第六篇胺類藥物分析

1、第六章胺類藥物的分析1.芳胺類藥物的分析芳胺類藥物主要分為兩類：一類為芳伯氨基未被取代，而在芳環(huán)對(duì)位有取代的 對(duì) 氨基苯甲酸酯類。另一類則為芳伯氨基被?；?，并在芳環(huán)對(duì)位有取代的 酰胺類藥 物。一、 結(jié)構(gòu)與性質(zhì)（一）對(duì)氨基苯甲酸酯類藥物本類藥物分子中都具有對(duì)氨基苯甲酸酯的母體，結(jié)構(gòu)通式如下：1、典型藥物：苯佐卡因、鹽酸普魯卡因和鹽酸丁卡因等局部麻醉藥。結(jié)構(gòu)為 ：HzhH）rCOOC# 也劑06一 HCI苯佐卡因鹽酸普魯卡因（Benzocaine） （Procaine Hydrochloride）CHs （CHe） $MH-X：OOCMH州 恤）J . HCI鹽酸丁卡因（Tetracaine Hy

2、drochloride）鹽酸普魯卡因胺（抗心律失常藥）因其化學(xué)性質(zhì)與本類藥物很相似，也在此 一并列入討論。其結(jié)構(gòu)如下：也N-qQC0NHCH2cMM （CiHs）HCI2、主要化學(xué)性質(zhì)1）芳伯氨基特性顯重氮化-偶合反應(yīng)；與芳醛縮合反應(yīng)；易氧化變色等。2）水解特性含酯鍵（或酰胺鍵）易水解。其水解的快慢受光線、熱或堿性 條件的影響。水解產(chǎn)物主要為對(duì)氨基苯甲酸（PABA）。3）弱堿性 除苯佐卡因外，因其脂爛胺側(cè)鏈為叔胺氮原子，故具有弱堿性。因此能與生物堿沉淀劑發(fā)生沉淀反應(yīng);非水溶劑中能滴定。但在水溶液中不能用標(biāo)準(zhǔn)酸直接滴定，在4）其它特性 本類藥物的游離堿多為堿性油狀液體或低熔點(diǎn)固體， 難溶于水,

3、可溶于有機(jī)溶劑。其鹽酸鹽均系白色結(jié)晶性粉末，具有一定的熔點(diǎn)，易溶于水和 乙醇，難溶于有機(jī)溶劑。（二）酰胺類藥物本類藥物均系苯胺的?；苌?，其共性是具有芳酰氨基，基本結(jié)構(gòu)為：巧出1、典型藥物：對(duì)乙酰氨基酚（撲熱息痛）等解熱鎮(zhèn)痛藥、鹽酸利多卡因和 鹽酸布比卡因等局部麻醉藥及醋氨苯碉抗麻風(fēng)藥。結(jié)構(gòu)為：0及O。/皿冊(cè)-喉城對(duì)乙酰氨基酚醋氨苯碉（Paracetamol） （Acedapsone）鹽酸利多卡因鹽酸布比卡因（Lidocaine Hydrochloride） （Bupivacaine Hydrochloride）2、主要化學(xué)性質(zhì)1）水解后顯芳伯氨基特性 芳酰氨基在酸性溶液中易水解為芳伯氨基，

4、并顯 芳伯氨基特性反應(yīng)。水解反應(yīng)的速度受空間位阻影響：對(duì)乙酰氨基酚 利多卡因、 布比卡因。2）水解產(chǎn)物易酯化對(duì)乙酰氨基酚和醋氨苯碉 一醋酸一醋酸乙酯的香味。3）酚羥基特性對(duì)乙酰氨基酚（FeCl3）。4）弱堿性 利多卡因和布比卡因的脂爛胺側(cè)鏈有叔胺氮原子，顯堿性，可以成 鹽，與生物堿沉淀劑發(fā)生沉淀反應(yīng)。其中與三硝基苯酚試液反應(yīng)生成的沉淀具有定的熔點(diǎn)5）與重金屬離子發(fā)生沉淀反應(yīng) 鹽酸利多卡因和鹽酸布比卡因酰氨基上的 氮可在水溶液中與銅離子或鉆離子絡(luò)合， 生成有色的配位化合物沉淀。此沉淀可 溶于氯仿等有機(jī)溶劑后呈色。此外，本類藥物的紫外吸收和紅外吸收光譜特征均可供分析用。二、鑒別試驗(yàn) （一）重氮化-

