心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v

1、心血管疾病蛋白質(zhì)組學(xué)與消化系統(tǒng)疾病蛋白質(zhì)組學(xué)研究進(jìn)展分子腫瘤及表觀遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)室向 廷 秀心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v培養(yǎng)開展臨床（疾病）蛋白組學(xué)研究的能力 目標(biāo):心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v 常見心血管疾病蛋白質(zhì)組學(xué)研究 慢性心肌缺血中的自噬作用 脂肪組織的蛋白質(zhì)組學(xué)研究 幽門螺旋桿菌的蛋白質(zhì)組學(xué)研究 腸道干細(xì)胞的蛋白質(zhì)組學(xué)研究 主要內(nèi)容心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v心血管疾病蛋白質(zhì)組學(xué)Cardiovascular Proteomics心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v心血管系統(tǒng) 心血管系統(tǒng)由心臟、血管和調(diào)節(jié)血液循環(huán)的神經(jīng)體液裝置所組成,其功能是通過血液將氧和營養(yǎng)物質(zhì)供

2、給組織,將組織代謝廢物運(yùn)出。The human heart beats over 100,000 times and moves ,5,700 liters of blood each day throughout the lifetime of an individual.心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v心血管疾病心臟和血管疾?。ㄐ难芗膊。┦嵌喾N疾病的總稱。包括動(dòng)脈粥樣硬化，冠狀動(dòng)脈粥樣硬化癥，冠狀動(dòng)脈硬化性心臟病，血栓阻塞部分心臟內(nèi)的血液流動(dòng)引起的心臟病發(fā)作，高血壓病，風(fēng)濕病，心力衰竭，心律失常，心臟瓣膜疾病，向大腦供血的血管發(fā)生阻塞引起的缺血性中風(fēng)，大腦內(nèi)的血管破裂引起的出血性中風(fēng)

3、等。心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v國家心血管病中心 2013年發(fā)布中國血管病報(bào)告2012年 我國心血管病患病人數(shù)仍呈快速增長態(tài)勢 目前我國約有2.9億人患冠心病、腦卒中、心力衰竭和高 血壓等心血管病 死于心血管病每年約350萬人（2012，300） 每天約9590人 （2012，8200） 每時(shí)約400人（2012，340） 每10秒1人占死亡原因的41%，居各種死因之首 心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v高血壓2.66億腦卒中700萬心肌梗死200萬心力衰竭420萬肺心病500萬風(fēng)心病250萬先心病200萬目前我國成人血脂異常2.5億，患病率達(dá)18

4、.6% 50-75%腦卒中和40-50%心梗發(fā)生與血壓升高有關(guān)發(fā)病率和死亡率呈持續(xù)上升階段醫(yī)療費(fèi)用366億/年每5個(gè)成年人中有1人患高血壓18歲以上成人2012估計(jì)患病率24%心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v“Ethica Award”獎(jiǎng)杯 設(shè)立于2001年，以在1977年開展全球首例經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療的“介入心臟病學(xué)之父”安德烈亞斯格林特茨格（Andreas Gruentzig）教授的名義，每年在全球范圍內(nèi)選出一位對心血管介入事業(yè)做出杰出貢獻(xiàn)的導(dǎo)師、科學(xué)家、臨床醫(yī)師和先驅(qū)者，表彰其終身成就。高潤霖院士作為“中國心血管介入治療的先驅(qū)者”，全球第13位獲獎(jiǎng)?wù)?，首位獲此殊榮的中國專家。 心血

5、管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v煙草防控不力超重/肥胖 心血管病發(fā)病和死亡率 居高不下高血壓膳食結(jié)構(gòu)不合理代謝綜合征身體活動(dòng)不足血脂異常糖尿病心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v /ms/shiminhusheng/1362565525.html心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v中國心血管疾病發(fā)生數(shù)上升幅度將超過50% 人口老齡化與人口增長將額外增長23% 血壓、膽固醇以及糖尿病增長 超過25%的成年人超重或肥胖2030年，心血管病發(fā)生數(shù)將增加2130萬 心血管病死亡人數(shù)將增加770萬心血管病發(fā)病及死亡狀況觸目驚心2005-2015年經(jīng)濟(jì)損失5500億美元 心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究

6、v“如果中國的心血管疾病、糖尿病等慢性病不加以控制，那么改革開放以后的幾乎一半的經(jīng)濟(jì)成果都將可能被這些重大慢性病消耗殆盡。”心血管疾病已經(jīng)成為威脅中國未來發(fā)展的嚴(yán)峻問題心腦血管疾病的住院費(fèi)用急劇攀升2004年以來急性心肌梗死 年均增長速度 34.46腦出血 26.85腦梗死 31.05 世界衛(wèi)生組織總干事陳馮富珍 心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v 提高對心血管疾病的診斷及治療水平勢在必行對心血管疾病狀態(tài)下細(xì)胞中蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)、功能和表達(dá)規(guī)律的研究，將有助于闡明疾病發(fā)生的細(xì)胞和分子機(jī)制，從而為心血管疾病的防治提供新的思路人類基因測序完成在科學(xué)史上具有里程碑意義，但即便探究一個(gè)細(xì)胞完整的基因序列，

