課后素養(yǎng)落實(shí)9動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與干細(xì)胞技術(shù)

1、課后素養(yǎng)落實(shí)（九）動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與干細(xì)胞技術(shù)（建議用時(shí)：40分鐘）4組基礎(chǔ)達(dá)標(biāo)練題組一動(dòng)物細(xì)胞融合.以下關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞融合的說法，不正確的選項(xiàng)是（）A.細(xì)胞融合前要用酶解法分散成單個(gè)細(xì)胞B.細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性C.融合后得到的雜交細(xì)胞能表現(xiàn)出兩個(gè)親本細(xì)胞的特點(diǎn)D.融合后得到的雜交細(xì)胞具有兩個(gè)細(xì)胞核D 動(dòng)物細(xì)胞融合前需用胰蛋白酶處理將組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞，A正 確；動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜具有流動(dòng)性，B正確；融合后得到的雜交細(xì)胞 獲得了兩個(gè)親本的遺傳物質(zhì)，能表現(xiàn)出兩個(gè)親本細(xì)胞的特點(diǎn)，C正確；融合后得 到的雜交細(xì)胞是單核細(xì)胞，D錯(cuò)誤。.以下不屬于細(xì)胞融合技術(shù)應(yīng)用的是（）A.細(xì)胞遺傳與

2、細(xì)胞免疫的研究B.生物新品種的培育C.單克隆抗體的制備D.瀕危動(dòng)物的克隆D 克隆瀕危動(dòng)物是體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用，不屬于細(xì)胞融合技術(shù)的應(yīng) 用。題組二單克隆抗體的制備技術(shù)3.以下圖是單克隆抗體制備流程的簡明示意圖。以下有關(guān)表達(dá)正確的選項(xiàng)是（） 抗原彌留一 / 右便像痛細(xì)胞向A小鼠腹腔體外培養(yǎng)I I服克隆抗體A.是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的T細(xì)胞B.中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細(xì)胞的形成C.同時(shí)具有脾臟細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞的特性D.是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群D 明確單克隆抗體制備過程的幾個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)是準(zhǔn)確解答此題的關(guān)鍵。 是從小鼠脾臟中獲得的能產(chǎn)生抗體的漿細(xì)胞，A項(xiàng)錯(cuò)誤；中應(yīng)該使用能促進(jìn)

3、細(xì) 胞融合的促融劑，如聚乙二醇等，B項(xiàng)錯(cuò)誤；同時(shí)具有從脾臟中別離出的漿細(xì) 胞和骨髓瘤細(xì)胞的特性，C項(xiàng)錯(cuò)誤；是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能產(chǎn)生特異性抗體的 細(xì)胞群，D項(xiàng)正確。.（多項(xiàng)選擇）以下圖表示抗人體胃癌的單克隆抗體的制備過程，有關(guān)表達(dá)正確的 是（）甲些小鼠一B細(xì)一選掙培養(yǎng)太盛分婚抗月癌單骨慚一乙丙* 丁一克隆抗體描細(xì)胞A.圖中實(shí)驗(yàn)小鼠注射的甲是能與抗人體胃癌抗體特異性結(jié)合的抗原B.利用聚乙二醇、滅活的病毒和電激等方法均可誘導(dǎo)細(xì)胞融合獲得乙C.用特定的選擇培養(yǎng)基對(duì)乙篩選，融合細(xì)胞均能生長，未融合細(xì)胞均不能 生長D.丙需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)屢次篩選后可獲得大量能分泌所 需抗體的丁ABD 圖中從

