第九章臨床實(shí)驗(yàn)室安全管理課件

1、第九章 臨床實(shí)驗(yàn)室安全管理郭素紅第九章 臨床實(shí)驗(yàn)室安全管理第一節(jié) 概述第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)室生物安全管理體系第三節(jié) 實(shí)驗(yàn)室生物安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估第四節(jié) 臨床實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)第五節(jié) 實(shí)驗(yàn)用菌（毒）種及廢棄物處理第六節(jié) 臨床實(shí)驗(yàn)室其他安全第九章 臨床實(shí)驗(yàn)室安全管理臨床實(shí)驗(yàn)室是醫(yī)療機(jī)構(gòu)病原體最集中區(qū)域也是科研工作的特殊場(chǎng)所這些病原體對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員、周圍人員及環(huán)境具有一定的潛在危害它甚至可以造成疾病的流行，危及廣大群眾的健康和生命安全，妨礙社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展及和諧社會(huì)的建設(shè)，使得實(shí)驗(yàn)室生物安全管理成為臨床實(shí)驗(yàn)室安全管理工作的核心 第一節(jié) 概述 一、實(shí)驗(yàn)室生物安全有關(guān)概念 二、臨床實(shí)驗(yàn)室主要危害源 三、相關(guān)的法律法規(guī)和

2、標(biāo)準(zhǔn) 四、實(shí)驗(yàn)室的常用安全標(biāo)識(shí)一、實(shí)驗(yàn)室生物安全的有關(guān)概念1.生物因子( biological agents)2.生物危害（biohazard）3.生物危險(xiǎn)(biorisk)4.氣溶膠（aerosols）5.生物安全（biosafety）6.實(shí)驗(yàn)室生物安全（laboratory biosafety） 1生物因子( biological agents)是可能引起感染、過敏或中毒的所有微小生物體，包括基因修飾的、細(xì)胞培養(yǎng)的和寄生于人體的一切微生物和其他相關(guān)的生物活性物質(zhì)2. 生物危害（biohazard）是由生物因子對(duì)環(huán)境及生物體的健康所造成的危害一、實(shí)驗(yàn)室生物安全的有關(guān)概念3. 生物危險(xiǎn)(bio

3、risk) 是生物因子將要或可能形成的危害，是傷害概率和嚴(yán)重性的綜合，又叫風(fēng)險(xiǎn)。研究病原微生物是有一定風(fēng)險(xiǎn)，生物安全實(shí)驗(yàn)室能夠降低這種風(fēng)險(xiǎn)4. 氣溶膠（aerosols）是指懸浮于氣體介質(zhì)中的粒子，一般直徑為0.001m100m的固態(tài)或液態(tài)微小粒子形成的相對(duì)穩(wěn)定的分散體系一、實(shí)驗(yàn)室生物安全的有關(guān)概念5. 生物安全（biosafety）是指人們對(duì)于由動(dòng)物、植物、微生物等生物體給人類健康和自然環(huán)境可能造成不安全的防范6. 實(shí)驗(yàn)室生物安全（laboratory biosafety） 是指在實(shí)驗(yàn)室從事病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)中，采取措施避免病原微生物對(duì)工作人員和相關(guān)人員造成危害、對(duì)環(huán)境造成污染和對(duì)公眾造成傷

4、害，保證實(shí)驗(yàn)研究的科學(xué)性并保護(hù)被實(shí)驗(yàn)對(duì)象免受污染 返回節(jié)目錄 一、實(shí)驗(yàn)室生物安全的有關(guān)概念二、臨床實(shí)驗(yàn)室的主要危害源（一）生物危害源（二）化學(xué)危害源（三）物理危害源（一）生物危害源生物危害源主要由病原微生物引起的包括細(xì)菌、病毒、真菌及寄生蟲等實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染的原因：被銳器刺傷 吸入氣溶膠 被動(dòng)物咬傷或抓傷 感染性材料處理不當(dāng) （二）化學(xué)危害源化學(xué)危害源主要指在臨床實(shí)驗(yàn)室的操作過程中所使用的危險(xiǎn)性化學(xué)品引起的危害。包括：易燃性化學(xué)品、易爆性化學(xué)品、腐蝕性化學(xué)品、強(qiáng)酸性化學(xué)品、有毒性化學(xué)品、有害性化學(xué)品入侵方式：通過吸入、接觸、食入、針刺及破損皮膚等方式侵入（三）物理危害源臨床實(shí)驗(yàn)室中物理危害源主要

5、放射性核素的輻射、紫外線和激光光源照射、電磁場(chǎng)、噪音等的危害1放射性核素 使用理由、限度和地點(diǎn)進(jìn)行評(píng)估 2. 紫外線和激光光源 提供個(gè)人防護(hù)裝備 3. 電 主要危害是引起火災(zāi) 4. 噪音 采用工程控制措施 返回節(jié)目錄 三、相關(guān)的法律法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)（一）國(guó)際的相關(guān)法律法規(guī)（二）我國(guó)生物安全法律、法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)（一）國(guó)際的相關(guān)法律法規(guī)20世紀(jì)5060年代歐美國(guó)家開始關(guān)注實(shí)驗(yàn)室生物安全問題世界衛(wèi)生組織在1983年出版了實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)（第一版）WHO于1993年組織編寫了該手冊(cè)的第二版。2004年WHO正式發(fā)布了實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)（第三版） （二）我國(guó)有關(guān)生物安全的法律法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)1. 我國(guó)有關(guān)生物安全的法

6、律法規(guī) （1）中華人民共和國(guó)傳染病防治法（2）病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例（3） 醫(yī)療廢物管理?xiàng)l例2我國(guó)有關(guān)實(shí)驗(yàn)室生物安全的標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范（1）中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)：實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求（GB19489-2008）、醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室安全要求（GB19781-2005/ISO15190）、生物安全實(shí)驗(yàn)室建設(shè)技術(shù)規(guī)范（GB50346-2004）（2）中華人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)：微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則、人間傳染的病原微生物名錄、可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運(yùn)輸管理規(guī)定（3）國(guó)家環(huán)境保護(hù)總局：病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全環(huán)境管理辦法（第32號(hào)） 返回節(jié)目錄 四、實(shí)驗(yàn)室的安全

7、標(biāo)識(shí)（一）生物危害標(biāo)識(shí)（二）感染性物品標(biāo)識(shí)（三）電離輻射標(biāo)識(shí)（四）危險(xiǎn)化學(xué)品警示標(biāo)識(shí) 授權(quán)人員方可進(jìn)入生物安全水平：-責(zé)任人：-緊急聯(lián)系電話：-白天電話：- 家庭電話：-必須得到上述責(zé)任人的授權(quán)方可進(jìn)入 生物危害警告標(biāo)識(shí)感染性物品標(biāo)識(shí) 當(dāng)心電離輻射標(biāo)識(shí)爆炸品標(biāo)識(shí) 易燃?xì)怏w、不燃?xì)怏w 易燃液體標(biāo)識(shí)氧化劑標(biāo)識(shí) 腐蝕品標(biāo)識(shí) 返回章目錄 警示標(biāo)識(shí) 第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)室生物安全管理體系 一、生物安全管理組織體系 二、生物安全管理體系文件 三、生物安全管理規(guī)章制度 四、生物安全管理規(guī)范 五、記錄與資料的管理一、生物安全管理組織體系（一）國(guó)家病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專家委員會(huì)（二）地區(qū)病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專家

