家兔動脈血壓的神經(jīng)和體液調(diào)節(jié)(共8頁)

1、 山東大學(xué)實驗報告 姓名(xngmng) * 系年級(ninj) * 學(xué)號*科目(km) 動物生理學(xué)實驗 同組者 *、* 日期 * 家兔動脈血壓的神經(jīng)和體液調(diào)節(jié)【實驗?zāi)康摹?. 學(xué)習(xí)直接測定家兔動脈血壓的急性實驗方法。2. 觀察神經(jīng)、體液因素對心血管活動的影響?！緦嶒炘怼吭谡Ｉ頎顩r下，人和高等動物的動脈血壓（arterial blood pressure， ABP）是相對穩(wěn)定的。這種相對穩(wěn)定性是通過神經(jīng)和體液因素的調(diào)節(jié)而實現(xiàn)的，其中以頸總動脈-主動脈弓壓力感受性反射尤為重要。此反射既可使升高的血壓下降，又可使降低的血壓升高，故有血壓緩沖反射之稱謂。家兔的主動脈神經(jīng)在解剖上獨成一支，易于分

2、離與觀察其作用。本實驗是應(yīng)用液導(dǎo)系統(tǒng)直接測定動脈血壓。即由動脈插管與壓力傳感器連通，其內(nèi)充滿抗凝液體，構(gòu)成液導(dǎo)系統(tǒng)，將動脈插管插入動脈內(nèi)，動脈內(nèi)的壓力及其變化，可通過封閉的液導(dǎo)系統(tǒng)傳遞到壓力傳感器，并由計算機采集系統(tǒng)記錄下來?！緦嶒灢牧稀坎牧希杭彝?。器具：兔體手術(shù)臺，常用手術(shù)器械，剪毛剪，解剖刀，咬骨鉗，止血鉗，氣管插管，動脈插管，三通管，動脈夾，壓力傳感器，計算機采集系統(tǒng)，照明燈，注射器，棉花，棉線，銀絲電極（雙電極）。試劑：20氨基甲酸乙酯，4檸檬酸鈉溶液，肝素鈉溶液，生理鹽水。【實驗步驟】實驗儀器的準備1. 打開計算機采集系統(tǒng)，接通壓力傳感器。從控制界面的菜單“實驗項目”中選取“循環(huán)實驗

3、”的“家兔血壓的調(diào)節(jié)”條，或者直接將相應(yīng)采集通道的模式調(diào)整為“壓力”模式。使圖線顯示壓力讀數(shù)。2. 連接液導(dǎo)系統(tǒng)并制壓 將壓力傳感器的下方支管，通過輸液管連接三通管，再連接動脈插管。上側(cè)管供制壓時排除管內(nèi)空氣使用。先用裝有20ml 4檸檬酸鈉的注射器，通過三通管向連接動脈插管的輸液管內(nèi)推注，使之充滿液體（不要使動脈插管高過壓力傳感器的上方支管）后，再用止血鉗夾住動脈插管端的輸液管。然后繼續(xù)向三通管內(nèi)推注，直至充滿壓力傳感器的上方支管，并用塞子塞住（注意：液導(dǎo)系統(tǒng)內(nèi)不可有氣泡）。繼續(xù)向三通管內(nèi)推注，同時觀察顯示器上壓力的變化。當加壓到120mmHg（1mmHg=1.33102Pa）左右即可關(guān)閉三

4、通管。觀察壓力是否變化，如果壓力下降，則需要檢查液導(dǎo)系統(tǒng)的漏液原因，并重新制壓。調(diào)節(jié)血壓顯示器的靈敏度，使30130mmHg的變化都能在顯示器上明顯地反映出來。將動脈插管端的導(dǎo)管內(nèi)充滿肝素鈉溶液。動物(dngw)準備1. 麻醉(mzu)動物(dngw)：取一只家兔，稱重并剪去耳緣靜脈上的被毛。用20ml注射器由耳緣靜脈緩慢推注20氨基甲酸乙酯（5g/1kg體重）進行麻醉。2. 固定與剪毛：將動物背位固定于手術(shù)臺上，用剪毛剪將頸部手術(shù)野的被毛剪去，即可進行手術(shù)。（三）手術(shù)1. 切開皮膚：一手的拇指和食指按住家兔頸部兩側(cè)，另一只手持手術(shù)刀，在緊靠喉嚨下緣，沿頸部正中線作一長57cm的皮膚切口。2.

