潔凈室的設(shè)計(jì)說(shuō)明書

1、. .PAGE18 / NUMPAGES18萬(wàn)級(jí)微生物潔凈室設(shè)計(jì)說(shuō)明一、萬(wàn)級(jí)微生物潔凈室設(shè)計(jì)說(shuō)明設(shè)計(jì)技術(shù)指標(biāo)：A、微生物潔凈室設(shè)計(jì)說(shuō)明技術(shù)指標(biāo)說(shuō)明：微生物潔凈室設(shè)計(jì)說(shuō)明 實(shí)驗(yàn)區(qū)空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)由制冷量KW的組合式空調(diào)機(jī)組。微生物潔凈室設(shè)計(jì)說(shuō)明 潔凈度（萬(wàn)級(jí)）0.5um350000粒/m3微生物潔凈室設(shè)計(jì)說(shuō)明 微生物浮游菌萬(wàn)級(jí)100/m3微生物潔凈室設(shè)計(jì)說(shuō)明 沉降菌萬(wàn)級(jí)3個(gè)/皿微生物潔凈室設(shè)計(jì)說(shuō)明 照明：實(shí)驗(yàn)臺(tái)300LX，其它生產(chǎn)區(qū)域?yàn)?50LX。微生物潔凈室設(shè)計(jì)說(shuō)明 室相鄰房間相對(duì)靜壓差5pa，相對(duì)室外靜壓10pa。微生物潔凈室設(shè)計(jì)說(shuō)明 室溫度18-26C，室相對(duì)濕度為45-60%。微生物潔凈室設(shè)

2、計(jì)說(shuō)明 室噪音60db(A)。微生物潔凈室設(shè)計(jì)說(shuō)明 電源：AC220V/380V-50HZB、微生物潔凈室設(shè)計(jì)說(shuō)明排風(fēng)口裝有高效過(guò)濾器，送風(fēng)口裝有高效過(guò)濾靜壓箱，以實(shí)現(xiàn)進(jìn)氣潔凈，另外更換高效過(guò)濾器比較方便。C、一般室送排風(fēng)采用上送下排方式，室排風(fēng)口應(yīng)設(shè)在室被污染風(fēng)險(xiǎn)最高的區(qū)域，單側(cè)布置，不得有障礙。D、回風(fēng)口以余壓閥自動(dòng)調(diào)節(jié)室壓力，保持正壓潔凈狀態(tài)。二、微生物潔凈室設(shè)計(jì)說(shuō)明設(shè)計(jì)說(shuō)明：實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)基本思路為經(jīng)濟(jì)、實(shí)用。凈化要求級(jí)別為萬(wàn)級(jí)。實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)有一更、二更、風(fēng)淋和緩沖等實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備工作。采用人流、物流分開(kāi)原則，以減少實(shí)驗(yàn)污染，保證安全。A、本布置緊湊、合理，滿足了實(shí)驗(yàn)室操作和空氣潔凈度等級(jí)要求

3、，同時(shí)力求科學(xué)性與經(jīng)濟(jì)性的原則，考慮實(shí)驗(yàn)室要求和發(fā)展與運(yùn)行費(fèi)用最優(yōu)。B、潔凈室入口處設(shè)置風(fēng)淋室，能有效清除人體所帶灰塵，減少潔凈室的灰塵量，同時(shí)風(fēng)淋室也起到了氣閘的作用，防止不潔凈空氣由門進(jìn)入潔凈區(qū)。C、潔凈室需向室供給一定比例的新鮮空氣，凈化過(guò)濾后進(jìn)入各實(shí)驗(yàn)室以補(bǔ)償排風(fēng)，保證正壓與工作人員需要。D、風(fēng)量回風(fēng)次數(shù)采用風(fēng)量調(diào)節(jié)閥對(duì)不同要求潔凈級(jí)別的區(qū)域進(jìn)行控制，以與壓強(qiáng)梯度的調(diào)節(jié)，保證氣流同“清潔”區(qū)域流向“污染”區(qū)域，潔凈室不同級(jí)別之間壓差為5pa，潔凈室與室外壓差為10pa。E、潔凈室設(shè)紫處燈殺菌裝置。F、傳遞窗為全不銹鋼材質(zhì)，機(jī)械聯(lián)鎖控制，帶滅菌裝置。G、觀察窗為密閉潔凈窗，門為氣密潔凈門

4、。三、生物潔凈室設(shè)計(jì)和施工中的問(wèn)題摘要： 本文介紹了幾種不同類型生物潔凈室的不同特點(diǎn)和設(shè)計(jì)方法，并針對(duì)在生物潔凈室設(shè)計(jì)施工中出現(xiàn)的幾個(gè)問(wèn)題提出自己的看法和意見(jiàn)。生物潔凈室的應(yīng)用越來(lái)越廣泛，目前集中在醫(yī)院手術(shù)室和病房、制藥廠、生物安全實(shí)驗(yàn)室、動(dòng)物房等。同樣級(jí)別的潔凈室，由于應(yīng)用領(lǐng)域不同，要求也有很大區(qū)別，筆者檢測(cè)的若干生物潔凈室中，出現(xiàn)了各種不同問(wèn)題，很多是由于對(duì)各種生物潔凈室的特點(diǎn)和要求缺乏了解造成的。首先，不同類型的生物潔凈室必須遵循相應(yīng)的規(guī)要求，不了解這些規(guī)，是無(wú)法進(jìn)行設(shè)計(jì)施工的。目前針對(duì)不同類型生物潔凈室的一些規(guī)如表1所列。只有熟悉各行業(yè)的特點(diǎn)，充分掌握各規(guī)的要求，才能切實(shí)做好生物潔凈室