8、委員會(huì)（三）醫(yī)療機(jī)構(gòu)生物安全管理委員會(huì)（四）實(shí)驗(yàn)室主任與安全管理員一、生物安全管理組織體系實(shí)驗(yàn)室安全負(fù)責(zé)人的工作(1)生物安全、生物安全保障以及技術(shù)規(guī)章方面的咨詢工作。(2)對(duì)技術(shù)方法、程序和方案、生物因子、材料和設(shè)備定期進(jìn)行內(nèi)部安全檢查 (3)記錄違反生物安全方案或程序的情況,與有關(guān)人員討論并提出改進(jìn)的辦法(4)進(jìn)行生物安全繼續(xù)教育和適當(dāng)?shù)纳锇踩嘤?xùn)(5)對(duì)于所有涉及潛在泄漏或意外事故調(diào)查,并將調(diào)查結(jié)果以及處理意見及時(shí)向?qū)嶒?yàn)室主任和生物安全委員會(huì)報(bào)告一、生物安全管理組織體系(6)在出現(xiàn)涉及感染性物質(zhì)溢出或其他事故時(shí),要確保清除污染(7)確保醫(yī)療廢棄物的正確管理(8)根據(jù)國(guó)家規(guī)定,制定病原微

9、生物的運(yùn)入/運(yùn)出的程序(9)對(duì)涉及感染性物質(zhì)實(shí)驗(yàn)的計(jì)劃、方案以及操作程序,要在具體操作實(shí)施以前進(jìn)行生物安全審查。(10)負(fù)責(zé)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)急預(yù)案的演練與實(shí)施等 返回節(jié)目錄 二、生物安全管理體系文件體系文件的編制一般都采用四層“金字塔”建構(gòu)第一層生物安全管理手冊(cè)，主要敘述生物安全原則、方針、意圖和指令等第二層是程序文件，是將生物安全管理指令、意圖轉(zhuǎn)化為行動(dòng)的途徑和相關(guān)聯(lián)的行動(dòng)第三層是作業(yè)指導(dǎo)書(SOP)，是用來指導(dǎo)相關(guān)活動(dòng)的實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)細(xì)節(jié)性文件第四層是記錄，是用來闡明安全關(guān)聯(lián)活動(dòng)的表達(dá)方式，它可追溯性提供結(jié)果的證據(jù)二、生物安全管理體系文件1生物安全管理手冊(cè)核心是生物安全方針、目標(biāo)、原則、組織機(jī)構(gòu)及各

10、組成要素的描述手冊(cè)中“方針目標(biāo)”應(yīng)口號(hào)式生物安全方針概述生物安全目標(biāo)，明確實(shí)驗(yàn)室對(duì)生物安全管理的承諾二、生物安全管理體系文件2生物安全管理程序文件是對(duì)生物安全活動(dòng)進(jìn)行全面策劃和管理，是對(duì)各項(xiàng)生物安全管理活動(dòng)的方法所作的規(guī)定，不涉及純技術(shù)性細(xì)節(jié)。程序文件一般包括；文件標(biāo)題、目的、適用范圍、職責(zé)、工作流程、記錄表格目錄、支持性文件等。 返回節(jié)目錄 三、生物安全管理規(guī)章制度1建立安全管理制度的基本原則 制定生物安全管理制度必須根據(jù)相關(guān) 的法律法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)，并結(jié)合本實(shí)驗(yàn)室情況還應(yīng)考慮其科學(xué)性、合理性和可操作性控制源頭、切斷途徑、避免危害三、生物安全管理規(guī)章制度2基本規(guī)章制度實(shí)驗(yàn)室安全管理制度生物安全防護(hù)

11、制度內(nèi)務(wù)清潔制度實(shí)驗(yàn)室消毒滅菌制度安全培訓(xùn)制度微生物實(shí)驗(yàn)室菌(毒)種管理制度傳染病病原體報(bào)告制度。防火、防電、防意外事故管理制度尖銳器具安全使用制度實(shí)驗(yàn)室醫(yī)療廢棄物處理制度 返回節(jié)目錄 四、生物安全管理規(guī)范構(gòu)成臨床實(shí)驗(yàn)室生物安全的三要素：工作人員、硬件和軟件人是核心要素，又是最寶貴的要素實(shí)驗(yàn)室或者實(shí)驗(yàn)室的設(shè)立單位應(yīng)當(dāng)每年定期對(duì)工作人員進(jìn)行培訓(xùn)，保證其掌握實(shí)驗(yàn)室技術(shù)規(guī)范、操作規(guī)范、生物安全防護(hù)知識(shí)和實(shí)際操作技能，并進(jìn)行考核四、生物安全管理規(guī)范病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例規(guī)定：實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)每年定期對(duì)工作人員進(jìn)行培訓(xùn)，保證其掌握實(shí)驗(yàn)室技術(shù)規(guī)范、操作規(guī)范、生物安全防護(hù)知識(shí)和實(shí)際操作技能，并進(jìn)行考核工

12、作人員經(jīng)考核合格的，方可上崗對(duì)實(shí)驗(yàn)室相關(guān)人員，包括實(shí)驗(yàn)室操作人員、保潔人員等也要進(jìn)行崗前培訓(xùn)和考核，持證上崗?fù)瑫r(shí)要進(jìn)行周期性(一般每年一次)生物安全知識(shí)的繼續(xù)教育，并記入個(gè)人技術(shù)檔案。 返回節(jié)目錄 五、記錄與資料的管理將所取得的結(jié)果或所完成的活動(dòng)以記錄方式形成的文件，它可追溯性提供證據(jù)實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)的表達(dá)方式之一記錄還可為糾正措施、預(yù)防措施的驗(yàn)證提供證據(jù)實(shí)驗(yàn)室采取糾正措施、預(yù)防措施的過程與效果可以通過相對(duì)的記錄予以驗(yàn)證 返回章目錄 第三節(jié) 實(shí)驗(yàn)室生物安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估 一、生物因子風(fēng)險(xiǎn)程度分級(jí) 二、病原微生物危害程度分類 三、實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)分級(jí) 四、風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估一、生物因子風(fēng)險(xiǎn)程度分級(jí)級(jí)風(fēng)險(xiǎn) : 低個(gè)體

13、危害，低群體危害。 不會(huì)導(dǎo)致健康工作者和動(dòng)物致病的細(xì)菌、真菌、病毒和寄生蟲等生物因子。 級(jí)風(fēng)險(xiǎn)： 中等個(gè)體危害，有限群體危害。 能引起人或動(dòng)物發(fā)病，但一般情況下對(duì)健康工作者、群體、家畜或環(huán)境不會(huì)引起嚴(yán)重危害的病原體。實(shí)驗(yàn)室感染不導(dǎo)致嚴(yán)重疾病，具備有效治療和預(yù)防措施，并且傳播風(fēng)險(xiǎn)有限。一、生物因子風(fēng)險(xiǎn)程度分級(jí)級(jí)風(fēng)險(xiǎn)： 高個(gè)體危害，低群體危害。 能引起人類或動(dòng)物嚴(yán)重疾病，或造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失，但通常不能因偶然接觸而在個(gè)體間傳播，或能使用抗生素、抗寄生蟲藥治療的病原體 。級(jí)風(fēng)險(xiǎn)： 高個(gè)體危害，高群體危害。 能引起人類或動(dòng)物非常嚴(yán)重的疾病，一般不能治愈，容易直接或間接或因偶然接觸在人與人，或動(dòng)物與人，或

