抗衰老藥物研究的篩選規(guī)范與臨床評(píng)價(jià)(中藥藥理與臨床)(共7頁(yè))

1、 DOI: 10. 13412 /j . cnki . zyyl . 1990. 06. 020中藥(zhngyo)藥理與臨床 1990；6( 6)抗衰老藥物研究的篩選規(guī)范與臨床(ln chun)評(píng)價(jià)本稿是在1998年12月3日全國(guó)抗衰老學(xué)術(shù)研討會(huì)廣州會(huì)議(huy)通過(guò)的送審稿基礎(chǔ)上，經(jīng)兩年的試用后修改補(bǔ)充，于1 9 9 0年5月1 8日中國(guó)藥學(xué)會(huì)老年藥學(xué)會(huì)沈陽(yáng)會(huì)議通過(guò)。一、抗衰老藥物的概念抗衰老藥物是一類以提高生命效率，改善人類體質(zhì)，并能在遺傳特性所決定的限度內(nèi)有效延長(zhǎng)機(jī)體壽限的藥物；是具有抑制、延緩岌預(yù)防機(jī)體生理袁老進(jìn)程，增強(qiáng)糾正病理性紊亂的能力，調(diào)整重要臟器功能失調(diào)，重建機(jī)體內(nèi)環(huán)境平衡，

2、作用廣泛，可促進(jìn)整體健康的藥物。 在經(jīng)典藥理學(xué)研究中沒(méi)有抗衰 老藥物的分類學(xué)地位，長(zhǎng)壽藥理學(xué)( Pha r m a e o l o n g e ri ty) 是近2 0年來(lái)在衰老生物學(xué)、衰老生物化學(xué)和分子生物學(xué)等多學(xué)科滲入到藥理學(xué)、藥物學(xué)研究中而形成的邊緣學(xué)科。由于機(jī)體的衰老是一個(gè)整體的連續(xù)過(guò)程，因此抗衰老藥物是針對(duì)機(jī)體不同程度衰老癥狀的一組藥物。它的特點(diǎn)是可以通過(guò)多層次 (整體、器官、細(xì)胞和分子水平)、多系統(tǒng)(神經(jīng)、內(nèi)分泌、免疫、心血管及呼吸等 )、多方面 (既有只奮又有抑制)和較長(zhǎng)時(shí)間的作用，以調(diào)整機(jī)體的物質(zhì)、能量代謝及組織學(xué)與功能狀態(tài)，從而達(dá)到延緩衰老的目的。 二、抗衰老藥物藥效研究方法

3、1. 基本要求1.1 抗衰老藥物能在不同水平、不同環(huán)節(jié)起調(diào)整作用尹因此需要進(jìn)行多系統(tǒng)、多層次 、 多指標(biāo)的觀察研究。 1.2 動(dòng)物種屬和品系的選擇應(yīng)符合抗衰老藥物篩選要求，動(dòng)物模型可用自然衰老和人工衰老動(dòng)物，以自然衰老為主；長(zhǎng)壽命 ( 23年) 和 ( 短壽命 ( 1數(shù)月 ) 動(dòng)物，以短壽命為主；高級(jí) (哺乳類)和低級(jí) (細(xì)胞、昆蟲等) 動(dòng)物，以低級(jí)動(dòng)物為主 。 1.3 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)有青年對(duì)照組、老年對(duì)照組和陽(yáng)性藥物（中藥或西藥）對(duì)照組 。 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)不僅應(yīng)有生理、生化等功能方面的指標(biāo)，還應(yīng)有光學(xué)顯微鏡、組織化學(xué)等形態(tài)學(xué)指標(biāo)，以更好為臨床療效提供試驗(yàn)依據(jù)。1.4在實(shí)驗(yàn)層次上既應(yīng)有共性(gngx

