中藥制劑理化鑒別方法

1、關(guān)于中藥制劑理化鑒別的方法第一張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 必備知識(shí)一、理化鑒別的意義 中藥制劑的理化鑒別是利用其藥味(原料藥)中的某種或某類指標(biāo)性成分的理化性質(zhì)，通過(guò)化學(xué)分析方法和儀器分析方法，檢測(cè)有關(guān)成分在制劑中是否存在，進(jìn)而對(duì)所含藥味與處方的一致性做出判斷，達(dá)到鑒定藥品真?zhèn)沃康摹?藥品真實(shí)性的檢定是藥品質(zhì)量控制的重要內(nèi)容，是評(píng)價(jià)藥品質(zhì)量的重要依據(jù)。如果藥品缺乏真實(shí)性，則可判定為不合格藥品，并以假藥論處。第二張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月二、理化鑒別的特點(diǎn) 理化鑒別是以制劑藥味中的指標(biāo)性成分（主要為有效成分或特征性成分）為檢測(cè)對(duì)象，故可以更加客觀深刻地評(píng)價(jià)

2、藥品的真實(shí)性。對(duì)于液體制劑或其它不含原料藥粉的制劑，理化鑒別則顯得為重要。 第三張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月三、理化鑒別的方法 目前中國(guó)藥典收載的理化鑒別方法有：一般化學(xué)鑒別法、微量升華法、熒光鑒別法、分光光度法、薄層色譜法、氣相色譜法和高效液相色譜法等。 其中色譜法尤其是薄層色譜法得到廣泛的應(yīng)用，這主要是由于色譜法具有分離分析雙重功能，從而大大提高了鑒別工作的靈敏度和專屬性，并成為今后中藥制劑鑒別的發(fā)展方向。 第四張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 中國(guó)藥典（2005）新增中成藥（116種）鑒別方法鑒別方法 應(yīng)用品種說(shuō) 明薄層色譜114高效液相色譜4 氣相色譜3主要鑒別

3、揮發(fā)性成分分光光度法0一般化學(xué)反應(yīng)法2熒光鑒別法0微量升華法0顯微鑒別法29適用于含藥粉的劑型第五張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第二節(jié) 一般化學(xué)反應(yīng)法 （ General Chemical Reaction）一、原理 一般化學(xué)反應(yīng)法是利用檢測(cè)試劑與制劑中的指標(biāo)性成分發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，根據(jù)所產(chǎn)生的顏色、沉淀或氣體等現(xiàn)象，來(lái)判斷某些成分或某些藥味的有無(wú)。由此可見，所謂一般化學(xué)反應(yīng)法即通常所說(shuō)的顯色反應(yīng)和沉淀反應(yīng)。第六張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月二特點(diǎn) 1.一般化學(xué)反應(yīng)法具有操作簡(jiǎn)便，適用性較強(qiáng)等特點(diǎn)。 2.其否定功能往往強(qiáng)于肯定功能,專屬性較差。 3.易發(fā)生假陽(yáng)性或假陰性反應(yīng)

4、第七張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月假陽(yáng)性或假陰性反應(yīng)克服方法如下：對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理，除去干擾性成分，富集被檢成分。選用專屬性較強(qiáng)的檢測(cè)試劑。必要時(shí)做陽(yáng)性或陰性對(duì)照試驗(yàn)加以驗(yàn)證，保證其專屬性和靈敏度。第八張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 三、常用的一般化學(xué)反應(yīng) 主要用于制劑中生物堿、黃酮類、蒽醌類、皂苷、香豆素、萜類以及各種礦物類成分的鑒別 （一）生物堿 1. 碘化鉍鉀反應(yīng) 產(chǎn)生紅棕色沉淀 2. 碘化汞鉀反應(yīng) 產(chǎn)生類白色沉淀 3. 硅鎢酸反應(yīng) 產(chǎn)生白色沉淀 4. 苦味酸反應(yīng) 產(chǎn)生黃色結(jié)晶性沉淀 需在酸性條件下進(jìn)行。注意事先排除其它成分的干擾。少數(shù)生物堿不與上述通用沉淀試劑反

