藥物分析實(shí)驗(yàn)教材10版

1、WORD 專業(yè)資料. 師大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院藥物分析實(shí)驗(yàn)?zāi)?錄實(shí)驗(yàn)一 葡萄糖中一般雜質(zhì)檢查 - 1實(shí)驗(yàn)一附錄 - 5實(shí)驗(yàn)二 葡萄糖注射液分析 - 15實(shí)驗(yàn)二附錄 - 17實(shí)驗(yàn)三 異煙肼的溴酸鉀法含量測定 - 20實(shí)驗(yàn)三附錄 - 22實(shí)驗(yàn)四 雙波長分光光度法測定復(fù)方制劑含量 - 25實(shí)驗(yàn)四附錄 - 27實(shí)驗(yàn)五 維生素C制劑的含量測定 - 29實(shí)驗(yàn)五附錄 - 31實(shí)驗(yàn)六 阿司匹林片的質(zhì)量分析 - 32實(shí)驗(yàn)六附錄 - 34實(shí)驗(yàn)一 葡萄糖中一般雜質(zhì)檢查一、目的要求 1. 掌握藥物的一般雜質(zhì)檢查原理與實(shí)驗(yàn)方法。 2. 掌握雜質(zhì)限度試驗(yàn)的概念與計(jì)算方法。 3. 熟悉一般雜質(zhì)檢查項(xiàng)目與意義。 二、主要儀器與試劑

2、 50mL納氏比色管，古蔡氏法測砷裝置，電子天平，刻度吸管，碘量瓶，鉑坩堝，瓷皿，比濁用玻璃管，水浴鍋，回流冷凝管，傘棚燈（照度為1000lx）、恒溫減壓干燥器、烘箱、馬福爐1. 葡萄糖原料藥2. 酚酞指示液（參見實(shí)驗(yàn)一附錄1）3. 氫氧化鈉滴定液 0.02mol/L4. 濁度標(biāo)準(zhǔn)貯備液（參見實(shí)驗(yàn)一附錄15）5. 濁度標(biāo)準(zhǔn)原液（參見實(shí)驗(yàn)一附錄15）6. 1號濁度標(biāo)準(zhǔn)液（參見實(shí)驗(yàn)一附錄15，學(xué)生臨用時(shí)制備）7. 比色用重鉻酸鉀液（參見實(shí)驗(yàn)一附錄3）8. 比色用硫酸銅液（參見實(shí)驗(yàn)一附錄4）9. 比色用氯化鈷液（參見實(shí)驗(yàn)一附錄5）10. 乙醇90%11. 稀硝酸（取硝酸105mL，加水稀釋至1000

3、mL）12. 標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液（參見實(shí)驗(yàn)一附錄6）13. 硝酸銀試液 0.1mol/L，16.99g1000mL14. 碘試液 0.05mol/L，6.35g1000mL15. 稀鹽酸，取鹽酸234mL，加水稀釋至1000mL16. 標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液（參見實(shí)驗(yàn)一附錄13）17. 氯化鋇溶液 25%18. 磺基水酸溶液（15）19. 硫酸20. 硝酸21. 鹽酸22. 硫氰酸銨溶液（30100）23. 標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液（儲備液，參見實(shí)驗(yàn)一附錄14）24. 標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液（儲備液，參見實(shí)驗(yàn)一附錄25）25. 醋酸鹽緩沖液（pH3.5）26. 稀焦糖溶液(參見實(shí)驗(yàn)一附錄15)27. 硫代乙酰胺試液(參見實(shí)驗(yàn)一附錄

4、18)28. 溴化鉀溴試液(參見實(shí)驗(yàn)一附錄16)29. 標(biāo)準(zhǔn)砷溶液（每1mL相當(dāng)于1g的As，參見實(shí)驗(yàn)一附錄26）30. 碘化鉀試液(參見實(shí)驗(yàn)一附錄19)31. 酸性氯化亞錫試液(參見實(shí)驗(yàn)一附錄17)32. 鋅粒33. 溴化汞試紙34. 醋酸鉛棉花三、實(shí)驗(yàn)方法、步驟葡萄糖 （Glucose）(C6H12O6H2 O 198.17) 1. 酸度 取本品2.0g，加水20mL溶解后，加酚酞指示液3滴與氫氧化鈉滴定液（0.02mol/L）0.20mL，應(yīng)顯粉紅色。 2. 溶液的澄清度與顏色 取本品5g，加熱水溶解后，放冷，用水稀釋至10mL，溶液應(yīng)澄清無色；如顯渾濁，與1號濁度標(biāo)準(zhǔn)液（中國藥典200

5、5年版二部附錄 B）比較，不得更濃；如顯色，與對照液（取比色用氯化鈷液3mL、比色用重鉻酸鉀液3mL與比色用硫酸銅液6mL，加水稀釋成50mL）1.0mL加水稀釋至10mL比較，不得更深。 3. 乙醇溶液的澄清度 取本品1.0g，加90%乙醇30mL，置水浴上加熱回流約10min，溶液應(yīng)澄清。 4. 氯化物 取本品0.6g，加水溶解使成25mL，再加稀硝酸10mL；溶液如不澄清，應(yīng)濾過；置50mL納氏比色管中，加水使成約40mL，搖勻，即得供試溶液。另取標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液6.0mL，置50mL納氏比色管中，加稀硝酸10mL，加水使成40mL，搖勻，即得對照溶液。于供試溶液與對照溶液中，分別加入硝酸

6、銀試液1.0mL，用水稀釋，使成50mL，搖勻，在暗處放置5分鐘，同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察、比較（中國藥典2005年版二部附錄A）。供試溶液所顯渾濁度不得較對照液更濃（0.01%）。 5. 硫酸鹽 取本品2.0g，加水溶解使成約40mL；溶液如不澄清，應(yīng)濾過；置50mL納氏比色管中，加稀鹽酸2mL，搖勻，即得供試溶液。另取標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液2.0mL，置50mL納氏比色管中，加水使成約40mL，加稀鹽酸2mL，搖勻，即得對照溶液。于供試溶液與對照溶液中，分別加入25%氯化鋇溶液5mL，用水稀釋至50mL，充分搖勻，放置10分鐘，同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察、比較（中國藥典200

7、5年版二部附錄B）。供試溶液所顯渾濁度不得較對照液更濃（0.01%）。 6. 亞硫酸鹽與可溶性淀粉 取本品1.0g，加水10mL溶解后，加碘試液1滴，應(yīng)即顯黃色。 7. 干燥失重 取本品，在105干燥至恒重，減失重量不得過9.5%（中國藥典2005年版二部附錄L）。 8. 熾灼殘?jiān)?不得過0.1%（中國藥典2005年版二部附錄N）。 9. 蛋白質(zhì) 取本品1.0g，加水10mL溶解后，加磺基水酸溶液（15）3mL，不得發(fā)生沉淀。 10. 鐵鹽 取本品2.0g，加水20mL溶解后，加硝酸3滴，緩緩煮沸5分鐘，放冷，加水稀釋使成45mL，加硫氰酸銨溶液（30100）3mL，搖勻，如顯色，與標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液