4、ng)實(shí)驗(yàn)或稱基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)，也應(yīng)有針對(duì)某一特定(tdng)要求的個(gè)性或稱特殊實(shí)驗(yàn)。 1. 5 給藥時(shí) 間和劑量應(yīng)根據(jù)(gnj)不同動(dòng)物而異，一般應(yīng)從中年動(dòng)物開始給藥，按高、 低二個(gè)劑量給藥，時(shí)間1或4個(gè)月 (依臨床療程長(zhǎng)短確定 )。給藥方法既可拌在飼料、飯水中，也可來(lái)用灌胃法。 2.主要藥效學(xué)實(shí)驗(yàn) 2.1 壽命實(shí)驗(yàn): 至少要完成兩種動(dòng)物的壽命實(shí)驗(yàn)，或者一種整體動(dòng)物，一種細(xì)胞 培養(yǎng)傳代實(shí)驗(yàn)。 2.2 腦功能實(shí)驗(yàn): 動(dòng)物學(xué)習(xí)記憶行為實(shí)驗(yàn)、神經(jīng)遞質(zhì)、受體和乙酞膽堿醋酶可逆性抑制作用。根據(jù)測(cè)試藥物需要也可進(jìn)行兩個(gè)以上指標(biāo)的測(cè)定 。 2.3 老化相關(guān)酶的測(cè)定: 分為與維持正常代謝有關(guān) 的酶及清除衰老產(chǎn)物的酶

5、。 前者有腦、肝組織線粒體中單胺氧化酶( M A O-B和 M A O-A )鈉-鉀 A T P 酶 ( N a- K-A T P a s e )、膽堿醋酶、墟泊酸脫氫酶等；后者有清除自由基的過(guò)氧化氫酶、超氧化物歧化酶和谷朧甘膚過(guò)氧化酶等。 2.4 體力負(fù)荷實(shí)驗(yàn)與抗應(yīng)激實(shí)驗(yàn):體力負(fù)荷實(shí)驗(yàn)是指能使動(dòng)物主動(dòng)性運(yùn)動(dòng)的一種良性實(shí)驗(yàn)，以觀察其正常運(yùn)動(dòng)能力，例如蹬車輪實(shí)驗(yàn)、目標(biāo)追逐速度時(shí)間等；抗應(yīng)激實(shí)驗(yàn)是在 劣性刺激下的生存能力實(shí)驗(yàn)，例如負(fù)重游津永實(shí)驗(yàn)、耐寒和耐缺氧實(shí)驗(yàn)等。 2.5 免疫功能實(shí)驗(yàn):測(cè)定 自然衰老或人工造成的免疫功能紊亂免疫功能低下的動(dòng)物體液免疫或細(xì)胞免疫功能，例如免疫球蛋白I g G、I

6、g A、I g M、T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化、 自然殺傷細(xì)胞 ( N K )功能、白細(xì)胞介素 I、 l ( I L- I 、l ) 等，以觀察抗衰老藥物對(duì)機(jī)體體液和細(xì)胞免疫功能的形響。 2. 6 核酸及蛋白代謝實(shí)驗(yàn):側(cè)定D N A、R N A及蛋白質(zhì)的更新率或用同位素雙2.7染色體畸變或修復(fù)實(shí)驗(yàn)用人探針觀察染色體的畸變率，或用同位素?fù)饺敕ㄓ^察藥物對(duì) D N A修復(fù)的影響，以確定藥物對(duì)遺傳基因的影響。2.8 老化代謝產(chǎn)物(chnw)的測(cè)定 : 用熒光(ynggung)比色法測(cè)定有關(guān)(yugun)組織的脂褐素、過(guò)氧化脂質(zhì)， 亦可側(cè)定經(jīng)脯氨酸、載脂蛋白等代謝產(chǎn)物，以觀察藥物的作 用。2.9 內(nèi)分泌功能的測(cè)定：

7、用放射免疫分析技術(shù) ( R I A ) 測(cè)定性腺激素、促性腺激素、腎上腺皮質(zhì)激素、甲狀腺激素、促甲狀腺激素、胸腺素等內(nèi)分泌激素的變化，以觀察藥物對(duì)內(nèi)分泌功能的影響。忍 . 1 0 在條件許可的情況下，應(yīng)該進(jìn) 行組織形態(tài)或亞微結(jié)構(gòu)變化的觀察，例如用光學(xué)顯 微鏡、組織化學(xué)或電鏡對(duì)有關(guān)組織，尤其是對(duì)心、腦、子宮、卵巢、辜丸等進(jìn)行觀察。3.特殊實(shí)驗(yàn)依不同作用的抗衰老藥物，為驗(yàn)證其特點(diǎn)而迸行的實(shí)驗(yàn)例如: 免疫調(diào)節(jié)、內(nèi)分泌調(diào)節(jié)、性功能調(diào)節(jié)等。任選實(shí)驗(yàn)的藥物必須在主要效學(xué)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上進(jìn)行，否則不能作為抗衰老藥物。4.藥理學(xué)篩選的程序?yàn)榱颂岣哐芯啃?，避免無(wú)效勞動(dòng) ， 研究可分階段進(jìn)行。即初篩實(shí)驗(yàn)和特殊實(shí)驗(yàn)由