5、應(yīng)，而具有專屬性較強(qiáng)的其它反應(yīng)。 第九張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（二）黃酮類化合物 最多使用的檢識(shí)反應(yīng)為鹽酸鎂粉反應(yīng)，呈紫紅色。大山楂丸（山楂）、抗骨增生丸（淫羊藿）、參茸保胎丸（黃芩）等。此外，黃芩提取物采用二氯氧鋯-鹽酸顯色反應(yīng)進(jìn)行檢識(shí)。（三）蒽醌類化合物 主要應(yīng)用堿液反應(yīng)（Borntrager反應(yīng)），陽(yáng)性反應(yīng)呈紅色，加酸紅色褪去呈黃色。例如大黃流浸膏。第十張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（四）皂苷 常用的定性鑒別反應(yīng)有： 泡沫反應(yīng) 樣品水溶液振搖后，產(chǎn)生持久性泡沫。 醋酐濃硫酸反應(yīng) 甾體皂苷呈現(xiàn)污綠色，三萜皂苷呈現(xiàn)紅、紅紫色。 濃硫酸反應(yīng) 呈現(xiàn)紅、紅紫色。 三氯

6、化銻或五氯化銻反應(yīng) 氯仿液呈紫蘭色。 氯仿濃硫酸反應(yīng) 氯仿層出現(xiàn)紅色或蘭色，并具綠色熒光。 例：地奧心血康膠囊（黃山藥和穿山龍薯蕷的提取物）、養(yǎng)心定悸膏（甘草、紅參、麥冬）。 第十一張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（五）香豆素、內(nèi)酯類和酚類常用的檢識(shí)反應(yīng)有： 氯亞氨基-2，6-二氯醌-四硼酸鈉反應(yīng)（Gibbs反應(yīng)），呈現(xiàn)藍(lán)色。 異羥肟酸鐵反應(yīng) 呈紅色。 應(yīng)用品種有：養(yǎng)陰清肺膏（牡丹皮）、前列舒丸（牡丹皮）等。第十二張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（六）揮發(fā)性成分 主要使用香草醛濃硫酸反應(yīng)檢識(shí)此類成分，正反應(yīng)呈紅、紅紫色。應(yīng)用品種主要有：萬(wàn)應(yīng)錠（冰片）、牛黃解毒片（冰片）、養(yǎng)

7、心定悸膏（桂枝、生姜）等。第十三張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（七）礦物藥朱砂、石膏、雄黃等為中成藥中常見的礦藥。 1.朱砂（主含HgS） 主要采用銅片反應(yīng)。 HgS+2HCl+CuCuCl2+Hg（白 ）+H2S 天王補(bǔ)心丹等中成藥中朱砂的鑒定。 2.石膏、牡蠣、海螵蛸等 此類藥物均富含鈣鹽，主要采用草酸銨反應(yīng) 。CaSO4+(NH4)2C2O4CaC2O4（白）+(NH4)2SO4 CaC2O4溶于鹽酸，難溶于醋酸。CaC2O4+2HClCaCl2+H2C2O4 止咳桔紅口服液（石膏）、安胃片（海螵蛸）、龍牡壯骨顆粒（牡蠣、龍骨、乳酸鈣、葡萄糖酸鈣等） 第十四張，PPT共七十七

8、頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 3.雄黃（主含As2S2） （1）氯化鋇沉淀法（檢出硫） As2S2+KClO3+4HNO3 2K3AsO3+H2SO4+Cl2+4NO H2SO4+BaCl2 BaSO4（白） 牙痛一粒丸 （2）硫化氫反應(yīng)（檢出砷） 2As2S2+7O2 2As2O3+4SO2 As2O3+3H2O 2H3AsO3 2H3AsO3+3H2S As2S3(黃)+6H2O As2S3在鹽酸中析出黃色沉淀，并溶于碳酸銨中 4As2S3+12(NH4)2CO3 4(NH4)3AsO3+4(NH4)3AsS3+12CO2 小兒驚風(fēng)散等。 o第十五張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（八

