切花百合離體繁殖與多倍體培育的研究

1、切花百合離體繁殖與多倍體培育的研究百合 (Lilium brownii F.E.Br.var.viridulum Baker)是單子葉植物亞綱百合科 (Liliaceae) 百合屬 (Lilium) 多年生球根植物，是世界名花之一，適合用作切花、盆花和園林布景，深受人們的喜愛，具有很高的商業(yè)價(jià)值和觀賞價(jià)值。開展多倍體育種，是提高百合觀賞品質(zhì)和抗性的一條非常重要的途徑。本研究共有10 個(gè)百合供試品種， 以索邦 (Sorbonne) 和提伯 (Tiber) 兩個(gè)品種為試驗(yàn)材料， 進(jìn)行了組織培養(yǎng)體系的系統(tǒng)研究， 在其篩選出的最佳培養(yǎng)基上， 探尋其是否能成為適合其余8 個(gè)品種的廣譜培養(yǎng)基，利用秋水仙素

2、和 Oryzaline誘導(dǎo)得到了四倍體索邦和提伯新種質(zhì)， 以期得到具有價(jià)值的新材料， 為百合的倍性育種奠定基礎(chǔ)。百合離體快繁體系的研究結(jié)果表明：最佳的外植體消毒方式：鱗片用洗滌劑浸泡10min,自來水沖洗30min, 75%乙醇消毒90s, 0.1 %升汞消 毒13min,無菌水沖洗46次。初代誘導(dǎo)索邦提伯芽分化的最佳培養(yǎng)基均為MS+1.0mg L 6-BA+0.2mg LNAA誘導(dǎo)率達(dá)100% ,成芽數(shù)為5.0以上。索邦最佳繼代增殖的培養(yǎng)基為 MS+1.0mg /L 6-BA+0.1mg/L NAA,其增殖系數(shù)為6.25;提伯最佳繼代增殖的培養(yǎng)基為 MS+0.5mJL 6-BA+0.2mg/

3、L NAA,增殖系數(shù)為 5.0。索邦的最適生根培養(yǎng)基為1/2MS+0.5mgzL IBA,提伯的最適生根培養(yǎng)基為1 2MS+0.2mg L IBA ，植株和根系生長狀況良好，生根率為100，移栽成活率 90以上。將郁羅檸(Yelloween) 、紅蕊 (Fangin) 、奧塔里 (Aotali) 、肉色杰作(Rousejizuo)、布林迪西(Cordelia)、黑人蒙特(Mome Negro)、多安娜(Pollyanna) 、南川百合(L.rosthornil) 接種在索邦、提伯芽誘導(dǎo)、增殖和生根的最適培養(yǎng)基上， 結(jié)果表明： 這 8個(gè)品種的鱗片都能在MS+1.0mg L 6-BA+0.2mg/

4、L NAAS養(yǎng)基上誘導(dǎo)出芽，布林迪西、多安娜、肉色杰作的出芽率最高，其次是奧塔里、黑人蒙特、紅蕊，出芽率最低的是南川百合和郁羅檸，最低的出芽率均達(dá)40%,所以認(rèn)為MS+1.0mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA可以成為芽誘導(dǎo)百合鱗芽的廣譜培養(yǎng)基。MS+1.0mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA是比較適合郁羅檸、紅蕊、奧塔里、布林迪西的繼代增殖培養(yǎng)，增殖系數(shù)能達(dá)到 3.2 以上。MS+0.5mg L 6-BA+0.2mg LNAAt匕較適合肉色杰作、多安娜、黑人蒙特、南川百合的繼代增殖培養(yǎng)，增殖系數(shù)能達(dá)到 2.3 以上。MS+1.0mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA MS+0

5、.5mJL 6-BA+0.2mg/L NAA是分別適合這 8 個(gè)品種增殖的廣譜培養(yǎng)基。1 2MS+0.2mg L IBA 為適合郁羅檸、紅蕊、奧塔里、肉色杰作、布林迪西、多安娜生根的廣譜培養(yǎng)基，根系多長勢(shì)好，利于移栽存活。利用秋水仙素溶液和Oryzaline 溶液， 采用浸泡法和混培法， 對(duì)索邦提伯進(jìn)行多倍體的誘導(dǎo)， 兩種化學(xué)劑以秋水仙素為好， 兩種方法中以浸泡法處理效果較好。索邦以0.05 %秋水仙素溶液處理20h效果最好，提伯以0.02 %秋水仙素溶液處理 15h 效果最好，獲得的純合四倍體植株最多，誘導(dǎo)率均為 13.3 ?；炫喾ㄋ靼钜蕴砑?.1 %的秋水仙素處理15d為好，提伯以添加0.

6、05 %的秋水仙素處理15d 效果最佳，可獲得最多的純合四倍體，誘導(dǎo)率分別為 10.0 和6.7%。索邦以 0.003 % Oryzaline 溶液處理 9h 為好，提伯以 0.003 % Oryzaline溶液處理 6h 效果最好，變異率最高，分別達(dá)到了 13.3 和 10.0 。對(duì)四倍體和二倍體百合植株進(jìn)行了外部形態(tài)、 氣孔、 保衛(wèi)細(xì)胞特性的對(duì)比觀 察發(fā)現(xiàn)：四倍體植株的葉片增厚、葉長變短、葉形指數(shù)變小，索邦、提伯的葉厚分別是二倍體的200和162.1 ， 葉長分別是二倍體的 82.8 和 75.8 。 索邦 和提伯四倍體的氣孔密度明顯下降，分別為二倍體的 58.7 和 71.4 ；保衛(wèi)細(xì)胞增大， 長度分別為二倍體的 142.5 和 156.0 ， 寬度分別為二倍體的 112.6 和 160.8 ；氣孔大小較二倍體明顯增大，長度為二倍體的 127.6 、 128.1 ，寬度為二倍體的 124.3 、 170.1 。對(duì)四