5、偶合反應(yīng)分子結(jié)構(gòu)中具有芳伯氨基或潛在芳伯氨基的藥物， 均可發(fā)生重氮化反應(yīng)，生成的 重氮鹽可與堿性p-蔡酚偶合生成有色的偶氮染料。苯佐卡因、鹽酸普魯卡因和鹽酸普魯卡因胺（鹽酸溶液中）+亞硝酸鈉進(jìn)行重氮化 反應(yīng)；對(duì)乙酰氨基酚和醋氨苯碉（鹽酸或硫酸）加熱水解+亞硝酸鈉進(jìn)行重氮化反應(yīng)。如鹽酸普魯卡因的鑒別反應(yīng)如下:又如對(duì)乙酰氨基酚的鑒別方法取本品約0.1g,加稀鹽酸5ml,置水浴中加熱40 分鐘，放冷；取0.5ml,滴加亞硝酸鈉試液5滴，搖勻，用水3ml稀釋后，加堿 性B蔡酚試液2ml,振搖，即顯紅色。反應(yīng)式見前面幾章。鹽酸丁卡因結(jié)構(gòu)中的芳香仲胺在酸性溶液中與亞硝酸鈉反應(yīng)，生成乳白色的N-亞硝基化合物

6、沉淀（可與具有芳伯氨基的同類藥物區(qū)別）。（二）與三氯化鐵反應(yīng)-對(duì)乙酰氨基酚（+FeCl3試液一藍(lán)紫色）。（三）與重金屬離子反應(yīng).與Cu2+和Co2+反應(yīng) 鹽酸利多卡因，在碳酸鈉試液中，與硫酸銅反應(yīng)生成 藍(lán)紫色配位化合物，溶于氯仿則顯黃色。 （鹽酸普魯卡因、鹽酸丁卡因和苯佐卡 因等無此反應(yīng)）。鹽酸利多卡因，在酸性溶液中與氯化鉆試液反應(yīng)，生成亮綠色細(xì)小鉆鹽沉淀。.與Hg2+反應(yīng) 鹽酸利多卡因+硝酸汞試液煮沸顯黃色；對(duì)氨基苯甲酸 酯類藥物顯紅色或橙黃色，可與之區(qū)別。.羥質(zhì)酸鐵鹽反應(yīng)鹽酸普魯卡因胺分子中具有芳酰胺結(jié)構(gòu)，加入濃過氧化氫 溶液，緩緩加熱至沸后，先被氧化成羥肪酸，再與三氯化鐵作用形成配位化合

7、物 羥肪酸鐵，其溶液顯紫紅色，隨即變?yōu)榘底厣磷睾谏?。中?guó)藥典95年版采用本法鑒別鹽酸普魯卡因胺。（四）水解產(chǎn)物反應(yīng)本類藥物分子中有些具有酯的結(jié)構(gòu)， 在堿性條件下水解，利用其水解產(chǎn)物與 試劑的反應(yīng)進(jìn)行鑒別。中國(guó)藥典95年版采用此法鑒別鹽酸普魯卡因、 苯佐卡因。 1.鹽酸普魯卡因的鑒別方法取本品約0.1g,加水2ml溶解后，加10%氫氧化鈉溶液1ml,即生成白色沉淀，加熱變?yōu)橛蜖钗铮ㄆ蒸斂ㄒ颍?；繼續(xù)加熱，產(chǎn)生 的蒸汽（二乙氨基乙醇）能使?jié)駶?rùn)的紅色石蕊試紙變?yōu)樗{(lán)色；熱至油狀物消失后 （生成可溶于水的對(duì)氨基苯甲酸鈉），放冷，加酸酸化，即析出白色沉淀。此沉 淀能溶于過量的鹽酸。2.苯佐卡因的鑒別方法

