無菌模擬灌裝工藝驗證[指南]

1、 / 42 / 42無菌工藝模擬驗證-培養(yǎng)基灌裝試驗王新峰內(nèi)容.培養(yǎng)基灌裝的目的.法規(guī)要求.不同制劑工藝的培養(yǎng)基灌裝（液體、凍干 產(chǎn)品，干粉分裝產(chǎn)品）.風(fēng)險分析.實驗設(shè)計.審計要點培養(yǎng)基灌裝試驗的定義定義：培養(yǎng)基灌裝-采用培養(yǎng)基代替產(chǎn)品，按照 正常生產(chǎn)的程序來進(jìn)行無菌灌裝工藝驗證培養(yǎng)基灌裝試驗?zāi)康哪縕評估在既定無菌生產(chǎn)環(huán)境和過程控制條件下生產(chǎn)無菌 產(chǎn)品的能力旬E明指定的無菌工藝設(shè)計和變更是否可行 忠明無菌工藝過程中的相關(guān)操作是否可行評估無菌工藝人員的操作水平（資格確認(rèn)組成部分）-QAR調(diào)查的手段ffi明符合cCMP的要求唉現(xiàn)無菌工藝過程中潛在的微生物污染因素培養(yǎng)基灌裝試驗應(yīng)用范圍撫菌藥品和生物

2、制劑的生產(chǎn)況無菌工藝進(jìn)行醫(yī)療器械，人和動物保健 品的生產(chǎn)法規(guī)要求2010GMp?第四十七條無菌生產(chǎn)工藝的驗證應(yīng)當(dāng)包括培養(yǎng)基模擬灌裝試驗。?應(yīng)當(dāng)根據(jù)產(chǎn)品的劑型、培養(yǎng)基的選擇性、澄清度、濃度和滅菌的適用性選擇培養(yǎng)基。應(yīng)當(dāng)盡可能模擬常規(guī)的無菌生產(chǎn)工藝，包括所有對無菌結(jié)果有影響的關(guān)鍵操作，及生 產(chǎn)中可能由現(xiàn)的各種干預(yù)和最差條件。?培養(yǎng)基模擬灌裝試驗的首次驗證，每班次應(yīng)當(dāng)連續(xù)進(jìn)行3次合格試驗?？諝鈨艋到y(tǒng)、設(shè)備、生產(chǎn)工藝及人員重大變更后，應(yīng)當(dāng)重復(fù)進(jìn)行培養(yǎng)基模擬灌裝試驗。培養(yǎng)基模擬 灌裝試驗通常應(yīng)當(dāng)按照生產(chǎn)工藝每班次半年進(jìn)行1次，每次至少一批。?培養(yǎng)基灌裝容器的數(shù)量應(yīng)當(dāng)足以保證評價的有效性。批量較小的產(chǎn)品

3、，培養(yǎng)基灌裝的 數(shù)量應(yīng)當(dāng)至少等于產(chǎn)品的批量。培養(yǎng)基模擬灌裝試驗的目標(biāo)是零污染，應(yīng)當(dāng)遵循以下 要求：?（一）灌裝數(shù)量少于5000支時，不得檢由污染品。?（二）灌裝數(shù)量在 5000至10000支時：?1.有1支污染，需調(diào)查，可考慮重復(fù)試驗；?2.有2支污染，需調(diào)查后，進(jìn)行再驗證。?（三）灌裝數(shù)量超過10000支時：?1.有1支污染，需調(diào)查；?2.有2支污染，需調(diào)查后，進(jìn)行再驗證。?（四）發(fā)生任何微生物污染時，均應(yīng)當(dāng)進(jìn)行調(diào)查。?第四十八條應(yīng)當(dāng)采取措施保證驗證不能對生產(chǎn)造成不良影響。其它法規(guī)要求? EU一guidelines in Annex 1 to UK cGMP s-PICS publicati

4、on PE 002- 2 Recommendation on the Validation of Aseptic Processes( April2000 )? USA一a Guideline on Sterile Drug Products Produced by Aseptic Processing ” FDA 1987一Reissued with updates in 2004其它組織要求PDA Technical Report No 22ProcessSimulation Testing for Aseptically Filled Products ” 1996 (2011 revi