8、簡(jiǎn)至繁進(jìn)行。5.中藥藥理實(shí)驗(yàn)中藥抗衰老藥物或以中藥為主的組合配方，應(yīng)在中醫(yī)藥理論的指導(dǎo)下，根據(jù)方藥的主治功能設(shè)計(jì)藥效指標(biāo)，同時(shí)要有選擇的針對(duì)某一類型的虛損動(dòng)物模型進(jìn)行相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)。6.按新藥評(píng)審辦法和報(bào)批規(guī)定，進(jìn)行一般藥理學(xué)及毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)。三、抗衰老藥物的臨床評(píng)價(jià)衰老不是疾病，因此不能定出診斷標(biāo)準(zhǔn)，也不能訂出疾病的痊愈和總有效率。但是衰老過(guò)程中所出現(xiàn)的機(jī)能失調(diào)和自我不適的感覺(jué)卻是可知的。衰老是一個(gè)有序過(guò)程 ，是生物序在時(shí)間上的表現(xiàn)。從總體來(lái)說(shuō)，人類的歷法年齡即代表人體的老化程度，同一年齡組的人群具有相似 的機(jī)能、結(jié)構(gòu)特征，即生物的老化度。但是每個(gè)個(gè)體由于各種因素，可以使歷法年齡與實(shí)際年齡有較大的差

9、異。進(jìn)行個(gè)體老化度測(cè)定并與相應(yīng)歷法年齡組人群的標(biāo)準(zhǔn)尺度進(jìn)行比較，以側(cè)算其生理學(xué)年齡，然后再觀察抗衰老藥物對(duì)生理學(xué)年齡的影響，這就是對(duì)抗衰老藥物進(jìn)行臨床評(píng)價(jià)的基本設(shè)計(jì)思想。1.生理學(xué)年齡測(cè)定(cdng)原則生理學(xué)年齡(ninlng) ( P h y s i o l o g i c a l a g e ) 包括(boku)機(jī)體的靜態(tài)功能和貯備功能，(負(fù)荷后調(diào)節(jié)力)；從測(cè)定方法來(lái)分類包括各臟器的功能指標(biāo)及生化指標(biāo)和免疫學(xué)指標(biāo)。在指標(biāo)的選擇上既要注意到宏觀指標(biāo)，也應(yīng)注意到微觀指標(biāo)和各指標(biāo)間的橫向關(guān)系，主觀指標(biāo)是指隨增齡而出現(xiàn)非疾病所致的衰老癥狀 。2 . 生理學(xué)年齡測(cè)定方法癥狀:除常規(guī) 1 0 項(xiàng)外，

10、癥狀還應(yīng)增加眼花、耳鳴、記憶全無(wú)、老年斑。分級(jí): “ O ” 、 “ I ” ( 偶 ) 、 “ I ” ( 大部份時(shí) 間 以 “ l ” ( 全無(wú) )。2.1 衰老癥狀 : 在流行病學(xué)調(diào)查的基礎(chǔ)上確定隨增齡而出現(xiàn)非疾病性衰老癥狀并且依其嚴(yán)重程度分出等級(jí)。一般用模糊數(shù)學(xué)的方法進(jìn)行，如主動(dòng)述出為 I 級(jí)，被動(dòng)述出為 I 級(jí)，否定為 1級(jí)。2 . 2 靜態(tài)機(jī)能指標(biāo)及形體測(cè)量 : 包括血壓、心率、脈搏、呼吸、身高體童等常規(guī)內(nèi)外科檢查和常規(guī)化驗(yàn)檢查。2 . 3 按中醫(yī)辨證分型對(duì)被檢查對(duì)象進(jìn)行中醫(yī)陰限 、 虛實(shí)分型。2 . 4 臟器功能測(cè)定 : (選做 )心血管機(jī)能測(cè)定 (心排出量、脈搏和有關(guān)指標(biāo)阻抗儀