8、取本品約0.1g,加氫氧化鈉試液5ml,煮沸，即有 乙醇生成，加碘試液，加熱，即生成黃色沉淀，并發(fā)生碘仿的臭氣。（五）制備衍生物測(cè)熔點(diǎn)（六）紫外特征吸收光譜（七）紅外吸收光譜紅外吸收光譜具有特征性強(qiáng)，專屬性好的特點(diǎn)。因此，國(guó)內(nèi)外藥典均把紅外 吸收光譜作為一種鑒別方法，而且采用該法鑒別的藥品不斷增加。如中國(guó)藥典（1995年版）用紅外吸收光譜法鑒別的藥品，由 1990年版的207種增加到316 種。該法特別適用于化學(xué)結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜、 化學(xué)結(jié)構(gòu)相互之間差別較小的藥物的鑒 別與區(qū)別。因?yàn)檫@些藥物采用其他理化方法難以進(jìn)行區(qū)別，而用紅外吸收光譜法 就比較容易區(qū)別。以鹽酸普魯卡因與鹽酸普魯卡因胺的紅外圖譜為例

9、說明。（見圖6-1,2及表6-2） 四、雜質(zhì)檢查（一）對(duì)乙酰氨基酚的雜質(zhì)檢查合成工藝：A、對(duì)硝基氯苯-水解-對(duì)硝基酚-還原-對(duì)氨基酚-乙?；?，制得； B、酚-亞硝化、還原-對(duì)氨基酚，乙酰化。在生產(chǎn)過程中除可能引入一般雜質(zhì) 外，還可能引入特殊的雜質(zhì)。.乙醇溶液的澄清度與顏色 生產(chǎn)工藝中使用鐵粉作為還原劑，可能帶入成 品中，致使乙醇溶液產(chǎn)生渾濁。中間體對(duì)氨基酚的有色氧化產(chǎn)物， 在乙醇中顯橙 紅色或棕色。檢查方法 取本品1.0g,加乙醇10ml溶解后，溶液應(yīng)澄清，無色；如顯渾 濁，與1號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液比較，不得更濃；如顯色，與棕紅色 2號(hào)或橙紅色2號(hào)標(biāo) 準(zhǔn)液比較，不得更深。.有關(guān)物質(zhì) 由于本品的生產(chǎn)工藝

10、路線較多，不同生產(chǎn)工藝路線所帶入的雜質(zhì)也 有所不同，這些雜質(zhì)主要包括中間體、副產(chǎn)物及分解產(chǎn)物。例如：對(duì)氨基酚、對(duì) 氯乙酰苯胺、O-乙?；鶎?duì)乙酰氨基酚、偶氮苯、氧化偶氮苯、苯酶和酶亞胺等。 以對(duì)硝基氯苯為原料，可能引入對(duì)氯乙酰苯胺，藥典采用薄層色譜法對(duì)此項(xiàng)雜質(zhì) 進(jìn)行限度檢查。檢查方法取本品的細(xì)粉1.0g,置具塞離心管或試管中，加乙醴 5ml,立即 密塞，振搖30分鐘，離心或放置澄清，取上清液作為供試品溶液；另取每 1ml 中含對(duì)氯乙酰苯胺1.0mg的乙醇溶液適量，用乙醴稀釋成每 1ml中含50g的溶 液作為對(duì)照液。吸取供試品溶液200仙與對(duì)照溶液40間分別點(diǎn)于同一硅膠GF254 薄板上。以氯仿丙

11、酮甲苯（13:5:2）為展開劑，展開后，晾干，置紫外光燈 （254nm）下檢視，供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，與對(duì)照溶液的主斑點(diǎn)比較，不得 更大，更深。.對(duì)氨基酚 本品在合成過程中，由于乙?；煌耆蛸A藏不當(dāng)發(fā)生水解，均可 引入對(duì)氨基酚，使本品產(chǎn)生色澤并對(duì)人體有毒性，應(yīng)嚴(yán)格控制其限量。利用對(duì)氨基酚在堿性條件下可與亞硝基鐵氟化鈉生成藍(lán)色配位化合物，而對(duì)乙酰氨基酚無此反應(yīng)的特點(diǎn)，與對(duì)照品比較，進(jìn)行限量檢查。檢查方法取本品1.0g,力口甲醇溶液（1-2） 20ml溶解后，加堿性亞硝基鐵氟 化鈉試液1ml,搖勻，放置30min；如顯色，與對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品1.0g加對(duì)氨 基酚50窺用同一方法制成的對(duì)照液（臨

