trkA和Aβ140與阿爾茨海默病大鼠發(fā)病機制的關(guān)系

1、trkA和A1-40與阿爾茨海默病大鼠發(fā)病機制的干系【摘要】目的接納穹隆-海馬傘堵截及雙側(cè)卵巢切除的要領(lǐng)制作阿爾茨海默病AlzhEier,diseaseAD模子，不雅察AD模子大鼠腦內(nèi)皮層區(qū)、海馬A1區(qū)、杏仁復(fù)合體區(qū)和eynert核區(qū)酪氨酸激酶原癌基因tyrsinekinaseprt-n-geneA,TrkA和淀粉樣肽1-40Aylid1-40的表達與比較組比力有何變革，以探究二者的變革與AD發(fā)病機制的干系。要領(lǐng)取康健雌性istar大鼠20只，隨機分成四組，比較組，穹隆海馬傘堵截加卵巢切除組雙切加去勢組，卵巢切除組去勢組，穹隆海馬傘堵截組雙切組每組各5只。在腦立體定位儀上，堵截大鼠腦的雙側(cè)穹隆

2、海馬傘同時切除雙側(cè)卵巢，創(chuàng)立模擬AD的動物模子。應(yīng)用免疫構(gòu)造細胞化學(xué)技能對trkA和A1-40免疫陽性細胞染色。不雅察AD模子組大鼠腦皮層區(qū)、海馬A1區(qū)、杏仁復(fù)合體區(qū)和基底前腦eynert核區(qū)等部位trkA和A1-40陽性細胞的表達與比較組比力是否差異。效果比較組大鼠腦內(nèi)的各不雅察區(qū)內(nèi)A1-40只有少量表達，trkA表達無顯著改變；AD模子組大鼠腦內(nèi)的皮層區(qū)、海馬A1區(qū)、杏仁復(fù)合體區(qū)和基底前腦eynert核區(qū)A1-40表達明顯增多P0.05，各模子組zhijian彼此比力，A1-40的表達無顯著差異P0.05；AD模子組大鼠腦內(nèi)的皮層區(qū)、海馬A1區(qū)、杏仁復(fù)合體區(qū)和基底前腦eynert核區(qū)trk

3、A的陽性細胞明顯淘汰P0.05，各模子組之間彼此比力，穹隆海馬傘堵截加卵巢切除組較穹隆海馬傘堵截組和卵巢切除組trkA淘汰明顯P0.05，穹隆海馬傘堵截組與卵巢切除組之間trkA表達差異無明顯性P0.05。結(jié)論AD模子組大鼠腦內(nèi)皮層區(qū)、海馬A1區(qū)、杏仁復(fù)合體區(qū)和基底前腦eynert核區(qū)內(nèi)A1-40的陽性細胞明顯增長，而trkA的陽性細胞明顯淘汰，提示A1-40的表達增多和trkA的表達淘汰大概與老年性癡呆發(fā)病機制相干，大概是臨床AD發(fā)病的病理基?！娟P(guān)鍵詞】穹隆-海馬傘堵截；卵巢切除；酪氨酸原癌基因；淀粉樣肽1-40；大鼠；阿爾茨海默病【Keyrds】fibria/frnixtransatin;

4、varietizatin;trkA;A1-40;rats;Alzheierdisease阿爾茨海默病AD是基底前腦膽堿能神經(jīng)元的變性殞命及相應(yīng)皮質(zhì)和海馬神經(jīng)元退化所引起的老年神經(jīng)元退行性疾病，重要臨床表現(xiàn)為學(xué)習(xí)和影象成效減退，嚴峻的智力低下1。AD是一種以認知影象停滯為重要特性的舉行性神經(jīng)體系疾病，又稱老年性癡呆，是老年人中最常見的神經(jīng)退行性疾病之一。AD的特性性病理改變有神經(jīng)細胞外出現(xiàn)淀粉樣肽Aylid1-40聚攏形成的老年斑，皮層海馬內(nèi)膽堿能與膽堿能受體神經(jīng)元喪失和神經(jīng)生長因子NGF及其受體酪氨酸激酶原癌基因tyrsinekinaseprt-n-geneA,TrkA表達淘汰等2。因此，本試

5、驗使用穹隆-海馬傘堵截和雙側(cè)卵巢切除模擬AD模子，不雅察AD模子大鼠腦內(nèi)的病理生理改變。皆在探究AD時大腦皮層區(qū)，海馬A1區(qū)、杏仁復(fù)合體區(qū)和基底前腦eynert核區(qū)等部位trkA和A1-40表達的改變與AD發(fā)病機制的干系，從而為臨床AD的防治方法和治療藥物的研究與開拓提供理論基矗本文對AD模子大鼠腦內(nèi)差異部位trkA和A1-40的變革舉行了不雅察。現(xiàn)陳訴如下。1質(zhì)料與要領(lǐng)1.1動物與分組取康健雌性istar5月齡大鼠，體重210250g，由青島市藥物試驗研究中央提供。通例豢養(yǎng)，自由飲水、取食，豢養(yǎng)的環(huán)境溫度22擺布。隨機分成4組：1比較組；2穹隆-海馬傘堵截組；3雙側(cè)卵巢切除組；4穹隆-海馬傘