5、 分層分離肌肉：持止血鉗輕輕提起少許氣管正上方的肌肉，然后用止血鉗將肌肉縱向打開一個小口，用止血鉗將創(chuàng)口擴大，直至看見肌肉層下方的氣管。用止血鉗向兩側(cè)拉開肌肉，暴露氣管。3. 氣管插管：先在甲狀腺后方的氣管背面穿過一條棉線，并打一活結(jié)備用，然后在氣管上方作一倒“T”型切口，將與氣管口徑相近的氣管插管，沿向心方向插入氣管，并扎緊備用線，將線固定于氣管插管的分叉處，以防氣管插管松脫。4. 分離頸總動脈、神經(jīng)：家兔頸部的神經(jīng)、頸總動脈被結(jié)締組織膜包在一起，形成血管神經(jīng)束，位于氣管兩側(cè)。用彎頭玻璃分針輕輕劃開局部結(jié)締組織束膜，仔細辨認3種神經(jīng)與頸總動脈：頸總動脈呈紅色，有波動，壁有較強的彈性；迷走神經(jīng)

6、最粗，有較好的韌性，色潔白，一般位于外側(cè)；交感神經(jīng)較細，略呈灰色，一般位于內(nèi)測；主動脈神經(jīng)最細，一般位于兩神經(jīng)之間。在一側(cè)頸總動脈下穿線，打一活結(jié)備用，分離同側(cè)3根神經(jīng)：用一玻璃分針將3根神經(jīng)挑起，向外拉，使3根神經(jīng)分開，用另一玻璃分針沿縱向先分開最細的2條神經(jīng)（頸減壓神經(jīng)和頸交感神經(jīng)），在分離最粗的神經(jīng)（頸迷走神經(jīng)），然后在3根神經(jīng)下分別穿2條線分別打活結(jié)備用；在對側(cè)分離出23cm長的頸總動脈，穿2條線，分別打活結(jié)，將2條線分別拉至分離出的動脈兩端備用。5. 動脈(dngmi)插管：首先用注射器吸1-2ml生理鹽水(shnglynshu)，再吸100ul肝素鈉溶液，從耳緣靜脈(jngmi)注

7、入肝素鈉溶液，以防凝血。然后在一側(cè)動脈行動脈插管術(shù)以記錄血壓。方法如下：將動脈遠心端的備用線盡可能靠頭端結(jié)扎（務(wù)必扎緊，以防漏血），然后在另一備用線的向心端，用動脈夾夾閉。輕輕提起動脈頭端的結(jié)扎線，用銳利的眼科剪在靠近扎線的稍后方，沿向心方向斜向剪開動脈上壁。另一只手將準備好的動脈插管，順勢輕輕推進6-8mm，用備用線將動脈聯(lián)通進入的插管扎緊，并將余線系在插管的固定側(cè)支上，以免滑脫。輕輕取下向心端動脈夾，可見動脈血與插管內(nèi)液體混合，血液在小管內(nèi)搏動。再取下通向壓力感受器的止血鉗，此時顯示器上出現(xiàn)血壓的波動曲線。【實驗觀察及結(jié)果】實驗中所用到的實驗動物體重2.6公斤，注射麻醉劑的量為13ml。（

8、1）觀察正常血壓曲線：調(diào)節(jié)掃描速度與增益，可明顯地觀察到心室射血與主動脈回縮形成的壓力變化與收縮、舒張壓的度數(shù)。有時可以觀察到血壓曲線隨呼吸變化，心搏為一級波，呼吸波為二級波。然后將掃面速度調(diào)慢，觀察正常血壓曲線。 心臟跳動 呼吸波 圖1 正常血壓曲線結(jié)果分析：此時觀察到家兔血液波動的收縮壓約為100mmHg，舒張壓約為80mmHg。由于插管處血液輕微滲漏，可能會使血壓的值略有降低。在血壓曲線上，可清楚分辨心臟跳動波和呼吸波。（2）刺激迷走神經(jīng)：使刺激輸出端連接保護電極，輕輕提起迷走神經(jīng)上的備用線，小心地將神經(jīng)置于保護電極之上。紀錄對照血壓曲線后，再用中等強度的連續(xù)電脈沖信號通過保護電極刺激神