12、用配制）比較，不得更深（0.005%）。（二） 鹽酸普魯卡因注射液中對(duì)氨基苯甲酸的檢查普魯卡因分子結(jié)構(gòu)中有酯鍵，易發(fā)生水解反應(yīng)。其注射液制備過程中受滅菌溫度、 時(shí)間、溶液pH值、貯藏時(shí)間以及光線和金屬離子等因素的影響，可發(fā)生水解反 應(yīng)生成對(duì)氨基苯甲酸和2-二乙氨基醇。其中對(duì)氨基苯甲酸隨貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)或高 溫加熱，可進(jìn)一步脫竣轉(zhuǎn)化為苯胺，而苯胺又可被氧化為有色物，使注射液變黃, 療效下降，毒性增加。故中國(guó)藥典 90年版規(guī)定，本品注射液應(yīng)檢查水解產(chǎn)物對(duì) 氨基苯甲酸，其限度不得超過1.2%。檢查方法 精密量取本品，加乙醇稀釋使成為每1ml中含鹽酸普魯卡因2.5mg 的溶液，作為供試品溶液。取對(duì)氨基苯

13、甲酸對(duì)照品，加乙醇制成每1ml中含30肝 的溶液，作為對(duì)照品溶液。取上述兩種溶液各 10gl分別點(diǎn)于含有竣甲基纖維素 鈉為粘合劑的硅膠H薄層板上，用苯冰醋酸丙酮甲醇（14:1:1:4）為展開 劑，展開后，取出晾干，用對(duì)二甲氨基苯甲醛溶液（2%對(duì)二甲氨基苯甲醛乙醇 溶液100ml,加入冰醋酸5ml制成）噴霧顯色。供試品溶液如顯與對(duì)照品溶液相 應(yīng)的雜質(zhì)斑點(diǎn)，其顏色與對(duì)照品溶液主斑點(diǎn)比較，不得更深。五、含量測(cè)定（一）亞硝酸鈉滴定法本類藥物分子結(jié)構(gòu)中具有芳伯氨基或水解后具有芳伯氨基，在酸性溶液中可與亞 硝酸鈉反應(yīng)，可用亞硝酸鈉滴定法測(cè)定含量。由于本法適用范圍廣，常被國(guó)內(nèi)外 藥典所采用。中國(guó)藥典（199

14、5年版）收載用本法測(cè)定含量的有：苯佐卡因、鹽酸普魯卡因及其片劑，鹽酸普魯卡因胺及其片劑與注射液，醋酸氨苯碉及其注射液。.原理 芳伯氨基藥物在酸性溶液中與亞硝酸鈉定量反應(yīng)，生成重氮鹽，用永停法或外指示劑法指示反應(yīng)終點(diǎn)。十Ar-NHCOR + H;0 三一Ar-HHZ RCOOHAr-NH2 + NNO; + 2MC1 fir-NjCl + NaCl + H2O1.測(cè)定的主要條件重氮化反應(yīng)的速度受多種因素的影響，亞硝酸鈉滴定液及反 應(yīng)生成的重氮鹽也不夠穩(wěn)定，因此在測(cè)定中應(yīng)注意以下主要條件：1）加入適量澳化鉀加快反應(yīng)速度：在鹽酸存在下，重氮化反應(yīng)的歷程為:MaNOz + HC1 HHO： + HaC

15、lUNOj + HC1 a HOC1 + H?0+ ND iji* =Ar-NH：Ar-NlkHO Ar-N=N-OH*Ar-N;Cl慢快快整個(gè)反應(yīng)的速度取決于第一步，而第一步反應(yīng)的快慢與含芳伯氨基化合物中芳伯 氨基的游離程度有密切關(guān)系。如芳伯氨基的堿性較弱，則在一定強(qiáng)度酸性溶液中 成鹽的比例較小，即游離芳伯氨基多，重氮化反應(yīng)速度就快；反之，則游離芳伯 氨基較少，重氮化反應(yīng)速度就慢。所以，在測(cè)定中一般向供試溶液中加入適量澳 化鉀（中國(guó)藥典規(guī)定加入2g）,使重氮化反應(yīng)速度加快。澳化鉀與鹽酸作用產(chǎn)生澳化氫，后者與亞硝酸作用生成NOBr:HNO2 + HBr - NOBr + H2O （1）若供試溶