14、人與動(dòng)物，或動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的病原體。 返回節(jié)目錄 二、病原微生物危害程度分類我國(guó)在病原微生物實(shí)驗(yàn)生物安全管理?xiàng)l例中，按危害程度將病原微生物分為四類。一類：能夠引起人類或者動(dòng)物非常嚴(yán)重疾病的微生物，以及我國(guó)尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅和微生物。二類：能夠引起人類或者動(dòng)物嚴(yán)重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動(dòng)物與人、動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的微生物。二、病原微生物危害程度分類三類：能夠引起人類或動(dòng)物疾病，但一般情況下對(duì)人、動(dòng)物或者環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害，傳播風(fēng)險(xiǎn)有限，實(shí)驗(yàn)室感染后很少引起嚴(yán)重疾病，并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物。四類：通常情況下不會(huì)引起人類或者動(dòng)物疾病的微生物。 返回節(jié)目錄 三、實(shí)驗(yàn)室生

15、物安全防護(hù)分級(jí)1一級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室（BSL-l）2二級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室（BSL-2）3三級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室（BSL-3）4四級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室（BSL-4）與風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)相對(duì)應(yīng)的生物安全水平、操作和設(shè)備選擇危害等級(jí) 生物安全水平 實(shí)驗(yàn)室類型 實(shí)驗(yàn)室操作 安全設(shè)施 BSL-1 基礎(chǔ)教學(xué)、研究 GMT 不需要；開放實(shí)驗(yàn)室 BSL-2 初級(jí)衛(wèi)生服務(wù)、診斷 GMT、防護(hù)服、 開放實(shí)驗(yàn)室，需要BSC 微生物危害標(biāo)識(shí) 用于可能生成的氣溶膠 BSL-3 特殊的診斷、研究 在BSL-2上增加特 BSC和（或）其他所有 殊防護(hù)服、進(jìn)入制 實(shí)驗(yàn)室工作所需的基本 度、定向氣流 設(shè)備 BSL-4 危險(xiǎn)病原體研究

16、 在BSL-3上增加氣鎖 級(jí)或級(jí)BSC并穿 入口、出口淋浴、污 著正壓服、雙開門高 染物的特殊處理 壓滅菌器，經(jīng)過濾空 氣 病原微生物危害等級(jí)劃分與生物安全實(shí)驗(yàn)室的分級(jí)分類病原微生物實(shí)驗(yàn)生物安全管理?xiàng)l例等級(jí)代號(hào)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求（GB19489-2004）四類在通常情況下不會(huì)引起人類或者動(dòng)物疾病的微生物級(jí)BSL1低個(gè)體危害，低群體危害。不會(huì)導(dǎo)致健康工作者和動(dòng)物致病的細(xì)菌、真菌、病毒和寄生蟲等生物因子。三類能夠引起人類或者動(dòng)物疾病，但一般情況下對(duì)人、動(dòng)物或者環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害，傳播風(fēng)險(xiǎn)有限，實(shí)驗(yàn)室感染后很少引起嚴(yán)重疾病，并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物。級(jí)BSL2中等個(gè)體危害，有限群體危害

17、。能引起人或動(dòng)物發(fā)病，但一般情況下對(duì)健康工作者、群體、家畜或環(huán)境不會(huì)引起嚴(yán)重危害的病原體。實(shí)驗(yàn)室感染不導(dǎo)致嚴(yán)重疾病，具備有效治療和預(yù)防措施，并且傳播風(fēng)險(xiǎn)有限。二類能夠引起人類或者動(dòng)物嚴(yán)重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動(dòng)物與人、動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的微生物級(jí)BSL3高個(gè)體危害，低群體危害。能引起人類或動(dòng)物嚴(yán)重疾病，或造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失，但通常不能因偶然接觸而在個(gè)體間傳播，或能使用抗生素、抗寄生蟲藥治療的病原體。一類能夠引起人類或者動(dòng)物非常嚴(yán)重疾病的微生物，以及我國(guó)尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅和微生物級(jí)BSL4高個(gè)體危害，高群體危害。能引起人類或動(dòng)物非常嚴(yán)重的疾病，一般不能治愈，容易直接或間接或因偶然

18、接觸在人與人，或動(dòng)物與人，或人與動(dòng)物，或動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的病原體。 返回節(jié)目錄 四、風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估（一）風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的含義（二）風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估范圍（三）風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估時(shí)間（四）評(píng)估人員（五）制定評(píng)估報(bào)告（六）評(píng)估辦法（一） 風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的含義風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估（risk assessment）是評(píng)估風(fēng)險(xiǎn)的大小以及確定風(fēng)險(xiǎn)是否可接受的全過程風(fēng)險(xiǎn)控制（risk control）為降低風(fēng)險(xiǎn)而采取的綜合措施風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估是實(shí)驗(yàn)室生物安全的核心工作（二）風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估范圍（1）生物安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估 涉及病原微生物危害評(píng)估、實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)活動(dòng)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、設(shè)施設(shè)備安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、人員健康監(jiān)測(cè)等多方面內(nèi)容。（2）風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估內(nèi)容 至少包括生物因子已知或未知的生物學(xué)特性生物

19、因子的種類、來源、傳染性、傳播途徑、易感性、潛伏期、劑量-效應(yīng)關(guān)系、致病性、變異性、在環(huán)境中的穩(wěn)定性、與其他生物和環(huán)境的交互作用、相關(guān)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)、流行病學(xué)資料、人員安全狀況評(píng)估、預(yù)防和治療方案等（三）風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估時(shí)間風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估始于實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)建造之前實(shí)施于實(shí)驗(yàn)活動(dòng)之中定期的階段性再評(píng)估因工作條件、人員變動(dòng)適時(shí)重新評(píng)估保證風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告的及時(shí)性保證有關(guān)管理規(guī)程、標(biāo)準(zhǔn)操作程序可行性（四）評(píng)估人員 實(shí)驗(yàn)室生物安全工作涉及病原微生物、建筑設(shè)計(jì)工程、防護(hù)材料空氣動(dòng)力等不同的專業(yè)領(lǐng)域是管理與研究并重的綜合性工作需要對(duì)該領(lǐng)域及實(shí)驗(yàn)研究有經(jīng)驗(yàn)、有資歷的專業(yè)人員進(jìn)行評(píng)估工作 （五）制定評(píng)估報(bào)告 各種因素的風(fēng)險(xiǎn)發(fā)生概率程度、

20、針對(duì)這些風(fēng)險(xiǎn)采取的風(fēng)險(xiǎn)控制措施以及風(fēng)險(xiǎn)發(fā)生后的補(bǔ)救方法風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告應(yīng)得到有關(guān)生物安全主管部門的審批程序?qū)徟菍?duì)評(píng)估結(jié)果的論證（六）評(píng)估辦法 具體評(píng)估辦法應(yīng)按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求（GB19489-2008）嚴(yán)格實(shí)行 返回章目錄 第四節(jié) 臨床實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)一、實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)類型二、實(shí)驗(yàn)室主要的安全設(shè)備三、個(gè)人安全防護(hù)用具四、臨床實(shí)驗(yàn)室技術(shù)規(guī)范五、臨床實(shí)驗(yàn)室消毒與滅菌六、臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)急事故處理 一、實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)的類型1.一級(jí)防護(hù)(primary barrier) 主要采用規(guī)范實(shí)驗(yàn)技術(shù)和適當(dāng)?shù)陌踩O(shè)備保護(hù)實(shí)驗(yàn)室工作人員和室內(nèi)環(huán)境安全免受感染性物質(zhì)污染包括安全設(shè)備和個(gè)體防護(hù)裝備