9、）動(dòng)物藥 常含有較多的蛋白質(zhì)或氨基酸、故鑒別此類藥物，常使用茚三酮反應(yīng)，正反應(yīng)呈紅紫色。 例如：龜齡集（鹿茸、海馬、等）、參茸保胎丸（阿膠、鹿茸）等。第十六張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月四、操作方法（1）供試液的制備（見前述）（2）操作方式 大多為試管反應(yīng) ，或在檢測(cè)試紙上、或在蒸發(fā)皿（坩堝）中進(jìn)行反應(yīng) 第十七張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月五、結(jié)果判斷 將反應(yīng)現(xiàn)象或結(jié)果與藥品標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照，若一致則符合規(guī)定。若不一致則判定為不符合規(guī)定。第十八張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月六、注意事項(xiàng) 試管反應(yīng)一般使用210cm試管，取供試液12ml。加入檢測(cè)試液時(shí)，試管應(yīng)稍傾斜，

10、試液應(yīng)沿試管內(nèi)壁逐滴加入，滴管下口不得觸及內(nèi)壁。 加入反應(yīng)試液后一般需振搖試管，使之與供試液混勻。振搖時(shí)應(yīng)緩緩搖擺振搖，不得上下振搖，手指不允許堵塞試管口，若需層反應(yīng)，則不得振搖試管。 一般需在白色背景下觀察反應(yīng)所產(chǎn)生的顏色或沉淀，若沉淀為白色或類白色則需在黑色背景下觀察。 如果反應(yīng)需加熱，一般在水浴中加熱。用試管夾夾持試管，內(nèi)容物不得超過(guò)容積的2/3，試管應(yīng)傾斜45度，試管口不得閉塞，并不得朝向人。加熱有機(jī)溶液絕對(duì)不允許使用明火熱源。 如果反應(yīng)需無(wú)水條件，必須保持試管、蒸發(fā)皿等容器的干燥，例如醋酐濃硫酸反應(yīng)。第十九張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月七、應(yīng)用實(shí)例1.千柏鼻炎片2.小兒清

11、熱止咳口服液3.茴香橘核丸4.地奧心血康膠囊5.養(yǎng)陰清肺膏6.安胃片7.天王補(bǔ)心丹8.牙痛一粒丸9.中風(fēng)回春片第二十張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第三節(jié) 升華鑒別法（Sublimation）一、原理 本法是利用某些成分的升華性，在一定溫度下將其從制劑中升華分離出來(lái)，并以升華物所具有的某些理化性質(zhì)作為制劑鑒別的依據(jù)。第二十一張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月二、特點(diǎn) 升華法具有簡(jiǎn)便、實(shí)用等特點(diǎn)，由于升華性僅為少數(shù)中藥化學(xué)成分所具有且升華物純度較高，故該法專屬性亦較好。第二十二張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月三、操作方法 大多采用微量升華法，少數(shù)使用坩堝法或蒸發(fā)皿法，

12、在此，僅介紹微量升華 。第二十三張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月六味地黃丸中冰片升華物六味地黃丸中冰片升華物顯微鏡下觀六味地黃丸中冰片升華物香草醛濃硫酸顯色第二十四張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 四、注意事項(xiàng) 升華時(shí)應(yīng)緩緩加熱，溫度過(guò)高，易使藥粉焦化，在載玻片上產(chǎn)生焦油狀物，影響對(duì)升華物的觀察或檢識(shí)。溫度的控制可通過(guò)調(diào)整酒精燈火焰與石棉板的間距來(lái)實(shí)現(xiàn)。 樣品粉末用量一般約0.5g，過(guò)少不易產(chǎn)生足夠量的升華物。 可在載玻片上滴加少量水降溫，促使升華物凝集析出。 無(wú)金屬片，可用載玻片代替。 第二十五張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月五、應(yīng)用實(shí)例（P58） (一) 萬(wàn)應(yīng)

