慢性高尿酸血癥大鼠模型建立方法的探討

1、慢性高尿酸血癥大鼠模子創(chuàng)立要領的探究慢性高尿酸血癥大鼠模子創(chuàng)立要領的探究【關鍵詞】高尿酸血癥;腺嘌呤;酵母;尿酸酶按捺劑;模子,動物;大鼠,istar【摘要】目的探究慢性高尿酸血癥大鼠模子的創(chuàng)立要領。要領雌性istar大鼠40只，隨機分為比擬組和模子組,模子組飼以高酵母飼料并賜與腺嘌呤100g/(kgd)灌胃,按期監(jiān)測大鼠血尿酸程度，血尿酸程度開始落落時，革新造模要領，模子組飼以高酵母飼料，并以腺嘌呤溶液50g/(kgd)灌胃，同時賜與氧嗪酸鉀乳懸液100g/(kgd)分2次皮下注射，以維持大鼠高尿酸血病癥態(tài)。效果實行第14天始,模子組大鼠血尿酸水均勻明顯高于比擬組(t=5.4388.404,

2、p0.05)。結論以高酵母飼料加腺嘌呤灌胃并適時賜與氧嗪酸鉀乳懸液皮下注射所復制的大鼠慢性高尿酸血癥模子，具有血尿酸值高、維持時間長、模子不變的特點?！娟P鍵詞】高尿酸血癥;腺嘌呤;酵母;尿酸酶按捺劑;模子,動物;大鼠,istarkeyrdshyperurieia;adenine;yeast;uriaseinhibitr;del,anial;rat,istar1質(zhì)料與要領1.1實行動物1.2實行儀器和試劑1.3種種灌胃液及高酵母飼料的制備1.4實行分組及要領大鼠順應性豢養(yǎng)7d后，隨機分為比擬組20只、模子組20只。按照文獻7的要領，模子組飼以質(zhì)量分數(shù)0.10的高酵母飼料，并以100g/(kgd)

3、腺嘌呤溶液灌胃，以制備高尿酸血癥模子;比擬組飼以平凡大鼠顆粒飼料，并賜與同體積蒸餾水灌胃。每周監(jiān)測血尿酸程度變革，第7周血尿酸程度開始落落時，革新造模要領，模子組飼以質(zhì)量分數(shù)0.10的高酵母飼料，并以50g/(kgd)腺嘌呤溶液灌胃，同時賜與氧嗪酸鉀乳懸液100g/(kgd)分2次皮下注射，以維持大鼠高尿酸血病癥態(tài);比擬組飼以平凡大鼠顆粒飼料，并賜與同體積蒸餾水灌胃，繼承監(jiān)測血尿酸程度。1.5實行指標檢測1.6統(tǒng)計要領2效果2.1兩組一樣平常狀態(tài)比力隨著造模時間的延伸，模子組飲水量漸漸增長，最高飲水量達比擬組的23倍;同時體質(zhì)量漸漸落落，尿量漸漸增多，體毛凋謝無光芒、精力委靡、運動淘汰等，嚴峻

4、者出現(xiàn)肌肉震顫、抽搐，衰竭而殞命，本組共殞命6只大鼠。比擬組飲水量、尿量、體質(zhì)量無顯著變革，反響機靈，運動正常，體毛有光芒，無大鼠殞命。2.2兩組血生化程度比力2周后模子組大鼠血清sua程度顯著升高，與比擬組比擬差異均有明顯意義(t=5.4388.404，p0.05)。見表1。模子組大鼠3、10周的血清bun、r、t程度與比擬組比擬差異有明顯性(t=2.53012.232,p0.05)。見表2、3。2.3尿液變革模子組3周后尿量漸漸增長，腎臟分泌尿酸成效減退，尿尿酸淘汰，同時尿密度減低，5周時與比擬組比擬差異均有明顯性(t=5.55318.296，p0.05)。見表4。表1兩組大鼠差異時期血尿