8、2.0mL用同一方法制成的對照液比較，不得更深（0.001%）。 11. 重金屬 取25mL納氏比色管兩支，甲管中加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量(2mL)與醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2mL后，加水稀釋成25mL。取本品4.0g，置乙管中，加水適量溶解后，加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2mL，加水使成25mL；若供試液帶顏色，可在甲管中滴加少量的稀焦糖溶液或其他無干擾的有色溶液，使之與乙管顏色一致。再在甲乙兩管中分別加硫代乙酰胺試液各2mL，搖勻，放置2分鐘，同置白紙上，自上向下透視，乙管中顯出的顏色與甲管比較，不得更深（中國藥典2005年版二部附錄H第一法），含重金屬不得過百萬分之五。 12. 砷鹽 取本品

9、2.0g，加水5mL溶解后，加稀硫酸5mL與溴化鉀溴試液0.5mL，置水浴上加熱約20分鐘，使保持稍過量的溴存在，必要時(shí)，再補(bǔ)加溴化鉀溴試液適量，并隨時(shí)補(bǔ)充蒸散的水分，放冷，加鹽酸5mL與水適量使成28mL，置測砷瓶中，作為供試溶液。另精密量取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液2mL，照供試品制備項(xiàng)下方法，自“加水5mL溶解后”起，至“置測砷瓶中”，同法處理，作為標(biāo)準(zhǔn)液。 取供試溶液和標(biāo)準(zhǔn)液分別進(jìn)行以下操作：加碘化鉀試液5mL與酸性氯化亞錫試液5滴，在室溫放置10min后，加鋅粒2g，立即將裝妥的導(dǎo)氣管密塞于測砷瓶上，并將測砷瓶置2540水浴中，反應(yīng)45min，取出溴化汞試紙，比較。供試溶液生成的砷斑與標(biāo)準(zhǔn)砷斑比較（

10、中國藥典2005年版二部附錄J 第一法），不得更深（0.0001%）。 四、注意事項(xiàng) 1比色管的正確使用選擇配對的兩支納氏比色管，用清潔液蕩洗除去污物，再用水沖洗干凈。采用旋搖的方法使管液體混合均勻。 2正確選用量具根據(jù)檢查試驗(yàn)一般允許誤差為10%的要求和藥品、試劑的取用量，選擇合適的容量儀器。 3平行操作標(biāo)準(zhǔn)與樣品必須同時(shí)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，加入試劑量等均應(yīng)一致。觀察時(shí)，兩管受光照的程度應(yīng)一致，使光線從正面照入，比色時(shí)置白色背景上，比濁時(shí)置黑色背景上，自上而下地觀察。 4注意刻度吸管的正確使用和觀察。 五、思考題1.古蔡氏檢砷法中所加各試劑的作用與操作注意點(diǎn)是什么？2.比色比濁操作應(yīng)遵循的原則是什么？

11、實(shí)驗(yàn)一附錄1. 酚酞指示液 取酚酞1g，加乙醇100mL使溶解，即得。變色圍 pH8.310.0（無色紅）。2. 氫氧化鈉滴定液 氫氧化鈉滴定液(1mol/L、0.5mol/L或0.1mol/L) NaOH=40.00 40.00g1000mL 20.00g1000mL 4.000g1000mL配制 取氫氧化鈉適量，加水振搖使溶解成飽和溶液，冷卻后，置聚乙烯塑料瓶中，靜置數(shù)日，澄清后備用。 氫氧化鈉滴定液(1mol/L) 取澄清的氫氧化鈉飽和溶液56mL，加新沸過的冷水使成1000mL，搖勻。 氫氧化鈉滴定液(0.5mol/L) 取澄清的氫氧化鈉飽和溶液28mL，加新沸過的冷水使成1000mL

12、，搖勻。 氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)取澄清的氫氧化鈉飽和溶液5.6mL，加新沸過的冷水使成1000mL，搖勻。 標(biāo)定 氫氧化鈉滴定液(1mol/L) 取在105干燥至恒重的基準(zhǔn)鄰苯二甲酸氫鉀約6g，精密稱定，加新沸過的冷水50mL，振搖，使其盡量溶解；加酚酞指示液2滴，用本液滴定；在接近終點(diǎn)時(shí)，應(yīng)使鄰苯二甲酸氫鉀完全溶解，滴定至溶液顯粉紅色。每1mL氫氧化鈉滴定液(1mol/L) 相當(dāng)于204.2mg的鄰苯二甲酸氫鉀。根據(jù)本液的消耗量與鄰苯二甲酸氫鉀的取用量，算出本液的濃度，即得。 氫氧化鈉滴定液(0.5mol/L) 取在105干燥至恒重的基準(zhǔn)鄰苯二甲酸氫鉀約3g,照上法標(biāo)定。每1mL

13、氫氧化鈉滴定液(0.5mol/L)相當(dāng)于102.1mg的鄰苯二甲酸氫鉀。 氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L) 取在105干燥至恒重的基準(zhǔn)鄰苯二甲酸氫鉀約0.6g，照上法標(biāo)定。每1mL氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于20.42mg的鄰苯二甲酸氫鉀。 如需用氫氧化鈉滴定液(0.05mol/L、0.02mol/L或0.01mol/L)時(shí)，可取氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)加新沸過的冷水稀釋制成。必要時(shí)，可用鹽酸滴定液(0.05mol/L、0.02mol/L或0.01mol/L)標(biāo)定濃度。 貯藏 置聚乙烯塑料瓶中，密封保存；塞中有2孔，孔各插入玻璃管1支，1管與鈉石灰管相連，1管供吸出本液

14、使用。 3. 比色用重鉻酸鉀液 取重鉻酸鉀，研細(xì)后，在120干燥至恒重，精密稱取0.4000g置500mL量瓶中，加適量水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。每1mL溶液中含0.800mg的K2Cr2O7。4. 比色用硫酸銅液 取硫酸銅約32.5g，加適量的鹽酸溶液(140)使溶解成500mL，精密量取10mL，置碘量瓶中，加水50mL、醋酸4mL與碘化鉀2g，用硫代硫酸鈉滴定液(0.1mol/L)滴定，至近終點(diǎn)時(shí)，加淀粉指示液2mL，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失。每1mL硫代硫酸鈉滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于24.97mg的CuSO45H2O。根據(jù)上述測定結(jié)果，在剩余的原溶液中加適量的鹽酸溶液(140)

15、，使每1mL溶液中適含62.4mg的CuSO45H2O，即得。5. 比色用氯化鈷液 取氯化鈷約32.5g，加適量的鹽酸溶液(140)使溶解成500mL,精密量取2mL，置錐形瓶中，加水200mL，搖勻，加氨試液至溶液由淺紅色轉(zhuǎn)變至綠色后，加醋酸-醋酸鈉緩沖液(pH6.0)10mL，加熱至60，再加二甲酚橙指示液5滴，用乙二胺四醋酸二鈉滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液顯黃色。每1mL乙二胺四醋酸二鈉滴定液(0.05mol/L)相當(dāng)于11.90mg的CoCl26H2O。根據(jù)上述測定結(jié)果，在剩余的原溶液中加適量的鹽酸溶液(140)，使每1mL溶液中適含59.5mgCoCl26H2O，即得。6.