6、堵截加雙側(cè)卵巢切除組；每組5只。1.2動物疾病模子制作1.3腦構(gòu)造病例不雅察將模子大鼠以10%的水合氯醛腹腔舉行麻醉后，開胸，舉行心臟灌洗，即以生理鹽水250l，快速沖洗2in。沖凈血液后，以4%的多聚甲醛灌注結(jié)實510in后，斷頭取腦。先鋸開顱蓋骨，剪開硬腦膜，取下的構(gòu)造塊放入4%的多聚甲醛后結(jié)實1.52h，通例脫水，二甲苯透明，然后舉行白臘包埋，一連冠狀切片，用于免疫組化不雅察。15定量闡發(fā)記數(shù)和統(tǒng)計學(xué)處置懲罰參考Paxins和atsn編寫的大鼠腦圖譜5，lypus光學(xué)顯微鏡下1040倍不雅察海馬A1區(qū)、皮質(zhì)區(qū)、杏仁復(fù)合體區(qū)、基地前腦eynet核等部位A1-40和trKA陽性細胞的數(shù)量，用

7、xs表現(xiàn)，統(tǒng)計學(xué)處置懲罰接納t查驗。2效果2.1A1-40在各不雅察組表達闡發(fā)假手術(shù)組大腦各不雅察區(qū)有少量的A1-40表達，與假手術(shù)組比力，模子組大鼠海馬A1區(qū)，皮質(zhì)區(qū)，杏仁復(fù)合體區(qū)A1-40陽性細胞的數(shù)量均明顯增多P0.01。見表1、表2。表1A1-40在各不雅察組表達闡發(fā)表2各模子組與比較組均數(shù)比力方差闡發(fā)效果2.2將去勢加雙切組、雙切組和去勢組舉行兩兩比力效果創(chuàng)造去勢加雙切組trkA表達的淘汰比單獨去勢組和雙切組明顯，差異有統(tǒng)計學(xué)意義P0.01見表3、表4，因此穹隆-海馬傘堵截，膽堿能神經(jīng)投射停頓，加雙側(cè)卵巢切除后，大鼠體內(nèi)雌激素程度落落對trkA表達損傷較單獨穹隆-海馬傘和卵巢切除更嚴

8、峻。表3TrKA在各不雅察部位的表達表4各模子組與比較組均數(shù)比力方差闡發(fā)效果3討論3.1膽堿能神經(jīng)損傷后trkA和A1-40表達的改變膽堿能神經(jīng)元損傷后膽堿能神經(jīng)元活性落落，大概通過NGF途徑使A1-40的表達增長，正常環(huán)境下，P75和trkA配合存在于膽堿能體系內(nèi)，通過與NGF作用而發(fā)揮神謀劃養(yǎng)作用，當(dāng)膽堿能神經(jīng)元活性落落，或產(chǎn)生蛻變和壞死，造成神經(jīng)元的喪失，通過兩條途徑造成A1-40的沉積，其一大概是由于膽堿能神經(jīng)元喪失，存在于膽堿能神經(jīng)體系的trkA淘汰，膽堿能神經(jīng)元對NGF的敏感性落落，毒性A1-40沉積7，另一條途徑大概是由于膽堿能神經(jīng)元活性落落，trkA表達淘汰，而P75的表達相對

9、增多，NGF與P75結(jié)合，促進APP的天生，A1-40的沉積增多。本文研究效果表現(xiàn)，在穹隆-海馬傘堵截大鼠腦內(nèi)海馬A1區(qū)、皮質(zhì)區(qū)、杏仁復(fù)合體區(qū)A1-40陽性細胞的數(shù)量明顯增多，說明膽堿能神經(jīng)的失活，不但導(dǎo)致乙酰膽堿的淘汰，同時引起A1-40陽性物質(zhì)大量沉積。3.2雌激素對trkA和A1-40表達的影響。因此在本實行中，卵巢切除大鼠體內(nèi)不雅察到trkARNA表達顯著淘汰，進一步證明了大概是由于恒久的雌激素缺乏，低落了膽堿能神經(jīng)元外源性NGF的反響性，引起基底前腦的膽堿能神經(jīng)元成效落落和存活淘汰。綜上所述，實行效果表現(xiàn)，AD模子組大鼠腦內(nèi)層區(qū)、海馬A1區(qū)、杏仁復(fù)合體區(qū)和基底前腦eynert核區(qū)A1-40的表達增多，而