7、也不能揭示其所有的生理、病理活動(dòng)。因?yàn)榛蛏飳W(xué)功能的執(zhí)行者是蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)的修飾加工、轉(zhuǎn)運(yùn)定位、相互作用等并不能從mRNA水平預(yù)測全面了解在生理和病理狀態(tài)下，心血管系統(tǒng)的蛋白質(zhì)譜變化，將獲得對心血管系統(tǒng)疾病發(fā)病機(jī)制的更為深入的認(rèn)識，并有可能找到某些生物學(xué)標(biāo)志物用蛋白質(zhì)組學(xué)研究技術(shù)對心血管疾病進(jìn)行研究心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v人類基因組共組成24個(gè)染色體，分別是22個(gè)體染色體、X染色體與Y染色體。含有約30億個(gè)DNA堿基對。1990年10月，多個(gè)國家正式參與了人類基因組計(jì)劃，該計(jì)劃旨在闡明人類基因組30億個(gè)堿基對的序列，發(fā)現(xiàn)所有人類基因并搞清其在染色體上的位置，破譯人類全部遺傳信息。

8、人類基因組計(jì)劃與曼哈頓計(jì)劃、阿波羅計(jì)劃并稱為世界三大科學(xué)計(jì)劃。2001年8月26日，中國提前兩年完成1%人類基因組測序任務(wù)。2003年4月15日，參與的六個(gè)國家共同宣布人類基因組序列圖完成。人類基因組計(jì)劃human genome project, HGP 心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v翻譯后蛋白質(zhì)的修飾是目前蛋白質(zhì)組研究中的一個(gè)重要課題。許多蛋白質(zhì)在翻譯后會(huì)在不同的基團(tuán)上發(fā)生不同的修飾，修飾后的蛋白質(zhì)在生物體的功能調(diào)節(jié)上起關(guān)鍵作用。對單一蛋白質(zhì)進(jìn)行研究的傳統(tǒng)方法遠(yuǎn)不能滿足分析這一層面上蛋白質(zhì)的多樣性和復(fù)雜性的需要，用蛋白質(zhì)組技術(shù)和生物信息學(xué)高通量地研究翻譯后蛋白質(zhì)的修飾已成為必然趨勢。心

9、血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v心肌細(xì)胞和組織的蛋白質(zhì)組學(xué)分析特別具有挑戰(zhàn)性心肌細(xì)胞是分化完全的細(xì)胞，再生能力很有限心臟在人體是獨(dú)一無二的，供體只能在死亡的患者體內(nèi)獲取心臟肩負(fù)著向全身供血的重要任務(wù)，是主宰生命的特殊器官。 人類蛋白質(zhì)參考庫（ HPRD ）具有很高的可靠性。目前數(shù)據(jù)庫中所注釋的蛋白質(zhì)已超過2萬個(gè)，有3萬多條相互作用的蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)，還包括一些蛋白質(zhì)功能域、蛋白質(zhì)翻譯后修飾等方面的信息。每個(gè)查詢結(jié)果中都有相關(guān)的文獻(xiàn)支持。此數(shù)據(jù)庫是目前為止與人類基因、蛋白質(zhì)相關(guān)的最全面的文本挖掘數(shù)據(jù)庫。其中有5079個(gè)已注明的心臟蛋白質(zhì)67%的至少記載有一種翻譯后蛋白修飾磷酸化占90%以上心血管系統(tǒng)

10、與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究vHuman Protein Reference Database (HPRD) ()established by Dr Akhilesh Pandey (Johns Hopkins University).human protein reference database，http：/ 心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v2013年11月6日，復(fù)旦大學(xué)與美國加州大學(xué)經(jīng)過3年多的合作，終于在心臟蛋白質(zhì)組生物信息學(xué)研究方面取得重要進(jìn)展，創(chuàng)建了全球首個(gè)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)的“心臟細(xì)胞器蛋白質(zhì)圖譜庫”。這項(xiàng)研究猶如一座橋梁，把原來“分散進(jìn)行”的心臟生物學(xué)基礎(chǔ)研究和臨床心臟醫(yī)學(xué)研究兩大領(lǐng)域連

11、為一體，對促進(jìn)心臟轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究進(jìn)程有重要意義。心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v 磷酸化 乙?；?甲基化 糖基化 羧基化 羥基化 核苷酸化 脂?；?泛素化 碘基化 。 蛋白翻譯后修飾(Post-Translational Modifications PTMs)心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v三大基本支撐技術(shù)： 雙向電泳技術(shù) 質(zhì)譜技術(shù) 計(jì)算機(jī)圖像分析與大規(guī)模數(shù)據(jù)處理技術(shù) 心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v 對相同關(guān)鍵詞的搜索在不同的搜索器上可以 有截然不同的結(jié)果 Analysis

12、 of MS data and assignment of peptide/protein identification can be difficult 難確保系統(tǒng)能獲得高準(zhǔn)確度的質(zhì)譜數(shù)據(jù) 因?yàn)榈鞍椎耐葱?，一種肽序列可以被分配 到多個(gè)蛋白心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v新的技術(shù)不斷出現(xiàn) 同位素編碼親和標(biāo)簽技術(shù)、雙色熒光技術(shù)定量蛋白質(zhì)組學(xué)研究 多重同位素標(biāo)記相對和絕對定量(iTRAQ)技術(shù)是最新的定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù) 酵母雙雜交技術(shù)、蛋白質(zhì)復(fù)合物免疫分離與質(zhì)譜鑒定技術(shù) -蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用 多維色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)大規(guī)模蛋白質(zhì)分離與鑒定 磷酸化、糖基化蛋白質(zhì)圖譜展示與檢測技術(shù)翻譯后修飾