21、一、實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)的類型2.二級(jí)防護(hù)(secondary barrier) 二級(jí)防護(hù)包括實(shí)驗(yàn)室設(shè)施設(shè)計(jì)和嚴(yán)格規(guī)范的操作流程以保護(hù)實(shí)驗(yàn)室外環(huán)境不受感染性物質(zhì)污染生物安全防護(hù)的三個(gè)要素實(shí)驗(yàn)室操作及技術(shù)、安全設(shè)備和實(shí)驗(yàn)室設(shè)施設(shè) 返回節(jié)目錄 二、實(shí)驗(yàn)室主要的安全設(shè)備（一）生物安全柜（二）超凈工作臺(tái)（三）通風(fēng)柜（四）洗眼器（五）緊急噴淋裝置（六）消毒設(shè)施及用品生物安全柜（biosafety cabinet ，BSCs ）是處理危險(xiǎn)性微生物時(shí)所用的箱型空氣凈化安全裝置。是在操作具有感染性的實(shí)驗(yàn)材料時(shí)，為保護(hù)操作者本人、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)外環(huán)境以及實(shí)驗(yàn)材料，使其避免在操作過程中可能產(chǎn)生的感染性氣溶膠和濺出物而設(shè)計(jì)

22、的一種實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)設(shè)備。 （一）生物安全柜（一）生物安全柜1. 種類介紹2. 生物安全柜使用要求3. 生物安全柜操作規(guī)范4. 生物安全柜檢測(cè)要求1. 種類介紹級(jí)生物安全柜級(jí)生物安全柜：級(jí)A1型、 級(jí)A2型、 級(jí)B1型、 級(jí)B2型級(jí)生物安全柜生物安全柜(負(fù)壓柜)級(jí)：設(shè)計(jì)簡(jiǎn)單，目前仍廣泛使用。保護(hù)操作者和環(huán)境，不保護(hù)操作對(duì)象。級(jí)：保護(hù)操作者和操作對(duì)象。操作危險(xiǎn)度2 級(jí)和3 級(jí)微生物。穿正壓防護(hù)服可處理危險(xiǎn)度4 級(jí)微生物。級(jí)：對(duì)操作者防護(hù)最好。操作危險(xiǎn)度4 級(jí)微生物。適用于三級(jí)和四級(jí)生物安全水平實(shí)驗(yàn)室。級(jí)生物安全柜原理A：前開口B：窗口C：排風(fēng)HEPA 過濾器D：壓力排風(fēng)系統(tǒng)不能對(duì)實(shí)驗(yàn)樣品進(jìn)行保護(hù)

23、安全柜內(nèi)的空氣可以通過HEPA 過濾器按下列方式排出：（a）排到實(shí)驗(yàn)室中，然后再通過實(shí)驗(yàn)室排風(fēng)系統(tǒng)排到建筑物外面（b）通過建筑物的排風(fēng)系統(tǒng)排到建筑物外面 （c）直接排到建筑物外面級(jí)生物安全柜級(jí)生物安全柜有不同的類型：A型（30%排出）：A1、A2型B型又分為：B1 （70%接管道外排） B2 （100%接管道外排） 不同于級(jí)生物安全柜之處為：只讓經(jīng)HEPA過濾的（無菌的）空氣流過工作臺(tái)面級(jí)A1 型生物安全柜原理圖A：前開口B：窗口C：排風(fēng)HEPA 過濾器D：后面的壓力排風(fēng)系統(tǒng)E：供風(fēng)HEPA 過濾器F：風(fēng)機(jī)級(jí)B1 型生物安全柜原理圖A：前開口B：窗口C：排風(fēng)HEPA 過濾器D：供風(fēng)HEPA 過

24、濾器E：負(fù)壓壓力排風(fēng)系統(tǒng)F：風(fēng)機(jī)G：送風(fēng)HEPA 過濾器安全柜需要有與建筑物排風(fēng)系統(tǒng)相連接的排風(fēng)接口級(jí)生物安全柜所有接口都是密封的有一個(gè)專門的外置排風(fēng)系統(tǒng)控制氣流安全柜內(nèi)部始終處于負(fù)壓狀態(tài)（約124.5Pa）只有通過連接在安全柜上的橡膠手套，手才能伸入安全柜級(jí)生物安全柜A：用于連接等臂長(zhǎng)手套的艙孔B：窗口C：兩個(gè)排風(fēng)HEPA 過濾器D：送風(fēng)HEPA 過濾器E：雙開門高壓滅菌器或傳遞箱F：化學(xué)浸泡槽安全柜需要有與獨(dú)立的建筑物排風(fēng)系統(tǒng)相連接的排風(fēng)接口根據(jù)保護(hù)類型的需要選擇適宜的生物安全柜保護(hù)類型BSC的選擇針對(duì)危險(xiǎn)組1-3微生物的人員保護(hù)級(jí)、級(jí)、級(jí)針對(duì)危險(xiǎn)組4微生物的人員保護(hù)，手套箱實(shí)驗(yàn)室級(jí)針對(duì)危

25、險(xiǎn)組1-3微生物的人員保護(hù),防護(hù)服實(shí)驗(yàn)室級(jí)、級(jí)產(chǎn)品保護(hù)級(jí),僅當(dāng)涉及層流時(shí)用級(jí)針對(duì)微量的不穩(wěn)定的放射性核/化學(xué)藥品的保護(hù)級(jí)B1,向室外排風(fēng)的級(jí)A2針對(duì)不穩(wěn)定的放射性核/化學(xué)藥品的保護(hù)級(jí)、級(jí)B2，級(jí) 擺放位置、操作、物品擺放、操作和維修 紫外線燈、明火、溢出、清潔和消毒、清 除污染、個(gè)體防護(hù)裝備、警報(bào)器、檢測(cè)2. 生物安全柜使用要求3. 生物安全柜操作規(guī)范1. 人員要培訓(xùn)2. 必須運(yùn)行正常3. 使用時(shí)不能打開玻璃觀察擋板4. 放置盡可能少的器材或標(biāo)本5. 不能使用本生燈6. 在安全柜的中后部操作、不要使用其他物品阻擋空氣格柵、盡量減少手臂的伸進(jìn)伸出、盡可能減少操作者身后的人員流動(dòng)、不進(jìn)行文字工作7