5、sed)PDA Technical Report No 36CurrentPractices in the Validation of Aseptic Processing ” 2002培養(yǎng)基灌裝的前提 / 42培養(yǎng)基灌裝的前提 / 42Z吉凈室環(huán)境達(dá)到設(shè)計要求a風(fēng)系統(tǒng)（HVAC ）的確認(rèn)被備驗證狀態(tài)確認(rèn)告產(chǎn)線設(shè)備安裝、運行和性能確認(rèn)歿備的清洗和消毒CIP,SIP播熱、干熱滅菌工藝賒菌過濾的驗證喀器/膠塞密閉性測試（CCIT）?A員培訓(xùn)了菌操作，無菌室行為了菌更衣資格確認(rèn)田菌環(huán)境取樣資格確認(rèn) / 42培養(yǎng)基選擇 / 42培養(yǎng)基灌裝設(shè)計宗義被模擬的工藝徙義使用的房間，灌裝線和設(shè)備? 使用的容器和

6、密封的類型雕裝線的速度雕裝數(shù)量、批量?莫擬過程中的干擾和中斷的數(shù)目和類型慘與的人員數(shù)目? 使用的培養(yǎng)基雕裝到容器內(nèi)培養(yǎng)基的體積流養(yǎng)條件，培養(yǎng)溫度，培養(yǎng)時間破行的環(huán)境監(jiān)測破行的測試及接受標(biāo)準(zhǔn)砒擇的最差條件及其原理養(yǎng)應(yīng)廣譜微生物生長我好的澄明度，較小的粘度可除菌過濾 滅菌（對于液體產(chǎn)品應(yīng)采用和產(chǎn)品一致的滅 菌方法;粉末產(chǎn)品應(yīng)采用經(jīng)過驗證的滅菌方法）在某些情況下應(yīng)該考慮使用厭氧性培養(yǎng)基嘯用培養(yǎng)基：TSBFTM也進(jìn)行促生長實驗，5天培養(yǎng)（應(yīng)包括惰性物質(zhì)使用濃 度的確認(rèn)）5000units), 一般至少5000瓶?應(yīng)該考慮手工灌裝和全自動隔離無菌工藝區(qū)別手工灌裝應(yīng)考慮全批量進(jìn)行模擬灌裝?其它方面考慮，如

7、跨班次生產(chǎn)等最差條件的設(shè)計（6） / 42最差條件的設(shè)計（6） / 42灌裝速度&瓶子規(guī)格Line speed &Container configuration罐裝速度和瓶子規(guī)格的關(guān)系-最大的瓶子規(guī)格，最慢的速度（最大暴露時間）-最小的瓶子規(guī)格，最快的速度（很難操作，更容易出現(xiàn)生產(chǎn)異常情況，增加人為干預(yù)的機會）人員 Personnel冷養(yǎng)基灌裝時模擬無菌區(qū)可能容納最多的 人數(shù)撫菌區(qū)工作人員至少每年參與一次培養(yǎng)基 灌裝環(huán)是每個人員都要參與最差條件的模擬滔，不是參與設(shè)備安裝 Process Set-up出多的人為干預(yù)，動作多?對灌裝區(qū)環(huán)境產(chǎn)生直接影響最差條件的設(shè)計(7)最差條件的設(shè)計(7)干擾 i

8、nterventions?日常常的干擾(routine/Inherent/planed)是指在經(jīng)常在生產(chǎn) 過程中出現(xiàn)的操作，如：灌裝線裝配，稱量調(diào)節(jié)，加膠塞 ,處理倒瓶，取樣，環(huán)境監(jiān)測等當(dāng)日日常的(non-routine/Corrective/Unplaned) 是指不經(jīng)常,不會在每批生產(chǎn)中都會出現(xiàn)的操作，如：設(shè)備故障，灌 裝線堵塞，膠塞堵塞、j軌道調(diào)節(jié)，拆卸/替換破損的部件 等注：福作規(guī)程中應(yīng)列出哪些干擾是容許的，正常干擾應(yīng)該每次 模擬灌裝都進(jìn)行，非正常的干擾至少每年模擬灌裝進(jìn)行一 次汗擾的頻率次數(shù)應(yīng)該能夠代表正常生產(chǎn)時發(fā)生的次數(shù)洞過環(huán)境監(jiān)控和模擬灌裝來評價干預(yù)過程是不科學(xué)的，應(yīng) 該在無菌工