13、蛋白質(zhì)芯片技術(shù)此前，獲得絕對定量的蛋白質(zhì)，我們被迫依靠ELISA或定量免疫印跡，兩者都需要高品質(zhì)的抗體。當(dāng)有高品質(zhì)的抗體，這些方法都是非常有價(jià)值的隨著最近通過多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）, 一種高特異性、高靈敏度的質(zhì)譜數(shù)據(jù)獲取方式,有可能沒有抗體需要也能獲得目標(biāo)蛋白質(zhì)的絕對定量心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v隨著新技術(shù)的出現(xiàn)心血管蛋白質(zhì)組學(xué)研究的文獻(xiàn)也逐年增加心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v一、擴(kuò)張型心肌病的蛋白質(zhì)組學(xué)研究 擴(kuò)張型心肌病 (dilated cardiomyopathy，DCM)是一類病因不明的心肌疾病，其主要特征是心室擴(kuò)張，室壁變薄，心肌收縮期泵功能障礙，產(chǎn)生充血性心力衰竭。在

14、細(xì)胞水平可見心肌細(xì)胞肥大變性，間質(zhì)纖維化等改變。迄今為止，DCM是利用蛋白質(zhì)組學(xué)研究最為深入的一類心血管疾病。心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v細(xì)胞骨架肌纖維蛋白（肌球蛋白輕鏈-2）線粒體能量產(chǎn)生相關(guān)蛋白（ATP合成酶肌酸激酶）應(yīng)激反應(yīng)相關(guān)蛋白（HSP27)與心肌收縮功能障礙、心力衰竭的發(fā)生有一定關(guān)聯(lián)100種蛋白質(zhì)表達(dá)異常，其中88種蛋白質(zhì)豐度顯著降低Joseph M.Corbett等以擴(kuò)張型心肌病死亡患者心臟組織為研究對象 心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v.ContentApproachResultDCM患者活檢標(biāo)本 正常供體心肌 雙向電泳(2-DE) MALDI質(zhì)譜肽質(zhì)量指紋圖和測序

15、分析 25種在DCM時(shí)發(fā)生顯著變化; ATP合酶鏈;線粒體的肌酸激酶;Hsp27等牛先天性DCM心肌 2-DE分析 35個(gè)相關(guān)蛋白質(zhì)點(diǎn)，24種蛋白質(zhì)表達(dá)下降，11種蛋白質(zhì)豐度增高，包括線粒體和能量代謝表達(dá)的蛋白， Knecht 等采用 2DE 取得了 3300 個(gè)心肌蛋白條帶，通過氨基酸序列分析，Edman 降解法及基質(zhì)輔助的激光解吸離子化質(zhì)譜 (MALDI-MS) 等分析了其中 150 條，經(jīng)活檢及病理證實(shí)，有 12 條為擴(kuò)張型心肌病特有的蛋白 DCM Proteomics心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v二、心肌缺血、再灌注、損傷的蛋白質(zhì)組學(xué)研究 (ischemiareperfusion

16、 injury，IR) 心肌缺血是心臟常見的病理狀態(tài)，影響心臟泵功能，導(dǎo)致心腦等重要器官供血不足，引發(fā)嚴(yán)重后果包括從輕微缺血時(shí)的可逆性損傷到嚴(yán)重缺血時(shí)不可逆性細(xì)胞壞死。研究該過程中蛋白質(zhì)組的變化，是理解這一病理過程的基礎(chǔ)。動(dòng)物模型： 牛 豬 犬 大鼠心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v對PKC-轉(zhuǎn)基因小鼠與未轉(zhuǎn)基因小鼠進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)PKC-至少與93個(gè)蛋白形成復(fù)合物PKC-相關(guān)的36種蛋白中有24種發(fā)生翻譯后修飾，其中23種包含潛在的PKC磷酸化位點(diǎn)，說明PKC-介導(dǎo)的心肌保護(hù)作用與翻譯后修飾相關(guān)對該保護(hù)機(jī)制的研究多集中在對蛋白激酶C(PKC)功能蛋白質(zhì)組學(xué)的探討，多數(shù)認(rèn)為PKC在心肌缺血預(yù)適應(yīng)

17、中起關(guān)鍵作用PKC是心肌缺血保護(hù)中一種重要的信號激酶，它的激活啟動(dòng)了心肌細(xì)胞中一系列級聯(lián)反應(yīng)，阻抑細(xì)胞死亡心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v三、冠狀動(dòng)脈疾病的蛋白質(zhì)組學(xué)研究從健康受試者和冠狀動(dòng)脈疾病患者血液高密度脂蛋白(HDL)血清蛋白之一可運(yùn)載周圍組織中的膽固醇進(jìn)入肝臟促進(jìn)其代謝維持組織中膽固醇量的相對恒定限制動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展HDL作為動(dòng)脈粥樣硬化預(yù)防因子成為研究的重點(diǎn)液相色譜-電噴霧離子化質(zhì)譜儀分析(LC-ESI-MS/MS)基因本體技術(shù)(geneontology，GO)鑒定研究對象研究方法HDL可結(jié)合48種特征性蛋白質(zhì)13種蛋白是首次發(fā)現(xiàn)包括補(bǔ)體C4A/C4B，C9 和補(bǔ)體調(diào)控蛋