26、. 工作開始前和結(jié)束后，風(fēng)機(jī)應(yīng)至少運(yùn)行5分鐘4. 生物安全柜檢測(cè)要求（1）人員、產(chǎn)品及交叉污染保護(hù)試驗(yàn)（2）柜體泄漏試驗(yàn)（3）HEPA過濾器泄漏試驗(yàn)（4）下降氣流流速測(cè)試（5）流入氣流流速測(cè)試（6）氣流煙霧模式測(cè)試（7）噪聲（8）照度（9）振動(dòng)（二） 超凈工作臺(tái)超凈工作臺(tái)的氣流是由外部經(jīng)HEPA過濾后進(jìn)入操作區(qū)，通過操作區(qū)后由超凈工作臺(tái)前、側(cè)開口區(qū)流向操作者一側(cè)而進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。超凈工作臺(tái)只能保護(hù)實(shí)驗(yàn)材料，不能保護(hù)操作人員及環(huán)境。超凈工作臺(tái)只適用于無毒、無味、無刺激性揮發(fā)氣體以及無感染性的實(shí)驗(yàn)材料操作。超凈工作臺(tái)（三） 通 風(fēng) 柜通風(fēng)柜是可以有效遏制毒性、刺激性或者易燃材料的安全設(shè)備在實(shí)驗(yàn)操作時(shí)往

27、往會(huì)產(chǎn)生各種有害氣體、臭氣、濕氣以及易燃、易爆、腐蝕性物質(zhì)，為了保護(hù)使用者的安全，防止實(shí)驗(yàn)中的污染物質(zhì)向?qū)嶒?yàn)室擴(kuò)散，在污染源附近要使用排風(fēng)設(shè)備尤其是當(dāng)試驗(yàn)過程中出現(xiàn)操作失誤，蒸汽和灰塵從使用器皿中大量泄出時(shí)，通風(fēng)柜可起到后備安全保障作用通風(fēng)柜（四） 洗眼器洗眼器是安全和勞動(dòng)保護(hù)必備的設(shè)備，是接觸酸、堿、有機(jī)物等有毒、腐蝕性物質(zhì)場(chǎng)合必備的應(yīng)急、保護(hù)設(shè)施洗眼器的類型很多，如復(fù)合式洗眼器、立式洗眼器、壁掛式洗眼器、便攜式洗眼器、臺(tái)式洗眼器每周應(yīng)測(cè)試洗眼器與水供應(yīng)連接的裝置以確保其功能的正常并沖掉積水洗眼器（五）緊急噴淋裝置一般安裝在使用苛性堿和腐蝕性化學(xué)品附近的地方定期測(cè)試噴淋裝置以保證其功能正常，

28、其次數(shù)依實(shí)驗(yàn)室的復(fù)雜程度和規(guī)模而定盡可能提供舒適的水溫；地面排水通常設(shè)在緊急噴淋裝置附近緊急噴淋裝置（六）消毒設(shè)施及用品臨床實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)常采用的消毒三種方式化學(xué)消毒高壓滅菌焚燒可在具體工作中應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況來選擇不同的消毒方式 返回節(jié)目錄 三、個(gè)人安全防護(hù)用品 1. 實(shí)驗(yàn)服2. 護(hù)目鏡3. 面罩4. 手套5. 鞋安全防護(hù)用具是避免操作人員暴露于氣溶膠、噴濺物以及意外接種等危險(xiǎn)的一個(gè)屏障應(yīng)根據(jù)所進(jìn)行工作的性質(zhì)來選擇防護(hù)用具常用的安全防護(hù)用具有實(shí)驗(yàn)服、護(hù)目鏡、面罩、手套和鞋等三、個(gè)人安全防護(hù)用品 實(shí)驗(yàn)服面罩護(hù)目鏡鞋套手套實(shí)驗(yàn)服 隔離衣 連體防護(hù) 靴套使用方法示意圖鞋套使用方法示意圖乳膠手套 聚

29、脂手套 聚氯乙烯手套 眼睛防護(hù)裝備 a .安全鏡 大多數(shù)情況,佩戴側(cè)面帶有護(hù)罩的安全眼鏡能夠保護(hù)工作人員避免受到大部分實(shí)驗(yàn)室操作所帶來的損害 b .安全護(hù)目鏡 只有在進(jìn)行有可能發(fā)生化學(xué)和生物污染物質(zhì)濺出的實(shí)驗(yàn)時(shí)，必須佩戴護(hù)目鏡 防護(hù)面罩（對(duì)整個(gè)臉部進(jìn)行防護(hù)） 一次性面罩 一次性防護(hù)面具 一次性防護(hù)面具 正壓防護(hù)服 使用中的全罩式防護(hù)面具 正壓面罩（頭盔正壓式呼吸防護(hù)系統(tǒng)） 返回節(jié)目錄 四、臨床實(shí)驗(yàn)室技術(shù)規(guī)范（一）一級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室（BSL-1）（二）二級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室（BSL-2）（三）三級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室（BSL-3）（四）四級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室（BSL-4）（一）一級(jí)生物安全防護(hù)

30、實(shí)驗(yàn)室（BSL-1）適用于已知不會(huì)導(dǎo)致健康工作者和動(dòng)物致病的生物因子（細(xì)菌、真菌、病毒和寄生蟲等）的操作對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員和環(huán)境的潛在危害性最小（一）一級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室1標(biāo)準(zhǔn)的微生物操作規(guī)程限制或禁止非本實(shí)驗(yàn)室人員進(jìn)入工作人員處理完后，脫下手套、離開實(shí)驗(yàn)室之前要洗手不許在工作區(qū)內(nèi)飲食、喝水、抽煙、化妝、處理隱形眼鏡，食物要放在工作區(qū)域以外的專用櫥柜或冰箱內(nèi)禁止使用口吸移液，應(yīng)使用移液器吸取液體制定銳利器具安全操作規(guī)程（一）一級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室1標(biāo)準(zhǔn)的微生物操作規(guī)程操作盡可能細(xì)心，以減少飛濺物或氣溶膠的產(chǎn)生每天至少消毒一次工作臺(tái)面，活性物質(zhì)濺出時(shí)應(yīng)及時(shí)消毒所有的培養(yǎng)物、廢棄物在運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室前，

31、應(yīng)使用可行的方法進(jìn)行消毒滅活制定有效的防鼠防蟲措施當(dāng)存在傳染源時(shí)，應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室入口處貼上生物危險(xiǎn)標(biāo)志，注明致病因子名稱、研究室負(fù)責(zé)人姓名及電話號(hào)碼（一）一級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室2實(shí)驗(yàn)室生物安全設(shè)備和防護(hù)要求 操作生物安全一級(jí)的生物因子，一般無須生物安全柜等特殊防護(hù)裝置和設(shè)備穿戴工作服,防止自身衣服被污染或弄臟若手部皮膚有破損或皮疹應(yīng)戴上手套操作中應(yīng)戴保護(hù)眼罩（一）一級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室3實(shí)驗(yàn)室設(shè)施要求 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該有控制進(jìn)入的門實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配備洗手池，并靠近出口處實(shí)驗(yàn)室地面應(yīng)易于清洗、防滑、不宜鋪設(shè)地毯實(shí)驗(yàn)臺(tái)面應(yīng)防水、耐熱、耐酸堿、耐有機(jī)溶劑及其他用于的消毒藥品實(shí)驗(yàn)室器材設(shè)施之間應(yīng)固定，并保持一定的間距

