并報上級主管部門批準、備案后方可轉入。部門批準、備案后方可轉入。二、二、 因科研需要使用許可證范圍以外核素時，課題組應因科研需要使用許可證范圍以外核素時，課題組應提前三個月報專職管理員提前三個月報專職管理員, , 專職管理員辦理許可證專職管理員辦理許可證增項手續(xù)，新增核素必須經上級相關部門批準后方增項手續(xù)，新增核素必須經上級相關部門批準后方可購買和使用。可購買和使用。單擊此處添課程名66三、三、 課題組購買含有放射源設備時必須提前報專課題組

50、購買含有放射源設備時必須提前報專職管理員，并提供設備放射源部分的技術資職管理員，并提供設備放射源部分的技術資料，以便辦理含源設備審批手續(xù)。料，以便辦理含源設備審批手續(xù)。四、建立完整的放射性同位素臺帳制度。四、建立完整的放射性同位素臺帳制度。五、嚴格執(zhí)行放射性同位素操作程序和應急預案。五、嚴格執(zhí)行放射性同位素操作程序和應急預案。 單擊此處添課程名67第五條第五條 培培 訓訓一、同位素操作人員必須經過培訓上崗。放射性同位素安一、同位素操作人員必須經過培訓上崗。放射性同位素安全管理工作委員會與人力資源處定期組織培訓，培訓全管理工作委員會與人力資源處定期組織培訓，培訓分外部培訓和內部培訓。分外部培訓和

51、內部培訓。 1外部培訓是請市相關資質部門依法組織的培訓。外部培訓是請市相關資質部門依法組織的培訓。 2內部培訓是定期組織同位素使用人員學習國家相關放內部培訓是定期組織同位素使用人員學習國家相關放射性管理的法律法規(guī)、組織學習各單位制定的放射性射性管理的法律法規(guī)、組織學習各單位制定的放射性管理規(guī)章制度、請有經驗的老師講解和指導同位素正管理規(guī)章制度、請有經驗的老師講解和指導同位素正確使用，達到即安全使用又消除不必要的恐怖心理。確使用，達到即安全使用又消除不必要的恐怖心理。二、導師有責任教育學生遵守本單位有關同位素管理的規(guī)二、導師有責任教育學生遵守本單位有關同位素管理的規(guī)章制度，對放射性同位素的使用中

52、安全防護、規(guī)范操章制度，對放射性同位素的使用中安全防護、規(guī)范操作、專業(yè)知識、人身安全、環(huán)境安全進行指導。作、專業(yè)知識、人身安全、環(huán)境安全進行指導。單擊此處添課程名68第六條第六條 建立場所監(jiān)測、個人計量檢測、健康建立場所監(jiān)測、個人計量檢測、健康 體檢制度體檢制度一、定期組織相關人員對操作場所、廢棄物倉庫進一、定期組織相關人員對操作場所、廢棄物倉庫進行檢測，并保留檢測記錄。行檢測，并保留檢測記錄。 二、按法規(guī)要求為長期同位素操作人員辦理個人劑二、按法規(guī)要求為長期同位素操作人員辦理個人劑量計，監(jiān)控個人劑量的輻射情況并建立個人檔量計，監(jiān)控個人劑量的輻射情況并建立個人檔案。案。三、按法規(guī)要求定期組織同

53、位素操作人員進行體檢，三、按法規(guī)要求定期組織同位素操作人員進行體檢，體檢結果納入個人放射性同位素健康檔案。體檢結果納入個人放射性同位素健康檔案。四、個人計量、健康檔案長期保存。四、個人計量、健康檔案長期保存。單擊此處添課程名69第七條第七條 放射性廢棄物的管理放射性廢棄物的管理一、設有符合標準的同位素廢品儲存?zhèn)}庫。設有符合標準的同位素廢品儲存?zhèn)}庫。二、每個同位素操作場所設有臨時廢棄物（液體、二、每個同位素操作場所設有臨時廢棄物（液體、 固體）存儲裝置，裝置成滿后在確保安全的情固體）存儲裝置，裝置成滿后在確保安全的情況下運輸到同位素廢品倉庫集中存儲。況下運輸到同位素廢品倉庫集中存儲。三、同位素廢

54、棄物定期由環(huán)保部門檢測，按國家有三、同位素廢棄物定期由環(huán)保部門檢測，按國家有關標準處理放射性廢棄物。關標準處理放射性廢棄物。單擊此處添課程名70第八條第八條 違反本條例的處罰違反本條例的處罰 對違反本條例的人員，管理人員應及時提出對違反本條例的人員，管理人員應及時提出批評教育并限期整改。不服從管理的，管理人員批評教育并限期整改。不服從管理的，管理人員將通知其課題組導師進行批評教育，并視情況報將通知其課題組導師進行批評教育，并視情況報本單位放射性同位素安全工作管理委員會做出相本單位放射性同位素安全工作管理委員會做出相應的處罰。應的處罰。單擊此處添課程名71同位素操作的實驗防護同位素操作的實驗防護

55、 以下物品不得帶入實驗室或在實驗室中使用：以下物品不得帶入實驗室或在實驗室中使用： 食物和飲料食物和飲料 任何香煙類物品任何香煙類物品 手提包手提包 脣膏等一切化妝品脣膏等一切化妝品 食用器皿食用器皿 離開控制區(qū)必須徹底清潔雙手，尤其注意指甲、離開控制區(qū)必須徹底清潔雙手，尤其注意指甲、 手指間和手指的邊緣部分。手指間和手指的邊緣部分。單擊此處添課程名72 離開控制區(qū)必須用檢測儀徹底檢測手部、鞋子和衣服。離開控制區(qū)必須用檢測儀徹底檢測手部、鞋子和衣服。 任何開封或者沒有開封的放射源不得用手直接拿取。任何開封或者沒有開封的放射源不得用手直接拿取。 放射源必須放置在具有遮擋射線功能的器皿或容器放射源必須放置在具有遮擋射線功能的器皿或容器 中，該容器最好要有手柄，且開合要簡單易操作，放中，該容器最好要有手柄，且開合要簡單易操作，放 射源在不同區(qū)域的安全可檢測劑量必須滿足以下規(guī)定：射源在不同區(qū)域的安全可檢測劑量必須滿足以下規(guī)定： 在控制區(qū)內在控制區(qū)內10 SV/