18、白vitronectin等研究結(jié)果心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v四、心力衰竭的蛋白質(zhì)組學(xué)研究 (heartfailure) 心力衰竭的臨床表現(xiàn)有左心室泵血功能降低、射血分?jǐn)?shù)下降、心臟擴(kuò)大、神經(jīng)體液反應(yīng)活化，在細(xì)胞水平出現(xiàn)心肌細(xì)胞形態(tài)和收縮功能的變化，常是各種病因所致心臟病的終末階段。 不同誘發(fā)因素造心衰模型電起搏誘發(fā)犬心衰內(nèi)皮素-1(ET-1)誘導(dǎo)的向心性肥大白血病抑制因子（LIF）誘導(dǎo)的離心性肥大 心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v臨床將研究結(jié)果主要用于：從蛋白質(zhì)水平研究相關(guān)心血管疾病的發(fā)病機(jī)制；應(yīng)用心血管疾病蛋白標(biāo)記物來更早、更準(zhǔn)確地檢測心血管疾病，尤其是急性冠脈綜合征(ACS)；

19、蛋白質(zhì)組學(xué)來源的信息作為目前患者診斷的補(bǔ)充；蛋白質(zhì)組檢測獲得的信息有利于個(gè)體化治療，為其提供新的治療靶位；蛋白質(zhì)組學(xué)檢測工具和信息用于治療的各個(gè)階段，可以適時(shí)評估治療的效果和校正治療方案。 心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v2-DE Heart Protein Databases Accessible Via WWWDatabase NameInstituteOrganWebsite HSC-2DPAGEHeart Science Centre, Harefield HospitalHuman heart (ventricle)Rat heart (ventricle)Dog heart (

20、ventricle)http:/www.doc.ic.ac.uk/vip/hsc-2dpage/HP-2DPAGEHeart 2-D Database, MDC, BerlinHuman heart (ventricle)http:/www.mdc-berlin.de/ emu/heart/HEART-2DPAGEGerman Heart Institute, BerlinHuman heart (ventricle) Human heart (atrium)http:/userpage.chemie.fu-berlin.de/ pleiss/dhzb.htmlRAT HEART-2DPAGE

21、German Heart Institute, BerlinRat hearthttp:/www.mpiib-berlin.mpg.de/2D/RAT-HEART/2 days/Emma McGregor, Michael J. Dunn. Proteomics of the Heart.Circulation Research. 2006;98:309心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究vCardiovascular Proteomics應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)從整體上分析心血管系統(tǒng)的蛋白質(zhì)組成成分的動(dòng)態(tài)變化，了解蛋白質(zhì)間的相互作用，將有助于闡明心血管疾病發(fā)病的分子機(jī)制和篩選特異的生物標(biāo)志物。Pub

22、 Date:December 2006心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院、中科院上海生命科學(xué)研究院、復(fù)旦大學(xué)等在中國蛋白質(zhì)組學(xué)領(lǐng)域最具實(shí)力的14個(gè)科研院所和個(gè)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室等單位承擔(dān)研究任務(wù)3500萬元人民幣的資助。 2002年我國啟動(dòng)人類重大疾病蛋白質(zhì)組學(xué)研究項(xiàng)目一項(xiàng)由我國名院士領(lǐng)銜、100多名中青年科學(xué)家參與的以肝炎、肝癌、心血管病等疾病為研究對象的高科技研究日前正式啟動(dòng) 心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v建立了人和大鼠、狗等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的心房、心室與內(nèi)皮細(xì)胞的蛋白質(zhì)2DE圖譜的一系列數(shù)據(jù)庫(http: /www.expasy.ch/ch2

23、d/2d index.html),鑒定了數(shù)百個(gè)心血管系統(tǒng)特有的蛋白質(zhì)。心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究vA 2DE separation of 80 g of heart (ventricle) proteins.The first dimension comprised an 18-cm nonlinear (NL) pH 3 to 10 IPG subjected to isoelectric focusing. The second dimension was a 21-cm 12% SDSgel. Proteins were detected by silver staining.

24、The NL pH range of the first-dimension IPG strip is indicated along the top of the gel, acidic pH to the left. The Mr scale can be used to estimate the molecular weights of the separated proteins.心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究vLCM of human cardiac tissue A, Cardiac myocytes. B, Blood vessels. NL indicates nonlin

25、ear.心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究vIF: 9.504心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v心臟線粒體和細(xì)胞質(zhì)的分離和分析樣品的制備2D- PAGE分析Western印跡MALDI TOF質(zhì)譜（MS）肽質(zhì)量指紋 Phosphopeptide Enrichment and Liquid Chromatography磷酸化肽的富集和液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜處理方法雄性Wistar大鼠（250-350克）一次性腹腔注射亞硝酸鹽0, 0.1, 1.0, and 10 mg/kg 體重亞硝酸鹽誘導(dǎo)心肌線粒體相關(guān)蛋白PDIA3,COQ9和ALDH2的改變心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v(Perlman

26、et al. Circ Res. 2009;104:796-804.)心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v(Perlman et al. Circ Res. 2009;104:796-804.)心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v這些標(biāo)志物的變化可用于調(diào)整臨床處理方案這些標(biāo)志物可以指示出與治療有關(guān)的亞細(xì)胞機(jī)制這些標(biāo)志物有助認(rèn)識疾病的分子起源, 提示調(diào)節(jié)表型的細(xì)胞治療方向心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v生物標(biāo)志物（ Biomarkers）可以分為以下五類：前期指標(biāo)（antecedent biomarkers ）：確定發(fā)生