13、錠的鑒別（二）小兒驚風(fēng)散的鑒別（反應(yīng)機(jī)理）（三）明目地黃丸的鑒別第二十六張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第四節(jié) 熒光鑒別法（Fluorescence）一、原理 熒光鑒別法是利用制劑中某些成分，如黃酮類、蒽醌類、香豆素類等在可見光或紫外光照射下能產(chǎn)生一定顏色熒光的性質(zhì)，對(duì)中藥制劑進(jìn)行鑒別。有的成分本身不具熒光性，但加酸、堿處理后，或經(jīng)其它化學(xué)方法處理后也可產(chǎn)生熒光供鑒別用。第二十七張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月二特點(diǎn) 本法操作簡(jiǎn)便、靈敏，具有一定的專屬性。例如大黃和土大黃 ，前者顯棕色至棕紅色熒光，而后者顯亮藍(lán)色熒光，很容易區(qū)分。第二十八張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022

14、年6月三、操作方法 取中成藥的提取液點(diǎn)加于濾紙上或加入蒸發(fā)皿中，置紫外光燈（365nm）下約10cm處觀察所產(chǎn)生的熒光。必要時(shí)可在供試品上加酸、堿或其它試劑，再觀察熒光及其變化。第二十九張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月四、注意事項(xiàng) 熒光強(qiáng)度較弱，故一般需在暗室中觀察熒光。 供試液一般用毛細(xì)管吸取，少量多次點(diǎn)加在濾紙上，使斑點(diǎn)集中且具有一定濃度。 紫外光對(duì)人的眼睛和皮膚有損傷，操作者應(yīng)避免與紫外光較長(zhǎng)時(shí)間接觸。第三十張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月五、應(yīng)用實(shí)例（P59）（一）元胡止痛片（二）五味麝香丸（三）熱炎寧顆粒第三十一張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第五節(jié) 薄

15、層色譜鑒別法（Thin Layer Chromatography TLC） 一、原理 基于相同物質(zhì)在同一的色譜條件下，表現(xiàn)出相同的色譜行為這一基本規(guī)律，在同一塊薄層板上點(diǎn)加供試品和對(duì)照物，在相同條件下展開，顯色檢出色譜斑點(diǎn)后，將所得供試品與對(duì)照物的色譜圖進(jìn)行對(duì)比分析，從而對(duì)藥品進(jìn)行定性鑒別。第三十二張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月二、特點(diǎn) （一）簡(jiǎn)便、快速、易普及、具有分離和分析雙重功能，且采用共薄層對(duì)照分析法，故專屬性亦較強(qiáng)。 （二）系統(tǒng)適用性試驗(yàn)。(05版藥典新增) 1.檢測(cè)靈敏度 2.分離度 3.重復(fù)性第三十三張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月1.檢測(cè)靈敏度 主要用于限

16、量檢查.采用供試品溶液和對(duì)照品溶液與稀釋若干倍（10倍）的對(duì)照品溶液在規(guī)定的色譜條件下，于同一塊薄層板上點(diǎn)樣、展開、檢視，后者應(yīng)顯示清晰的斑點(diǎn)。第三十四張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2.分離度 用于鑒別時(shí)，對(duì)照品溶液與供試品溶液中相應(yīng)的主斑點(diǎn)，應(yīng)顯示兩個(gè)清晰分離的斑點(diǎn)。用于限量檢查和含量測(cè)定時(shí)，要求定量峰與相鄰峰之間有較好的分離度，除另有規(guī)定外，分離度應(yīng)大于1.0。第三十五張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 分離度（R）的計(jì)算公式為： R=2(d2-d1)/W1+W2 式中 d1為相鄰兩峰中后一峰與原點(diǎn)的距離； d2為相鄰兩峰中前一峰與原點(diǎn)的距離； W1 及W2為相鄰兩峰各

