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文檔簡介
1、第13核酸代謝主要內(nèi)容核酸的合成代謝 核苷酸的生物合成,核酸的生物合成核酸的分解代謝核酸的分解,核苷酸的降解代謝遺傳工程 DNA的限制酶圖譜,基因載體, DNA重組技術(shù)第一節(jié) 核酸的合成代謝核苷酸的生物合成核酸的生物合成一、核苷酸的生物合成(一)嘌呤核苷酸的生物合成(二) 嘧啶核苷酸的生物合成(三)脫氧核糖核苷酸的合成(一)嘌呤核苷酸的生物合成 1、反應(yīng)式2、嘌呤中原子的來源 3、嘌呤核苷酸合成過程(AMP, GMP) (二) 嘧啶核苷酸的生物合成 1、嘧啶環(huán)的各個原子的來源2、嘧啶核苷酸的合成途徑(UMP)(三) 脫氧核糖核苷酸的合成二、核酸的生物合成中心法則 (一) DNA的生物合成1、D
2、NA復(fù)制 基本概念 半保留復(fù)制 復(fù)制叉 岡崎片段DNA合成酶系復(fù) 制 叉DAN合成過程2、DNA的逆向轉(zhuǎn)錄 (二) RNA的生物合成 1、轉(zhuǎn)錄 2、RNA的復(fù)制有些生物中,核糖核酸還可以是遺傳信息的基本攜帶者,如某些RNA病毒侵入寄主細胞后,能以RNA作模板,在有四種核苷三磷酸和鎂離子存在時合成出與模板性質(zhì)相同的RNA。 第二節(jié) 核酸的分解代謝核酸的分解核苷酸的降解代謝一、核酸的分解分解核酸的酶1、核酸外切酶:核酸外切酶作用于核酸鏈的末端,逐個水解下核苷酸。 2、核酸內(nèi)切酶:核酸內(nèi)切酶催化水解多核苷酸鏈內(nèi)部的磷酸二酯鍵。二、核苷酸的降解代謝1、核苷酸的降解 2、嘌呤的降解3、嘧啶的降解尿素和乙
3、醛酸尿囊酸 尿囊素和CO2尿酸黃嘌呤嘌呤NH3、CO2和-丙氨酸-脲基丙酸 二氫胸腺嘧啶二氫尿嘧啶胞嘧啶尿嘧啶胸腺嘧啶-脲基異丁酸NH3,CO2和-氨基異丁酸第三節(jié) 遺傳工程基本概念DNA的限制酶圖譜基因載體DNA重組技術(shù)一、基本概念遺傳工程:也叫基因工程,是指將不同的DNA片段(如基因等)按人們的設(shè)計方案定向地連接起來,并在特定的受體細胞中與載體一起得到復(fù)制與表達,使受體細胞獲得新的遺傳特性?;蚬こ痰挠猛?. 利用DNA重組技術(shù)大量生產(chǎn)一些在正常細胞代謝中產(chǎn)量很低的物質(zhì),如酶類;2. 定向地改造生物基因組結(jié)構(gòu),使其某些具有經(jīng)濟價值的功能得以顯著提高;3. 將DNA重組技術(shù)應(yīng)用于基礎(chǔ)研究。二
4、、DNA的限制酶圖譜1、限制性內(nèi)切酶限制性內(nèi)切酶主要在細菌中產(chǎn)生,具有極高的專一性,識別雙鏈DNA上特定的位點,將兩條鏈都切斷,形成粘性末端或平末端。其生物功能在于降解外面侵入的DNA,但不降解自身細胞中的DNA,因為在自身DNA的酶切位點上經(jīng)甲基化修飾而受到保護。限制性內(nèi)切酶2、DNA的限制酶圖譜將用分子克隆法從單一克隆中擴增而制備的純化DNA,用不同的限制酶切割,進行凝膠電泳分析。對環(huán)形DNA則找出一個對該DNA只有一個切位點的酶,以此點作為參考點,根據(jù)測量凝膠電泳圖上各酶切片段的長度,就可以決定各切點的位置。將各限制酶的切點位置標(biāo)在DNA分子圖的相應(yīng)位置上,即制成DNA的限制圖譜。三、基因載體載體將外源DNA片段帶入受體細胞并在其中一起進行復(fù)制與表達的運載工具稱為載體。常用載體細菌和酵母的質(zhì)粒,噬菌體(如-噬菌體,M13)和病毒。四、DNA重組技術(shù) DNA重組技術(shù)包括三個步驟 :1. 把所需要的DNA片斷(基因)和基因載體取出,使之進行基因的體外重組; 2.
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