11、 ， S J4 2 生理記錄錄 儀等 ； R P心功能測(cè)定儀 ； 至少應(yīng)有一種測(cè)定 。 智能測(cè)定 : 小學(xué)以 上：W M S ； 文盲 : 修 訂的長(zhǎng)谷川量表及修 訂的 M M S E ( C M M SE )。微循環(huán) ( 田牛氏加權(quán)評(píng)分法 )血流變學(xué) 、 血小板聚集率、 紅細(xì)胞變形 能力等肺功能 ； 腎功 能 ； 肝功能 ； 免疫功能 ； 內(nèi)分泌功能 ( 垂體一靶腺軸 ) : 側(cè) 肇丸酮 、 雌二醇水平。2 .5 負(fù)荷試驗(yàn) ( 選做 )2.6 分子生物學(xué)指標(biāo) ( 選做 ) :c A M P c / G M P血漿(xujing) 、 P G I Z / T X A Z血漿(xujing) 、

12、 P G E / P G F Z血漿(xujing) 、 S O D 、 L P O 、 其他 (血漿激素水平測(cè)定，血微量元素 : Z n、e S等 ) 、血脂 、血糖、載脂蛋白、脂蛋白電泳等。2.7稱7 各種受體的放射性配基 ” :3. 臨床觀察設(shè)計(jì)注意事項(xiàng)3 . 1 年齡組 : 老年 前 期 4 5 5 9 ； 老年期 6 0 、8；9 長(zhǎng)壽期 9 0以上3 . 2 設(shè)立雙盲或單盲對(duì)照組3. 3 排除疾病癥狀的干擾 : 因老 年 多病 ， 不可能選出絕對(duì)健康老年人 ， 因 此要應(yīng)用相似對(duì)照的辦祛，把患有同一種疾病的分在治療組和對(duì)照組 。為了治療某些慢性病而同服的治療藥物，可以不停藥，但要做

13、好服用抗衰 老 藥 物 前后 的 自身對(duì)照 。 3.4 老年人平時(shí)有服各種補(bǔ)藥 的 習(xí) 1 貫， 如人參 、 鹿茸等 ； 應(yīng)在用抗衰老藥物之前停服一切中 西補(bǔ)劑三個(gè) 月以上 ， 療程中也不 使用其他補(bǔ)劑 。 3. 5 治療前后的生活起居 、 飲食習(xí)質(zhì)和食 量應(yīng)基本保持一致 ， 避免附加因素的影 響 ， 如療程中發(fā)生疾病或慢性心腦疾病的 急性發(fā)作 ， 即應(yīng)。3.6 在 觀察預(yù)定指標(biāo) 的 同時(shí) ， 也要注意其原發(fā)疾病的變化 ， 并應(yīng)記錄和探 索 與 本 次用藥的關(guān)系 。 4. 總療效判定 : 有兩種方法 4.1 生理學(xué)年齡差法 : 應(yīng)用 電 子計(jì)算機(jī)進(jìn)行多指標(biāo)的多元逐步回 歸分析 ， 測(cè)定生理學(xué)年

14、齡 ， 療程 前后進(jìn)行對(duì)比 ， 同時(shí)用以 下兩法 : 1 ) 生理學(xué)年齡下 降 3 歲以上者為顯效 ； O 者為有；D者為無(wú)效。 2 ) 總有效率與對(duì)照組比較，P 0 . 0 5者，治療組才能判定有效。 4.2 積分法 . : 將各種數(shù)據(jù)劃等級(jí)給分，相加后積分得總值，以腎虛脾虛為例，見下表。腎虛、脾虛各類證型衰老辯證標(biāo)準(zhǔn)抗衰老藥物研究的篩選規(guī)范與臨床評(píng)價(jià)19900518證型望診脈診問(wèn)診主要疾狀次要疾狀腎氣虛1.面色皓（白光）白1.腰膝酸軟1.夜尿頻（或尿后余瀝）；2.自汗；2.舌淡胖、苔白2.疲倦乏力3.氣短；4.耳鳴（或聾）；5.發(fā)脫或變白3.脈細(xì)弱6.健忘；7.齒搖；8.性欲減退腎陰虛1.