9、藝設(shè)計階段就應(yīng)該考慮避免干擾24 / 42 / 42 / 42最差條件的設(shè)計總結(jié)程培養(yǎng)基模擬灌裝過程中因盡可能和實際 分裝工藝過程相一致，包括設(shè)備，工藝， 人員參與以及工藝要求的關(guān)鍵保留時間等O巽E培養(yǎng)基模擬灌裝設(shè)計中不僅需要考慮上 述最差條件，而且更重要的是設(shè)計如何完 成它。? 壬何的設(shè)計都應(yīng)該有支持性文件說明理由餌境監(jiān)控空氣浮游菌沉降菌接觸碟/棉簽法伙員監(jiān)控位為點選擇：考慮對產(chǎn)品構(gòu)成最大風(fēng)險的位 置，如產(chǎn)品暴露位置、直接接觸表面劑料微生物負(fù)荷監(jiān)控培養(yǎng)基灌裝過程記錄環(huán)境監(jiān)測，人員監(jiān)測的數(shù)據(jù)滲與培養(yǎng)基灌裝的人員O發(fā)生開始時間縮養(yǎng)基灌裝過程事件記錄，包括：人員干擾操作，中斷，異常情況，空機運轉(zhuǎn)等

10、和結(jié)束時間縮養(yǎng)基促生長實驗結(jié)果印日性瓶細(xì)菌鑒定的結(jié)果?w查報告但程錄像培養(yǎng)培養(yǎng)條彳20-25 C條件下培養(yǎng)7天（培養(yǎng)真 菌）and 30-35 C培養(yǎng)7天（培養(yǎng)細(xì)菌）培養(yǎng)前：確保瓶內(nèi)壁和瓶塞充分接觸培養(yǎng)基培養(yǎng)前：應(yīng)檢查瓶密封完整性、缺損狀態(tài)，非 正常狀態(tài)的瓶應(yīng)剔出不進(jìn)行培養(yǎng)，正常狀態(tài)的 瓶都應(yīng)該進(jìn)行培養(yǎng)，任何不作培養(yǎng)的瓶都應(yīng)該 說明原因并記錄培養(yǎng)結(jié)束后，取培養(yǎng)基灌裝過程中開始、中間、結(jié)束的樣品進(jìn)行促生長實驗-目檢應(yīng)該由有資質(zhì)的人員進(jìn)行計數(shù)培養(yǎng)基灌裝過程要進(jìn)行物料平衡-總共灌裝的數(shù)量-在培養(yǎng)前總共剔出的數(shù)量-總共進(jìn)行培養(yǎng)的數(shù)量-在培養(yǎng)結(jié)束總共進(jìn)行檢查的數(shù)量培養(yǎng)基灌裝結(jié)束后的清場和清洗應(yīng)當(dāng)采取妥善

11、措施保證培養(yǎng)基灌裝驗證不 會對后續(xù)的生產(chǎn)帶入污染的風(fēng)險。始養(yǎng)基的處理渡間和設(shè)備應(yīng)在4小時內(nèi)進(jìn)行清掃培養(yǎng)基灌裝試驗的頻次-初始驗證對象：新的無菌生產(chǎn)工藝徑少連續(xù)3次合格的培養(yǎng)基灌裝? 3天或3個獨立的班硝足夠的時間模擬實際生產(chǎn)時的操作?夜體從產(chǎn)品認(rèn)為無菌開始，固體從產(chǎn)品加 入料斗開始對每條無菌灌裝線現(xiàn)行再驗證應(yīng)班次，每年進(jìn)行兩次再驗證，間隔5-7個月應(yīng)條生產(chǎn)線輪流使用最大和最小尺寸的容器?以下變更情況需要進(jìn)行再驗證?生產(chǎn)線發(fā)生重大改變；?直接接觸產(chǎn)品的設(shè)備、容器改變；?空調(diào)系統(tǒng)的重大改變（影響空氣質(zhì)量和氣流方向）?參與生產(chǎn)的主要生產(chǎn)人員改變；?首次增加生產(chǎn)班次；?無菌實驗失敗，調(diào)查結(jié)論需要進(jìn)行培