17、自的峰寬；ABW1W2d1d2第三十六張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3.重復(fù)性 主要用于含量測(cè)定.即同一供試品溶液在同一塊薄層板上平行點(diǎn)樣的待測(cè)成分的峰面積測(cè)量值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)應(yīng)不大于3.0%；需顯色后測(cè)量的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于5.0%。第三十七張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（三）對(duì)照物的設(shè)置 對(duì)照物分為對(duì)照品（主要為有效成分和特征性成分的單體）、對(duì)照藥材和對(duì)照提取物三種。 對(duì)照物的設(shè)置有四種方式： 設(shè)置一種或數(shù)種對(duì)照品 設(shè)置對(duì)照提取物 設(shè)置一種或數(shù)種對(duì)照藥材 同時(shí)設(shè)置對(duì)照品和對(duì)照藥材(“雙對(duì)照”)，它要求樣品色譜圖中的主斑點(diǎn)應(yīng)與對(duì)照品和對(duì)照藥材色譜圖中的有關(guān)

18、斑點(diǎn)相一致，從而大大提高了薄層色譜鑒別法的專屬性和整體性，可有效地檢出藥品是否使用了假冒藥材.第三十八張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（四）TLC已廣泛用于中藥材及其制劑的檢驗(yàn)，成為中藥鑒別的重要方法和鮮明特色。（五）中國(guó)藥典大多數(shù)品種采用硅膠薄層色譜法，少數(shù)使用聚酰胺薄層色譜法和氧化鋁色譜法。 薄層色譜法還可用于藥品的雜質(zhì)檢查和含量測(cè)定。 第三十九張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月三、影響薄層色譜鑒別的主要因素 影響因素較多，例如供試液的凈化程度，吸附劑的性能和薄層板的質(zhì)量、點(diǎn)樣（原點(diǎn)）的質(zhì)量、展開劑的組成和飽和情況、對(duì)照品的純度、展開的距離、相對(duì)濕度和溫度等。重點(diǎn)介紹展開

19、劑、相對(duì)濕度、溫度和pH值的影響。第四十張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月四、儀器與材料（一）薄層板 1.市售薄層板（亦稱預(yù)制薄層板） 除另有規(guī)定外，一般要求使用市售薄層板。市售薄層板分普通薄層板和高效薄層板兩種。常用的有硅膠薄層板、硅膠GF254薄層板、聚酰胺薄層板、氧化鋁薄層板等。第四十一張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2.自制薄層板 在保證色譜質(zhì)量的前提下，如需對(duì)薄層板進(jìn)行處理和化學(xué)改性，以適應(yīng)供試品分離的要求時(shí)，也可用實(shí)驗(yàn)室自制的薄層板，除另有規(guī)定外，玻板可用10cm10cm、10cm15cm、20cm10cm、20cm20cm不同規(guī)格的，最常用的固定相有硅膠G、硅膠

20、GF254、硅膠H、硅膠HF254等。其顆粒大小，一般要求直徑為1040m。薄層板采用濕法制備，即使用涂布器將制好的固定相糊均勻涂布于玻板上。所用涂布器應(yīng)能使固定相在玻板上涂成一層符合厚度要求的均勻薄層。涂布器有手動(dòng)、半自動(dòng)、全自動(dòng)等類型。第四十二張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月不同規(guī)格的薄層板鋪制薄層板第四十三張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（二）點(diǎn)樣器材為了增強(qiáng)藥品定性鑒別的可比性，中國(guó)藥典規(guī)定采用定量點(diǎn)樣。最常用的是微升毛細(xì)管（定容毛細(xì)管），為了提高點(diǎn)樣效率和質(zhì)量，還可用點(diǎn)樣輔助設(shè)備，如點(diǎn)樣支架、半自動(dòng)或自動(dòng)點(diǎn)樣器。第四十四張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（