5、的設(shè)計(jì)、施工、調(diào)試等工作。表2中將各參數(shù)作了詳細(xì)的比較。應(yīng)當(dāng)指出，表2中的參數(shù)要求并不詳盡，應(yīng)以原規(guī)為準(zhǔn)1 應(yīng)用于各種生物潔凈室的規(guī)編號(hào)名稱簡(jiǎn)稱適用圍GB 50073-2001潔凈廠房設(shè)計(jì)規(guī)設(shè)計(jì)規(guī)一切潔凈室，尤其是電子廠房Code for design of clean roomGB 50333-2002醫(yī)院潔凈手術(shù)部建筑技術(shù)規(guī)手術(shù)部規(guī)醫(yī)院潔凈手術(shù)部Architectural technical code for hospital clean operating departmentYFB 004-1997軍隊(duì)醫(yī)院潔凈護(hù)理單元建筑技術(shù)規(guī)護(hù)理病房規(guī)醫(yī)院血液病房等Architectural Sta

6、ndard on Bioclean Nursing Unit For MilitaryHospital1998藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)人藥GMP人用藥品的生產(chǎn)Good manufacture practice for drug2002獸藥生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)獸藥GMP獸用藥品的生產(chǎn)Good manufacture practice for veterinary drugYY 0033-2000無(wú)菌醫(yī)療器具生產(chǎn)管理規(guī)醫(yī)療器具GMP無(wú)菌醫(yī)療器具的生產(chǎn)Good manufacture practice for sterile medical devicesGB xxxx-200 x生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)生物安

7、全實(shí)驗(yàn)室規(guī)生物安全實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)Architectural and Technical Code for Biosafety LaboratoriesGB 14925-2001實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 環(huán)境與設(shè)施動(dòng)物房規(guī)各種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物繁育、實(shí)驗(yàn)設(shè)施的建設(shè)Laboratory animalRequirements of environment and housing facilities表2 各參數(shù)在不同規(guī)中的不同要求參數(shù)級(jí)別設(shè)計(jì)規(guī)手術(shù)部規(guī)護(hù)理病房規(guī)生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)截面風(fēng)速(m/s)5（百）0.20.50.250.300.180.256（千）50607（萬(wàn)）152530362512158（10萬(wàn)）1015182215（

8、30萬(wàn)）1215靜壓差(Pa)不同級(jí)別之間5305潔凈區(qū)對(duì)非潔凈區(qū)510潔凈區(qū)對(duì)室外101515相對(duì)負(fù)壓-10-15噪聲dB(A)非單向流潔凈室60525060單向流潔凈室65504550照度(lx)主要工作區(qū)7502500350200一般區(qū)100500150200150溫度()工作區(qū)冬季2022222522241827夏季24262426輔助區(qū)冬季1620212720262026夏季26302529相對(duì)濕度(%)工作區(qū)冬季305035(40)6045603070夏季5070輔助區(qū)6065表2（完）參數(shù)級(jí)別藥監(jiān)局GMP獸藥GMP醫(yī)療器具GMP動(dòng)物房規(guī)截面風(fēng)速(m/s)5（百）0.250.30換

9、氣次數(shù)(h-1)5（百）20506（千）7（萬(wàn)）202010208（10萬(wàn)）1515（30萬(wàn)）1012靜壓差(Pa)不同級(jí)別之間5552050潔凈區(qū)對(duì)非潔凈區(qū)105潔凈區(qū)對(duì)室外101210噪聲dB(A)非單向流潔凈室6060單向流潔凈室65局百房間63照度(lx)主要工作區(qū)300150150300一般區(qū)100溫度()1826182618282026相對(duì)濕度(%)4565306545654070了解了不同生物潔凈室的不同要求，下面談?wù)勗谏餄崈羰以O(shè)計(jì)施工中遇到的幾個(gè)問(wèn)題。首先是平面布置方面的問(wèn)題。這個(gè)問(wèn)題在藥廠潔凈廠房和生物安全實(shí)驗(yàn)室的平面設(shè)計(jì)中尤為突出，主要的問(wèn)題就是平面過(guò)于復(fù)雜。的確，在藥廠

10、平面設(shè)計(jì)中，應(yīng)盡量保證潔凈區(qū)不受污染，做到合理分區(qū)，潔污分開(kāi)，人流、物流明顯，但一定要避免矯枉過(guò)正。由于一些行業(yè)主管部門在制訂驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，缺乏專業(yè)知識(shí)，對(duì)潔凈室的原理和特點(diǎn)了解不夠，往往將潔凈室過(guò)于神秘化，復(fù)雜化，因此對(duì)潔凈室平面布局過(guò)于苛刻，造成很多不必要的麻煩。這個(gè)問(wèn)題在緩沖室的設(shè)置上尤為突出。例如某藥廠人員進(jìn)入潔凈廠房的過(guò)程是這樣的：換鞋 一更 緩沖 二更 洗手消毒 緩沖潔凈走廊三更緩沖或手消毒高級(jí)別潔凈室，由此，工作人員在進(jìn)入高級(jí)別潔凈室工作前，需要進(jìn)出9個(gè)房間，開(kāi)啟關(guān)閉18扇門，其復(fù)雜程度可想而知。另外，很多藥廠由于規(guī)模小投資少，廠房十分緊湊，以至于每間輔助間的面積只有幾平方米，甚至