27、疾病的風(fēng)險(xiǎn)；篩選指標(biāo)（screening biomarkers） ：發(fā)現(xiàn)亞臨床情況；診斷指標(biāo)（diagnostic biomarkers） ：識別明顯的疾?。环诸愔笜?biāo)（Classification biomarkers ）：疾病的分類或程度；預(yù)后指標(biāo)（prognostic biomarkers）：預(yù)測疾病未來的進(jìn) 展，包括復(fù)發(fā)或?qū)χ委煹姆磻?yīng)以及監(jiān)測治療的療效。心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v臨床前探索期，發(fā)現(xiàn)靶目標(biāo)，確定生物標(biāo)志物，明確可行性；臨床驗(yàn)證期，生物標(biāo)志物的檢測方法標(biāo)準(zhǔn)化，得到公認(rèn)并且與疾病相關(guān)；回顧性研究期，由臨床流行病研究中心將庫存的標(biāo)本進(jìn)行回顧性的研究；臨床前瞻性研究期，通

28、過縱向的前瞻性研究篩選疾??；臨床應(yīng)用期，通過在隨機(jī)對照的臨床研究或臨床實(shí)踐中的應(yīng)用，達(dá)到控制疾病的目的。 生物標(biāo)志物的確立是一個(gè)復(fù)雜的過程，一般需要經(jīng)過五個(gè)階段 心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v一個(gè)新的生物標(biāo)志物在應(yīng)用前需要回答如下關(guān)鍵問題： 檢測方法是否標(biāo)準(zhǔn)化？能否重復(fù)？準(zhǔn)確性、有效性如何？生物標(biāo)志物在一般人群或選擇的健康人群中的分布情況？異常水平（參照標(biāo)準(zhǔn)和分辨值）？是否與已知的心血管危險(xiǎn)因素相關(guān)？是否揭示新的發(fā)病機(jī)制？能否預(yù)測疾病的進(jìn)程？解釋新的生物標(biāo)志物與心血管疾病的關(guān)系時(shí)哪些情況需要排除？新的標(biāo)志物是否優(yōu)于現(xiàn)有的標(biāo)志物或增強(qiáng)其效益？新的標(biāo)志物與已知的標(biāo)志物聯(lián)合，多重標(biāo)志物檢驗(yàn)?zāi)芊?/p>

29、使心血管疾病的診斷得以改善？是否增加預(yù)測危險(xiǎn)能力？新的標(biāo)志物能否反映藥物的治療療效或相關(guān)的作用？新的標(biāo)志物作為篩選、診斷、預(yù)后指標(biāo)能否改善臨床實(shí)踐？價(jià)格效益比值如何？心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v本書英文版CardiovascularBiomarkers :Pathophysiology and Disease Management由David A.Morrow博士組織國際頂級的心臟領(lǐng)域和實(shí)驗(yàn)室專家編撰，是心血管生物標(biāo)志物方面的權(quán)威專著。Morrow博士是TIMI研究組中的重要成員，是國際公認(rèn)的心臟缺血患者危險(xiǎn)分層的頂級專家，是許多世界上有關(guān)心臟標(biāo)志物應(yīng)用指南及標(biāo)準(zhǔn)制定的重要參與者.心血

30、管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v自噬(autophagy)是指細(xì)胞消化自身蛋白質(zhì)或細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)（細(xì)胞器）的一種自食過程。當(dāng)細(xì)胞受外界壓力時(shí)也會(huì)利用這過程維持自身生存。 自噬在心肌缺血-再灌注、擴(kuò)張型心肌病、心力衰竭 等疾病中普遍存在，在維持心肌細(xì)胞穩(wěn)態(tài)，無論是結(jié) 構(gòu)還是功能方面都有重要作用。慢性心肌缺血中的自噬作用心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v199020042012Autophagy-related paper心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v

31、Ryter,et al. Proc Am Thorac Soc Vol 7. pp 4047, 2010心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v自噬與凋亡自噬“自己吃自己”，是凋亡之外的第二種程序性細(xì)胞死亡方式。細(xì)胞的自噬被認(rèn)為是參與絕大多數(shù)長半衰期蛋白質(zhì)的降解。自噬一旦被過分激活，就會(huì)導(dǎo)致自噬性細(xì)胞死亡（Autophagic Cell Death），這是有別于凋亡的另一種程序性細(xì)胞死亡。凋亡也稱為型程序性細(xì)胞死亡，是細(xì)胞的一種基本生物學(xué)現(xiàn)象，在多細(xì)胞生物去除不需要的或異常的細(xì)胞中起著必要的作用。細(xì)胞凋亡是機(jī)體清除多余、變異或惡化細(xì)胞的一種主動(dòng)、程序化生理過程。該過程的正常與紊亂與機(jī)體進(jìn)行新陳代謝

