病免++病原菌++結核桿菌

1、分枝桿菌結核桿菌(ji h n jn)共二十五頁細菌(xjn)簡介 結核分枝桿菌，俗稱結核桿菌，是引起(ynq)結核病的病原菌。 可侵犯全身各器官，但以肺結核為最多見。結核病至今仍為重要的傳染病。估計世界人口中1/3感染結核分枝桿菌。據WHO報道，每年約有800萬新病例發(fā)生，至少有300萬人死于該病。我國建國前死亡率達200-300人/10萬，居各種疾病死亡原因之首，建國后人民生活水平提高，衛(wèi)生狀態(tài)改善，特別是開展了群防群治，兒童普遍接種卡介苗，結核病的發(fā)病率和死亡率大為降低。 共二十五頁一、生物學性狀(xngzhung) 形態(tài)染色：1、結核分枝桿菌為細長略帶彎曲的桿菌；細胞壁脂質含量較高，約

2、占干重的60%； 有大量分枝菌酸包圍在肽聚糖層的外面，可影響染料的穿入，故分枝桿菌一般用抗酸染色法: 以5% 石炭酸復紅加溫染色后可以染上，但用3%鹽酸乙醇不易脫色是由于石炭酸復紅與分枝菌酸牢固結合成復合物。若再加用美藍復染，則分枝桿菌呈紅色，而其他細菌(xjn)和背景中的物質被酒精脫色染為藍色。共二十五頁2、莢膜：無鞭毛，無芽孢，近年發(fā)現結核分枝桿菌在細胞壁外尚有一層莢膜。一般因制片時遭受破壞而不易看到。若在制備電鏡標本固定前用明膠處理，可防止莢膜脫水收縮。在電鏡下可看到菌體外有一層較厚的透明區(qū)，即莢膜，莢膜對結核分枝桿菌有一定(ydng)的保護作用。 3、形態(tài)變異：結核分枝桿菌在體內外經青

3、霉素、溶菌酶可破壞肽聚糖，導致其變?yōu)榧毦鶯型，呈顆粒狀或絲狀；異煙肼影響分枝菌酸的合成，可變?yōu)榭顾崛旧幮浴９捕屙摻Y核病人痰液抗酸染色(rns)共二十五頁L-J培養(yǎng)基上形態(tài)(xngti)共二十五頁培養(yǎng)特性： 1.專性需氧。 2.最適溫度為37，低于30不生長。 3.結核分枝桿菌細胞壁的脂質含量(hnling)較高，影響營養(yǎng)物質的吸收，故生長緩慢。在一般培養(yǎng)基中每分裂1代需時1824h，營養(yǎng)豐富時只需5h。培養(yǎng)需要豐富的營養(yǎng)物質：內含蛋黃、甘油、馬鈴薯、無機鹽等。固體培養(yǎng)基一般24周可見菌落生長。菌落呈顆粒、結節(jié)或菜花狀，乳白色或米黃色，不透明。在液體培養(yǎng)基中可能由于接觸營養(yǎng)面大，細菌生長較

4、為迅速。一般12周即可生長。臨床標本檢查液體培養(yǎng)比固體培養(yǎng)的陽性率高數倍。 共二十五頁抵抗力 ： 1.結核分枝桿菌細胞壁中含有脂質，故對乙醇敏感（在70%乙醇中2min死亡）。 2.脂質可防止菌體水分丟失，故對干燥(gnzo)的抵抗力特別強（粘附在塵埃上保持傳染性810d，在干燥(gnzo)痰內可存活68個月）。 3.結核分枝桿菌對濕熱敏感（在液體中加熱6263 15min或煮沸即被殺死）。 4.結核分枝桿菌對紫外線敏感（直接日光照射數小時可被殺死，可用于結核患者衣服、書籍等的消毒）。注意：痰液可增強結核分枝桿菌的抵抗力。因大多數消毒劑可使痰中的蛋白質凝固，包在細菌周圍，細菌不易被殺死。5%石