11、只有2平方米，于是工作人員在幾乎不能同時(shí)容下2人的房間里，不停的開(kāi)門、轉(zhuǎn)身、關(guān)門，以至于近乎暈頭轉(zhuǎn)向。要求嚴(yán)格是好事，但如果矯枉過(guò)正就會(huì)適得其反，很多工人為了進(jìn)出方便，往往很多門都不關(guān)，很多房間形同虛設(shè)。將可以合并的房間合并，將沒(méi)有必要設(shè)置的房間取消，是解決這一問(wèn)題的辦法。例如洗手消毒完全可以當(dāng)作緩沖間，另外對(duì)于低級(jí)別潔凈室之間，如萬(wàn)級(jí)和10萬(wàn)級(jí)潔凈室之間，不一定非要設(shè)置緩沖室，有些場(chǎng)合，三更的設(shè)置也是可以考慮的。緩沖間的設(shè)置主要是通過(guò)進(jìn)出兩門的不同時(shí)開(kāi)啟起到氣閘的隔離作用，如果嚴(yán)格管理，一些輔助房間如二更等，完全可以起到緩沖作用。另外，在10萬(wàn)級(jí)和萬(wàn)級(jí)房間也沒(méi)有一定設(shè)置緩沖的必要。10萬(wàn)級(jí)房

12、間和萬(wàn)級(jí)房間的空氣含塵濃度不象一些非專業(yè)人士想象的那樣相差10倍，門一開(kāi)啟就會(huì)污染。事實(shí)上，兩者相差不多，例如獸藥GMP(2002)中規(guī)定，10萬(wàn)級(jí)房間最低換氣次數(shù)是15次/h，萬(wàn)級(jí)房間最低換氣次數(shù)是20次/h，相差不多，另外由于房間體積普遍較小，例如對(duì)于4m2的房間，5次/h的換氣次數(shù)僅有50m3/h左右的送風(fēng)量，而這50m3/h的送風(fēng)量是較難調(diào)整的，另外，無(wú)論設(shè)計(jì)施工都要適當(dāng)留有一定余量，所以，從筆者檢測(cè)的若干藥廠來(lái)看，在人員進(jìn)出路線上的一些小房間，除了名義上的潔凈度級(jí)別不同外，其換氣次數(shù)和空氣含塵濃度沒(méi)有什么區(qū)別。有時(shí)所謂的10萬(wàn)級(jí)房間的含塵濃度比萬(wàn)級(jí)房間還要低。以上的觀點(diǎn)是想證明不能以

13、主觀意識(shí)制訂驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)該充分以實(shí)際出發(fā)考慮問(wèn)題。精簡(jiǎn)平面并不影響實(shí)際功能，而且可以使人員進(jìn)出方便簡(jiǎn)單，節(jié)省工程造價(jià)，擴(kuò)大有效使用面積，何樂(lè)而不為。同樣的問(wèn)題還出現(xiàn)在三級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)中，行業(yè)主管部門除了要求加設(shè)很多緩沖外，還要求做到人流、物流、潔物、污物各走不同路線，完全分開(kāi)，但事實(shí)上是不可能做到的，也沒(méi)有必要。一些政策制訂人為強(qiáng)調(diào)重視程度或迎合一些需要，提出的“生物安全怎么強(qiáng)調(diào)都不過(guò)份”的說(shuō)法是不負(fù)責(zé)任的，對(duì)于工程技術(shù)人員來(lái)講必須一切從實(shí)際出發(fā)，凡事都要有度。只要能完全滿足安全需要即可，層層加碼是專業(yè)知識(shí)不足，缺乏自信心的表現(xiàn)。筆者認(rèn)為，自SARS以來(lái)提出的P3實(shí)驗(yàn)室設(shè)“三區(qū)兩緩”（

14、即實(shí)驗(yàn)室分為清潔區(qū)，半污染區(qū)和污染區(qū)，不同區(qū)域之間必須設(shè)緩沖）的要求有待商榷，從國(guó)外的一些資料也可以看到，一些發(fā)達(dá)國(guó)家的生物安全實(shí)驗(yàn)室平面比我們簡(jiǎn)單的多，一些危險(xiǎn)度不高的實(shí)驗(yàn)室設(shè)置“兩區(qū)一緩”就足夠了。制訂“三區(qū)兩緩”的人可能設(shè)計(jì)工作接觸不多，事實(shí)上，由于生物安全實(shí)驗(yàn)室對(duì)壓差要求極為嚴(yán)格，“三區(qū)兩緩”往往要6、7層房間，層層負(fù)壓，而且要嚴(yán)格保證，無(wú)論從設(shè)計(jì)、施工以與自控上，都是極難保證的。所以還是要從實(shí)際出發(fā)，讓生物安全實(shí)驗(yàn)室真正做到安全、實(shí)用、經(jīng)濟(jì)、可行。在生物潔凈室施工中有一個(gè)突出的問(wèn)題就是圓弧角的使用。生物潔凈室主要以控制細(xì)菌等微生物為根本目的，而微生物極易在一些角落里滋生，因此生物潔凈