5、酸程度比力表2兩組大鼠3周時血生化程度比力表3兩組大鼠10周時血生化程度比力表4高嘌呤飲食5周后大鼠24h尿量、飲水量、尿密度及尿尿酸的比力(s)組別24h尿量(v/l)24h飲水量(v/l)尿密度尿尿酸2.4病理變革比擬組大鼠腎臟外不雅無腫脹，色紅有光芒，包膜易于剝離，腎小球、腎小管形態(tài)正常，皮質(zhì)、髓質(zhì)分界明晰。模子組大鼠腎臟體積增大，兩腎呈灰白色，外貌呈顆粒狀，腎包膜與腎本色粘連不易剝離，切面皮髓質(zhì)分界不清。光鏡查抄：比擬組腎小球囊腔內(nèi)未見非常物質(zhì),腎曲小管、聚集管亦未見非常病變。模子組部門腎小球萎縮，數(shù)目淘汰，腎小管濁腫,腎小管及間質(zhì)部位有較多的尿酸鹽結晶沉積,結晶四周可見異物巨細胞反響

6、，間質(zhì)有灶性淋巴細胞浸潤，個體地區(qū)有灶性纖維化;高倍鏡下不雅察腎小管間質(zhì)部位,可見尿酸鹽結晶呈針狀、雙折光放射形擺列。3討論尿酸是人類嘌呤代謝的終產(chǎn)物，其血中濃度受遺傳和情況兩種因素的影響。原發(fā)性痛風的病因,除1%2%的病人與先本性酶缺陷有關外,多數(shù)病因不明,但臨床可見有相稱一部門因進食高嘌呤飲食而誘發(fā)。高嘌呤飲食可使sua濃度升高,乃至到達相稱于痛風病人的程度9。以是,高尿酸血癥是痛風緊張的生化底子,痛風傷害性與sua程度有顯著的相干性1。比年來，高尿酸血癥和痛風的發(fā)病率漸漸上升，發(fā)病年事提早，對其病因學、盛行病學、分子遺傳學的研究漸成為熱門。臨床治療正成為各人所存眷的題目。高尿酸血癥動物模

7、子的創(chuàng)立，為開拓研究驗證治療藥物提供了一種有用途徑，而至今國表里尚沒有關于慢性高尿酸血癥模子制備的同一報道，有待于進一步探究。如今關于高尿酸血癥動物模子的制備，國表里尚未有明白同一的要領，此中氧嗪酸鉀作為體內(nèi)尿酸酶的有用按捺劑用于制備高尿酸血癥動物模子的要領由于敏捷、輕便、重復性好，在國際上已普及得到接納，但一樣平常為短期造模。本實行選用雌性istar大鼠，團結應用酵母飼料飼喂、腺嘌呤灌胃和尿酸酶按捺劑皮下注射制備慢性高尿酸血癥模子,不雅察sua程度及腎成效變革。實行第14天始,模子組sua水均勻明顯高于比擬組,提示高尿酸血癥模子制備樂成。同時,模子組r、bun程度亦高于比擬組(p0.05)。

8、實行第5周,腎臟切片光鏡下可見腎小管濁腫,腎小管及間質(zhì)部位有尿酸鹽結晶沉積,間質(zhì)有出血及大量炎性細胞浸潤,全部這些病理特性與臨床上高尿酸血癥所致痛風性腎病較為相似。本實行團結應用酵母飼料飼喂、腺嘌呤灌胃和尿酸酶按捺劑皮下注射，可以使模子組sua程度顯著升高且維持凌駕12周，可以樂成制備大鼠慢性高尿酸血癥動物模子,團結利用尿酸酶按捺劑前后模子組sua比力無統(tǒng)計學差異,高尿酸血癥模子較不變。別的，模子組大鼠t顯著高于比擬組，這與臨床上高尿酸血癥和痛風病人易歸并脂代謝紊亂相切合。應該認可,如今尚無抱負的動物模子問世。本實行團結應用幾種模子,在時效性、不變性方面有所改進，但仍存在不敷。人體產(chǎn)生的尿酸約有2/3經(jīng)腎臟隨尿液去除,因此,高尿酸血癥一定影響到腎成效的減退10。本實行模子組大鼠出現(xiàn)尿酸鹽腎臟沉積征象，導致腎臟分泌尿酸成效減退，尿尿酸淘汰以及尿量增多、尿密度減低，團結腎臟免疫組化染色光鏡下腎小管濁腫