4、注射了甲的小鼠中獲得的B細(xì)胞可以產(chǎn)生特異性抗體，所以 甲為相應(yīng)的抗原，A正確；利用聚乙二醇（化學(xué)法）、滅活的病毒（生物法）和電激（物 理法）等方法均可誘導(dǎo)細(xì)胞融合獲得雜交細(xì)胞，B正確；用特定的選擇培養(yǎng)基對(duì) 乙篩選，同種細(xì)胞的融合細(xì)胞和未融合細(xì)胞均不能生長，只有融合的雜交細(xì)胞（雜 交瘤細(xì)胞）能生長，C錯(cuò)誤；雜交瘤細(xì)胞經(jīng)過選擇培養(yǎng)基的篩選并經(jīng)單一抗體檢 測呈陽性后，培養(yǎng)能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，即可制備單克隆抗體，D正確。.人絨毛膜促性腺激素（HCG）是女性懷孕后胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌的一種糖 蛋白，制備抗HCG單克隆抗體可用于早孕的診斷。以下圖是抗HCG單克隆抗體 制備流程示意圖，請(qǐng)分析回答以下問

5、題：(1)制備單克隆抗體過程中要用到 和 技術(shù)。(2)制備單克隆抗體過程中，給小鼠注射的HCG相當(dāng)于,注射后小 鼠身體發(fā)生了相應(yīng)的免疫反響，生成了 和 等細(xì)胞以及，此過程屬于特異性免疫中的 免疫。(3)此過程生產(chǎn)的單克隆抗體可以與 發(fā)生特異性結(jié)合，從而診斷早孕。(4)在動(dòng)物細(xì)胞原代培養(yǎng)過程中，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到細(xì)胞外表時(shí)，細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的 o此時(shí)，瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是o而在體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞時(shí)，瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是I解析(1)制備單克隆抗體的誘導(dǎo)過程有：正常小鼠進(jìn)行免疫處理、動(dòng)物細(xì) 胞融合、雜交瘤細(xì)胞的篩選與培養(yǎng)、專一抗體檢測陽性細(xì)胞培養(yǎng)、單克隆抗體的 提純。因此，

6、該過程要用到動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)。(2)題圖是抗HCG單克隆抗體制備流程示意圖，給小鼠注射的HCG相當(dāng)于 抗原，使小鼠產(chǎn)生記憶細(xì)胞和分泌抗HCG抗體的漿細(xì)胞，抗體是參與體液免疫 的免疫活性物質(zhì)。(3)抗體與抗原發(fā)生特異性結(jié)合，人絨毛膜促性腺激素(或HCG)相當(dāng)于抗原， 可以與抗HCG單克隆抗體發(fā)生特異性結(jié)合。(4)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，當(dāng)細(xì)胞外表相互接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增 殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。由于接觸抑制，在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，瓶壁上 只能形成單層細(xì)胞，而在體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞時(shí)，具有無限增殖的特點(diǎn)，瓶壁上 形成多層細(xì)胞。答案(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 動(dòng)物細(xì)胞融合(2)抗原漿細(xì)胞

7、記憶細(xì)胞抗體體液(3)人絨毛膜促性腺激素(或HCG)(4)相互接觸接觸抑制一層(或單層)多層題組三干細(xì)胞技術(shù)及其應(yīng)用.治療性克隆有望解決供體器官的短缺和器官移植出現(xiàn)的排異反響等問題。 以下圖表示治療性克隆的過程，以下有關(guān)表達(dá)不正確的選項(xiàng)是()病人他一健康體細(xì)胞叫 細(xì)胞核 幽去核卵母細(xì)胞應(yīng)用治療臟器組織細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞等臟器組織干細(xì)胞、神經(jīng)組織干細(xì)胞等胚胎干細(xì)胞重組細(xì)胞A.上述過程利用了動(dòng)物體細(xì)胞核移植和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)B.上述過程充分說明動(dòng)物細(xì)胞具有全能性C.過程的完成離不開胚胎干細(xì)胞的增殖和分化D.過程都發(fā)生了 DNA的復(fù)制和蛋白質(zhì)的合成B 圖示過程利用了動(dòng)物體細(xì)胞核移植和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)