15、室應(yīng)易于清掃，盡量減少死角，因此在JGJ 71-90潔凈室施工與驗(yàn)收規(guī)中的第 2.3.8條規(guī)定：踢腳板部分施工時(shí)應(yīng)與墻面齊平或略縮進(jìn)23mm。當(dāng)踢腳板與地面材料一樣時(shí)可做成小圓角，其圓角半徑R應(yīng)大于等于50mm；當(dāng)踢腳板與地面材料不同時(shí)，應(yīng)用彈性材料嵌固。除地面與墻面的交角要求可設(shè)圓角外，對(duì)其他部位并未做規(guī)定?，F(xiàn)在普遍的做法是將所有交角均加裝鋁合金圓角，由于制作粗糙，使得很多工程的圓角流于形式，甚至作用適得其反。對(duì)于墻壁之間，墻壁與頂棚之間的圓角，本來(lái)作用不是很大，現(xiàn)在成了施工單位掩蓋粗糙接角的“遮羞布”。對(duì)于墻面與地面的交角，其實(shí)是十分關(guān)鍵的，但往往成為藏污納垢，滋生細(xì)菌的場(chǎng)所。原因在于：由

16、于圓弧角有厚度，在圓角與板壁和地面的兩個(gè)交角處，便會(huì)形成兩個(gè)細(xì)小的接縫，由于地面、板壁不平，在接縫處往往有很多縫隙，很多施工單位偷工減料，沒(méi)有打膠密封，有的即使打膠了，也會(huì)有開(kāi)裂的現(xiàn)象。因此本來(lái)的目的是為了消除衛(wèi)生死角，而實(shí)際情況卻增加了很多隱患。這種情況在平時(shí)不明顯，在潔凈室進(jìn)行衛(wèi)生清掃時(shí)就會(huì)暴露無(wú)遺，地面上一旦有水，水會(huì)通過(guò)縫隙滲到隔壁房間，圓角下經(jīng)常滿是水漬，成為細(xì)菌滋生的絕好場(chǎng)地。造成這種情況的根本原因是對(duì)規(guī)的規(guī)定沒(méi)有真正領(lǐng)會(huì)，只是流于形式。筆者認(rèn)為對(duì)于我國(guó)的生物潔凈室建設(shè)，我們已不能僅僅滿足于那種解決“有與沒(méi)有”的層面，必須提高層次，做到真正實(shí)用，而不是應(yīng)付認(rèn)證工作，不僅要建，而且一

17、定要建好。有幾種做法值得推薦：1.安裝圓角之后，鋪設(shè)一定厚度的自流坪地面，徹底消除地面接縫；2.安裝圓角之后，鋪裝整體卷材地面，然后將卷材沿圓角上鋪至壁板，使圓角和地面成為一體。3.采用建筑材料（如膠砂）砌筑圓弧狀的壁板基座，基座與地面做同樣的處理，如刷涂料等，使地面和基座成為一體，而且基座作為踢腳部分與墻面齊平或低于墻面。作為潔凈室地面，現(xiàn)澆水磨石具有耐磨、完整、耐腐蝕、耐刷洗、造價(jià)低廉的特點(diǎn)，在低級(jí)別潔凈室中是完全可以采用的。但一些采用水磨石地面的工程卻出現(xiàn)了問(wèn)題：空氣中的含塵濃度居高不下，尤其是5m的大顆粒嚴(yán)重超標(biāo)，排除過(guò)濾器泄露的可能外，發(fā)現(xiàn)根本原因在與水磨石地面。很多地方掉灰，甚至可

18、以用指甲劃出粉末。出現(xiàn)這種問(wèn)題的原因是因?yàn)樗鄻?biāo)號(hào)不夠。在JGJ 71-90潔凈室施工與驗(yàn)收規(guī)的第2.2.2條中對(duì)潔凈室的地面做法有這樣的規(guī)定：潔凈室涂料地面水泥砂漿基底的水泥標(biāo)號(hào)不得低于425號(hào)；水磨石地面應(yīng)現(xiàn)澆，所用小石子直徑為615mm，水磨石磨細(xì)后，宜用不揮發(fā)的護(hù)面材料打涂。一些認(rèn)證人員認(rèn)為水磨石地面不可行的觀點(diǎn)是片面的，只要遵守規(guī)規(guī)定，現(xiàn)澆水磨石完全可以是一種物美價(jià)廉的地面材料。一些施工單位偷工減料，采用低標(biāo)號(hào)水泥，玻璃嵌條，而且表面不做任何處理。由此提醒廣大建設(shè)單位和設(shè)計(jì)單位注意這個(gè)問(wèn)題，把好質(zhì)量關(guān)。生物潔凈室的特點(diǎn)還很多，實(shí)際工程中的問(wèn)題也很多，我們只有充分了解不同類別潔凈室的不

19、同要求和特點(diǎn)，熟悉規(guī)的規(guī)定，才能真正把生物潔凈室建設(shè)好。標(biāo)準(zhǔn)的PCR實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)的PCR實(shí)驗(yàn)室簡(jiǎn)介1、主體結(jié)構(gòu)：主體為彩鋼板、鋁合金型材。室所有陰角、陽(yáng)角均采用鋁合金50圓角鋁，從而解決容易污染、積塵、不易清掃等問(wèn)題。結(jié)構(gòu)牢固，線條簡(jiǎn)明，美觀大方，密封性好。2、標(biāo)準(zhǔn)的三區(qū)分隔和氣壓調(diào)節(jié)：將PCR過(guò)程分成試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本制備和PCR擴(kuò)增檢測(cè)三個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)區(qū)。整個(gè)區(qū)域有一個(gè)整體緩沖走廊。每個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)區(qū)設(shè)置有緩沖區(qū)，同時(shí)各區(qū)通過(guò)氣壓調(diào)節(jié)，使整個(gè)PCR實(shí)驗(yàn)過(guò)程中試劑和標(biāo)本免受氣溶膠的污染并降低擴(kuò)增產(chǎn)物對(duì)人員和環(huán)境的污染?？纱蜷_(kāi)緩沖區(qū)，緩沖區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)的排風(fēng)扇往外排氣，在實(shí)驗(yàn)區(qū)的外墻上和各扇門上都安裝有