32、、保持自身相對穩(wěn)定以及腫瘤發(fā)生等密切相關(guān)。自噬和凋亡屬于程序性細(xì)胞死亡自噬通常有助于細(xì)胞存活，自噬過度激活會(huì)破壞過多的蛋白質(zhì) 和細(xì)胞器，導(dǎo)致細(xì)胞死亡，稱為2型程序性細(xì)胞死亡 而細(xì)胞凋亡卻無一例外地最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡 心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究vProgression of cell apoptosis, visualised with Annexin V-Oregon Green.Apoptosis 凋亡細(xì)胞的典型形態(tài)學(xué)特點(diǎn)表現(xiàn)為：細(xì)胞皺縮、體積縮??；部分細(xì)胞器、核糖體和核碎片被細(xì)胞膜包裹形成凋亡小體，從細(xì)胞表面出芽脫落，最后被具有吞噬功能的細(xì)胞如巨噬細(xì)胞、上皮細(xì)胞等吞噬；磷脂酰絲氨酸外

33、翻；細(xì)胞核染色質(zhì)濃縮、邊緣化、染色質(zhì)DNA斷裂。 心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究vLin Y,et al. oncogene (2013),1-10Chal-24 induces non-apoptotic cell deathTRAIL (200ng/ml for A549) for 8h were used as a control of apoptotic cell deathJNK and ERK activation is required for Chal-24-inducedcell death心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v自噬與自噬性細(xì)胞死亡自噬(Autophagy)

34、是指從粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的無核糖體附著區(qū)脫落的雙層膜包裹部分胞質(zhì)和細(xì)胞內(nèi)需降解的細(xì)胞器、蛋白質(zhì)等成分形成自噬體(autophagosome)，并與溶酶體融合形成自噬溶酶體，降解其所包裹的內(nèi)容物，以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞本身的代謝需要和某些細(xì)胞器的更新。自噬是環(huán)境變化的適應(yīng)性反應(yīng)和細(xì)胞對代謝應(yīng)激采取的措施自噬有處理廢物的功能 自噬抑制活性氧簇(ROS)的產(chǎn)生，具有細(xì)胞保護(hù)作用 在細(xì)胞無法繼續(xù)維持自身生存時(shí)自噬可誘導(dǎo)細(xì)胞主動(dòng)性死亡.心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v哺乳動(dòng)物細(xì)胞autophagy的三種主要方式 ：根據(jù)細(xì)胞內(nèi)底物運(yùn)送到溶酶體腔方式的不同，哺乳動(dòng)物細(xì)胞autophagy 可分為三種主要方式 ：大自噬（Ma

35、croautophagy）：由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)來源的膜包繞待降解物形成自噬體，然后與溶酶體融合并降解其內(nèi)容物。小自噬（Microautophagy）：溶酶體的膜直接包裹長壽命蛋白等，并在溶酶體內(nèi)降解。分子伴侶介導(dǎo)的自噬 (Chaperone-mediated autophagy，CMA)：胞質(zhì)內(nèi)蛋白結(jié)合到分子伴侶后被轉(zhuǎn)運(yùn)到溶酶體腔中，然后被溶酶體酶消化。心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究vAutophagy, a membrane trafficking process leading to lysosomal degradation, is implicated in cancer, neurodeg

36、eneration, and aging.在形態(tài)學(xué)上，即將發(fā)生自噬的細(xì)胞胞漿中出現(xiàn)大量游離的膜性結(jié)構(gòu)，稱為前自噬泡（自噬發(fā)生的鐵證之一）。前自噬泡逐漸發(fā)展成為由雙層膜結(jié)構(gòu)形成的自噬泡（自噬發(fā)生的鐵證之二），其中包裹著變性壞死的細(xì)胞器和部分細(xì)胞漿。自噬泡的外膜與溶酶體膜融合，內(nèi)膜及其包裹的物質(zhì)進(jìn)入溶酶體腔，被溶酶體中的酶水解。此過程使進(jìn)入溶酶體中的物質(zhì)分解為其組成成分，并被細(xì)胞再利用，這種吞噬了細(xì)胞內(nèi)成分的溶酶體被稱為自噬溶酶體。自噬泡Autolysosomes自噬溶酶體 細(xì)胞的自噬過程心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究vRyter,et al. Proc Am Thorac Soc Vol 7

37、. pp 4047, 2010心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v自噬泡(phagophore)或自噬體(autophagosome)形成方面的穩(wěn)態(tài)監(jiān)測方法和細(xì)胞自噬的過程(Flux)監(jiān)測。檢測自噬的金指標(biāo)：透射電鏡檢測。自噬體膜標(biāo)志性蛋白質(zhì)的檢測：利用Western Blot檢測LC3-III比值的變化以評價(jià)自噬形成或在熒光顯微鏡下采用GFP-LC3融合蛋白來示蹤自噬形成。研究Beclin1(哺乳動(dòng)物自噬的標(biāo)記蛋白，參與自噬體膜的形成)單丹(磺)酰戊二胺(MDC)染色法：包括自噬體，所有酸性液泡都被染色，故屬于非特異性的。對自噬溶酶體及其殘?bào)w的檢測有吖啶橙染色法；殘?bào)w的檢測主要是對脂褐素顆粒

38、的顯微觀察。自噬體的研究和檢測方法心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v電鏡 Phagophore的特征為：新月狀或杯狀，雙層或多層膜，有包繞胞漿成分的趨勢。自噬體（AV1）的特征為：雙層或多層膜的液泡狀結(jié)構(gòu)，內(nèi)含胞漿成分，如線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、核糖體等。自噬溶酶體（AV2）的特征為：單層膜，胞漿成分已降解。（autophagic vacuole，AV）無自噬時(shí)，GFP-LC3融合蛋白彌散在胞漿中；自噬形成時(shí)，GFP-LC3融合蛋白轉(zhuǎn)位至自噬體膜，在熒光顯微鏡下形成多個(gè)明亮的綠色熒光斑點(diǎn)，一個(gè)斑點(diǎn)相當(dāng)于一個(gè)自噬體，可以通過計(jì)數(shù)來評價(jià)自噬活性的高低。熒光顯微鏡下：采用GFP-LC3融合蛋白示蹤自噬形成