5、炭酸在無痰時30min可殺死結核桿菌，有痰時需要24h。共二十五頁耐藥性：結核分枝桿菌對鏈霉素、異煙肼、利福平、乙胺丁醇、卡那霉素、對氨基水楊酸等敏感，但長期(chngq)用藥容易出現耐藥性，而吡嗪酰胺的耐藥性5%。藥物敏感試驗表明，對利福平和鏈霉素大多仍敏感，而對異煙肼耐藥（異煙肼可影響細胞壁中分枝菌酸的合成，誘導結核桿菌成為L型,此可能是耐異煙肼的一種原因）。故目前治療多主張異煙肼和利福平或吡嗪酰胺聯(lián)合用藥，以減少耐藥性的產生，增強療效。 共二十五頁變異性：結核分枝桿菌可發(fā)生形態(tài)、菌落、毒力、免疫原性和耐藥性等變異?？ń槊鏐CG就是Calmette和Guerin 兩人(1908)將牛結核分

6、枝桿菌在含甘油、膽汁、馬鈴薯的培養(yǎng)基中經(zhn jn)13年230次傳代而獲得的減毒活菌苗株，現廣泛用于預防接種。 共二十五頁二、致病原因(yunyn) 結核分枝桿菌不產生內、外毒素。其致病性可能(knng)為： 1.細菌在組織細胞內大量繁殖引起的炎癥； 2.菌體成分和代謝物質的毒性 3.機體對菌體成分產生的免疫損傷有關。共二十五頁四、所致(su zh)疾病 結核分枝桿菌可通過呼吸道、消化道或皮膚(p f)損傷侵入易感機體，引起多種組織器官的結核病，其中以通過呼吸道引起肺結核為最多。 因腸道中有大量正常菌群寄居，結核分枝桿菌必須通過競爭才能生存并和易感細胞粘附。肺泡中無正常菌群，結核分枝桿菌

7、可通過飛沫微滴或含菌塵埃的吸入，故肺結核較為多見。 共二十五頁三、致病物質(wzh) 與莢膜、脂質和蛋白質有關。 1.莢膜：有助于結核分枝桿菌在宿主細胞上的 粘附與入侵； 莢膜中有多種酶可降解宿主組織中的 大分子物質，為入侵的結核桿菌繁殖 提供(tgng)營養(yǎng)； 莢膜能防止宿主的有害物質進入結核 分枝桿菌。 2脂質：包括糖脂、磷脂、脂肪酸等，與細菌毒 力有關。3.蛋白質：有抗原性，能使機體發(fā)生超敏反應， 引起組織壞死和全身中毒癥狀。 共二十五頁五、感染(gnrn)類型1.肺部感染感染菌的毒力、數量、機體的免疫狀態(tài)不同，肺結核可有以下兩類表現。（1）原發(fā)感染：多發(fā)生于兒童。其特點是： 形成原發(fā)灶

8、：肺泡中有大量巨噬細胞，少數活的結核分枝桿菌進入肺泡即被巨噬細胞吞噬。由于該菌有大量脂質，可抵抗溶菌酶而繼續(xù)繁殖，使巨噬細胞遭受破壞(phui)，釋放出的大量菌在肺泡內引起炎癥，稱為原發(fā)灶。 共二十五頁 初次感染的機體因缺乏特異性免疫，結核分枝桿菌常經淋巴管到達肺門淋巴結，引起(ynq)肺門淋巴結腫大，稱原發(fā)綜合征。 此時，可有少量結核分枝桿菌進入血液，向全身擴散，但不一定有明顯癥狀（稱隱性菌血癥），其中少數患者因免疫低下，可經血和淋巴系統(tǒng)，播散至骨、關節(jié)、腎、腦膜及其他部位引起相應的結核病。 90% 以上的原發(fā)感染形成纖維化或鈣化，不治而愈，但病灶內常仍有一定量的結核分枝桿菌長期潛伏，不但能

9、剌激機體產生免疫，也可在以后引起內源性感染。共二十五頁 （2）繼發(fā)感染： 亦以肺部為多見。 病菌可以是外來的（外源性感染）或原來潛伏在病灶內（內源性感染）。 由于(yuy)機體已有特異性細胞免疫，因此原發(fā)后感染的特點是病灶多局限，一般不累及鄰近的淋巴結，被纖維素包圍的干酪樣壞死灶可鈣化而痊愈。如果干酪樣結節(jié)破潰，排入鄰近支氣管，則可形成空洞并釋放大量結核分枝桿菌至痰中。共二十五頁2.肺外感染 部分(b fen)患者結核分枝桿菌可進入血液循環(huán)引起肺內、外播散，如腦結核、腎結核，痰菌被咽入消化道也可引起腸結核、結核性腹膜炎等。 而結核分枝桿菌在血中播散的大多不是一般細菌型，而是一種不易生長的L型。