20、風(fēng)量可調(diào)的回風(fēng)口，空氣通過(guò)回風(fēng)口向室換氣。3、消毒：在三個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)和三個(gè)緩沖區(qū)頂部以與傳送窗部安裝有紫外燈，供消毒用。在試劑準(zhǔn)備區(qū)和標(biāo)本制備區(qū)還設(shè)置移動(dòng)紫外線燈，對(duì)實(shí)驗(yàn)桌進(jìn)行局部消毒。4、機(jī)械連鎖不銹鋼傳遞窗：試劑和標(biāo)本通過(guò)機(jī)械連鎖不銹鋼（不建議使用電子連鎖方式）傳遞窗傳遞，保證試劑和標(biāo)本在傳遞過(guò)程中不受污染（人物分流）。5、地面地面建議使用PVC卷材地面或自流坪地面，整體性好。便于進(jìn)行清掃，耐腐蝕。沒(méi)有條件的也可采用水磨石地面，或大塊的瓷磚（至少800mm800mm）接縫需要小于2mm。6、照明燈具要選用凈化燈具，能達(dá)到便于清洗、不積塵的特點(diǎn)。標(biāo)準(zhǔn)的PCR實(shí)驗(yàn)室在建設(shè)的過(guò)程中應(yīng)注意：規(guī)的安裝流

21、程和全面的服務(wù)流程。嚴(yán)格按照規(guī)科學(xué)設(shè)計(jì)的安裝流程。安裝前需要確定以下安裝條件，如：電源電壓，電源進(jìn)線位置，網(wǎng)絡(luò)線進(jìn)線位置，進(jìn)水水壓，最小安裝空間，地面平整度，通風(fēng)孔、進(jìn)水管和下水管的位置等，理想狀態(tài)的空間尺寸和通風(fēng)口尺寸。1.1.1PCR實(shí)驗(yàn)室基本要求2.1 PCR 實(shí)驗(yàn)室依據(jù)所使用的方法可分為試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本制備、擴(kuò)增、產(chǎn)物分析等三或四個(gè)區(qū)域。只是使用實(shí)時(shí)熒光PCR儀、HIV病毒載量測(cè)定儀的PCR實(shí)驗(yàn)室，有上述前面三個(gè)區(qū)域即可。各區(qū)域應(yīng)完全獨(dú)立分隔，不應(yīng)有任何的空氣直通。2.2標(biāo)準(zhǔn)的PCR實(shí)驗(yàn)室 產(chǎn)物分析區(qū)或三個(gè)區(qū)域的最后一個(gè)區(qū)域（即擴(kuò)增與產(chǎn)物分析區(qū)），空氣流向應(yīng)由室外向室，可通過(guò)在室設(shè)置通風(fēng)

22、櫥、排風(fēng)扇或其他排風(fēng)系統(tǒng)達(dá)到空氣流由室外向室流動(dòng)的要求。2.3 PCR實(shí)驗(yàn)室各區(qū)域儀器設(shè)備配備通常如下：2.3.1標(biāo)準(zhǔn)的PCR實(shí)驗(yàn)室 試劑準(zhǔn)備區(qū):儀器設(shè)備主要應(yīng)有加樣器、冰箱、天平、低速離心機(jī)、混勻器、可移動(dòng)紫外燈等。可使用超凈工作臺(tái)作為試劑配制操作臺(tái)面。2.3.2標(biāo)準(zhǔn)的PCR實(shí)驗(yàn)室 標(biāo)本制備區(qū)儀器設(shè)備主要應(yīng)有生物安全柜（最好為B2, 可避免提取核酸在柜反復(fù)循環(huán)，造成標(biāo)本間交叉“污染”，出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。此外還應(yīng)配備加樣器、臺(tái)式高速離心機(jī)（冷凍與常溫）、臺(tái)式低速離心機(jī)、恒溫設(shè)備（水浴和/或干浴儀）、冰箱、混勻器和可移動(dòng)紫外燈等。2.3.3標(biāo)準(zhǔn)的PCR實(shí)驗(yàn)室 擴(kuò)增區(qū)主要儀器就是核酸擴(kuò)增熱循環(huán)儀（P

23、CR儀，實(shí)時(shí)熒光或普通的）。熱循環(huán)儀的電源應(yīng)專用，并配備一個(gè)穩(wěn)壓電源或UPS，以防止由于電壓的波動(dòng)對(duì)擴(kuò)增測(cè)定的影響。此外，根據(jù)工作需要，還可配備加樣器、超凈臺(tái)等。2.3.4標(biāo)準(zhǔn)的PCR實(shí)驗(yàn)室 產(chǎn)物分析區(qū)：本區(qū)所使用的儀器設(shè)備可能有加樣器、電泳儀（槽）、電轉(zhuǎn)印儀、雜交爐或雜交箱、水浴箱、DNA測(cè)序儀、酶標(biāo)儀和洗板機(jī)等。The equipment here may be pipette, electrophoresis system capillary, transblot system, chest/ oven molecule hybridization, water bath, DNA se