9、經(jīng)。血壓出現(xiàn)明顯下降后即可停止刺激（如果血壓下降很快、很低，應(yīng)立即停止刺激），并待血壓恢復(fù)。圖2 刺激迷走神經(jīng)(mzu- shng jng)對血壓的影響結(jié)果(ji gu)分析：刺激迷走神經(jīng)后，血壓(xuy)迅速下降，且頻率變慢，說明迷走神經(jīng)具有減壓以及降低心臟活動的作用。停止刺激后，血壓漸漸恢復(fù)到初始值。（3）分別刺激迷走神經(jīng)中樞端和外周端：雙結(jié)扎迷走神經(jīng)后（務(wù)必扎緊），從兩結(jié)扎線之間剪斷神經(jīng)。記錄對照血壓后，同法分別刺激神經(jīng)的中樞端和外周端，觀察并記錄血壓變化。圖3 刺激迷走神經(jīng)中樞端對血壓的影響圖4 刺激迷走神經(jīng)(mzu- shng jng)外周端對血壓的影響結(jié)果(ji gu)分析：刺激迷

10、走神經(jīng)中樞(zhngsh)端與外周端都能引起減壓反射。是因為：迷走神經(jīng)為自主神經(jīng)，刺激外周端時，能夠引起效應(yīng)器官的反應(yīng)，如血壓降低、心率變慢；刺激中樞端時，也可以通過中樞神經(jīng)系統(tǒng)后，傳至外周端，產(chǎn)生效應(yīng)。（4）刺激交感神經(jīng)：用同樣的方法刺激交感神經(jīng)，觀察血壓曲線是否有變化。結(jié)果分析：在實驗過程中，無論如何刺激交感神經(jīng)，血壓曲線都無明顯變化。原因：刺激交感神經(jīng)使心臟的活動加強，血壓應(yīng)該有一定程度上升，然而交感神經(jīng)對血壓進行的是微調(diào)，變化并不明顯，因此很難記錄到血壓曲線的變化。在實驗中，并未剪斷主動脈神經(jīng)，分別刺激中樞端和外周端。（5）刺激主動脈神經(jīng)（減壓神經(jīng)）：用同樣的方法刺激主動脈神經(jīng)，觀察血

11、壓曲線是否有變化。結(jié)果分析：在實驗過程中，無論如何刺激主動脈神經(jīng)，血壓曲線都無明顯變化，說明刺激的并非主動脈神經(jīng)，或主動脈神經(jīng)受到了損壞，神經(jīng)沖動的傳導(dǎo)受到阻斷，失去了其生理活性。經(jīng)查閱資料得知：刺激主動脈神經(jīng)會導(dǎo)致血壓下降。原因：當電刺激主動脈神經(jīng)時：主動脈神經(jīng)傳入沖動增多，使心迷走中樞興奮、心交感中樞抑制、縮血管中樞抑制，使迷走神經(jīng)傳出沖動增加，交感神經(jīng)傳出沖動減少，而至心率減慢、心收縮力減弱、小靜脈舒張，回心血量減少，心輸出量減少，外周阻力降低，最終導(dǎo)致血壓下降。由于刺激完整的主動脈神經(jīng)，血壓曲線無明顯變化，在實驗中，并未剪斷主動脈神經(jīng)，分別刺激中樞端和外周端。后來得知：刺激整體主動脈神

12、經(jīng)，血壓曲線無明顯變化，并不代表分別刺激中樞端和外周端，血壓曲線不會出現(xiàn)變化。很遺憾，實驗結(jié)果缺少了部分實驗結(jié)果。（6）閉氣：紀錄對照血壓曲線后，用棉花堵住氣管插管的兩個開口，觀察并記錄血壓曲線變化。當血壓明顯上升時，打開氣管插管的開口，并記錄血壓的恢復(fù)過程。 圖5 O2含量減少對血壓的影響結(jié)果分析：阻塞呼吸后，血壓雖略有升高，且出現(xiàn)了血壓的周期性搏動。分析出現(xiàn)這一現(xiàn)象(xinxing)的原因為：阻塞呼吸后，血液中O2的含量(hnling)下降，CO2的含量(hnling)增加，*導(dǎo)致血壓升高。由于阻塞呼吸，家兔呼吸困難，身體出現(xiàn)規(guī)律性掙扎，因此對血壓造成了周期性的影響。（7）生理鹽水對血壓的