21、三）展開容器 應(yīng)使用專用的展開缸，展開缸有水平式及直立式兩種類型。上行展開一般使用直立展開缸，它又分為平底式和雙槽式，雙槽展開缸具有節(jié)省溶劑、便于預(yù)平衡、可控制展開箱內(nèi)的濕度等優(yōu)點(diǎn)。 展開缸蓋子應(yīng)能密閉，體積應(yīng)與薄層板大小相適應(yīng)。不能用生物標(biāo)本缸等其它玻璃器皿作為展開缸，否則影響展開質(zhì)量。第四十五張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月全自動(dòng)點(diǎn)樣儀微升毛細(xì)管雙槽展開缸第四十六張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（四）顯色（檢視）裝置展開后的薄層板，一般需采用相應(yīng)的顯色（檢視）方法使板上的被檢成分斑點(diǎn)顯色。噴霧顯色應(yīng)使用玻璃噴霧瓶或?qū)Ｓ脟婌F器，要求用壓縮氣體使顯色劑呈均勻霧狀噴出；浸漬顯

22、色可用專用玻璃器皿或適宜的展開缸做為浸漬槽；蒸氣熏蒸顯色可在雙槽展開缸或大小適宜的干燥器中進(jìn)行；熒光檢視裝置為裝有可見光、254nm及365nm紫外光源和相應(yīng)濾光片的暗箱，可附加攝像設(shè)備供拍照?qǐng)D像用，暗箱內(nèi)光源應(yīng)有足夠的光照度。第四十七張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月噴霧顯色熒光顯色第四十八張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 五、操作方法 一般操作步驟為： 薄層板制備（制板）點(diǎn)樣展開顯色與檢視（一）薄層板制備 1.市售薄層板 臨用前一般應(yīng)在活化分鐘。聚酰胺薄膜不需活化。如在貯放期間被空氣中雜質(zhì)污染，使用前可用三氯甲烷、甲醇或二者的混合溶劑在展開缸中上行展開預(yù)洗，110活化，放

23、干燥器中備用。第四十九張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 2.自制薄層板 除另有規(guī)定外，將1份固定相和3份水（或0.20.5羧甲基纖維素鈉水溶液）在研缽中向同一方向研磨混合，去除表面的氣泡后，倒入涂布器中，在玻璃板上平穩(wěn)地移動(dòng)涂布器進(jìn)行涂布，取下涂好薄層的玻璃板，置水平臺(tái)上室溫下晾干后，在 烘30分鐘活化，立即置干燥器中備用。薄層板一般要求新鮮制備，當(dāng)天使用。使用前應(yīng)在反射光及透射光下檢查其質(zhì)量，若板面不均勻、不平整或有麻點(diǎn)、有氣泡、有破損及污染等情況，應(yīng)棄去不用。第五十張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（二）點(diǎn)樣 1.供試品溶液的制備 主要采用浸漬法、回流以及超聲等方法提取，

24、液液萃取法或固液萃取法進(jìn)行精制。有的成分在藥品中是以苷或酯等結(jié)合態(tài)存在，檢驗(yàn)前需水解成游離態(tài)再與相應(yīng)的對(duì)照品一同展開分離、鑒別。 如萬(wàn)應(yīng)錠中熊膽的鑒別、定坤丹中人參和三七的鑒別和牛黃上清丸中大黃的鑒別。第五十一張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2.原點(diǎn)的點(diǎn)加 除另有規(guī)定外，在干燥潔凈的環(huán)境，用專用毛細(xì)管或半自動(dòng)、自動(dòng)點(diǎn)樣器械點(diǎn)樣于薄層板上形成原點(diǎn)。原點(diǎn)一般為圓點(diǎn)狀或窄細(xì)的條帶狀。原點(diǎn)基線距板底邊1015mm，高效板原點(diǎn)基線離底邊810mm。圓點(diǎn)狀原點(diǎn)直徑一般不大于3mm；條帶狀的寬度一般為510mm。高效板條帶寬度為48mm，原點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況以不影響檢出為宜，一般不少于8mm