24、quencer, microplate-reader for ELISA, microplate washer and so on.建議Recommendations在理想情況下，PCR實(shí)驗(yàn)室試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本制備、擴(kuò)增三個(gè)區(qū)域可設(shè)置緩沖間。在緩沖間，可設(shè)置正壓，使室空氣不流向室外，室外空氣不流向室。PCR實(shí)驗(yàn)室平面布置示意圖一般實(shí)驗(yàn)室間隔材料分:彩鋼板,不銹鋼板,理化板等,價(jià)格依次而上,主要考慮不產(chǎn)塵,不滋菌,容易清理就行一般實(shí)驗(yàn)室間隔材料分:彩鋼板,不銹鋼板,理化板等,價(jià)格依次而上,主要考慮不產(chǎn)塵,不滋菌,容易清理就行*衛(wèi)生部PCR研究員金明(衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心臨床免疫室主任,研究員)的PCR

25、建設(shè)方案再說(shuō)吧！國(guó)外的資料不一定是最好。個(gè)人覺(jué)得金明的實(shí)驗(yàn)室區(qū)正壓（擴(kuò)增分析區(qū)因?yàn)闆](méi)有緩沖，所以為負(fù)壓），緩沖間負(fù)壓的作法可以更好的防止氣體的外泄與防止試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、產(chǎn)物擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增分析區(qū)四區(qū)之間的氣體相互滲漏。PCR實(shí)驗(yàn)室也可以分為三個(gè)區(qū)，即第三、四區(qū)合為一區(qū)，必須設(shè)立緩沖間。有條件建設(shè)實(shí)驗(yàn)室采用三十萬(wàn)級(jí)的標(biāo)準(zhǔn)來(lái)建設(shè)。空調(diào)系統(tǒng)采用制冷劑各區(qū)獨(dú)立循環(huán)，可以防止氣流交叉。*疾病預(yù)防控制中心實(shí)驗(yàn)室建設(shè)之PCR 實(shí)驗(yàn)室基本要求:PCR實(shí)驗(yàn)室可以是分散形式，也可以是組合形式。完成一組PCR實(shí)驗(yàn)，通常應(yīng)經(jīng)過(guò)試劑配制、樣品處理、核酸擴(kuò)增與產(chǎn)物分析四個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程，若實(shí)驗(yàn)工藝需要，還應(yīng)增加樣品粉碎過(guò)程

26、。一、分散形式PCR實(shí)驗(yàn)室 所謂分散形式PCR實(shí)驗(yàn)室，是指完成上述實(shí)驗(yàn)過(guò)程的實(shí)驗(yàn)用房彼此相距較遠(yuǎn)，呈分散布置形式。對(duì)于這種布置形式的PCR實(shí)驗(yàn)室，由于各個(gè)實(shí)驗(yàn)之間不易相互干擾，因此無(wú)需特殊條件要求。 二、組合形式PCR實(shí)驗(yàn)室所謂組合形式PCR實(shí)驗(yàn)室, 是指完成PCR四個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程的實(shí)驗(yàn)用房相鄰布置，組成獨(dú)立實(shí)驗(yàn)區(qū)域的形式。對(duì)于組合形式PCR實(shí)驗(yàn)室，由于各個(gè)實(shí)驗(yàn)間集中布置，容易造成相互干擾，因此，對(duì)總體布局以與屏障系統(tǒng)具有一定的要求。各室在入口處設(shè)緩沖間，以減少室外空氣交換。試劑配制室與樣品處理室宜呈微正壓，以防外界含核酸氣溶膠的空氣進(jìn)入，造成污染；核酸擴(kuò)增室與產(chǎn)物分析室應(yīng)呈微負(fù)壓，以防含核酸的氣

27、溶膠擴(kuò)散出去污染試劑與樣品。如果使用熒光PCR儀，擴(kuò)增室和產(chǎn)物分析室可以合并。若房間進(jìn)深允許，可設(shè)PCR部專用走廊。需要指出的是在減少室外空氣交換方面，緩沖間比專用走廊更有意義。*PCR實(shí)驗(yàn)區(qū)的設(shè)置，幾個(gè)要注意的問(wèn)題：1、幾個(gè)區(qū)域的大小設(shè)置情況，應(yīng)該是試劑準(zhǔn)備區(qū)、產(chǎn)物擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增分析區(qū)，要小一些。標(biāo)本制備區(qū)應(yīng)大一些。因?yàn)?，?biāo)本制備室要放置一個(gè)生物安全柜為一個(gè)低溫冰箱。2、試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)就設(shè)立緊急洗眼器，以備不時(shí)之需。3、PCR實(shí)驗(yàn)室的潔凈度可以根據(jù)用戶的實(shí)際使用情況和資金的投入來(lái)設(shè)計(jì)。*臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室基本設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)臨床檢驗(yàn)擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理暫行辦法，制定本標(biāo)準(zhǔn) 一、 臨床基因

28、擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室區(qū)域設(shè)置原則 （一） 臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室區(qū)域設(shè)置原則 1、 試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū) 2、 標(biāo)本制備區(qū) 3、 擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū) 4、 擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū) 如使用全自動(dòng)分析儀，區(qū)域可適當(dāng)合并。 （二）各工作區(qū)域必須有明確的標(biāo)記，避免不同工作區(qū)域的設(shè)備、物品混用。 （三）進(jìn)入各工作區(qū)域必須嚴(yán)格按照單一方向進(jìn)行，即試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū) 標(biāo)本制備區(qū)擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。 （四）不同的工作區(qū)域使用不同的工作服（例如不同的顏色）。工作人員離開(kāi)各工作區(qū)域時(shí)，不得將工作服帶出。 二、 工作區(qū)域儀器設(shè)備配置標(biāo)準(zhǔn) （一） 試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū) 1、2-8C和-15C冰箱 2、混勻器 3