16、 標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液的制備 稱取氯化鈉0.165g，置1000mL量瓶中，加水適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。 臨用前，精密量取貯備液10mL，置100mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得(每1mL相當(dāng)于10g的Cl)。 附注 用濾紙過濾時(shí)，濾紙中如含有氯化物，可預(yù)先用含有硝酸的水溶液洗凈后使用。 7. 稀硝酸 取硝酸105mL，加水稀釋至1000mL，即得。本液含HNO3應(yīng)為9.510.5。 8. 硝酸銀試液 可取用硝酸銀滴定液(0.1mol/L)9. 硝酸銀滴定液(0.1mol/L) AgNO3=169.87 16.99g1000mL 配制 取硝酸銀17.5g，加水適量使溶解成10

17、00mL，搖勻。 標(biāo)定 取在110干燥至恒重的基準(zhǔn)氯化鈉約0.2g， 精密稱定，加水50mL使溶解，再加糊精溶液(150)5mL、碳酸鈣0.1g與熒光黃指示液8滴，用本液滴定至渾濁液由黃綠色變?yōu)槲⒓t色。每1mL硝酸銀滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于5.844mg的氯化鈉。根據(jù)本液的消耗量與氯化鈉的取用量，算出本液的濃度，即得。 如需用硝酸銀滴定液(0.01mol/L)時(shí),可取硝酸銀滴定液(0.1mol/L)在臨用前加水稀釋制成。 貯藏 置玻璃塞的棕色玻瓶中，密閉保存。10. 碘試液 可取用碘滴定液(0.05mol/L)。11. 碘滴定液(0.1mol/L) I2=253.81 12.69g10

18、00mL 配制 取碘13.0g,加碘化鉀36g與水50mL溶解后，加鹽酸3滴與水適量使成1000mL，搖勻，用垂熔玻璃濾器濾過。 標(biāo)定 取在105干燥至恒重的基準(zhǔn)三氧化二砷約0.15g，精密稱定，加氫氧化鈉滴定液(1mol/L)10mL，微熱使溶解，加水20mL與甲基橙指示液1滴，加硫酸滴定液(0.5mol/L)適量使黃色轉(zhuǎn)變?yōu)榉奂t色，再加碳酸氫鈉2g、水50mL與淀粉指示液2mL，用本液滴定至溶液顯淺藍(lán)紫色。每1mL碘滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于4.946mg的三氧化二砷。根據(jù)本液的消耗量與三氧化二砷的取用量，算出本液的濃度。即得。 如需用碘滴定液(0.05mol/L)時(shí)，可取碘滴定液(

19、0.1mol/L)加水稀釋制成。 貯藏 置玻璃塞的棕色玻瓶中，密閉，在涼處保存。 12.稀鹽酸取鹽酸234mL，加水稀釋至1000mL，即得。本液含HCl應(yīng)為9.510.5。 13. 標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液的制備稱取硫酸鉀0.181g，置1000mL量瓶中，加水適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得（每1mL相當(dāng)于100g的SO4）14. 標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液的制備 稱取硫酸鐵銨 FeNH4(SO4)212H2O 0.863g，置1000mL量瓶中，加水溶解后，加硫酸2.5mL，用水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。臨用前，精密量取貯備液10mL，置100mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得(每1mL相當(dāng)于10g的F

20、e)。15.稀焦糖溶液取蔗糖或葡萄糖約5g，置磁坩堝中，在玻璃棒不斷攪拌下，加熱至呈棕色糊狀，放冷，用水溶解成約25mL，濾過，貯于滴瓶中備用。臨用時(shí)，根據(jù)供試液色澤深淺，取適當(dāng)量調(diào)節(jié)使用。16溴化鉀溴試液取溴30g與溴化鉀30g，加水使溶解成100mL，即得。17. 酸性氯化亞錫試液 取氯化亞錫20g，加鹽酸使溶解成50mL，濾過，即得。本液配成后3個(gè)月即不適用。 18.硫代乙酰胺試液 取硫代乙酰胺4g，加水使溶解成100mL,置冰箱中保存。19. 碘化鉀試液 取碘化鉀16.5g，加水使溶解成100mL，即得。本液應(yīng)臨用新制。20. 中國藥典2005年版二部附錄 B 澄清度檢查法 本法系在室

21、溫條件下，將用水稀釋至一定濃度的供試品溶液與等量的濁度標(biāo)準(zhǔn)液分別置于配對的比濁用玻璃管（徑1516mm，平底，具塞，以無色、透明、中性硬質(zhì)玻璃制成）中，在濁度標(biāo)準(zhǔn)液制備后5分鐘后，在暗室垂直同置于傘棚燈下,照度為1000lx，從水平方向觀察、比較；用以檢查溶液的澄清度或其渾濁程度。除另有規(guī)定外，供試品溶解后應(yīng)立即檢視。 正文中規(guī)定的“澄清”,系指供試品溶液的澄清度一樣于所用溶劑，或未超過0.5號濁度標(biāo)準(zhǔn)液。濁度標(biāo)準(zhǔn)貯備液的制備 稱取于105干燥至恒重的硫酸肼1.00g，置100mL容量瓶中，加水適量使溶解，必要時(shí)可在40的水浴中溫?zé)崛芙?，并用水稀釋至刻度，搖勻，放置46小時(shí)；取此溶液與等容量的

22、10烏洛托品溶液混合，搖勻，于25避光靜置24小時(shí)，即得。本液置冷處避光保存，可在兩個(gè)月使用，用前搖勻。 濁度標(biāo)準(zhǔn)原液的制備取濁度標(biāo)準(zhǔn)貯備液15.0mL，置1000mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，取適量，置1cm吸收池中，照分光光度法（附錄 A），在550nm的波長處測定，其吸收度應(yīng)在0.120.15圍。本液應(yīng)在48小時(shí)使用，用前搖勻。 濁度標(biāo)準(zhǔn)液的制備 取濁度標(biāo)準(zhǔn)原液與水，按下表配制,即得。本液應(yīng)臨用時(shí)制備,使用前充分搖勻。 級號 0.5 1 2 3 4 濁度標(biāo)準(zhǔn)原液/mL 2.50 5.0 10.0 30.0 50.0 水/ mL 97.50 95.0 90.0 70.0 50.0 2

23、1. 中國藥典2005年版二部附錄A氯化物檢查法除另有規(guī)定外，取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的供試品，加水溶解使成25mL(溶液如顯堿性,可滴加硝酸使成中性),再加稀硝酸10mL；溶液如不澄清,應(yīng)濾過；置50mL納氏比色管中,加水使成約40mL，搖勻,即得供試溶液。另取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液,置50mL納氏比色管中，加稀硝酸10mL，加水使成40mL，搖勻，即得對照溶液。于供試溶液與對照溶液中，分別加入硝酸銀試液1.0mL，用水稀釋使成50mL，搖勻,在暗處放置5分鐘,同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察、比較，即得。 供試溶液如帶顏色，除另有規(guī)定外，可取供試溶液兩份，分置50mL納氏比色管中，