32、便于清掃如果實(shí)驗(yàn)室有窗戶應(yīng)安裝紗窗（二）二級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室二級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室（BSL-2）接觸致病生物因子的實(shí)驗(yàn)室工作人員要經(jīng)過特殊培訓(xùn)在資深工作人員的指導(dǎo)下工作（二）二級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室1標(biāo)準(zhǔn)的微生物操作規(guī)程同BSL-1，特殊安全操作規(guī)程1）在開展傳染病原體操作時(shí)，實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人應(yīng)禁止或限制其他人員進(jìn)入2）只有那些明確病原體潛在危險(xiǎn)性并符合特殊要求（如經(jīng)過免疫接種）的人員才能進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室3）實(shí)驗(yàn)室入口處貼上生物危害標(biāo)志，在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)必須佩戴的個(gè)人防護(hù)設(shè)施4）實(shí)驗(yàn)室人員接受適當(dāng)與實(shí)驗(yàn)有關(guān)的免疫接種或檢測(cè)（如乙型肝炎病毒疫苗或卡介苗皮試）5）必要時(shí)對(duì)實(shí)驗(yàn)室或其他高危人員進(jìn)行基準(zhǔn)血清樣本收集并

33、保存6）標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程或生物安全手冊(cè)中應(yīng)包括生物安全程序（二）二級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室1標(biāo)準(zhǔn)的微生物操作規(guī)程7）工作人員要每年要接受1次最新知識(shí)的培訓(xùn)。8）對(duì)于污染的銳利器具，要嚴(yán)格遵守以下規(guī)定： 針、注射器及其他銳器應(yīng)限制在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)使用；可用其他器具替代操作 注射和吸取感染性物質(zhì)時(shí)要用一次性注射器；用過的針頭不得彎曲、剪斷、折斷、直接置于堅(jiān)壁容器中 適當(dāng)時(shí)使用帶針頭套的注射器、無針頭注射器和其他安全裝置 禁止直接用手處理破碎的玻璃器具，必須用其他工具（如刷子、簸箕、夾子或鑷子等）處理，盛裝污染的針頭、銳器、破碎玻璃的容器在丟棄前需進(jìn)行消毒處理（二）二級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室1標(biāo)準(zhǔn)的微生物操作規(guī)程9）

34、實(shí)驗(yàn)室設(shè)備和工作臺(tái)面在進(jìn)行完感染性物質(zhì)的操作后進(jìn)行常規(guī)消毒，污染的設(shè)備必須根據(jù)相應(yīng)規(guī)定進(jìn)行消毒10）培養(yǎng)物、組織、體液樣本或具潛在感染性的廢物必須放在密閉、防漏的容器內(nèi)，防止發(fā)生泄漏）發(fā)生溢出事故造成感染性物質(zhì)擴(kuò)散時(shí)，應(yīng)立即報(bào)告實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人，要進(jìn)行適當(dāng)?shù)尼t(yī)學(xué)評(píng)估、監(jiān)測(cè)以及妥善處理，并保留書面記錄12）與實(shí)驗(yàn)無關(guān)的動(dòng)物不允許進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室（二）二級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室2實(shí)驗(yàn)室生物安全設(shè)備和防護(hù)要求二級(jí)生物安全柜或個(gè)人防護(hù)裝備或物理防護(hù)可能產(chǎn)生感染性氣溶膠或飛濺物的實(shí)驗(yàn)過程, 處理高濃度或大體積的感染性生物，密封的轉(zhuǎn)頭或離心管,可以在開放的實(shí)驗(yàn)室離心生物安全柜外操作感染性微生物時(shí),要佩戴面目防護(hù)裝置要穿

35、著專用的工作服等防護(hù)服,在離開時(shí)必須脫下當(dāng)手可能接觸到有潛在感染性的物質(zhì)、污染的表面或設(shè)備時(shí),必須戴手套。處理后的手套不能再進(jìn)行沖洗、使用或接觸“干凈”的表面(鍵盤、電話等),脫下手套后立即洗手（二）二級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室3實(shí)驗(yàn)室設(shè)施要求實(shí)驗(yàn)室門應(yīng)帶鎖應(yīng)配備各種消毒設(shè)施，如高壓滅菌裝置、化學(xué)消毒裝置等新建實(shí)驗(yàn)室選址應(yīng)遠(yuǎn)離公共場(chǎng)所生物安全柜要放在遠(yuǎn)離門、開放的窗戶、走動(dòng)比較頻繁的實(shí)驗(yàn)室區(qū)域以及其他具有潛在破壞性的設(shè)備處,以維持生物安全柜的氣流參數(shù)（三）三級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室（BSL-3）1操作規(guī)程標(biāo)準(zhǔn)的微生物安全操作規(guī)程同BSL-2特殊安全操作規(guī)程，在BSL-2特殊安全操作規(guī)程的基礎(chǔ)上，對(duì)實(shí)驗(yàn)室

36、設(shè)備和工作臺(tái)面消毒、銳器的處理、生物安全柜的應(yīng)用、廢棄物的處理等有一些特殊的要求（三）三級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室2實(shí)驗(yàn)室生物安全設(shè)備和防護(hù)要求進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室時(shí)應(yīng)穿防護(hù)服，操作完畢必須脫下工作服涉及感染性材料的操作均應(yīng)在級(jí)或級(jí)生物安全柜中進(jìn)行，當(dāng)不得不在生物安全柜外進(jìn)行時(shí)，必須采用適當(dāng)?shù)膫€(gè)體綜合防護(hù)裝置和物理防擴(kuò)散設(shè)備在進(jìn)行感染性實(shí)驗(yàn)操作時(shí)，必須使用面部防護(hù)設(shè)備和呼吸保護(hù)裝置在實(shí)驗(yàn)室中必須配備有效的消毒劑、眼部清洗劑或生理鹽水，可配備應(yīng)急藥品（三）三級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室3實(shí)驗(yàn)室設(shè)施要求在BSL-2實(shí)驗(yàn)室的設(shè)施基礎(chǔ)上實(shí)驗(yàn)室應(yīng)單獨(dú)隔離區(qū)域，禁止隨便進(jìn)入，經(jīng)過兩道自動(dòng)門洗手池為手免接觸式或腳踏式或肘動(dòng)式或全自

37、動(dòng)式，下水必須經(jīng)過消毒處理應(yīng)設(shè)置緩沖區(qū)，緩沖區(qū)的面積不宜超過實(shí)驗(yàn)室面積的1/8實(shí)驗(yàn)室應(yīng)密閉，所有的門窗需關(guān)閉和密封，無縫隙、表面應(yīng)光滑防水、耐腐蝕在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)備有對(duì)實(shí)驗(yàn)廢棄物進(jìn)行消毒處理的措施應(yīng)安裝管道式廢氣排放系統(tǒng)建議在實(shí)驗(yàn)室的入口處設(shè)置可視的監(jiān)測(cè)系統(tǒng)（四）四級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室（BSL-4）在BSL-3技術(shù)規(guī)范的基礎(chǔ)上更為嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)人員和實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室有特殊的要求實(shí)驗(yàn)室入口應(yīng)安裝上鎖的安全門所有進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的人員都要簽名登記日期和時(shí)間實(shí)驗(yàn)人員入室前應(yīng)更換衣服，只能經(jīng)淋浴間和更衣室進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室，每次離開實(shí)驗(yàn)室前都應(yīng)進(jìn)行消毒性淋浴實(shí)驗(yàn)材料和用品應(yīng)通過雙層門的高壓滅菌倉(cāng)、熏蒸消毒倉(cāng)或氣體閘門送入，