29、、微量加樣器（覆蓋1-1000ul） 4、移動(dòng)紫外燈（近工作臺(tái)面） 5、消耗品：一次性手套、一次性吸水紙、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭（帶濾心） 6、專用工作服和工作鞋 7、專用辦公用品 （二） 標(biāo)本制備區(qū) 1、2-8C冰箱、-20C或-80C冰箱 2、高速臺(tái)式冷凍離心機(jī) 3、混允器 4、水浴箱或加熱模塊 5、微量加樣器（覆蓋1-1000ul） 6、可移動(dòng)紫外燈（近工作臺(tái)面） 7、超凈工作臺(tái) 8、消耗品：一次性手套、一次性吸水紙、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭（帶濾心） 9、專用工作服和工作鞋 10、專用辦公用品 如需處理大分子DNA，應(yīng)具有超聲波水浴儀。 （三） 擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)

30、 1、 核酸擴(kuò)增儀 2、 微量加樣器（覆蓋1-1000ul） 3、 可移動(dòng)紫外燈（近工作臺(tái)面） 4、消耗品：一次性手套、一次性吸水紙、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭（帶濾心） 5、 專用工作服和工作鞋 6、 專用辦公用品 (四)擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū) 視檢驗(yàn)方法不同而定?；緝x器設(shè)備如下： 1、 微量加樣器（覆蓋1-1000ul） 2、 可移動(dòng)紫外燈（近工作臺(tái)面） 3、消耗品：一次性手套、一次性吸水紙、加樣器吸頭（帶濾心） 4、 專用工作服和工作鞋 5、 專用辦公用品 為了對(duì)以個(gè)特定序列進(jìn)行PCR做重復(fù)檢測(cè),需要三個(gè)不同的區(qū)域,每一個(gè)區(qū)域的具體技術(shù)操作和試劑在下面詳細(xì)列出. 1、樣品準(zhǔn)備區(qū) 這個(gè)區(qū)域?qū)?/p>

31、門用作樣品的準(zhǔn)備，在制備和操作用于核酸提取的試劑時(shí)應(yīng)該采 取預(yù)防措施： 1）PCR產(chǎn)物和帶有要擴(kuò)增序列的DNA克隆不能在這個(gè)房間操作。 2）組織培養(yǎng)物、組織標(biāo)本和血清樣品都帶進(jìn)樣品準(zhǔn)備間處理，以根據(jù)應(yīng)用的需要提取DNA或RNA。 3）用于樣品處理的工具不能被用作普通分子克隆的工具，也不能用作操作靶序列。 4）DNA樣品應(yīng)該用有專門的防護(hù)或正壓活塞式移液管操作，以防止在吸取樣品時(shí)有氣溶膠遺留。 5）大體積樣品應(yīng)該用單獨(dú)包裝的無(wú)菌一次性移液管吸取。 6）管子打開(kāi)前都要簡(jiǎn)短離心以減少氣溶膠的產(chǎn)生，而且管子不能用力崩開(kāi)，這樣會(huì)產(chǎn)生氣溶膠。 7）任何時(shí)候都應(yīng)該穿實(shí)驗(yàn)服和帶手套，手套要經(jīng)常更換，尤其在抽提

32、過(guò)程中每一步之間都要更換。實(shí)驗(yàn)服要專門用于樣品準(zhǔn)備間，經(jīng)常清洗。 2、樣品準(zhǔn)備和RNA-PCR RNA-PCR的額外步驟需要額外的樣品操作，這樣增加了樣品之間污染的機(jī)會(huì)。為了避免這一問(wèn)題，反轉(zhuǎn)錄一步可以在樣品準(zhǔn)備區(qū)進(jìn)行。在RNA-PCR中應(yīng)用UNG以防止污染的方法也有報(bào)道。 3、前PCR區(qū) 必須有專門用于準(zhǔn)備各種反應(yīng)的區(qū)域，這個(gè)區(qū)域必須保持干凈，而且沒(méi)有來(lái)自克隆和樣品準(zhǔn)備的污染。前PCR區(qū)必須要有試劑和準(zhǔn)備，特別是專門用于前PCR區(qū)的正壓活塞式移液管。 4、PCR實(shí)驗(yàn)室試劑的操作 1）所用的所有溶液都應(yīng)該沒(méi)有核酸和（或）核酸酶（DNase和RNase）污染。 2）所有PCR試劑中使用的水都應(yīng)該

33、是高質(zhì)量的新鮮蒸餾的去離子水，用0.22m過(guò)濾的，并且是高壓滅菌。 3）在20到25貯存的試劑建議加點(diǎn)像疊氮鈉一類的抗微生物劑，在擴(kuò)增試劑或樣品制備試劑中加入0.025%的疊氮鈉不抑制擴(kuò)增反應(yīng)。 4）所用試劑都應(yīng)該以大體積配制，實(shí)驗(yàn)一下看試劑是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量進(jìn)行貯存。 5）所有試劑和樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的瓶子和管子。 6）新配制的試劑在用于準(zhǔn)備新的標(biāo)本之前應(yīng)該加以檢驗(yàn)。 7）樣品準(zhǔn)備和前PCR區(qū)所使用的移液管在不使用時(shí)都應(yīng)該小心保存。 5、在前PCR區(qū)建立PCR混合物 1）可以把即刻可用的“主混合物”溶液配好、分裝并保存在-20或4，在實(shí)驗(yàn)室只涉與到擴(kuò)增一種或少