24、一份中加硝酸銀試液1.0mL，搖勻，放置10分鐘， 如顯渾濁，可反復(fù)濾過，至濾液完全澄清，再加規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液與水適量使成50mL，搖勻,在暗處放置5分鐘，作為對照溶液；另一份中加硝酸銀試液1.0mL與水適量使成50mL，搖勻，在暗處放置5分鐘，按上述方法與對照溶液比較，即得。 標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液的制備 稱取氯化鈉0.165g，置1000mL量瓶中，加水適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。 臨用前，精密量取貯備液10mL，置100mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得(每1mL相當(dāng)于10g的Cl)。 附注 用濾紙過濾時(shí)，濾紙中如含有氯化物，可預(yù)先用含有硝酸的水溶液洗凈后使用。22. 中

25、國藥典2005年版二部附錄 B 硫酸鹽檢查法 除另有規(guī)定外，取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的供試品，加水溶解使成約40mL（溶液如顯堿性，可滴加鹽酸使成中性）；溶液如不澄清，應(yīng)濾過；置50mL納氏比色管中，加稀鹽酸2mL，搖勻，即得供試溶液。另取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液,置50mL納氏比色管中,加水使成約40mL，加稀鹽酸2mL，搖勻,即得對照溶液。于供試溶液與對照溶液中,分別加入25氯化鋇溶液5mL，用水稀釋至50mL,充分搖勻，放置10分鐘，同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察、比較，即得。 供試溶液如帶顏色，除另有規(guī)定外，可取供試溶液兩份，分置50mL納氏比色管中，一份中加25氯化鋇溶液5m

26、L，搖勻,放置10分鐘，如顯渾濁，可反復(fù)濾過，至濾液完全澄清，再加規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液與水適量使成50mL，搖勻，放置10分鐘，作為對照溶液；另一份中加25氯化鋇溶液5mL與水適量使成50mL，搖勻,放置10分鐘，按上述方法與對照溶液比較，即得。 標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液的制備 稱取硫酸鉀0.181g，置1000mL量瓶中，加水適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得（每1mL相當(dāng)于100g的SO4）。23. 中國藥典2005年版二部附錄L干燥失重測定法 取供試品，混合均勻(如為較大的結(jié)晶,應(yīng)先迅速搗碎使成2mm以下的小粒)。取約1g或各藥品項(xiàng)下規(guī)定的重量，置與供試品同樣條件下干燥至恒重的扁形稱瓶中，精密稱

27、定，除另有規(guī)定外，在105干燥至恒重。從減失的重量和取樣量計(jì)算供試品的干燥失重。 供試品干燥時(shí)，應(yīng)平鋪在扁形稱量瓶中，厚度不可超過5mm，如為疏松物質(zhì)，厚度不可超過10mm。放入烘箱或干燥器進(jìn)行干燥時(shí)，應(yīng)將瓶蓋取下，置稱量瓶旁，或?qū)⑵可w半開進(jìn)行干燥；取出時(shí)，須將稱量瓶蓋好。置烘箱干燥的供試品，應(yīng)在干燥后取出置干燥器中放冷至室溫，然后稱定重量。 供試品如未達(dá)規(guī)定的干燥溫度即融化時(shí)，應(yīng)先將供試品于較低的溫度下干燥至大部分水分除去后，再按規(guī)定條 件干燥。 當(dāng)用減壓干燥器或恒溫減壓干燥器時(shí)，除另有規(guī)定外，壓力應(yīng)在2.67kPa (20mmHg)以下；干燥器中常用的干燥劑為無水氯化鈣、硅膠或五氧化二磷，

28、恒溫減壓干燥器中常用的干燥劑為五氧化二磷，除另有規(guī)定外，溫度為60。干燥劑應(yīng)保持在有效狀態(tài)。24. 中國藥典2005年版二部附錄N熾灼殘?jiān)鼨z查法 取供試品1.02.0g或各藥品項(xiàng)下規(guī)定的重量，置已熾灼至恒重的坩堝中，（如供試品分子中含有堿金屬或氟元素，則應(yīng)使用鉑坩堝）中，精密稱定，緩緩熾灼至完全炭化，放冷；除另有規(guī)定外，加硫酸0.51mL使?jié)駶?，低溫加熱至硫酸蒸氣除盡后，在700800熾灼使完全灰化，移置干燥器，放冷，精密稱定后，再在700800熾灼至恒重，即得。 如需將殘?jiān)糇髦亟饘贆z查，則熾灼溫度必須控制在500600。25. 中國藥典2005年版二部附錄 H 重金屬檢查法 重金屬系指在實(shí)

29、驗(yàn)條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉作用顯色的金屬雜質(zhì)。 標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液的制備 稱取硝酸鉛0.160g，置1000mL量瓶中，加硝酸5mL與水50mL溶解后，用水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。 臨用前，精密量取貯備液10mL，置100mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得（每1mL相當(dāng)于10g的Pb）。 配制與貯存用的玻璃容器均不得含鉛。 第一法 除另有規(guī)定外，取25mL納氏比色管兩支，甲管中加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量與醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2mL后，加水或各藥品項(xiàng)下規(guī)定的溶劑稀釋成25mL，乙管中加入各藥品項(xiàng)下規(guī)定的方法制成的供試液25mL；若供試液帶顏色，可在甲管中滴加少量的稀焦糖溶液或其它無干擾的有色

30、溶液，使之與乙管一致；再在甲乙兩管中分別加硫代乙酰胺試液各2mL，搖勻，放置2分鐘，同置白紙上，自上向下透視，乙管中顯出的顏色與甲管比較，不得更深。如在甲管中滴加稀焦糖溶液仍不能使顏色一致時(shí)，可取該藥品項(xiàng)下規(guī)定的二倍量的供試品和試液，加水或該藥品項(xiàng)下規(guī)定的溶劑使成30mL，將溶液分成甲乙二等分，乙管中加水或該藥品項(xiàng)下規(guī)定的溶劑稀釋成25mL；甲管中加入硫代乙酰胺試液2mL，搖勻，放置2分鐘，經(jīng)濾膜(孔徑3m)濾過，然后甲管中加入標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量，加水或該藥品項(xiàng)下規(guī)定的溶劑使成25mL；再分別在乙管中加硫代乙酰胺試液2mL，甲管中加水2mL，照上述方法比較，即得。 供試品如含高鐵鹽影響重金屬檢查

31、時(shí)，可取該藥品項(xiàng)下規(guī)定方法制成的供試品溶液，加抗壞血酸0.51.0g，并在對照液中加入一樣量的抗壞血酸，再照上述方法檢查。配制供試品溶液時(shí)，如使用的鹽酸超過1.0mL（或與鹽酸1.0mL相當(dāng)?shù)南←}酸），氨試液超過2mL，或加入其他試劑進(jìn)行處理者，除另有規(guī)定外，對照液中應(yīng)取同樣同量的試劑置瓷皿中蒸干后，加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2mL與水15mL，微熱溶解后，移置納氏比色管中，加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量，再用水稀釋成25mL。 26. 中國藥典2005年版二部附錄J砷鹽檢查法標(biāo)準(zhǔn)砷溶液的制備 稱取三氧化二砷0.132g，置1000mL量瓶中，加20氫氧化鈉溶液5mL溶解后，用適量的稀硫酸中和，再加稀硫