16、液中僅有HCl,則生成NOCl:HNO2 + HCl - NOCl + H2O （2）由于（1）式的平衡常數(shù)比（2）式的約大300倍，即生成的NOBr量大得多，也就是 在供試液中NO+的濃度大得多，從而加速了重氮化反應(yīng)。2）加過量鹽酸加速反應(yīng)：因胺類藥物的鹽酸鹽較其硫酸鹽的溶解度大，反應(yīng)速度也較快，所以多采用鹽酸。鹽酸的用量按其反應(yīng)，1mol的芳胺需與2mol的 鹽酸作用，但實(shí)際測(cè)定時(shí)往往加入過量的鹽酸，有利于：重氮化反應(yīng)速度加快； 重氮鹽在酸性溶液中穩(wěn)定；防止生成偶氮氨基化合物，而影響測(cè)定結(jié)果。 一Ar-NzCl + Rr -） ftr-N=N-NH-Ar + HCl酸度加大，反應(yīng)向左進(jìn)行，

17、故可以防止偶氮氨基化合物的生成。若酸度過大，又 可阻礙芳伯氨基的游離，反而影響重氮化反應(yīng)速度。在太濃的鹽酸中還可使亞硝 酸分解。所以，加入鹽酸的量一般按芳胺類藥物與酸的摩爾比約為1:2.56。3）室溫（1030 C）條件下滴定：通常溫度高，重氮化反應(yīng)速度快；但溫度太 高，可使亞硝酸逸失，并可使重氮鹽分解：一般溫度每升高10C,重氮化反應(yīng)速度加快2.5倍，但重氮鹽分解的速度亦相應(yīng) 地加速2倍；所以滴定一般在低溫下進(jìn)行。由于低溫時(shí)反應(yīng)太慢，經(jīng)試驗(yàn)，可在 室溫下進(jìn)行。4）滴定管尖端插入液面下滴定：重氮化反應(yīng)為分子反應(yīng)，反應(yīng)速度較慢，幫 滴定不宜過快。為了避免滴定過程中亞硝酸揮發(fā)和分解，滴定時(shí)將滴定管

18、尖端插 入液面下約2/3處，一次將大部分亞硝酸鈉滴定液在攪拌條件下迅速加入，使其 盡快反應(yīng)。然后將滴定管尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，再緩緩滴定。尤其 是在近終點(diǎn)時(shí)，因尚未反應(yīng)的芳伯氨基藥物的濃度極稀，須在最后一滴加入后， 攪拌15分鐘，再確定終點(diǎn)是否真正到達(dá)。這樣可以縮短滴定時(shí)間，也不影響 結(jié)果。3.指示終點(diǎn)的方法 有電位法、永停滴定法、外指示劑法和內(nèi)指示劑法等。 藥品標(biāo)準(zhǔn)中多采用永停滴定法或外指示劑法指示終點(diǎn)。1）永停滴定法：中國(guó)藥典規(guī)定用永停法指示亞硝酸鈉滴定法的終點(diǎn)。電極 應(yīng)為柏-伯電極系統(tǒng)。用亞硝酸鈉液滴定，終點(diǎn)前，溶液中無亞硝酸，線路無電 流通過，電流計(jì)指針指零。終點(diǎn)時(shí)溶液中有微

19、量亞硝酸存在， 電極即起氧化還原 反應(yīng)，線路中遂有電流通過，此時(shí)電流計(jì)指針突然偏轉(zhuǎn)，并不再回復(fù)，即為滴定 終點(diǎn)。2）外指示劑法：（二）非水溶液滴定法（三）分光光度法對(duì)乙酰氨基酚在0.4%氫氧化鈉溶液中，于257nm波長(zhǎng)處有最大吸收，具紫 外吸收光譜特征，可用于其原料及其制劑的含量測(cè)定。該法較亞硝酸鈉滴定法靈 敏度高，操作簡(jiǎn)便，因此被國(guó)內(nèi)外藥典所收載。如 USP （23）采用甲醇一水混合 溶劑，于244nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，與對(duì)照品溶液進(jìn)行對(duì)照測(cè)定其含量；而中 國(guó)藥典（1995年版）則米用百分吸收系數(shù)（匕加）法，測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚原料、 片劑、注射液、栓劑及膠囊劑的含量。.對(duì)乙酰氨基酚的測(cè)定.片劑