38、所有操作必須級(jí)生物安全柜中進(jìn)行任何未經(jīng)高壓或熏蒸消毒的物質(zhì)不得轉(zhuǎn)移出實(shí)驗(yàn)室 返回節(jié)目錄 五、臨床實(shí)驗(yàn)室的消毒與滅菌（一）常用的消毒滅菌方法（二）化學(xué)消毒（三） 臨床實(shí)驗(yàn)室消毒措施（四）焚燒（一）常用的消毒滅菌方法1物理的消毒滅菌方法 用物理因素殺菌或清除病原微生物及其他有害微生物，稱為物理消毒滅菌法。（1）熱力滅菌法（heat sterilization） 濕熱滅菌法：濕熱滅菌法是最常用的滅菌法其殺菌機(jī)制：在濕熱條件下蛋白質(zhì)吸收水分容易變性或凝固，水分子的穿透力比空氣大，更易均勻傳遞熱能，蒸汽有潛熱存在。所以該法的滅菌效率比干熱滅菌法高。主要包括：高壓蒸氣滅菌法、間歇蒸氣滅菌法、流通蒸氣消毒法

39、、煮沸法、巴氏消毒法（一）常用的消毒滅菌方法1物理的消毒滅菌方法 干熱滅菌法：其機(jī)制是高溫能使菌體蛋白分子變性及細(xì)胞質(zhì)濃縮，使新陳代謝受到障礙而死亡；可殺死一切微生物，包括芽胞菌，還可以破壞熱原質(zhì)（2）輻射殺菌法（radiation sterilization）：通過紫外線照射和射線的高能量電子束，使菌體蛋白發(fā)生光解、變性、核酸酶被破壞。主要方法有：紫外線法、電離輻射法、微波法（一）常用的消毒滅菌方法（3）超聲波殺菌法（ultrasonic）：超聲波的滅菌機(jī)制是利用其通過水時(shí)產(chǎn)生的空（腔）化作用，從而造成細(xì)菌的崩破與裂解，革蘭陰性菌對(duì)其尤為敏感 常與其他方法合用，起到增效作用。（4）過濾除菌法

40、（filtration）：采用濾器通過物理阻留的方法將液體或空氣中的細(xì)菌除去的方法，以達(dá)到無菌目的 主要用于不耐高溫滅菌的血清、毒素、抗生素、藥液和空氣除菌，不能去除病毒、支原體和L型細(xì)菌（一）常用的消毒滅菌方法（二）化學(xué)消毒化學(xué)消毒是指用化學(xué)藥物作用于微生物和病原體，使其蛋白質(zhì)變性，失去正常功能而死亡具有殺菌作用的化學(xué)藥物稱為化學(xué)消毒劑，具有抑制微生物生長(zhǎng)繁殖的藥物稱為防腐劑主要方法有：浸泡法、擦拭法、熏蒸法、噴霧法，環(huán)氧乙烷氣體密閉消毒法適用于不耐高溫的物品，如銳利器械（如刀、剪刀、縫針等）、內(nèi)鏡、塑料導(dǎo)管、光學(xué)儀器及皮膚、黏膜，病人的分泌物、排泄物、實(shí)驗(yàn)室空氣等均可采用此法（二）化學(xué)消毒

41、各種消毒劑可按照其作用效力分為三類：高效消毒劑：甲醛、戊二醛、過氧乙酸、環(huán)氧乙烷、有機(jī)汞化合物等，可以殺滅包括細(xì)菌繁殖體、芽孢、真菌、病毒在內(nèi)一切微生物，可用作滅菌劑中效消毒劑：有乙醇、酚類、碘、含氯消毒劑等，可殺滅細(xì)菌芽孢以外的其他各種微生物低效消毒劑：包括新潔爾滅、洗必泰等，不能殺滅細(xì)菌芽孢、結(jié)核桿菌和親水類病毒，可殺滅結(jié)核桿菌以外的其他細(xì)菌繁殖體、真菌和親脂類病毒(三) 臨床實(shí)驗(yàn)室消毒措施臨床實(shí)驗(yàn)室分清潔區(qū)、半污染區(qū)、污染區(qū)目前實(shí)驗(yàn)室一般使用含氯消毒劑進(jìn)行消毒1清潔區(qū) 辦公室、盥洗室、休息室、培養(yǎng)基室等每天開窗通風(fēng)換氣，擦拭桌面、地面。每周用消毒液500mg/L有效氯擦拭。2半污染區(qū) 包

42、括緩沖間、更衣室及衛(wèi)生通道等區(qū)域，可能存在致病菌污染空氣消毒常采用紫外燈照射消毒、空氣凈化器消毒門窗、桌面等物體表面用500mg/L有效氯擦拭消毒工作用鞋用500mg/L有效氯擦拭，工作衣、隔離衣通常由醫(yī)院洗衣房統(tǒng)一消毒處理(三) 臨床實(shí)驗(yàn)室消毒措施3污染區(qū) 包括實(shí)驗(yàn)室樣本收集區(qū)、處理區(qū)、培養(yǎng)區(qū)、鑒定藥敏區(qū)和廢棄物處理區(qū)域等。（1）空氣消毒用紫外燈照射消毒、空氣凈化器消毒。（2）手消毒常用250mg/L有效氯或?qū)Ｓ孟词忠合荆?）門窗、桌面、貴重儀器設(shè)備等物體表面消毒需用500mg/L有效氯擦拭（4）被樣品污染的表面消毒用1000mg/L有效氯消毒30min60min被病毒和結(jié)核桿菌污染表面消

43、毒要用2000mg/L有效氯消毒30min（四）焚 燒在臨床實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)工作中，焚燒環(huán)節(jié)是醫(yī)療廢棄物消毒的終末環(huán)節(jié)在處理那些經(jīng)過或事先未經(jīng)清除污染的動(dòng)物尸體以及解剖組織或其他實(shí)驗(yàn)室廢棄物時(shí)，焚燒是一種有效的方法但要在指定地點(diǎn)，應(yīng)符合有關(guān)規(guī)定一般交由廢棄物處理部門完成 返回節(jié)目錄 六、臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)急事故處理（一）刺傷、切割傷或擦傷（二）潛在感染性物質(zhì)的食入（三）潛在危險(xiǎn)性氣溶膠的釋放（柜外）（四）容器破碎及感染性物質(zhì)的溢出（五）未裝可封閉離心桶的離心機(jī)內(nèi)盛有潛在感染性物質(zhì)的離心管發(fā)生破裂（六）在可封閉的離心桶內(nèi)離心管發(fā)生破裂（七）火災(zāi)和自然災(zāi)害（八）緊急救援、聯(lián)系對(duì)象（九）急救裝備（一）刺

44、傷、切割傷或擦傷1受傷人員應(yīng)當(dāng)脫下防護(hù)服，清洗雙手和受傷部位使用適當(dāng)?shù)钠つw消毒劑，必要時(shí)進(jìn)行醫(yī)學(xué)處理2要記錄受傷原因和相關(guān)的微生物，并應(yīng)保留完整適當(dāng)?shù)尼t(yī)療記錄（二）潛在感染性物質(zhì)的食入應(yīng)脫下受害人的防護(hù)服，并進(jìn)行醫(yī)學(xué)處理要報(bào)告食入材料的鑒定和事故發(fā)生的細(xì)節(jié)并保留完整適當(dāng)?shù)尼t(yī)療記錄（三）潛在危險(xiǎn)性氣溶膠的釋放1所有人員必須立即撤離相關(guān)區(qū)域，任何暴露人員都應(yīng)接受醫(yī)學(xué)咨詢2應(yīng)當(dāng)立即通知實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人和生物安全員3為了使氣溶膠排出和使較大的粒子沉降，在一定時(shí)間內(nèi)（例如1h內(nèi)）嚴(yán)禁人員入內(nèi)。如果實(shí)驗(yàn)室沒有中央通風(fēng)系統(tǒng)，則應(yīng)推遲進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室（例如24h）4應(yīng)張貼“禁止進(jìn)入”的標(biāo)志，過了相應(yīng)時(shí)間后，在生物安全員