25、，高效板樣品間隔不少于5mm。毛細(xì)管接觸點(diǎn)樣時(shí)應(yīng)少量多次點(diǎn)加，才能保證原點(diǎn)小而圓。還需注意勿損傷薄層表面，點(diǎn)加條帶原點(diǎn)時(shí)應(yīng)注意條帶的均勻性，用噴霧狀條帶點(diǎn)樣器，可保證點(diǎn)樣的質(zhì)量。第五十二張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月8mm原點(diǎn)起始線5mm815cm11.5cm溶劑前沿展開劑液面第五十三張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（三）展開 點(diǎn)樣后的薄層板放入加有展開劑的展開缸中，密閉，一般采用上行一次展開。薄層板浸入展開劑的深度以液面距原點(diǎn)5mm為宜，溶劑前沿達(dá)到規(guī)定的展距后，取出薄層板，晾干，待檢測(cè)。一般上行展開815cm，高效板上行展開58cm。必要時(shí)可進(jìn)行二次展開或雙向展開。

26、例如，益氣養(yǎng)血口服液中陳皮的薄層鑒別即采用二次展開，先以乙酸乙酯甲醇水吡啶（10017135）展至3cm，取出晾干；再以甲苯乙酸乙酯甲醇水（201011上層）展至8cm，取出晾干。第五十四張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 展開前一般需用展開劑對(duì)展開缸進(jìn)行預(yù)平衡，即使缸內(nèi)展開劑氣液兩相達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡，該過(guò)程亦稱“飽和”。為此可在展開缸內(nèi)加入適量展開劑，密閉，保持1530分鐘。預(yù)平衡后，迅速將薄層板放入展開缸中，立即密閉，展開。若薄層板需同時(shí)預(yù)平衡，可將點(diǎn)樣后的薄層板放入雙槽展開缸的一側(cè)槽中，另一側(cè)槽中加入展開劑，如上法預(yù)平衡后，再將展開劑移入放有薄層板的槽中，展開。展開劑要求新鮮配制，不

27、要多次反復(fù)使用。展開劑配制后若分層，則應(yīng)按要求放置分層后取需要的一相（上層或下層）使用。 第五十五張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 （四）顯色與檢視 1.顏色較深的成分可直接在日光下檢視其斑點(diǎn)。 2.無(wú)色或淺色的成分多用噴霧法或浸漬法以適宜的顯色劑顯色，或再加熱使之顯色，在日光下檢視。 3.有熒光的物質(zhì)或遇某些試劑可激發(fā)熒光的物質(zhì)可在紫外燈（365nm）下觀察熒光色譜。 4.有的成分可用試劑的蒸氣熏蒸（如碘蒸氣、氨蒸氣）顯色。 5.某些無(wú)色有紫外吸收且不產(chǎn)生熒光的成分可用熒光淬滅法顯色。即在含有熒光劑的硅膠板（如硅膠GF254板），在紫外光燈（254nm）下觀察板面上該成分形成的熒光

28、淬滅色譜。第五十六張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月GF254薄層板GF254薄層板在熒光燈下熒光淬滅法的GF254薄層板第五十七張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月六、記錄薄層色譜圖象可采用攝像設(shè)備拍照，以光學(xué)照片或電子圖象的形式保存。也可以用掃描儀記錄相應(yīng)的色譜圖。薄層色譜數(shù)碼相機(jī)成像系統(tǒng)第五十八張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月七、結(jié)果判斷 供試品色譜中，在與對(duì)照品、對(duì)照藥材或?qū)φ仗崛∥锷V的相應(yīng)的位置上，顯相同顏色或熒光的斑點(diǎn)，則判斷為符合規(guī)定。第五十九張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 八、應(yīng)用實(shí)例（一）六味地黃丸中牡丹皮的鑒別1.丹皮酚；25.六味地黃