8、。圖示過程 中，由于最終沒有形成完整個(gè)體且移植的是病人體細(xì)胞的細(xì)胞核，故不能說明動(dòng) 物細(xì)胞具有全能性。過程都有細(xì)胞的增殖、分化，因此都會(huì)發(fā)生DNA的復(fù) 制和蛋白質(zhì)的合成。.以下圖為哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞及其分化的示意圖。請(qǐng)回答以下問題。皮膚干細(xì)胞 造血干細(xì)胞 神經(jīng)干細(xì)胞肝組織干細(xì)胞I , I I皮膚細(xì)胞|神經(jīng)細(xì)胞肝細(xì)胞紅細(xì)胞白細(xì)胞血小板(1)在機(jī)體內(nèi)，皮膚干細(xì)胞分化成皮膚細(xì)胞是機(jī)體細(xì)胞中基因的結(jié)果。(2)某患者不能產(chǎn)生正常的白細(xì)胞，通過骨髓移植可以到達(dá)治療的目的。骨 髓移植的實(shí)質(zhì)是將圖中的 細(xì)胞移植到患者體內(nèi)。(3)假設(shè)要克隆某種哺乳動(dòng)物，從理論上分析，上述紅細(xì)胞、白細(xì)胞、皮膚細(xì) 胞、神經(jīng)細(xì)胞中

9、不能選用作為供體的細(xì)胞是成熟的，其原因是(4)假設(shè)某藥物可抑制肝腫瘤細(xì)胞DNA的復(fù)制，使用該藥物可使肝腫瘤細(xì)胞停 留于細(xì)胞周期的 期。解析（1）細(xì)胞分化是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果。（2）骨髓是人體的造血組織， 存在造血干細(xì)胞，骨髓治療的實(shí)質(zhì)是將題圖的造血干細(xì)胞移植到患者體內(nèi)。（3） 克隆某種哺乳動(dòng)物需要供體提供細(xì)胞核，而成熟的紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核，所以不能 作為供體。（4）DNA分子的復(fù)制在細(xì)胞分裂間期進(jìn)行。答案（1）選擇性表達(dá)（2）造血干（3）紅細(xì)胞 成熟的紅細(xì)胞中無細(xì)胞核 （4）間6組素養(yǎng)培優(yōu)練.利用細(xì)胞工程方法，以SARS病毒核衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體。 以下相關(guān)表達(dá)正確的選項(xiàng)是（）A.將

10、純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，產(chǎn)生的血清抗體為單克隆抗 體B.體外培養(yǎng)單個(gè)B細(xì)胞可以獲得大量針對(duì)SARS病毒的單克隆抗體C.將等量B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合，經(jīng)PEG誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞均為雜交 瘤細(xì)胞D.利用該單克隆抗體與SARS病毒核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法可診斷出 病毒感染者D 經(jīng)過抗原刺激后的B細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合，產(chǎn)生雜交瘤細(xì)胞， 克隆化培養(yǎng)并經(jīng)抗體檢測篩選后的雜交瘤細(xì)胞能產(chǎn)生特異性強(qiáng)、靈敏度高的單克 隆抗體。SARS病毒感染者體內(nèi)有SARS病毒核衣殼蛋白，用相應(yīng)的單克隆抗體 與之發(fā)生特異性結(jié)合的方法可診斷出病毒感染者，D正確。.（多項(xiàng)選擇）右圖為細(xì)胞融合的示意圖，以下表達(dá)正確的選