32、酸10mL，用水稀釋至刻度，搖勻,作為貯備液。 臨用前，精密量取貯備液10mL，置1000mL量瓶中，加稀硫酸10mL，用水稀釋至刻度,搖勻，即得(每1mL相當(dāng)于1g的As)。第一法(古蔡氏法) 儀器裝置 如圖1。A為100mL標(biāo)準(zhǔn)磨口錐形瓶；B為中空的標(biāo)準(zhǔn)磨口塞，上連導(dǎo)氣管C(外徑8.0mm，徑6.0mm)，全長約180mm；D為具孔的有機(jī)玻璃旋塞,其上部為圓形平面,中央有一圓孔，孔徑與導(dǎo)氣管C的徑一致，其下部孔徑與導(dǎo)氣管C的外徑相適應(yīng)，將導(dǎo)氣管C的頂端套入旋塞下部孔，并使管壁與旋塞的圓孔適相吻合。粘合固定；E為中央具有圓孔（孔徑6.0mm）的有機(jī)玻璃旋塞蓋，與D緊密吻合。 測試時(shí)，于導(dǎo)氣管

33、C中裝入醋酸鉛棉花60mg(裝管高度為6080mm)，再于旋塞D的頂端平面上放一片溴化汞試紙（試紙大小以能覆蓋孔徑而不露出平面外為宜），蓋上旋塞蓋E并旋緊，即得。 標(biāo)準(zhǔn)砷斑的制備 精密量取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液2mL，置A瓶中，加鹽酸5mL與水21mL，再加碘化鉀試液5mL與酸性氯化亞錫試液5滴，在室溫放置10分鐘后，加鋅粒2g，立即將照上法裝妥的導(dǎo)氣管C密塞于A瓶上，并將A瓶置2540水浴中，反應(yīng)45分鐘,取出溴化汞紙?jiān)?即得。 若供試品需經(jīng)有機(jī)破壞后再行檢砷，則應(yīng)取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液代替供試品，照各藥品項(xiàng)下規(guī)定的方法同法處理后，依法制備標(biāo)準(zhǔn)砷斑。檢查法 取按各藥品項(xiàng)下規(guī)定方法制成的供試液，置A瓶中,照標(biāo)準(zhǔn)砷斑

34、的制備，自“再加碘化鉀試液5mL”起，依法操作。將生成的砷斑與標(biāo)準(zhǔn)砷斑比較，不得更深。實(shí)驗(yàn)二 葡萄糖注射液分析一、目的要求 1. 掌握比旋度的概念、求算方法和旋光法測定旋光性物質(zhì)含量的原理與計(jì)算。 2. 熟悉紫外法檢查雜質(zhì)的原理與方法。 二、主要儀器與藥品WZZ-1自動(dòng)指示旋光儀，納氏比色管，紫外分光光度儀1. 10%葡萄糖注射液2. 堿性酒石酸銅試液（參照附錄1）三、實(shí)驗(yàn)原理與方法 葡萄糖 （Glucose）(C6H12O6H2 O 198.17) 本品為葡萄糖或無水葡萄糖的滅菌水溶液。含葡萄糖（C6H12O6H2O）應(yīng)為標(biāo)示量的95.0%105.0%。 1. 葡萄糖鑒別原理： 方法： 取本

35、品，緩緩滴入溫?zé)岬膲A性酒石酸銅試液中，即生成氧化亞銅的紅色沉淀。 2. 雜質(zhì)的檢查：5-羥甲基糠醛原理：葡萄糖注射液在高溫加熱滅菌時(shí)，易分解產(chǎn)生5-羥甲基糠醛： 利用5-羥甲基糠醛在284nm的波長處有吸收，而葡萄糖無吸收，將樣品配制成一定濃度的溶液，在284nm的波長處測定，規(guī)定吸收度不得大于0.32來控制5-羥甲基糠醛的量。 方法：精密量取本品適量（約相當(dāng)于葡萄糖1.0g），置100mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，在284nm的波長處測定，吸收度不得大于0.32。 3. 葡萄糖含量的測定旋光法（中國藥典2005年版二部附錄E） 原理： 葡萄糖分子中含不對稱碳原子，具有旋光性，在一定條件下

36、，其水溶液的比旋度tD為52.553.0，根據(jù)旋光度與濃度c的比例關(guān)系可進(jìn)行含量測定： =tDlc， 式中l(wèi)為液層厚度（dm），c為溶液的百分濃度（g/mL，按干燥品或無水物計(jì)算）。所以： c = 100/tDl方法：精密量取本品適量（約相當(dāng)于葡萄糖10g），置100mL容量瓶中，加氨試液0.2mL（10%或10%以下規(guī)格的本品可直接取樣測定），用水稀釋至刻度，搖勻，靜置10分鐘，測定旋光度。測定時(shí)使用讀數(shù)至0.01并經(jīng)過檢定的旋光計(jì)，先用水校正零點(diǎn)，再將測定管（長度為1dm）用供試溶液沖洗數(shù)次，緩緩注入供試溶液適量（注意勿使發(fā)生氣泡），置于旋光計(jì)檢測讀數(shù)，記錄旋光度，同法操作讀取旋光度3次，

37、取3次的平均值作為樣品的旋光度。與2.0852相乘，即得100mL供試溶液中含有C6H12O6H2O的質(zhì)量（g）。測定后再用水核對零點(diǎn)，若零點(diǎn)變動(dòng)，應(yīng)重測。 四、注意事項(xiàng)1 旋光儀接通電源后需預(yù)熱520分鐘。每次測定前后應(yīng)用溶劑作空白校正。配制溶液與測定時(shí)，均應(yīng)調(diào)節(jié)溫度至200.5（除另有規(guī)定外）。供試溶液應(yīng)澄清，如顯渾濁或含有混懸的小粒，應(yīng)預(yù)先濾過，并棄去初濾液。測定管裝樣時(shí)應(yīng)注意光路中不應(yīng)有氣泡，使用后應(yīng)立即用水洗凈晾干，切勿用刷子刷，也不能用高溫烘烤。 2 標(biāo)示量=規(guī)格=處方量表示單位制劑（例如：每片，每丸、每毫升、每瓶等）所含主藥的量。 五、思考題1.葡萄糖旋光度法測定含量時(shí)，為什么要

38、加氨試液并放置后進(jìn)行測定？2.推算出旋光度法測定葡萄糖含量時(shí)的計(jì)算系數(shù)2.0852實(shí)驗(yàn)二附錄1. 堿性酒石酸銅試液(1)取硫酸銅結(jié)晶6.93g，加水使溶解成100mL。 (2)取酒石酸鉀鈉結(jié)晶34.6g與氫氧化鈉10g，加水使溶解成100mL。用時(shí)將兩液等量混合，即得。 2. 中國藥典2005年版二部附錄 E 旋光度測定法 平面偏振光通過含有某些光學(xué)活性的化合物液體或溶液時(shí)，能引起旋光現(xiàn)象，使偏振光的平面向左或向右旋轉(zhuǎn)。旋轉(zhuǎn)的度數(shù)，稱為旋光度。偏振光透過長1dm并每1mL中含有旋光性物質(zhì)1g的溶液，在一定波長與溫度下測得的旋光度稱為比旋度。測定比旋度（或旋光度）可以區(qū)別或檢查某些藥品的純雜程度