20、溶出度測(cè)定.分光光度法測(cè)定人唾液中對(duì)乙?；拥暮浚ㄋ模┍壬?參閱參考文獻(xiàn)（五）鹽酸普魯卡因胺的快速熒光測(cè)定-參閱參考文獻(xiàn)（六）高效液相色譜法用高效液相色譜法，以苯甲酸為內(nèi)標(biāo)，可以同時(shí)測(cè)定鹽酸普魯卡因注 射液中的普魯卡因及其降解產(chǎn)物對(duì)氨基苯甲酸 （PABA）,不需分離提取， 方法準(zhǔn)確簡(jiǎn)便。第二節(jié)苯乙胺類藥物的分析一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)（一）基本結(jié)構(gòu)與典型藥物本類藥物為擬腎上腺素類藥物，共性為具有苯乙胺的基本結(jié)構(gòu)。其中腎上 腺素、鹽酸異內(nèi)腎上腺素和鹽酸多巴胺分子結(jié)構(gòu)中苯環(huán)的3,4位上都有2個(gè)鄰位酚羥基，與兒茶酚類似，都屬于兒茶酚胺類藥物。藥典中收載本類 原料藥物近20種，本節(jié)在表6 3中僅列舉了 13

21、種，在鑒別、檢查和含 量測(cè)定等方面具有代表性的藥物供分析用。本類藥物的基本結(jié)構(gòu)為： R1-CH-CH-NH-R2加也表6-3苯乙胺類典型藥物（二）主要化學(xué)性質(zhì).弱堿性 本類藥物分子結(jié)構(gòu)中具有姓氨基側(cè)鏈，其氮為仲胺氮，故 顯弱堿性。其游離堿難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑，其鹽可溶于水。.酚羥基特性本類藥物分子結(jié)構(gòu)中具有鄰苯二酚（或苯酚）結(jié)構(gòu)， 可與重金屬離子絡(luò)合呈色，露置空氣中或遇光、熱易氧化，色漸變深，在 堿性溶液中更易變色。.光學(xué)活性 多數(shù)藥物分子結(jié)構(gòu)中具有手性碳原子，具有旋光性，可 供分析用。此外，藥物分子結(jié)構(gòu)中苯環(huán)上的其它取代基， 如鹽酸克侖特羅的芳伯 氨基，也各具特性均可供分析用。還可利用其

22、紫外吸收與紅外吸收光譜進(jìn) 行定性或定量分析。二、鑒別試驗(yàn)（一）與三氯化鐵反應(yīng)-酚羥基腎上腺素和鹽酸去氧腎上腺素等藥物的分子結(jié)構(gòu)中具有酚羥基，與 Fe3+離子絡(luò)合顯色，加入堿性溶液，隨即被高鐵離子氧化而顯紫色或紫 紅色。見表6-4。（二）與甲醛一硫酸反應(yīng)腎上腺素和鹽酸去氧腎上腺素等藥物可與甲醛在硫酸中反應(yīng)，形成具有釀式結(jié)構(gòu)的有色化合物。見 表6-4。（三）氧化反應(yīng)-酚羥基本類藥物分子結(jié)構(gòu)中多數(shù)具有酚羥基，易被碘、過氧化氫、鐵氟化鉀 等氧化劑氧化而呈現(xiàn)不同的顏色。如腎上腺素在中性或酸性條件下，被碘 或過氧化氫氧化后，生成腎上腺素紅，放置可變?yōu)樽厣嗑垠w；鹽酸異丙 腎上腺素在偏酸性條件下被碘迅速氧化