12、養(yǎng)基灌裝試驗?環(huán)境監(jiān)測結(jié)果明顯異常，調(diào)查結(jié)論需要進(jìn)行培養(yǎng)基灌裝試驗?任何情況下對培養(yǎng)基灌裝進(jìn)行的再驗證都要經(jīng)過評估，由工廠質(zhì)量和 生產(chǎn)部負(fù)責(zé)人來決定培養(yǎng)基灌裝的次數(shù)。培養(yǎng)基模擬灌裝試驗的目標(biāo)是零污染,應(yīng)當(dāng)遵循以下要求:分裝數(shù)量50005000到10000大于10000行動污染的個數(shù)污染的個數(shù)污染的個數(shù)調(diào)查1調(diào)查&考慮重新 驗證1根據(jù)調(diào)查結(jié)果， 并進(jìn)行再驗證122陽性結(jié)果調(diào)查當(dāng)培養(yǎng)基灌裝出現(xiàn)陽性結(jié)果時，不管是符合驗證 可接受標(biāo)準(zhǔn)，都必須啟動工廠偏差程序進(jìn)行調(diào)查O判斷：撫菌工藝過程的可靠性?對已經(jīng)上市產(chǎn)品可能存在的風(fēng)險（追溯上一次成 功模擬分裝后的產(chǎn)品開始）4日性結(jié)果產(chǎn)生的原因深取必要的補救措施餛

13、否需要從新進(jìn)行培養(yǎng)基灌裝實驗污染瓶的調(diào)查-魚骨圖物料方法環(huán)境-培養(yǎng)基滅菌/除菌失敗-惰性物質(zhì)無菌性-膠塞無菌性-容器密封性-更衣操作是否科學(xué)-干擾操作是否科學(xué)-無菌技術(shù)是否科學(xué)-壓差-生產(chǎn)環(huán)境不符合要求-非活性粒子-活性粒子-物料滅菌方法是否驗證-無菌室無菌狀態(tài)維護方法陽性結(jié)果&-壓縮空氣過濾完整性-液體過濾器完整性-滅菌設(shè)備故障-溶液罐密封性-更衣操作是否規(guī)范-目檢人員資格-高效過濾器泄露-層流風(fēng)速達(dá)不到要求-無菌操作技術(shù)是否規(guī)范-干擾操作是否規(guī)范-鑒定陽性結(jié)果驗證失敗設(shè)備人員測量污染瓶的調(diào)查講境和人員監(jiān)測數(shù)據(jù)次菌記錄和設(shè)備校驗記錄撫菌區(qū)及設(shè)施的清潔和消毒記錄撫菌區(qū)生產(chǎn)操作人員/輔助人員培訓(xùn)

14、記錄?高效過濾器完整性測試記錄?ffi差記錄撫菌過濾器的完整性測試記錄度定污染菌流養(yǎng)前丟棄的培養(yǎng)基瓶的缺陷類型準(zhǔn)陽性瓶灌裝時所模擬的干擾過程花培養(yǎng)基灌裝時發(fā)生的任何偏差和非正常事件培養(yǎng)基灌裝無效沈效=和無菌工藝無關(guān)但影響模擬灌裝有效性的事件發(fā)生嫄因：席養(yǎng)基促生長實驗失敗實驗的原因or培養(yǎng)基的原因席養(yǎng)條件不正確培養(yǎng)基瓶沒有放在20 25 C下培養(yǎng)7天，然后在30 35 C下再培 養(yǎng)7天-灌裝量沒有達(dá)到要求TF正常操作引起的，如停電，公用設(shè)施異常等，最好開始階段就 應(yīng)該終止試驗注意：不能直接將培養(yǎng)基灌裝失敗作為無效，必須給與充分的理由進(jìn)行 說明培養(yǎng)基灌裝后的生產(chǎn)縮養(yǎng)基灌裝后可以進(jìn)行生產(chǎn)，但要培養(yǎng)基