39、，亦可用以測定含量。 本藥典系用鈉光譜的D線(589.3nm)測定旋光度，除另有規(guī)定外，測定管長度為1dm(如使用其他管長，應(yīng)進(jìn)行換算)，測定溫度為20。 測定旋光度時(shí)，用讀數(shù)至0.01并經(jīng)過檢定的旋光計(jì)。將測定管用供試液體或溶液（取固體供試品，按各藥品項(xiàng)下的方法制成）沖洗數(shù)次，緩緩注入供試液體或溶液適量（注意勿使發(fā)生氣泡），置于旋光計(jì)檢測讀數(shù)，即得供試液的旋光度。使偏振光向右旋轉(zhuǎn)者（順時(shí)針方向）為右旋，以“”符號表示；使偏振光向左旋轉(zhuǎn)者(反時(shí)針方向)為左旋，以“”符號表示。用同法讀取旋光度3次,取3次的平均數(shù)，照下列公式計(jì)算,即得供試品的比旋度。 對液體供試品 對固體供試品 式中 為比旋度；

40、 D為鈉光譜的D線； t為測定時(shí)的溫度； l為測定管長度, dm； 為測得的旋光度； d為液體的相對密度； c為每100mL溶液中含有被測物質(zhì)的重量g（按干燥品或無水物計(jì)算）。 旋光計(jì)的檢定，可用標(biāo)準(zhǔn)石英旋光管進(jìn)行，讀數(shù)誤差應(yīng)符合規(guī)定。 注意事項(xiàng) (1) 每次測定前應(yīng)以溶劑作空白校正，測定后，再校正1次,以確定在測定時(shí)零點(diǎn)有無變動(dòng)；如第2次校正時(shí)發(fā)現(xiàn)零點(diǎn)有變動(dòng)，則應(yīng)重新測定旋光度。 (2) 配制溶液與測定時(shí)，均應(yīng)調(diào)節(jié)溫度至200.5(或各藥品項(xiàng)下規(guī)定的溫度)。(3)供試的液體或固體物質(zhì)的溶液應(yīng)不顯渾濁或含有混懸的小粒。如有上述情形時(shí),應(yīng)預(yù)先濾過，并棄去初濾液。實(shí)驗(yàn)三 異煙肼的溴酸鉀法含量測定一

41、、目的要求 1. 掌握溴酸鉀法測定異煙肼含量的方法。 2. 掌握氧化還原滴定法的原理。 二、主要儀器與試劑 25mL滴定管，100mL容量瓶，25mL移液管，研缽，5cm20cm硅膠G薄層板（用羧甲基纖維素鈉溶液制備），層析缸，1. 異煙肼片（規(guī)格100mg）2. 溴酸鉀固體3. 硫代硫酸鈉滴定液(0.1mol/L)4. 丙醇5. 丙酮6. 鹽酸7. 乙醇制對二氨基苯甲醛試液（參見附錄）8. 甲基橙指示液（參見附錄）9. 碘化鉀固體10. 稀硫酸 11. 淀粉指示液12. 濁度標(biāo)準(zhǔn)貯備液（參見實(shí)驗(yàn)一附錄15）13. 濁度標(biāo)準(zhǔn)原液（參見實(shí)驗(yàn)一附錄15）14. 1號濁度標(biāo)準(zhǔn)液（參見實(shí)驗(yàn)一附錄15，

42、學(xué)生臨用時(shí)制備）15. 比色用重鉻酸鉀液（參見實(shí)驗(yàn)一附錄3）16. 比色用硫酸銅液（參見實(shí)驗(yàn)一附錄4）三、實(shí)驗(yàn)方法、步驟 異煙肼（Isoniazid ）（C6H7N3O，F(xiàn)W137.14） 本品為4-吡啶甲酰肼。按干燥品計(jì)算，含C6H7N3O應(yīng)為標(biāo)示量的95.0%105.0%。1 性狀本品為無色結(jié)晶，或白色至類白色的結(jié)晶性粉末；無臭，味微甜后苦；遇光漸變質(zhì)。2. 檢查溶液的澄清度與顏色取本品1.0g，加水10mL溶解后，溶液應(yīng)澄清無色；如顯渾濁，與1號濁度標(biāo)準(zhǔn)液（中國藥典2005版二部附錄 B，參見實(shí)驗(yàn)一附錄15）比較，不得更濃；如顯色，與同體積的對照液（取比色用重鉻酸鉀液3.0mL與比色用硫

43、酸銅液0.10mL，加水稀釋至250mL）比較，不得更深。游離肼取本品，加水制成每1mL中含50mg的溶液，作為供試品溶液。另取硫酸肼加水制成每1mL中含0.20mg（相當(dāng)于游離肼50g）的溶液，作為對照溶液。照薄層色譜法（中國藥典2005年版二部附錄B）試驗(yàn)，吸取供試品溶液10L與對照溶液2L，分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板（用羧甲基纖維素鈉溶液制備）上，以異丙醇丙酮（3：2）為展開劑，展開后，晾干，噴以乙醇制對二甲氨基苯甲醛試液，15分鐘后檢視。在供試品主斑點(diǎn)前方與硫酸肼斑點(diǎn)相應(yīng)的位置上，不得顯黃色斑點(diǎn)。干燥失重取本品，在105干燥至恒重，減失重量不得過0.5%（中國藥典2005年版二部附錄L，參

44、見實(shí)驗(yàn)一附錄23）。3. 含量測定原理： 取本品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于異煙肼0.2g），置100mL量瓶中，加水適量，振搖使異煙肼溶解并稀釋至刻度，搖勻，用干燥濾紙濾過，精密量取續(xù)濾液25mL，加水50mL、鹽酸20mL與甲基橙指示液1滴，用溴酸鉀滴定液（0.01667mol/L）緩緩滴定（溫度保持在1825）至粉紅色消失。每1mL溴酸鉀滴定液（0.01667mol/L）相當(dāng)于3.429mg的C6H7N3O。 四、注意事項(xiàng) 1. 指示劑褪色是不可逆的，滴定過程中必須充分振搖，以避免滴定劑局部過濃而引起指示劑提前褪色，可補(bǔ)加1滴指示劑以驗(yàn)證終點(diǎn)是否真正到達(dá)。 2. 過濾前

45、必須充分振搖，使異煙肼完全溶解。 3. 過濾用漏斗、燒杯必須干燥，棄去初濾液。 五、思考題 1.寫出異煙肼與溴酸鉀的滴定反應(yīng)式和滴定度的計(jì)算過程。2.當(dāng)游離肼不合格時(shí)，對測定有何影響？實(shí)驗(yàn)三附錄1. 中國藥典2005年版二部附錄B 薄層色譜法 薄層色譜法，系將適宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或鋁基片上，成一均勻薄層。待點(diǎn)樣、展開后，與適宜的對照物按同法所得的色譜圖作對比，用以進(jìn)行藥品的鑒別、雜質(zhì)檢查或含量測定的方法。 1.儀器與材料 (1) 玻板 除另有規(guī)定外，用5cm20cm，10cm20cm或20cm20cm的規(guī)格,要求光滑、平整，洗凈后不附水珠，晾干。 (2) 固定相或載體 最常用的有硅膠