23、， 生成異內(nèi)腎上腺素紅，加硫代硫 酸鈉使碘的棕色消退，溶液顯淡紅色。重灑石酸去甲腎上腺素在上述條件下比較穩(wěn)定，幾乎不被碘氧化。為了與腎上腺素和鹽酸異內(nèi)腎上腺素相區(qū)別，中國(guó)藥典規(guī)定本品加酒石酸氫鉀飽 和溶液（pH 3.56）溶解，加碘試液放置5分鐘后，加硫代硫酸鈉試液， 溶液為無色或僅顯微紅色或淡紫色。在此條件下腎上腺素和鹽酸異內(nèi)腎上 腺素可被氧化產(chǎn)生明顯的紅棕色或紫色。在 pH 6.5的緩沖液中，這三種 藥物均可被碘氧化產(chǎn)生紅色。故在 pH 6.5條件下加碘試液，無法區(qū)別這 三種藥物。（四）紫外特征吸收與紅外吸收光譜（五）與亞硝基鐵氟化鈉反應(yīng)（Rimini試驗(yàn)）-脂肪伯氨基三、雜質(zhì)檢查（一）酮

24、體檢查（二）有關(guān)物質(zhì)檢查-參閱參考文獻(xiàn)（三）鹽酸苯乙雙月瓜中有關(guān)雙月瓜的檢查-參閱參考文獻(xiàn) 四、含量測(cè)定本類藥物的原料多采用非水溶液滴定法和澳量法測(cè)定含量，其制劑的測(cè)定方法較多，有提取容量法、陰離子表面活性劑滴定法、比色法、紫外 分光光度法和高效液相色譜法等。(一)非水溶液滴定法在列舉的13種典型藥物中，有10種藥物的原料藥均采用非水溶液滴 定法測(cè)定含量。常用的測(cè)定條件為：冰醋酸為溶劑，加入醋酸汞試液以消 除氫鹵酸的干擾，并用結(jié)晶紫指示液指示終點(diǎn)。僅鹽酸甲氧明測(cè)定中以蔡 酚苯甲醇指示終點(diǎn)；鹽酸苯乙雙月瓜和鹽酸克侖特羅的測(cè)定采用電位滴定 法。如堿性較弱，終點(diǎn)不明顯可加入醋酊，提高其堿性，使終點(diǎn)突

25、躍明顯。 其測(cè)定的主要條件詳見 表6-7。.重灑石酸去甲腎上腺素的測(cè)定取本品0.2g,精密稱定，加冰醋酸10ml,振搖溶解后(必要時(shí)微溫)，加結(jié)晶紫指示劑1滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，至溶液顯藍(lán)綠色，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml 的高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于 31.93mg 的 C8H11NO3.C4H406。 由于重灑石酸在冰醋酸溶液中酸性較弱，不干擾高氯酸的滴定和結(jié)晶紫指 示劑終點(diǎn)顏色的變化。故可以高氯酸直接滴定。.鹽酸克侖特羅的測(cè)定取本品約0.25g,精密稱定，加冰醋酸20ml,微熱使溶解，放冷，加醋酸汞試液 5ml,照電位滴定法，用高氯酸滴定液(0.

26、1mol/L)滴定，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每 1ml的高氯酸滴定 液(0.1mol/L)相當(dāng)于 31.37mg 的 C12H18Cl2N2O HCl。*醋酸汞的作用-消除氫鹵酸的干擾。*為何用電位法指示終點(diǎn)？-由于鹽酸克侖特羅的游離堿堿性較弱，終點(diǎn) 突躍不明顯。3.硫酸沙丁胺醇的測(cè)定取本品約0.4g,精密稱定，加冰醋酸10ml,微熱使溶解，放冷，加醋酊15ml和結(jié)晶紫指示液1滴用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每 1ml的高氯酸滴定 液(0.1mol/L)相當(dāng)于 57.67mg 的(C13H21NO3)2 H2SO4。有機(jī)堿的硫酸鹽，因硫酸在滴定液中酸性