45、的指導(dǎo)下來清除污染5應(yīng)穿戴適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)服和呼吸保護(hù)裝備（四）容器破碎及感染性物質(zhì)的溢出1應(yīng)當(dāng)立即用布或紙巾覆蓋受感染性物質(zhì)污染或受感染物質(zhì)溢灑的破碎物品。在上面倒上消毒劑，并使其作用適當(dāng)時(shí)間。2然后將布、紙巾以及破碎物品清理；玻璃碎片應(yīng)用鑷子清理。3用消毒劑擦拭污染區(qū)域。如果用簸箕清理破碎物，應(yīng)當(dāng)對(duì)其進(jìn)行高壓滅菌或放在有效的消毒液內(nèi)浸泡。用于清理的布、紙巾和抹布等應(yīng)當(dāng)放在盛放污染性廢棄物的容器內(nèi)。4所有這些操作過程中都應(yīng)戴手套。如果實(shí)驗(yàn)表格或其他打印或手寫材料被污染，應(yīng)將這信息復(fù)制，并將原件置于盛放污染性廢棄物的容器內(nèi)。 （五）未裝封閉離心桶感染性物質(zhì)離心管破裂1如果機(jī)器正在運(yùn)行時(shí)發(fā)生破裂或懷疑

46、發(fā)生破裂，應(yīng)關(guān)閉機(jī)器電源，讓機(jī)器密閉30min使氣溶膠沉積。2如果機(jī)器停止后發(fā)現(xiàn)破裂，應(yīng)立即將蓋子蓋上，并密閉30min。3發(fā)生上述兩種情況時(shí)都應(yīng)通知生物安全員。隨后的所有操作都應(yīng)戴結(jié)實(shí)的手套（如厚橡膠手套），必要時(shí)可在外面戴適當(dāng)?shù)囊淮涡允痔住?當(dāng)清理玻璃碎片時(shí)應(yīng)當(dāng)使用鑷子，或用鑷子夾著棉花來進(jìn)行。所有破碎的離心管、玻璃碎片、離心桶、十字軸和轉(zhuǎn)子都應(yīng)放在無腐蝕性的、已知對(duì)相關(guān)微生物具有殺滅活性的消毒劑內(nèi)。未破損的帶蓋離心管應(yīng)放在另一個(gè)有消毒劑的容器中，然后回收。5離心機(jī)內(nèi)腔應(yīng)用適當(dāng)濃度的同種消毒劑擦拭，并再次擦拭，然后用水沖洗并干燥。6清理時(shí)所使用的全部材料都應(yīng)按感染性廢棄物處理。（五）未裝封

47、閉離心桶感染性物質(zhì)離心管破裂（六）在可封閉的離心桶內(nèi)破裂1所有密封離心桶都應(yīng)在生物安全柜內(nèi)裝卸。2如果懷疑在安全杯內(nèi)發(fā)生破損，應(yīng)該松開安全杯蓋子并將離心桶高壓滅菌。安全杯也可以采用化學(xué)消毒的方法處理。（七）火災(zāi)和自然災(zāi)害應(yīng)事先告知消防人員和其他服務(wù)人員房間有潛在的感染性物質(zhì)。要參觀實(shí)驗(yàn)室，讓他們熟悉實(shí)驗(yàn)室的布局和設(shè)備。發(fā)生自然災(zāi)害時(shí)，應(yīng)就實(shí)驗(yàn)室建筑內(nèi)和（或）附近建筑物的潛在危險(xiǎn)向當(dāng)?shù)鼗驀?guó)家緊急救助人員提出警告只有在受過訓(xùn)練的實(shí)驗(yàn)室工作人員的陪同下，他們才能進(jìn)入這些地區(qū)感染性物質(zhì)應(yīng)收集在防漏的盒子內(nèi)或結(jié)實(shí)的一次性袋子中。由生物安全人員依據(jù)當(dāng)?shù)氐囊?guī)定決定繼續(xù)利用或是最終丟棄（八）緊急救援、聯(lián)系對(duì)象

48、應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)顯著位置張貼以下電話號(hào)碼及地址：實(shí)驗(yàn)室、研究所所長(zhǎng)、實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人生物安全員、消防隊(duì)醫(yī)院急救機(jī)構(gòu)醫(yī)務(wù)人員水、氣和電的維修部門工程技術(shù)人員、警察。 （九）急救裝備 1急救箱，包括常用的和特殊的解毒劑。2合適的滅火器和滅火毯。3有效防護(hù)化學(xué)物質(zhì)和顆粒的濾毒罐的全面罩式防毒面具。4全套防護(hù)服。5房間消毒設(shè)備，如噴霧器和甲醛熏蒸器等。6工具，如錘子、斧子、扳手、螺絲刀、梯子和繩子。7擔(dān)架。8劃分危險(xiǎn)區(qū)域界限的器材和警告標(biāo)示。 返回章目錄 第五節(jié) 實(shí)驗(yàn)用菌種及廢棄物處理 一、菌（毒）種的保藏與管理 二、臨床實(shí)驗(yàn)室廢棄物處理一、菌（毒）種的保藏與管理（1）生物安全管理部門要建立菌（毒）種管理監(jiān)督

49、程序。（2）菌毒種儲(chǔ)藏環(huán)境是要合乎規(guī)范并具備相應(yīng)等級(jí)菌毒種保藏的基本設(shè)備和生物安全保障設(shè)施。（3）菌（毒）種儲(chǔ)藏設(shè)施要求雙人雙鎖。（4）保藏的菌種，要有詳細(xì)的背景和相關(guān)資料。（5）菌（毒）種分離是要有標(biāo)準(zhǔn)的操作細(xì)則，并有相應(yīng)的原始記錄。（6）進(jìn)行II級(jí)生物危害微生物實(shí)驗(yàn)的原始記錄自菌種開啟（分離）到菌種保藏或銷毀，可溯源。（7）實(shí)驗(yàn)記錄要有實(shí)驗(yàn)人、復(fù)核人、實(shí)驗(yàn)日期，實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人要對(duì)記錄內(nèi)容核查。（8）銷毀記錄要有包括銷毀方式、銷毀物品明細(xì)、滅菌溫度與時(shí)間。（9）要有菌毒種滅活方法驗(yàn)證程序，驗(yàn)證原始記錄。（10）要有用于菌毒種或培養(yǎng)物銷毀的高壓鍋檢測(cè)報(bào)告。（11）實(shí)驗(yàn)室廢棄物要使用專用包裝物、容器，要有明顯的警示標(biāo)識(shí)和警示說明。（12）具有處理菌毒種或培養(yǎng)物泄漏所需消毒制劑及其他物品。 一、菌（毒）種的