10、共二十五頁六、免疫性 1、免疫機制 結核分枝桿菌是胞內感染菌，其免疫主要是以T細胞為主的細胞免疫。 結核分枝桿菌侵入呼吸道后，由于肺泡中80%90% 是巨噬細胞，10% 是淋巴細胞（T細胞占多數）；原肺泡中未活化的巨噬細胞抗菌活性弱，不能防止所吞噬的結核分枝桿菌生長，反可將結核分枝桿菌帶到他處。但可遞呈抗原，使周圍T淋巴細胞致敏?？芍苯託屑毎?，也可產生淋巴因子激活巨噬細胞，使吞噬作用加強而將病菌殺死。結核的免疫屬于感染免疫，又稱有菌免疫，即只有當結核桿菌存在體內時才有免疫力。一旦(ydn)體內的結核分枝桿菌全部消失，免疫也隨之不存在。 共二十五頁2、結核菌素試驗結核菌素試驗是應用結核菌素進

11、行皮膚試驗來測定機體對結核分枝桿菌是否能引起IV型超敏反應的一種(y zhn)試驗。 1）.結核菌素試劑以往用舊結核菌素（old tuberculin,OT）。系將結核分枝桿菌接種于甘油肉湯培養(yǎng)基，培養(yǎng)48周后加熱濃縮過濾制成。稀釋2 000倍，每0.1ml含5單位。目前都用純蛋白衍化物(purified protein derivative,PPD)（進一步化學分餾得來）。 PPD有二種：人結核分枝桿菌制成的PPD-C和卡介苗制成的BCG-PPD。每0.1ml含5單位。共二十五頁2）.試驗方法與意義 常規(guī)試驗分別取2種PPD 0.1ml注射于兩前臂皮內，4872h后觀察： 紅腫硬結超過5mm

12、者為陽性，15mm 為強陽性，對臨床診斷有意義。 若PPD-C側紅腫大于BCG-PPD側為感染(gnrn)。 反之，BCG-PPD側大于PPD-C側，可能 系卡介苗接種所致。共二十五頁陰性反應：表明未感染過結核分枝桿菌，但應考慮以下情況： 感染初期，因結核分枝桿菌感染后需4周以上才能出現超敏反應; 老年人; 嚴重結核患者或正患有其他傳染病，導致細胞免疫(miny)低下; 獲得性細胞免疫低下，如艾滋病或腫瘤等用過免疫抑制劑者。 （后3種都是免疫力低下）共二十五頁七、微生物學(wi shn w xu)檢查法 結核病的癥狀和體征往往不典型，雖可借助X線攝片診斷，但確診仍有賴于細菌學檢查。 標本：標本

13、的選擇根據感染部位(bwi)?？扇√?、支氣管灌洗液、尿、糞、腦脊液或胸、腹水。其他肺外感染可取血或相應部位(bwi)分泌液或組織細胞。 直接涂片鏡檢：標本直接涂片，用抗酸染色。若找到抗酸陽性菌即可初步診斷。 注意：近年來國內外研究證明臨床各種類型的肺結核患者中40% 左右分離出L型。經治療的結核病人細菌型消失，L型常持續(xù)存在。有空洞患者痰中已不排細菌型者，8% 左右仍可檢出L型。故細菌型與L型 均轉陰才能作為痰陰性。 共二十五頁八、防治(fngzh)原則 預防：近20年國際(guj)組織提出控制結核病主要方法有： 發(fā)現和治療痰菌陽性者； 新生兒接種卡介苗。約 80% 獲得 保護力。 治療：利福平、異煙肼、乙胺丁醇、鏈霉素為第一線藥物。利福平與異煙肼合用可以減少耐藥性的產生。對嚴重感染，可以吡嗪酰胺與利福平及異煙肼合用。 共二十五頁抗酸染色(rns)1）初染用玻片夾夾持涂片標本，滴加石炭酸復紅2-3滴，在火焰高處徐徐加熱，切勿沸騰，出現蒸汽即暫時離開，若染液蒸發(fā)減少(jinsho)，應再加染液，以免干涸，加熱3-5分鐘，待標本冷卻后用水沖洗。2）脫色3%鹽酸酒精脫色30秒1分鐘；用水沖洗。3）復染用堿性美蘭溶液復染1分鐘，水洗，用吸水紙吸干后用油鏡觀察。共二十五頁內容摘要分枝桿菌。以5% 石炭酸復紅加溫染色后可以染上，但用3%鹽酸乙醇不易脫色是