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1、第一部分 免疫球蛋白測定一、IgG、IgA、IgM的測定1、單向免疫擴散法(RID)步驟:抗Ig血清按效價與融化的瓊脂混合澆板凝固后打孔加樣擴散測沉淀環(huán)做標準曲線,根據(jù)標準曲線得相應(yīng)Ig含量。122、免疫比濁法:原理:當抗原與抗體在稀釋系統(tǒng)中反應(yīng),而比例合適時,形成的免疫復(fù)合物在聚乙二醇等作用下自液相析出,使檢樣的濁度或光散射程度發(fā)生改變,分為透射比濁和散射比濁。步驟:抗Ig標準血清中(含PEG)孵育測OD值制標準曲線抗Ig待檢血清中(含PEG) 孵育測OD值根據(jù)標準曲線求值34散射比濁法5參考值:IgG:12.871.35g/L IgA:2.530.34g/L IgM:1.080.24g/L
2、臨床意義: 1、低Ig血癥: 先天性 體液免疫缺陷、聯(lián)合免疫缺陷病 獲得性 淋巴肉瘤、腎病綜合征等 2、高Ig血癥: 慢性感染、自身免疫病(類風濕性關(guān)節(jié)炎等)6二、IgE測定1、血清總IgE測定:ELISA法方法:抗IgE包被反應(yīng)板 IgE標準品或待測血清 酶標記抗IgE 底物顯色 測吸光度 做標準曲線求待測IgE含量參考值:男:631128 IU/ml 女:33760 IU/ml臨床意義:含量增高:特應(yīng)性皮膚病、枯草熱、哮喘、過敏性休克等含量降低:先天性低丙球蛋白血癥等72、變應(yīng)原特異性IgE檢測:放射變應(yīng)原吸附試驗(radioallergosorbent test,RAST)步驟:變應(yīng)原交聯(lián)載體 加待檢血清或正常對照血清加 125I-抗人IgE 洗去未結(jié)合125I-抗人IgE 計數(shù)器測放射值結(jié)果判定:以大于正常人3.5倍為陽性臨床意義: (1) 參見血清總IgE測定 (2) 確定變應(yīng)原8三、M蛋白測定:免疫電泳M蛋白: 漿細胞或B淋巴細胞單克隆增殖產(chǎn)生的結(jié)構(gòu)均一的多無活性的單克隆免疫球蛋白。方法步驟:血清蛋白電泳加抗體于瓊脂槽內(nèi)擴 散、沉淀結(jié)果判斷:在2-區(qū)附近形成致密弓形沉淀弧臨床意義:主要見于多發(fā)性骨髓瘤(multiple myeloma),也可見于巨球蛋白血癥mactogl
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