15、灌裝合 格后產(chǎn)品才能放行（產(chǎn)品有報廢的風(fēng)險）。撫效的培養(yǎng)基灌裝后可以進(jìn)行生產(chǎn)，但生產(chǎn)的批次要在成功培養(yǎng)基灌裝后方可放行縮養(yǎng)基灌裝失敗生產(chǎn)線不能用來生產(chǎn)，根據(jù)調(diào)查結(jié)果決定培養(yǎng)基 灌裝的次數(shù)和數(shù)量，培養(yǎng)基灌裝合格后，才能生 產(chǎn)。GMP檢查要點驗證方案/批記錄是否包括所有的重要步驟，比如計劃安排的打斷操 作，模擬分裝的介質(zhì)種類，體積，分裝的數(shù)量，倒班設(shè)計，參與人 員的列表等？分裝線的最初驗證或生產(chǎn)線/生產(chǎn)工藝的重大變更后，是否至少進(jìn)行 了連續(xù)三次成功的模擬分裝？每一條生產(chǎn)線/生產(chǎn)工藝每半年是否進(jìn)行了一次成功的模擬分裝？ 培養(yǎng)基灌裝驗證中是否模擬了無菌生產(chǎn)操作中的常規(guī)和非常規(guī)打斷 操作以及最差情況下的

16、行動和條件（如:西林瓶的大小和開口，生產(chǎn) 線的速度，班次的轉(zhuǎn)換，生產(chǎn)線操作人員的最大人數(shù) ，最大的分裝 時間）？打斷操作在批文件中是否被記錄（參考美國FDA的無菌生產(chǎn) 指南中生產(chǎn)特殊關(guān)鍵參數(shù)的部分）?授權(quán)可以進(jìn)入無菌分裝室的操作人員，包括技術(shù)人員和設(shè)備維修人 員，是否有文件記錄顯示他們每年至少參加了一次模擬分裝？這些 人員的操作崗位是否與日常生產(chǎn)中職責(zé)保持一致？GMP檢查要點（cont） / 42GMP檢查要點（cont） / 42分裝的數(shù)量是否至少在5000到10000之間？如果分裝的數(shù)量少于5000或手工灌裝/壓膠塞，模擬分裝過程中分裝的培養(yǎng) 基的量是否至少等于日常生產(chǎn)的最大批量？每一瓶中

17、是否有一定體積的培養(yǎng)基去充分接觸西林瓶的內(nèi)表面（如：當(dāng)?shù)?置或手動使培養(yǎng)基渦旋時）并允許目視檢查微生物的生長情況？是否使用了微生物促生長介質(zhì)如大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基？當(dāng)實際生產(chǎn)需要 無氧條件時，模擬分裝是否采用了厭氧菌的培養(yǎng)基（如：硫膠質(zhì)液體培養(yǎng) 基）？在培養(yǎng)后，培養(yǎng)基的促生長試驗是否應(yīng)用了 USP-EP標(biāo)準(zhǔn)菌株和環(huán)境檢測 過程分離出的菌株？當(dāng)常規(guī)生產(chǎn)使用惰性氣體時，模擬分裝是否使用了無菌的氣體進(jìn)行模擬？對于凍干操作中，未完全密封的容器是否暴露于部分真空環(huán)境中了嗎？模擬分裝過程和打斷操作是否在質(zhì)量部門監(jiān)督下進(jìn)行？培養(yǎng)的溫度是否合適于微生物的復(fù)蘇？（在可接受的是在20-35 C范圍之問）帝養(yǎng)時間是否不少于14天？?目檢人員是否有相關(guān)培訓(xùn)或經(jīng)驗來判斷微生物污染？?壬何被排除的產(chǎn)品（未密閉的）是否都得到充分的評估并在報告中解釋了原因？是否評估了物料平衡？?可接受標(biāo)準(zhǔn)是否符合法規(guī)標(biāo)準(zhǔn)：當(dāng)模擬分裝數(shù)量少于5000支時，沒有污染瓶被發(fā)現(xiàn)當(dāng)模擬分裝