29、丸第六十張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月112.一捻金；13.人參二醇+人參三醇（二）一捻金中人參的鑒別第六十一張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（三）龜齡集中人參的鑒別 14.龜齡集；5.人參對(duì)照藥材；6.人參皂苷Rb1(S1)、Re(S2)、Rg1(S3)第六十二張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（四）萬(wàn)氏牛黃清心丸中黃連的鑒別 15.萬(wàn)氏牛黃清心丸； 6.黃連對(duì)照藥材；7.小檗堿 第六十三張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（五）華佗再造丸薄層色譜圖（噴顯色劑前的）（噴顯色劑后的）1.12.吳茱萸對(duì)照藥材； 2.11.川芎對(duì)照藥材； 310.華佗再造丸第六

30、十四張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第五節(jié) 紫外-可見光譜鑒別法(Ultraviolet and Visible Spectroscopy) 一、原理 某些中藥或中成藥經(jīng)適當(dāng)處理后，所得紫外吸收光譜是由其各組分的特征吸收疊加而成的。若將中藥制劑作為一個(gè)特定的整體，在一定測(cè)試條件下，只要各藥味及其成分的組成與含量相對(duì)穩(wěn)定，則其紫外吸收光譜具有一定的特征性和重現(xiàn)性，可以用于定性鑒別。 兩組分的加和紫外吸收光譜第六十五張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月二、特點(diǎn)分光光度鑒別法簡(jiǎn)便、靈敏、易普及。但由于紫外光譜分辨率較低，圖譜簡(jiǎn)單，某些不同的樣品可能給出極其相似的光譜圖，使其在實(shí)際工作

31、中受到一定的限制。如果對(duì)樣品進(jìn)行前處理，除去干擾成分，則可有效地提高該法的專屬性。中國(guó)藥典僅有少數(shù)中成藥品種收載了分光光度鑒別法，例如，木香檳榔丸等。中國(guó)藥典規(guī)定以最大吸收波長(zhǎng)（max）做為鑒別參數(shù)。樣品吸收峰波長(zhǎng)應(yīng)在該品種項(xiàng)下 規(guī)定的波長(zhǎng)2nm以內(nèi)。復(fù)方丹參片紫外譜線組圖第六十六張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月三、操作方法（P77 自學(xué)）四、注意事項(xiàng)（P77 自學(xué)）五、結(jié)果判斷 將供試品最大吸收波長(zhǎng)和藥品標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定進(jìn)行比較，二者如果一致，則判定為符合規(guī)定。第六十七張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月六、應(yīng)用實(shí)例 木香檳榔丸 處方：木香、檳榔、枳殼、陳皮、青皮（醋炒）、香附（醋

32、制 ）、三棱（醋制）、莪術(shù)（醋制）取本品粉末4g，置蒸餾瓶中，加水10ml，使供試品濕潤(rùn)后，水蒸汽蒸餾，收集餾液約100ml，照紫外分光光度法（中國(guó)藥典附錄V A）測(cè)定，在253nm波長(zhǎng)處有最大吸收。（檢出揮發(fā)性成分）第六十八張，PPT共七十七頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 第六節(jié) 氣相色譜鑒別法(Gas Chromatography GC) 一、原理 在一定的色譜條件下，相同的物質(zhì)應(yīng)具有相同的色譜特性（分配系數(shù)）和色譜行為（保留值）。因此，在同一色譜條件下，將供試品溶液和對(duì)照品溶液分別注入氣相色譜儀，對(duì)二者的氣相色譜圖進(jìn)行比對(duì)，根據(jù)供試品是否給出與對(duì)照品保留時(shí)間相同的色譜峰，從而對(duì)樣品作出定性分析。這種方