15、兩罐潮紅1.腰膝酸軟1.頭暈耳鳴；2.盜汗；3.口干舌燥；2.色紅少苔2.五心煩熱4.便秘；5.發(fā)脫或變白；6.健忘；3.脈細(xì)數(shù)7.齒搖；8.性欲減退；腎陽(yáng)虛1.面目浮腫1.腰膝酸軟1.夜尿頻；2.精神不振；3.氣短而踹2.舌淡胖而潤(rùn)，苔白厚2.畏寒肢冷4.大便糖??；5.發(fā)脫或變白；6.健忘3.脈沉池7.齒搖；8.性欲減退；脾氣虛1.面色萎黃1.四肢乏力1.食不消化；2.嘔逆2.舌淡胖、苔白2.腹脹腸鳴3.大便糖??；4.納減；3.脈細(xì)數(shù)脾陰虛1.面色萎黃1.四肢乏力1.饑不擇食；2.嘔逆2.舌心肝或肝絳2.口干喜飲3.大便干結(jié)；4.脘悶腹脹3.脈細(xì)數(shù)脾陽(yáng)虛1.面色萎黃1.四肢乏力1.畏寒喜暖；

16、2.口泛清水；2.舌淡胖、嫩、苔白潤(rùn)2.腹中冷痛，得溫痛減3.大便糖??；4.納減；3.脈沉遲說(shuō)明(shumng):1.各型腎虛(shn x)必備主要癥狀二項(xiàng)，次要癥狀(zhngzhung)中任意三項(xiàng)和望診脈診中的一項(xiàng)，或積分值 大于等于13分。2.各型脾虛必備主要癥狀二項(xiàng) ， 次要癥狀中任意二項(xiàng)和 望診脈診中的一項(xiàng) ， 或積分值大于等于1 2分。 3.望診、脈診中任一項(xiàng)或一項(xiàng)以上均記為6分，無(wú)為0分。 4. 主要癥狀記分按程度標(biāo)準(zhǔn)較定后X2。衰老癥狀積分值評(píng)定方法：一、問(wèn)診: 使用一致股語(yǔ)句提問(wèn)，凡主動(dòng)說(shuō)出的癥狀記4分，問(wèn)出的癥狀按照癥狀顯著或持續(xù) 出現(xiàn) 、定狀時(shí)輕時(shí)重或間斷出現(xiàn)、癥狀輕或偶爾

17、出現(xiàn)分別記 3 分、2分和1分，無(wú)癥狀為0分 。 問(wèn)診方式: 1 . 先讓受試者主訴?？蓡?wèn) “ 你平時(shí)感到哪些不 好 ? ” 或 “ 你服藥 后 還 感 到哪些不好 ? ” 。 2.按照各類證型衰老辨證標(biāo)準(zhǔn) ， 依次詢問(wèn)各型虛證 的主要癥狀 ( 己主訴的除外 ) ， 如詢問(wèn)腎虛證型 的主要癥狀 ， 可 問(wèn) “ 你是否感到腰膝 酸軟 ? 疲倦乏力? 五心煩 熱 ? 畏寒肢冷 ? ” 。 3.依次詢問(wèn)各 型虛證的次要 癥 狀 ， 方 式 同二、望診(wn zhn)和脈診: 望診(wn zhn)和脈診中具有任意一項(xiàng)應(yīng)記為6分，因?yàn)?yn wi)這些癥狀是較客觀的 。 三、療效判斷: 每例問(wèn)診、望診和

18、脈診記分之總和為衰老見證積分值 。 (1) 顯效 : 治療后衰老見證積分下降之值2 / 3治療前平均衰老見證積分值 。 (2) 有效 : 治療后衰1/ 3、2/ 3治療前平均衰老見證積分值之間 。 (3) 無(wú)效 : 治療后衰老見證積分下降之值在1/3治療前平均衰老見證積分值以下 。 I M A O-A 和 M A O-B測(cè)定法 : (1) 用化學(xué)方法測(cè) O D值 。 (2) 用同位素方法 : H-5 經(jīng) 色 胺 硫 酸 鹽 ( 3 H-5 H T ) 測(cè) M A O-A ； “ C -b苯乙胺 ( C-bP E A ) 測(cè) M A O-B. 2.各種受體的放射性配基 ( 體 ) (1) 3 H-D i h y d r o l p r a n l o l ( “ H-D H A ) 刀受體的配體 。 (2) 3 H-Sp i p e r o n e ( 3 H-氟 呱 哆陡醇 ) :D A ( 多 巴胺 ) 受體的配體 。 (3) 3 H-P r a z o s i n ( 3 H-呱 哇嗓 ) : a-受體的配體 。 (4) “ H-Q