34、數(shù)幾種特異序列時(shí)這樣做很有用。 2）如果你的實(shí)驗(yàn)室使用多套引物，以致于配制包括所有試劑的單一反應(yīng)混合物不夠經(jīng)濟(jì)，可以考慮分裝保存夠一天的PCR成分。 3）作為一個(gè)規(guī)則，應(yīng)該保存一套陰性、弱陽(yáng)性和強(qiáng)陽(yáng)性對(duì)照樣品來(lái)分析樣品配制和PCR前過(guò)程的效率和潔凈程度。而且，你也希望通過(guò)使用一個(gè)已知的弱陽(yáng)性樣品來(lái)驗(yàn)證你的樣品緩沖液以證明里面不含擴(kuò)增抑制物。 4）陰性樣品要與每組樣品同時(shí)做，以分析是否存在樣品與樣品之間的污染以與是否存在PCR產(chǎn)物的污染，陰性對(duì)照應(yīng)該包括核酸以外的所有試劑。 5）當(dāng)做陽(yáng)性對(duì)照時(shí)，有兩個(gè)理由決定了應(yīng)該使用最少數(shù)量的核酸。 6）由于必須有對(duì)照反應(yīng)，對(duì)照模板的特點(diǎn)應(yīng)該予以考慮。 6、控

35、制污染的方法 已設(shè)計(jì)出很有力的酶學(xué)方法用來(lái)消除一種形式的污染使用UNG，這一技術(shù)能有效地消除由PCR產(chǎn)物引起的污染。另一種控制污染的方法是使用紫外線，這種方法不能完全消除污染問(wèn)題，但可以將污染降低幾個(gè)數(shù)量級(jí)。 7、PCR儀的位置 8、后PCR區(qū) PCR完成以后，需要分析樣品并解釋數(shù)據(jù)，應(yīng)該留出一個(gè)專門用于反應(yīng)后處理樣品的地方。后PCR活動(dòng)中使用的所用試劑、一次性耗材和儀器都必須是專門用于這一目的，決不能把實(shí)驗(yàn)室這一區(qū)域的試劑或儀器用于任何前PCR活動(dòng)。*臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理暫行辦法第一章 總 則 第一條為規(guī)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理，保證臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)質(zhì)量，使臨床診斷和治療更為科學(xué)、合

36、理，特制定本辦法。 第二條臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)技術(shù)指以臨床診斷治療為目的，以擴(kuò)增檢測(cè)DNA或RNA為方法的檢測(cè)技術(shù)，如聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）、連接酶鏈反應(yīng)（LCR）、轉(zhuǎn)錄依賴的放大系統(tǒng)（TAS）自主序列復(fù)制系統(tǒng)（3SR）和鏈替代擴(kuò)增（SDA）等。 第三條本辦法適用于開(kāi)展臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)室。臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室設(shè)立在二級(jí)以上醫(yī)院。 第四條臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室必須使用經(jīng)國(guó)家藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)的臨床檢驗(yàn)試劑開(kāi)展臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)項(xiàng)目。 第五條衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心（以下簡(jiǎn)稱衛(wèi)生部臨檢中心）和省、自治區(qū)、直轄市臨床檢驗(yàn)中心（以下簡(jiǎn)稱省臨檢中心）負(fù)責(zé)對(duì)所轄行政區(qū)域臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量監(jiān)督管理工作

37、。第二章 實(shí)驗(yàn)室設(shè)置和驗(yàn)收 第六條擬設(shè)置臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的醫(yī)療機(jī)構(gòu)按照臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室基本設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)（見(jiàn)附件）籌建實(shí)驗(yàn)室；籌建完成后，由法定代表人向衛(wèi)生部臨檢中心提出技術(shù)驗(yàn)收申請(qǐng)。申請(qǐng)時(shí)需提交以下材料： （一）醫(yī)療機(jī)構(gòu)執(zhí)業(yè)許可證復(fù)印件； （二）可行性研究報(bào)告； 1、擬設(shè)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室機(jī)構(gòu)的所在地醫(yī)療衛(wèi)生資源狀況、本機(jī)構(gòu)的基本情況、對(duì)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)的需求以與臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行的預(yù)測(cè)分析； 2、 擬設(shè)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的設(shè)置平面圖； 3、擬設(shè)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室將開(kāi)展的檢驗(yàn)項(xiàng)目、實(shí)驗(yàn)設(shè)備條件和有關(guān)技術(shù)人員資料 第七條衛(wèi)生部臨檢中心和省臨檢中心共同組織相關(guān)專業(yè)的專家組（以下簡(jiǎn)稱專家組），按照臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室基本設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)對(duì)提出申請(qǐng)的臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行技術(shù)驗(yàn)收。驗(yàn)收完成后，在20日將驗(yàn)收?qǐng)?bào)告寄送至申請(qǐng)機(jī)構(gòu)。 第八條經(jīng)專家組技術(shù)驗(yàn)收合格的醫(yī)療機(jī)構(gòu)將本辦法第六條規(guī)定的材料與專家組驗(yàn)收?qǐng)?bào)告送至省級(jí)行政部備案。在將符合規(guī)定的全部材料送達(dá)省級(jí)衛(wèi)生行政部門后15日未收到省級(jí)衛(wèi)生行政部門不同意的意見(jiàn)，方可開(kāi)展專家組技術(shù)驗(yàn)收合格的臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)項(xiàng)目。 第九條未經(jīng)專家組驗(yàn)收合格并報(bào)省級(jí)衛(wèi)生行政部門備案的醫(yī)療機(jī)構(gòu)不得擅自開(kāi)展臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)