46、G、硅膠GF254 、硅膠H、 硅膠HF254,其次有硅藻土、硅藻土G、氧化鋁、氧化鋁G、微晶纖維素、 微晶纖維素F254等。 其顆粒大小,一般要求直徑為1040m。薄層涂布，一般可分無黏合劑和含黏合劑兩種，前者系將固定相直接涂布于玻板上, 后者系在固定相中加入一定量的黏合劑，一般常用1015煅石膏(CaSO4.2H2O在140加熱4小時(shí))，混勻后加水適量使用，或用羧甲基纖維素鈉水溶液(0.50.7)適量調(diào)成糊狀，均勻涂布于玻板上。也有含一定固定相或緩沖液的薄層。 (3) 涂布器 應(yīng)能使固定相或載體在玻板上涂成一層符合厚度要求的均勻薄層。(4) 點(diǎn)樣器 同紙色譜法項(xiàng)下。 (5) 展開室 應(yīng)使用

47、適合薄層板大小的玻璃制薄層色譜展開缸，并有嚴(yán)密的蓋子，除另有規(guī)定外，底部應(yīng)平整光滑，應(yīng)便于觀察。 2.操作方法 (1) 薄層板制備 除另有規(guī)定外，將1份固定相和3份水在研缽中向一方向研磨混合,去除表面的氣泡后，倒入涂布器中,在玻板上平穩(wěn)地移動(dòng)涂布器進(jìn)行涂布（厚度為0.20.3mm），取下涂好薄層的玻板，置水平臺上于室溫下晾干，后在110烘30分鐘，即置有干燥劑的干燥箱中備用。使用前檢查其均勻度（可通過透射光和反射光檢視）。(2) 點(diǎn)樣 除另有規(guī)定外，用點(diǎn)樣器點(diǎn)樣于薄層板上，一般為圓點(diǎn)，點(diǎn)樣基線距底邊2.0cm，樣點(diǎn)直徑與點(diǎn)間距離同紙色譜法,點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況以不影響檢出為宜。點(diǎn)樣時(shí)必須注

48、意勿損傷薄層表面。 (3) 展開 展開缸如需預(yù)先用展開劑飽和，可在缸中加入足夠量的展開劑，并在壁上貼二條與缸一樣高、寬的濾紙條，一端浸入展開劑中，密封缸頂?shù)纳w，使系統(tǒng)平衡或按正文規(guī)定操作。 將點(diǎn)好樣品的薄層板放入展開缸的展開劑中,浸入展開劑的深度為距薄層板底邊0.51.0cm（切勿將樣點(diǎn)浸入展開劑中）,密封缸蓋,待展開至規(guī)定距離(一般為1015cm),取出薄層板，晾干，按各品種項(xiàng)下的規(guī)定檢測。(4) 如需用薄層掃描儀對色譜斑點(diǎn)作掃描檢出，或直接在薄層上對色譜斑點(diǎn)作掃描定量，則可用薄層掃描法。 薄層掃描的方法，除另有規(guī)定外，可根據(jù)各種薄層掃描儀的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)與使用說明，結(jié)合具體情況，選擇吸收法或熒光

49、法，用雙波長或單波長掃描。由于影響薄層掃描結(jié)果的因素很多，故應(yīng)在保證供試品的斑點(diǎn)在一定濃度圍呈線性的情況下，將供試品與對照品在同一塊薄層上展開后掃描，進(jìn)行比較并計(jì)算定量，以減少誤差。各種供試品，只有得到分離度和重現(xiàn)性好的薄層色譜，才能獲得滿意的結(jié)果。2. 乙醇制對二氨基苯甲醛試液取對二甲氨基苯甲醛1g，加乙醇9.0mL與鹽酸2.3mL使溶解，再加乙醇至100mL，即得。甲基橙指示液 取甲基橙0.1g，加水100mL使溶解，即得。變色圍 pH3.24.4（紅黃）。3. 溴酸鉀滴定液 (0.01667mol/L) KBrO3=167.00 2.784g1000mL 配制 取溴酸鉀2.8g，加水適量

50、使溶解成1000mL，搖勻。 標(biāo)定 精密量取本液25mL，置碘瓶中， 加碘化鉀2.0g與稀硫酸5mL，密塞，搖勻，在暗處放置5分鐘后，加水100mL稀釋，用硫代硫酸鈉滴定液(0.1mol/L)滴定至近終點(diǎn)時(shí)，加淀粉指示液2mL，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失。根據(jù)硫代硫酸鈉滴定液(0.1mol/L)的消耗量，算出本液的濃度，即得。室溫在25以上時(shí)，應(yīng)將反應(yīng)液與稀釋用水降溫至約20。4. 稀硫酸 取硫酸57mL，加水稀釋至1000mL，即得。本液含H2SO4應(yīng)為9.5-10.5。 5. 淀粉指示液取可溶性淀粉0.5g，加水5mL攪勻后，緩緩傾入100mL沸水中，隨加隨攪拌，繼續(xù)煮沸2分鐘，放冷，傾取上層清液

51、，即得。本液應(yīng)臨用新制。實(shí)驗(yàn)四 雙波長分光光度法測定復(fù)方制劑含量一、目的要求：1、掌握雙波長分光光度法消除干擾的原理和波長選擇原則。 2、掌握紫外-標(biāo)準(zhǔn)對照法測定藥物含量與計(jì)算方法。 3、熟悉紫外分光光度儀的構(gòu)造和使用操作。 二、主要儀器與試劑 紫外分光光度儀，石英比色皿，100mL容量瓶，移液管1. 磺胺嘧啶對照品2. 甲氧芐啶對照品3. 復(fù)方磺胺嘧啶片4. 氫氧化鈉溶液0.4%5. 鹽酸溶液（91000）6. 冰醋酸三、實(shí)驗(yàn)方法、步驟 復(fù)方磺胺嘧啶片（Compound Sulfadiazine Tablets） 本品每片中含磺胺嘧啶（C10H10N4O2S）應(yīng)為0.3600.440g；含甲

52、氧芐啶（C14H18N4O3）應(yīng)為45.055.0mg。處方 磺胺嘧啶400g甲氧芐啶50g 制成1000片1. 原理：復(fù)方磺胺嘧啶片系由磺胺嘧啶和甲氧芐啶組成的復(fù)方制劑。兩者在紫外區(qū)有較強(qiáng)的吸收（見圖2-5）。在鹽酸溶液（91000）中，磺胺嘧啶在308nm處有吸收，而甲氧芐啶在此波長處無吸收，故可在此波長處直接測定磺胺嘧啶的吸收度而求得含量。甲氧芐啶在277.4nm波長處有較大吸收，而磺胺嘧啶在277.4nm處與308nm處有等吸收點(diǎn)。故可采用雙波長法以277.4nm為測定波長，308nm為參比波長，測定甲氧芐啶在該兩波長處的A（A=A277nm-A308nm）值來計(jì)算含量。 2. 測定步