39、Western Blot檢測LC3-II/I比值的變化心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v正常培養(yǎng)的細(xì)胞自噬活性很低，不適于觀察，可對自噬進(jìn)行人工干預(yù)和調(diào)節(jié)。（一）自噬誘導(dǎo)劑1）Bredeldin A / Thapsigargin / Tunicamycin ：模擬內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激2）Carbamazepine/ L-690，330/ Lithium Chloride（氯化鋰）：IMPase 抑制劑（即 Inositol monophosphatase，肌醇單磷酸酶）3）Earles平衡鹽溶液：制造饑餓4）N-Acetyl-D-sphingosine（C2-ceramide）：Class I PI3

40、K Pathway抑制劑5）Rapamycin：mTOR抑制劑6）Xestospongin B/C：IP3R阻滯劑（二）自噬抑制劑1）3-Methyladenine（3-MA）：（Class III PI3K） hVps34 抑制劑2）Bafilomycin A1：質(zhì)子泵抑制劑3）Hydroxychloroquine（羥氯喹）：Lysosomal lumen alkalizer（溶酶體腔堿化劑）心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究vAutophagy in chronically ischemic myocardium1、動(dòng)物模型的制作2、自噬形態(tài)學(xué)的電鏡觀察3、蛋白的提取4、雙相電泳分離5、M

41、ALDI TOF MS分析6、數(shù)據(jù)庫搜索7、差異表達(dá)蛋白的WB驗(yàn)證與定位研究心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v動(dòng)物模型的制作Chronically instrumented pigs were studied with repetitive myocardial ischemia produced by one, three, or six episodes of 90 min of coronary stenosis(冠狀動(dòng)脈狹窄) 30% reduction in baseline coronary flow followed by reperfusion(再灌注) every 12 h

42、 with the non-IS region as control. In this model, wall thickening in the IS region was chronically depressed by 37%. 心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究vElectron micrographs of different types of AVs observed in the six-episode chronically IS region (AC) and six-episode NI region (D).(A) Autophagic vacuoles(Avs,自體吞噬

43、泡) containing remnants of mitochondria are demonstrated. (B) Doublemembrane AVs containing recognizable cytoplasmic contents are displayed.(C) AVs containing multivesicular bodies surrounded by a sequestering membrane are demonstrated. (D) These AVs were not observed in the six-episodeNI. Arrows ind

44、icate AVs. (Magnifications: 1,4002,000, AD; 5,000, A and B Insets.)心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究vAlteration of cathepsin D in chronically IS myocardium.(Upper) 2D gel map of protein extracts from chronically IS region after six episodes. (Lower)A magnified gel region from the NI region (Left) and the IS after e

45、ither three (Center) or six (Right) episodes of CS. Arrows indicate the spots after six episodes that were all later identified as cathepsin D. MW, molecular weight.Each lower image is a 6-fold magnification from the original gel.心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究vComparison of expression level of cathepsin B and D

46、in chronically IS myocardium at different episodesComparison of expression level of cathepsin B and D in chronically IS myocardium at different episodes. (A and B) Western blot analysis of cathepsin D (A) and cathepsin B (B) at six episodes chronically IS vs. NI regions (Upper) and three episodes (L

47、ower). The expression of cathepsins B and D significantly increased at six episodes (*, P 0.01; *, P 0.05 vs. NI). (C) The direct comparison of levels of cathepsin B (CB) and cathepsin D (CD) in chronically IS in one, three, and six episodes, again showing marked increased expression of both protein

48、s after six episodes. (D) The elevated expression of cathepsins B and D was confirmed to occur in myocytes from the chronically IS myocardium. ADU, arbitrary densitometric units. 心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究vEnzyme activity assays of cathepsin B (A), cathepsin D (B), and -hexosaminidase (C)Enzyme activity assa

49、ys of cathepsin B (A), cathepsin D (B), and -hexosaminidase (C). Activity of both cathepsin B and D and -hexosaminidase was much higher at six episodes in chronically IS region vs. NI region compared with three episodes vs. NI. *, P 0.01 vs. NI; *, P 0.05 vs NI. 心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究vWestern blot analys

50、is of Hsc73 at six episodes chronically IS vs. NI(non-IS) myocardium (A) and at three episodes in isolated myocytes (B) and comparing effects in necrotic tissue after myocardial infarction (IF) vs. NI regions (C).The expression of Hsc73 increased significantly in the chronically IS of six episodes (

51、*, P 0.01 vs. NI), but not in the IS after three episodes compared with NI. The elevation of Hsc73 after six episodes was confirmed in isolated myocytes. In contrast, the expression of Hsc73 decreased in the infarcted region. ADU, arbitrary densitometric units. 心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究vWestern blot analysi

52、s of beclin 1 at three and six episodes (chronically IS vs.NI regions)Western blot analysis of beclin 1 at three and six episodes (chronically IS vs. NI regions) (A) and in isolated myocytes from the chronically IS (B) and comparing effects in necrotic tissue after myocardial infarction (IF) vs. NI