13、影響：紀錄對照血壓曲線后，用20ml注射器，從而緣靜脈注入15-20ml生理鹽水，觀察并記錄血壓變化及恢復(fù)曲線。圖6 注射生理鹽水后血壓的變化結(jié)果分析：注射生理鹽水后血壓有一定程度的升高，過一段時間后恢復(fù)到正常水平。原因為：注射大量生理鹽水后，血管內(nèi)液體的量增加，循環(huán)血量增加，血壓出現(xiàn)一定程度的上升，刺激壓力感受器，引起減壓反射，使血壓最終恢復(fù)到正常水平。（8）按壓頸動脈竇：紀錄對照血壓曲線后，用手指按壓頸動脈竇（下頜下方內(nèi)側(cè)），觀察并記錄血壓變化。當血壓明顯下降時，則停止按壓，待血壓恢復(fù)。（如果血壓反而升高，說明按壓的是血管，需要重新尋找按壓位置）。圖7 按壓頸動脈竇后血壓的變化結(jié)果分析：按

14、壓頸動脈竇后，血壓由正常狀態(tài)下的收縮壓100mmHg，舒張壓為80mmHg，下降到收縮壓80mmHg以下，舒張壓60mmHg以下。是因為：在外界壓力刺激下，頸動脈竇壓力感受器感受到壓力的上升，并引起減壓反射，致使血壓降低。解除外在壓力后血壓逐漸恢復(fù)到正常值。（9）夾閉對側(cè)頸總動脈：輕輕提起對側(cè)完好頸總動脈上的備用線，用棉線結(jié)扎（于結(jié)扎前紀錄動脈通常時的血壓曲線），觀察并記錄血壓變化。 圖8 結(jié)扎(jiz)頸總動脈對血壓的影響結(jié)果分析：結(jié)扎一側(cè)頸總動脈后，動脈中的血量減少，血壓(xuy)降低，導(dǎo)致同側(cè)的頸動脈竇壓力感受器感受到的壓力減小，引起增壓(zn y)反射，導(dǎo)致家兔血壓升高：由正常狀態(tài)下的

15、收縮壓100mmHg，舒張壓80mmHg，升高到收縮壓120mmHg，舒張壓100mmHg。一段時間后，收縮壓和舒張壓都有所降低，但由于是對頸總動脈進行的不可回復(fù)性結(jié)扎，血壓恢復(fù)穩(wěn)定后，仍然略高于最初血壓，在接下來的實驗中，初始值會受到一定程度的影響?！咀⒁馐马棥?. 注射時注意：先從耳緣靜脈盡可能遠心端注射（第一次注射不成功時，可稍向近心一些注射。注射時速度要緩慢，并隨時觀察動物情況。當動物四肢松軟、呼吸變深變慢、角膜反應(yīng)遲鈍時，表明動物已被麻醉，即可停止注射。2. 手術(shù)時，注意切口不可偏離氣管上方，不可橫向剪斷肌肉，以免造成血管斷裂而出血。切口也不要過于擴大，以免造成氣胸。3. 氣管插管時，切勿損傷甲狀腺及其血管，否則會出血不止。4. 分離神經(jīng)、頸總動脈時，要小心，避免將神經(jīng)、血管弄斷。5. 在動脈上壁剪開口時，不可只剪開血管外包膜，也切勿剪斷整個動脈，剪口的大小約為管徑的一半。6. 動脈插管時，插管應(yīng)與動脈血管的方向一致，以防止插管尖端扎破動脈管壁。如果手感滯澀，說明插管并未進入動脈，必須退出插管，重新剪口再插。7. 動脈插管不可因扎線松動而滑出，亦不可漏液。8. 按壓頸動脈竇時，如血壓升高，說明按壓的是血管，需重新尋找按壓位置。參考文獻1解景田，劉燕強，崔庚寅.家兔(ji t)頸部(jn b)動脈和神經(jīng)的分離及減壓神經(jīng)