青光眼實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ秃蛽p害

1、青光眼實(shí)行模子和損害【摘要】青光眼實(shí)行模子有助于闡述青光眼的病因?qū)W和病理學(xué)并生長新的更為有用的治療要領(lǐng)。本文重要先容比年來常用的青光眼實(shí)行模子及損害評估技能的上風(fēng)和限定?！娟P(guān)鍵詞】青光眼;實(shí)行模子;損害評估青光眼是以視神經(jīng)萎縮和視野從外周向中心漸進(jìn)性缺損為特性的神經(jīng)退行性疾病，發(fā)病隱匿，是環(huán)球第二致瞎眼病，確切發(fā)病機(jī)制尚不清楚。青光眼的眼內(nèi)病變重要包羅三個方面：(1)房水流出受阻，小梁網(wǎng)和鞏膜色素層流出通道形態(tài)學(xué)和生化的改變，眼內(nèi)壓(intraularpressure,ip)的增高;(2)視神經(jīng)乳頭(ptinervehead,nh)特異性的變革包羅視網(wǎng)膜神經(jīng)纖維的缺失，篩板壓縮變雹弓形后移、篩

2、孔延伸、細(xì)胞外基質(zhì)改變(膠原卵白、彈性卵白、基膜毗連卵白、葡糖胺聚糖等)和神經(jīng)膠質(zhì)構(gòu)造改變(星型膠質(zhì)細(xì)胞活化、細(xì)胞外間質(zhì)重構(gòu));(3)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(retinalganglinells，rgs)漸進(jìn)性的凋亡。青光眼實(shí)行模子是研究青光眼生理、病理、藥理等方面的重要本領(lǐng)，如今常用的是動物模子和構(gòu)造細(xì)胞造就模子。1青光眼實(shí)行模子1.1動物實(shí)行模子青光眼動物實(shí)行模子有助于闡述青光眼的病因?qū)W和病理學(xué)并生長新的更為有用的治療要領(lǐng)。最抱負(fù)的動物實(shí)行模子是猴子或猩猩，由于它們的篩板和人類最為靠近，但基于社會倫理道德和用度方面的思量，應(yīng)用有所限定。其次是嚙齒類，大鼠和小鼠的前房角布局和靈長類很相似，小梁網(wǎng)由

3、小梁細(xì)胞覆蓋的小梁纖維交織成網(wǎng)狀并有真正的shle管。小鼠房水動力學(xué)和人眼極為相似。差異的是嚙齒類沒有靈長類視神經(jīng)乳頭處具有的篩板，包羅圍繞神經(jīng)節(jié)細(xì)胞纖維束的篩狀板。但是，小鼠和大鼠視神經(jīng)乳頭的細(xì)胞層更遼闊，星形膠質(zhì)細(xì)胞層板狀延伸與神經(jīng)纖維軸突彼此交織。別的，大鼠的視神經(jīng)乳頭有稀松垂直走向的小梁，內(nèi)含膠原、彈力卵白、層粘連卵白和卵白聚糖。這些上風(fēng)使嚙齒類動物模子成為研究青光眼常用的東西。如今利用的嚙齒類動物模子重要有(1)常壓模子：玻璃體內(nèi)注射快樂性氨基酸、內(nèi)皮素，視神經(jīng)損傷、視網(wǎng)膜缺血再灌注模子;(2)壓力模子：自覺性高眼壓模子、一連光照模子、高滲鹽水模子、激光光凝小梁網(wǎng)模子、鞏膜靜脈燒灼模

4、子、鞏膜靜脈結(jié)扎模子、透明質(zhì)酸前房注射、微球前房注射。urla等1報道大鼠前房每周注射含有或不含羥丙基甲基纖維素(hydrxyprpylethylellulse，hp)的乳膠微球可導(dǎo)致眼壓增高至少一連30周。(3)轉(zhuǎn)基因模子：利用病毒載體使人y突變株在小鼠眼內(nèi)過分表達(dá)，導(dǎo)致ip明顯增長2。1.2構(gòu)造細(xì)胞造就模子構(gòu)造造就和單細(xì)胞范例造就是快速比力差異藥物治療結(jié)果的東西，并容許直接調(diào)控細(xì)胞微環(huán)境。常用的構(gòu)造細(xì)胞造就模子有：原始視網(wǎng)膜細(xì)胞混淆造就;純化rgs造就;rgs轉(zhuǎn)染;視網(wǎng)膜移植造就;神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和其他支持細(xì)胞造就。通過細(xì)胞造就可以：分散和分選純化細(xì)胞確定差異范例細(xì)胞的作用;遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)染以過分