11、項(xiàng)是（）A.假設(shè)a細(xì)胞和b細(xì)胞是植物細(xì)胞，需先脫分化再誘導(dǎo)融合a b TOC o 1-5 h z a細(xì)胞和b細(xì)胞之間的融合需要促融處理后才能實(shí)現(xiàn);一C.c細(xì)胞的形成與a、b細(xì)胞膜的流動(dòng)性都有關(guān)守D.c細(xì)胞將同時(shí)表達(dá)a細(xì)胞和b細(xì)胞中的所有基因（o）cBC 假設(shè)a細(xì)胞和b細(xì)胞是植物細(xì)胞，應(yīng)該先用酶解法去 一掉它們的細(xì)胞壁再誘導(dǎo)融合，A錯(cuò)誤；無論是動(dòng)物細(xì)胞還是植物細(xì)胞，兩個(gè)細(xì)胞 的融合都需要促融處理后才能實(shí)現(xiàn)，B正確；兩個(gè)細(xì)胞融合成一個(gè)細(xì)胞，利用了 細(xì)胞膜的流動(dòng)性，C正確；c細(xì)胞同時(shí)具備了 a細(xì)胞和b細(xì)胞中的所有基因，但是基因是選擇性表達(dá)的，因此c細(xì)胞中基因不一定都能夠表達(dá)，D錯(cuò)誤。.在單克隆抗體制

12、備中，關(guān)于雜交瘤細(xì)胞制備的表達(dá)，正確的選項(xiàng)是（）A.可利用電激等物理方法直接誘導(dǎo)兩個(gè)細(xì)胞的融合B.可利用細(xì)胞中染色體的數(shù)目和形態(tài)篩選出雜交瘤細(xì)胞C.利用了細(xì)胞膜的流動(dòng)性和基因重組等原理D.用選擇培養(yǎng)基篩選得到的雜交瘤細(xì)胞可直接用于生產(chǎn)單克隆抗體A 誘導(dǎo)細(xì)胞融合通常有物理法、化學(xué)法、生物法等，電激和離心是常用 的物理融合法，A正確；雜交瘤細(xì)胞的篩選需要使用特定的選擇培養(yǎng)基，觀察細(xì) 胞染色體數(shù)目和形態(tài)只能判斷細(xì)胞是否融合，B錯(cuò)誤；雜交瘤細(xì)胞的制備利用了 細(xì)胞膜的流動(dòng)性，但不涉及基因重組，C錯(cuò)誤；經(jīng)選擇培養(yǎng)基篩選出的雜交瘤細(xì) 胞還需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測，才能用于生產(chǎn)單克隆抗體，D錯(cuò)誤。.以

13、下圖是一種“生物導(dǎo)彈”的作用原理示意圖，沒有與腫瘤細(xì)胞結(jié)合的 “生物導(dǎo)彈”，一段時(shí)間后被機(jī)體清除。阿霉素是一種抗腫瘤藥，可抑制DNA 和RNA的合成，對(duì)正常細(xì)胞也有一定毒性。以下說法不正確的選項(xiàng)是（）A.單克隆抗體是由雜交瘤細(xì)胞合成和分泌的B.活化阿霉素能抑制細(xì)胞中的DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄過程C.在治療中，應(yīng)先注射非活化磷酸阿霉素再注射生物導(dǎo)彈D.單克隆抗體特異性強(qiáng)，能減輕阿霉素對(duì)正常細(xì)胞的傷害C 單克隆抗體是由骨髓瘤細(xì)胞和B細(xì)胞融合形成的雜交瘤細(xì)胞合成和分 泌的，A正確；活化阿霉素抑制DNA和RNA的合成，DNA合成要經(jīng)過DNA 的復(fù)制，RNA的合成要經(jīng)過DNA的轉(zhuǎn)錄，B正確；根據(jù)圖中信息可知，阿

14、霉素 的活化需要生物導(dǎo)彈攜帶的堿性磷酸酶，所以在治療中，應(yīng)先注射生物導(dǎo)彈再注 射非活化磷酸阿霉素，但不能間隔時(shí)間太長，因?yàn)闆]有與腫瘤細(xì)胞結(jié)合的“生物 導(dǎo)彈”一段時(shí)間后被機(jī)體清除，C錯(cuò)誤；單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備的特點(diǎn)，根據(jù)特異性強(qiáng)這一特點(diǎn)，在該過程中是針對(duì)腫瘤細(xì)胞的，所 以能減輕阿霉素對(duì)正常細(xì)胞的傷害，D正確。.動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。 現(xiàn)在己經(jīng)廣泛應(yīng)用于多種學(xué)科的研究工作中，特別是新開展起來的雜交瘤技術(shù), 為制備單克隆抗體開辟了新途徑。研究說明DNA合成有兩條途徑：“S途徑” 和“D途徑”，淋巴細(xì)胞（漿細(xì)胞）有“S途徑”和“D途徑”，