53、驟： 磺胺嘧啶 取本品10片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于磺胺嘧啶0.2g），置100mL量瓶中，加0.4%氫氧化鈉溶液適量，振搖使磺胺嘧啶溶解，并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液2mL，置另一100mL容量瓶中，加鹽酸溶液（91000）稀釋至刻度，搖勻，照分光光度法（中國藥典2005年版二部附錄 A），在308nm的波長處測定吸收度；另取105干燥至恒重的磺胺嘧啶對照品適量，精密稱定，加鹽酸溶液（91000）溶解并定量稀釋制成每1mL中約含40g的溶液，同法測定；計(jì)算，即得。 甲氧芐啶 精密稱取上述研細(xì)的細(xì)粉適量（約相當(dāng)于甲氧芐啶40mg），置100mL容量瓶中，加冰醋酸30

54、mL振搖使甲氧芐啶溶解，加水稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液；另精密稱取甲氧芐啶對照品40mg與磺胺嘧啶對照品約0.3g，分置100mL容量瓶中，各加冰醋酸30mL溶解，加水稀釋至刻度，搖勻，前者作為對照品溶液（1），后者濾過，取續(xù)濾液作為對照品溶液（2）。精密量取供試品溶液與對照品溶液（1）、（2）各5mL，分置100mL容量瓶中，各加鹽酸溶液（91000）稀釋至刻度，搖勻，照分光光度法測定。取對照品溶液（2）的稀釋液，以308.0nm為參比波長1，在277.4nm波長附近（每間隔0.2nm）選擇等吸收點(diǎn)波長為測定波長（2），要求A=A2-A1=0。再在2和1波長處分別測定供試

55、品溶液的稀釋液與對照品溶液（1）的稀釋液的吸收度，求出各自的吸收度差值（A），計(jì)算，即得。 四、注意事項(xiàng) 1. 石英比色皿的正確使用和吸收度校正。 2. 吸收度讀數(shù)3次，取平均值計(jì)算含量。 3. 讀數(shù)后與時(shí)關(guān)閉光閘以保護(hù)光電管。五、思考題1.雙波長分光光度法是如何消除干擾的？2.應(yīng)用雙波長分光光度法應(yīng)如何選擇測定波長和參比波長？實(shí)驗(yàn)四附錄1. 中國藥典2005年版二部附錄IV A分光光度法 分光光度法是通過測定被測物質(zhì)在特定波長處或一定波長圍的光吸收度，對該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的方法。 常用的波長圍為：(1)200400nm的紫外光區(qū)；(2)400760nm的可見光區(qū)；(3)2.525m（按

56、波數(shù)計(jì)為4000400cm-1）的紅外光區(qū)。所用儀器為紫外分光光度計(jì)、可見分光光度計(jì)（或比色計(jì)）、紅外分光光度計(jì)或原子吸收分光光度計(jì)。為保證測量的精密度和準(zhǔn)確度，所有儀器應(yīng)按照國家計(jì)量檢定規(guī)程或本附錄規(guī)定，定期進(jìn)行校正檢定。 單色光輻射穿過被測物質(zhì)溶液時(shí)，被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度（光路長度）成正比，其關(guān)系如下式： 式中A為吸收度；T為透光率；為吸收系數(shù)，采用的表示方法是(1% 1cm)，其物理意義為當(dāng)溶液濃度為1(g/mL)，液層厚度為1cm時(shí)的吸收度數(shù)值； c為100mL溶液中所含被測物質(zhì)的重量（按干燥品或無水物計(jì)算），g；l為液層厚度，cm。 物質(zhì)對光的選擇性吸收波長，以

57、與相應(yīng)的吸收系數(shù)是該物質(zhì)的物理常數(shù)。當(dāng)已知某純物質(zhì)在一定條件下的吸收系數(shù)后,可用同樣條件將該供試品配成溶液，測定其吸收度，即可由上式計(jì)算出供試品中該物質(zhì)的含量。在可見光區(qū)，除某些物質(zhì)對光有吸收外，很多物質(zhì)本身并沒有吸收,但可在一定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過處理使其顯色后再測定，故又稱比色分析。由于顯色時(shí)影響呈色深淺的因素較多，且常使用單色光純度較差的儀器，故測定時(shí)應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌吠瑫r(shí)操作。實(shí)驗(yàn)五 維生素C制劑的含量測定一、目的要求 1. 掌握碘量法的原理和操作方法。2. 掌握常用輔料對制劑含量測定的影響和排除方法。3. 掌握制劑的含量計(jì)算方法。二、 主要儀器與試劑 25mL棕色滴定管，50mL

58、移液管，刻度吸管，碘量瓶，100mL量瓶，濾紙、漏斗、鐵架臺與鐵圈。維生素C片，維生素C注射液。 1. 碘滴定液(0.1mol/L) 見附錄12. 稀醋酸 取冰醋酸60mL，加水稀釋至1000mL3. 淀粉指示液 見附錄3。本液應(yīng)臨用新制。4. 丙酮5. 重鉻酸鉀基準(zhǔn)物6. 硫代硫酸鈉固體三、 實(shí)驗(yàn)方法、步驟 維生素C（Vitamin C）(C6H8O6 , FW= 176.13)1. 原理：維生素C分子中的烯二醇基具有還原性，能被I2定量地氧化成二酮基：1分子維生素C與2摩爾I相當(dāng)（中國藥典規(guī)定，1個(gè)I為1摩爾），所以維生素C的滴定當(dāng)量等于分子量的1/2。 2. 步驟（一）維生素C片 本品為

59、白色或略帶淡黃色片，含維生素C（C6H8O6 ）應(yīng)為標(biāo)示量的93.0%107.0% 取本品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于維生素C 0.2g），置100mL量瓶中，加新沸過的冷水100mL與稀醋酸10mL的混合液適量，振搖使維生素C溶解并稀釋至刻度，搖勻，經(jīng)干燥濾紙迅速濾過，精密量取續(xù)濾液50mL，加淀粉指示液1mL，用碘滴定液（0.1mol/L）滴定，至溶液顯藍(lán)色并持續(xù)30秒鐘不褪。每1mL碘滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于8.806mg的C6H8C6。 （二）維生素C注射液 本品為維生素C的滅菌水溶液，無色或微黃色的澄明液體。含維生素C（C6H8O6）應(yīng)為標(biāo)示量的90.0%1

60、10.0%。本品中可加適量的焦亞硫酸鈉為穩(wěn)定劑。 精密量取本品適量（約相當(dāng)于維生素C 0.2g），加水15mL與丙酮2mL，搖勻，放置5分鐘，加稀醋酸4mL與淀粉指示液1mL，用碘滴定液（0.1mol/L）滴定，至溶液顯藍(lán)色并持續(xù)30秒鐘不褪。每1mL碘滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于8.806mg的C6H8O6。 四、注意事項(xiàng) 1. 維生素C在空氣中易被氧化，過濾、滴定等操作應(yīng)迅速。 五、思考題1、溶樣時(shí)為什么要用新煮沸并冷卻的蒸餾水？2、加稀醋酸的目的是什么？實(shí)驗(yàn)五附錄1. 碘滴定液(0.1mol/L) I2=253.81 12.69g1000mL 配制 取碘13.0g,加碘化鉀36g與水