53、regions (C). The expression of beclin 1 was increased significantly in the chronically IS after six episodes (*, P 0.05 vs. NI), but not after three episodes. The elevation of beclin 1 after six episodes was confirmed in isolated myocytes. In contrast, the expression of beclin 1 decreased in the inf

54、arcted region. ADU, arbitrary densitometric units. 心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究vWestern blot analysis of LC3 at six episodes chronically IS vs.NI myocardium.Western blot analysis of LC3 at six episodes chronically IS vs. NI myocardium. The LC3-II/LC3-I ratio was significantly increased in the chronically IS (*

55、, P 0.01 vs. NI). Western blotting of actin showed equal loading of the samples. 心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究vLocalization of cathepsin B and dual labeling of cathepsin B and apoptosisLocalization of cathepsin B and dual labeling of cathepsin B and apoptosis. (A) Fluorescent immunostaining for detection of cat

56、hepsin B in myocytes after six episodes. Cathepsin B (green) was localized to myocytes. (B and C) Dual labeling of apoptosis (TUNEL) and cathepsin B. (B) Staining for cathepsin B (blue) was more intense in areas where apoptosis was absent. (C) Conversely, myocytes associated with increased apoptosis

57、 (green) exhibited much less cathepsin B (indicated by blue and the arrow) immunostaining. (Magnification: 430, A; 275, B and C.) 心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v結(jié) 論證實(shí)了一種調(diào)節(jié)自噬過程的蛋白質(zhì)-組織蛋白酶D的表達(dá)增加還發(fā)現(xiàn)組織蛋白酶B、熱休克同源蛋白Hsc73(一種分子伴侶介導(dǎo)自噬的關(guān)鍵標(biāo)志蛋白)、哺乳動(dòng)物自噬基因beclin 1、微管相關(guān)蛋白1輕鏈3(一種自噬泡標(biāo)志物)的表達(dá)增加組織蛋白酶D的免疫組化染色結(jié)果顯示, 沒

58、有發(fā)現(xiàn)明顯的凋亡, 說明由缺血所觸發(fā)的自噬是適應(yīng)性機(jī)能, 它可以抑制凋亡, 減少慢性缺血所帶來的有害影響.心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v缺血階段通過AMPK-eEF2KmTOR 通路引發(fā)自噬，而再灌注階段卻是通過Class III PI3KBeclin 1途徑心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v 脂肪組織的 蛋白質(zhì)組學(xué)研究近年來，隨著脂肪組織內(nèi)分泌功能的發(fā)現(xiàn)，以蛋白質(zhì)組學(xué)的技術(shù)和策略對其開展研究成為人們十分關(guān)注的一個(gè)領(lǐng)域。心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v根據(jù)分布、形態(tài)和功能的不同，可分為棕色脂肪組織，白色脂肪組織。棕色脂肪組織(brown adipose tissue): 細(xì)胞內(nèi)含有

59、大量的細(xì)胞色素C和線粒體而呈棕色；細(xì)胞間含有豐富的毛細(xì)血管和大量的交感神經(jīng)纖維末梢，組成了一個(gè)完整的產(chǎn)熱系統(tǒng)。含量：僅占正常人體重的1%（不同體重成人含量為肥胖人正常人瘦人）。分布：有限，僅見于頸、肩、腋窩、肩胛區(qū)部位及皮下、甲狀腺、腎門、自主神經(jīng)、嗜鉻細(xì)胞。形態(tài)：呈多邊形，直徑約60m，內(nèi)含多個(gè)小脂滴。棕色脂肪組織是近年才被人們發(fā)現(xiàn)的一種脂肪組織，是哺乳動(dòng)物體內(nèi)非顫栗產(chǎn)熱的主要來源心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v脂肪組織內(nèi)分泌的新器官近年來發(fā)現(xiàn)，脂肪組織(脂肪細(xì)胞、前脂肪細(xì)胞和巨噬細(xì)胞)還是一種代謝十分活躍、功能非常復(fù)雜的內(nèi)分泌和旁分泌器官，分泌許多細(xì)胞因子和生物活性因子。在2005年第

60、65屆美國糖尿病學(xué)會(huì)（ADA）年會(huì)上，脂肪組織源性因子的研究成為一個(gè)亮點(diǎn)，Phillip E Scherer博士在會(huì)上作了題為“脂肪組織：從脂肪儲(chǔ)存庫到內(nèi)分泌器官”的精彩報(bào)告。脂肪組織作為一個(gè)內(nèi)分泌器官已成為學(xué)術(shù)界的共識，脂肪內(nèi)分泌學(xué)已成為內(nèi)分泌學(xué)的一個(gè)新的領(lǐng)域。心血管系統(tǒng)與消化系統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)研究v“脂肪組織：從脂肪儲(chǔ)存庫到內(nèi)分泌器官”的報(bào)告要點(diǎn)脂肪組織及其分泌的脂聯(lián)素(adiponectin) 在胰島素抵抗、心血管疾病、代謝綜合征等發(fā)病機(jī)制中的重要作用，并以最新建立的轉(zhuǎn)基因小鼠模型對脂肪組織的功能作進(jìn)一步探討。脂聯(lián)素是脂肪細(xì)胞中表達(dá)最為豐富的激素，在血漿中有相當(dāng)高的濃度，女性高于男性。脂聯(lián)素