27、很強(qiáng)，只能滴定至HSO4-0*為何在放冷的條件下加醋酊?-防止氨基被乙?；?，乙酰化物堿性很弱，如為伯氨基的乙酰化物，以結(jié) 晶紫為指示劑時(shí)不能被滴定，用電位滴定法尚可測(cè)定，但突躍很小，這樣 就會(huì)使滴定結(jié)果偏低。仲氨基的乙?；?，以指示劑法和電位滴定法都不 能被滴定。但在低溫時(shí)可防止乙?；约颖姿崛芙鈽悠泛?，應(yīng)在放 冷的條件下再加醋酊。（二）澳量法-參閱參考文獻(xiàn)（三）比色法利用藥物分子結(jié)構(gòu)中的酚羥基可與亞鐵離子絡(luò)合顯色，測(cè)定鹽酸異內(nèi)腎上腺素注射液和鹽酸多巴胺注射液的含量。也可利用分子結(jié)構(gòu)中的芳伯 氨基進(jìn)行重氮化-偶合反應(yīng)顯色， 測(cè)定鹽酸克侖特羅栓劑的含量。所以比 色法也是本類藥物制劑常用的含

28、量測(cè)定方法，具有靈敏和簡(jiǎn)便的優(yōu)點(diǎn)。以鹽酸克侖特羅栓的含量測(cè)定為例。.測(cè)定原理 加氯仿使栓劑基質(zhì)溶解后，用鹽酸液（9-100）提取鹽 酸克侖特羅，加亞硝酸鈉試液后，則分子中的芳伯氨基重氮化，在酸性溶 液中，與N-（1-蔡基）-乙二胺偶合顯色，在500nm波長(zhǎng)處進(jìn)行比色測(cè)定。.測(cè)定方法對(duì)照品溶液的制備：供試品溶液的制備：測(cè)定方法：（四）提取酸堿滴定法-參閱參考文獻(xiàn)（五）腎上腺素的熒光分光光度法-參閱參考文獻(xiàn)（六）高效液相色譜法利用液相色譜的高效分離、高靈敏度和高選擇性的測(cè)定方法，不但對(duì) 本類藥物制劑進(jìn)行常規(guī)分析，而且還廣泛用于本類藥物的臨床藥濃監(jiān)控和 體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)研究。第三節(jié) 氨基醴衍生物類藥物

29、的分析本類藥物為N,N二甲基一2-（二苯基甲氧基）乙胺鹽，典型藥物 有鹽酸苯海拉明、茶苯海明及其制劑。一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)（一）典型藥物的結(jié)構(gòu)酸苯海拉明 茶苯海明（Diphenhydramine Hydrochloride） （Dimendydrinate） 二、鑒別試驗(yàn)（一）與硫酸反應(yīng)顯色苯海拉明分子中具有二苯甲氧基的結(jié)構(gòu)，能與硫酸發(fā)生顯色反應(yīng)，反應(yīng)機(jī)理不明。鹽酸苯海拉明采用此法鑒別。（二）制備三硝基苯酚衍生物測(cè)熔點(diǎn) （熔點(diǎn)為128132C）（三）水解反應(yīng)（C6H5）2CHOH （1:2000） （四）與硝酸銀反應(yīng)形成白色沉淀鹽酸苯海拉明中的鹽酸與硝酸銀反應(yīng)形成AgClA（五）鹽酸苯海拉明的UV、

30、IRUV: /max 253nm 和 258nm。IR:除苯環(huán)及單取代苯的特征吸收外，于 2700cm.12400cm-1處有 叔胺鹽 N-H峰，1115cm-1有醴的 C-O峰。三、含量測(cè)定中國(guó)藥典1995年版規(guī)定的含量測(cè)定方法： 鹽酸苯海拉明：原料藥-非水溶液滴定法 片劑及其溶出度-酸性染料比色法 注射液-陰離子表面活性劑滴定法茶苯海明：原料藥-苯海拉明：非水溶液滴定法；8-氯茶堿:銀量法 片劑-高效液相色譜法（一）非水溶液滴定法鹽酸苯海拉明為有機(jī)堿的鹽酸鹽，在冰醋酸中加醋酸汞后，可定量地與高 氯酸生成苯海拉明的高氯酸鹽。茶苯海明為 8-氯茶堿的復(fù)鹽。其中苯海 拉明含量，可在冰醋酸中直接用高氯酸滴定液進(jìn)行測(cè)定。（二）銀量法