5、表達(dá)或敲除某種特定基因;細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度、活性氧濃度的熒光成像，線粒體膜電位，細(xì)胞酸堿度和其他細(xì)胞生理學(xué)的丈量。2青光眼損害的評估得當(dāng)?shù)恼_的青光眼損害評估技能和東西是研究不成或缺的，包羅ip丈量、rgs和視神經(jīng)的成效形態(tài)學(xué)評估等。2.1ip丈量2.2rgs的形態(tài)學(xué)評估視網(wǎng)膜全層切片或視網(wǎng)膜鋪片結(jié)合構(gòu)造化學(xué)技能可將全部范例的細(xì)胞非特異性染色(如甲酚紫)或選擇性的標(biāo)識表記標(biāo)幟rgs(逆行性標(biāo)識表記標(biāo)幟或rgs免疫組化標(biāo)識表記標(biāo)幟)。視網(wǎng)膜全層切片的長處是可以表現(xiàn)差異細(xì)胞層形態(tài)學(xué)變革，計數(shù)視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞層(ganglinelllayer,gl)細(xì)胞數(shù)量，預(yù)計rgs的存活率。缺點(diǎn)是正常視網(wǎng)膜rgs的漫

6、衍密度和青光眼患者或嚙齒動物模子視網(wǎng)膜rgs的缺失都是不均一的。其次，并非存在于gl的全部的細(xì)胞都是rgs，無足細(xì)胞(aarineells)據(jù)預(yù)計高達(dá)50%，因此計數(shù)gl的細(xì)胞不克不及正確反響rgs的變革。視網(wǎng)膜鋪片用于查抄整個視網(wǎng)膜，消除rgs不勻稱漫衍和不合錯誤稱喪失導(dǎo)致的偏向。構(gòu)造學(xué)技能是視網(wǎng)膜鋪片不成缺少的增補(bǔ)。甲苯基紫染色：得當(dāng)調(diào)解染色步伐的參數(shù)，特殊是染色和脫色的時間，可僅染色gl，但不雅察者仍需依附履歷從形態(tài)上區(qū)分rgs和無足細(xì)胞。值得留意的是higashide等人4用激光掃描檢眼鏡樂成拍攝并計數(shù)活體大鼠眼內(nèi)的rgs。利用上丘注射染料dia后再電子成像，dia可以不變存在長達(dá)2個

7、多月，成像黑白創(chuàng)傷性的，可重復(fù)檢測，因此可提供視網(wǎng)膜rgs數(shù)量和密度的一連變革。2.3視神經(jīng)的形態(tài)學(xué)評估視神經(jīng)形態(tài)學(xué)評估能提供比rgs評估更有代價的信息。視神經(jīng)橫斷面染色后可以借助光學(xué)或電子顯微鏡不雅察形態(tài)學(xué)變革和定量評估存活或損傷的軸突數(shù)量，預(yù)計軸突損傷環(huán)境并表現(xiàn)優(yōu)先受損地區(qū)。如今常用視神經(jīng)損傷評估體系(ptinervedaagesre，nds)，可便利快速評估視神經(jīng)團(tuán)體損傷環(huán)境。2.4nh的形態(tài)學(xué)評估青光眼損害的特性性改變是nh杯狀凹陷和篩板向后突出。眼底鏡查抄，眼底照相，激光掃描眼底共同前房角鏡可專門檢測嚙齒動物活體內(nèi)視盤杯狀凹陷環(huán)境，激光斷層掃描可以清楚表白眼內(nèi)高壓小鼠視盤杯狀凹陷隨時

8、間生長變革。2.5其他電生理評價：靈長類青光眼損害的成效評價可以是活體的身心或電生理評價。不幸的是，如今的技能限定了對嚙齒類動物身心評價的研究。常用的電生理評價如視網(wǎng)膜電流圖(erg)、圖形視網(wǎng)膜電圖(perg)、多焦視網(wǎng)膜電圖(ferg)，視覺誘發(fā)電位(vep)、多焦視覺誘發(fā)電位(fvep)。瞳孔對光反射(plr)：是評估成效完備的或視覺疾病損害的視網(wǎng)膜和視神經(jīng)成效的敏感要領(lǐng)，已在小鼠和大鼠被證明具有特性性?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1urlajh,hernandez,veine.threeexperientalglauadelsinrats:parisnftheeffetsfintraularpressureelevatinnretinalganglinellsizeanddeathj.expeyeres,2022,83:429-437.4higashide