15、骨髓瘤細(xì)胞只有 “D途徑”，HAT培養(yǎng)液中氨基喋吟可以阻斷DNA合成的“D途徑”。以下圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖?；卮鹨韵聠栴}:將特定的抗聯(lián)注入小骨制相細(xì)SS（不能在HAT培 養(yǎng)基上生長）混合并進(jìn)行某些淋巴爆胞（產(chǎn)生特界抗體）韁跑眼合. 轉(zhuǎn)到HAT 培養(yǎng)罌上 培養(yǎng)朵交相 加胞分 開靖苑未眩合 韁胞死亡 雜交值 細(xì)胞生長選育出產(chǎn)生 島特異性抗體的期胞（1）技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)。單克隆細(xì)胞是指單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比，最大的優(yōu)越性是（4）雜交瘤細(xì)胞既具有骨髓瘤細(xì)胞的 的特點(diǎn)，又具備淋巴細(xì)胞的 的特點(diǎn)。（5）圖示過程，有兩次篩選。第一次是用HAT培養(yǎng)液篩選出雜交瘤細(xì)胞，那 么淋巴細(xì)

16、胞（漿細(xì)胞）在HAT培養(yǎng)液中不生長的原因是,骨髓瘤細(xì)胞在HAT培養(yǎng)液中不生長的原因是解析（1）單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)。（2） 單個(gè)細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群為單克隆細(xì)胞。（3）與常規(guī)抗體相比，單克隆抗體的 優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備。（4）雜交瘤細(xì)胞具有骨髓瘤細(xì)胞的能 在體外無限增殖和淋巴細(xì)胞的能產(chǎn)生特異性抗體的特點(diǎn)。（5）淋巴細(xì)胞不增殖， 而骨髓瘤細(xì)胞的DNA合成途徑被氨基喋吟阻斷而不能進(jìn)行DNA復(fù)制，導(dǎo)致骨 髓瘤細(xì)胞不能在HAT培養(yǎng)基中生長。答案（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合（2）單個(gè)細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群 特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備（4）在體外大量增

17、殖（無限增殖）分泌特異 性抗體（5）缺乏在體外培養(yǎng)液中增殖的能力 其DNA合成途徑被氨基喋吟阻 斷而不能進(jìn)行DNA復(fù)制易錯(cuò)點(diǎn)不能準(zhǔn)確區(qū)分單克隆抗體制備過程中的兩次篩選.以下是應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)獲取單克隆抗X抗體的具體操作步驟， 其中對(duì)單克隆抗體制備的相關(guān)表達(dá)不正確的選項(xiàng)是（）從患骨髓瘤的小鼠體內(nèi)獲取骨髓瘤細(xì)胞將X抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗X抗體的B細(xì)胞將雜交瘤細(xì)胞注入小鼠腹腔培養(yǎng)篩選出能產(chǎn)生抗X抗體的雜交瘤細(xì)胞利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞從腹水中提取抗體利用促細(xì)胞融合因子使兩種細(xì)胞發(fā)生融合A.實(shí)驗(yàn)順序應(yīng)當(dāng)是B.過程中產(chǎn)生的多個(gè)雜交瘤細(xì)胞稱為克隆C.過程獲得的細(xì)胞均可無限增殖D.利用細(xì)胞融合生產(chǎn)單克隆抗體過程中通常要經(jīng)過兩次篩選C 單克隆抗體制備的實(shí)驗(yàn)順序：從患骨髓瘤的小鼠體內(nèi)獲取骨髓瘤細(xì)胞 f將X抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗X抗體的B細(xì)胞f利用促細(xì)胞