科技探索之路　細胞工程的發(fā)展歷程 (3)

1、植物體細胞雜交技術(shù)乾縣第二中學(xué) 鐘斌輪回顧問題1 ：植物組織培養(yǎng)的原理是？問題2：簡單說出植物組織培養(yǎng)的大體過程。問題：在自然界中番茄和馬鈴薯可以直接雜交嗎？ 植物體細胞雜交技術(shù)植物細胞A植物細胞B原生質(zhì)體A原生質(zhì)體B正在融合的原生質(zhì)體雜種細胞愈傷組織雜種植株去壁 1、不同植物的體細胞完成融合，遇到的第一個障礙是什么？ 二 、 合作探究植物細胞壁的存在 2、如何去除細胞壁呢？有沒有比較溫和的方法去除呢？去除細胞壁后的細胞結(jié)構(gòu)是？原生質(zhì)體的概念：除去細胞壁的植物細胞叫做原生質(zhì)體。酶解法-纖維素酶和果膠酶3、原生質(zhì)體如何融合在一起呢？融合的原理是什么？融合原理：細胞膜具有流動性人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合

2、方法：物理法：離心、振動、電刺激等 化學(xué)法：聚乙二醇（PEG） 4、假設(shè)原生質(zhì)體兩兩融合，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)什么類型的細胞？都是我們所需要的嗎？需要篩選ABAABB5、雜種細胞形成的標志是什么？再生細胞壁的形成提示：與細胞壁形成有關(guān)的細胞器是高爾基體和線粒體等6、如何將雜種細胞培育成雜種植株？植物組織培養(yǎng)技術(shù)雜種細胞愈傷組織去分化再分化植株 7、假設(shè)番茄是二倍體（2N=24，）,基因型為Aa,馬鈴薯是四倍體（4N=48）,基因型為Bb,經(jīng)植物體細胞雜交技術(shù)得到的雜種植株的染色體組數(shù)、染色體數(shù)及基因型？染色體組數(shù)=6N染色體數(shù)=72基因型為AaBb總結(jié)提升：體細胞雜交及兩個細胞融合成一個細胞，不管是

3、染色體、基因型還是染色體組都采用直接相加的方法。 8、為什么番茄-馬鈴薯既沒有結(jié)番茄，也沒長馬鈴薯？ 生物基因的表達不是孤立的，它們之間是相互調(diào)控、相互影響的，兩份遺傳物質(zhì)的表達受到相互干擾，所以不能再像馬鈴薯或番茄植株中的遺傳物質(zhì)一樣有序表達。三 、總結(jié)提升1.植物體細胞雜交的過程 植物細胞A植物細胞B原生質(zhì)體A原生質(zhì)體B正在融合的原生質(zhì)體雜種細胞愈傷組織雜種植株去壁植物細胞A植物細胞B原生質(zhì)體A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體融合正在融合的原生質(zhì)體再生出細胞壁雜種細胞愈傷組織雜種植株去細胞壁纖維素酶果膠酶物理方法化學(xué)方法：離心振動電刺激聚乙二醇（PEG）細胞分裂植物細胞融合酶解法人工誘導(dǎo)方法篩選植物體細

4、胞融合完成的標志植物組織培養(yǎng)2、植物體細胞雜交的原理細胞膜的流動性植物細胞的全能性 將不同種的植物體細胞，在一定條件下融合成雜種細胞，并把雜種細胞培育成新的植物體的技術(shù)。3、概念4、植物體細胞雜交的成果及意義 煙草海島煙草 胡蘿卜羊角芹白菜甘藍白菜甘藍植物體細胞雜交的意義 克服不同生物遠緣雜交不親和的障礙 打破生殖隔離 擴大了遺傳重組的范圍，實現(xiàn)種間，屬間雜種1. 植物體細胞雜交所利用的原理包括()細胞膜的流動性細胞的全能性 基因結(jié)構(gòu)的相對獨立性A BC D2. 下面關(guān)于植物體細胞雜交技術(shù)的說法，不正確的是()A必須有纖維素酶和果膠酶的存在B要經(jīng)過組織培養(yǎng)的過程C可以實現(xiàn)種間或種內(nèi)雜交D原生質(zhì)

5、體融合必須借助誘導(dǎo)劑四、有效訓(xùn)練CD3.通過細胞雜交，獲得一個雜種植物，需要的步驟是（ ）A.分離原生質(zhì)體 誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合 組織培養(yǎng) 雜種植株B. 分離原生質(zhì)體 細胞融合 組織培養(yǎng) 雜種植株 C.獲取細胞 原生質(zhì)體融合 組織培養(yǎng) 雜種植株 D.獲取細胞 細胞融合 組織培養(yǎng) 雜種植株A4. 下圖為“番茄馬鈴薯”的培育過程示意圖，有關(guān)敘述正確的是()A獲得a、b細胞需要胰蛋白酶和果膠酶B誘導(dǎo)a、b細胞融合的化學(xué)試劑一般用秋水仙素Ca、b細胞融合為c細胞的原理是生物膜具有流動性Dd、e、f過程表示植物的組織培養(yǎng)過程，e、f分別為脫分化和再分化C5 .下圖為植物體細胞雜交過程示意圖，據(jù)圖回答： (1

6、)步驟是去掉_ ，使植物細胞成為_，最常用的方法是_ 。 (2) 步驟一般常用的化學(xué)試劑是_，目的是_ 。體細胞兩兩融合后形成的細胞類型有_、_和_三種。(3)在利用雜種細胞培育成為雜種植株的過程中，運用的技術(shù)手段是_ ，其中步驟相當于_ ，步驟相當于_ 。(4)植物體細胞雜交的目的是獲得新的雜種植株，使兩株植物的性狀能夠在新的植物體上有所表現(xiàn)，其根本原因是_。 細胞壁原生質(zhì)體酶解法聚乙二醇誘導(dǎo)原生質(zhì)體發(fā)生融合aaabbb植物組織培養(yǎng)再分化脫分化雜種植株中同時含有兩植株的遺傳物質(zhì)6.現(xiàn)有甲、乙兩個煙草品種(2n48)，其基因型分別為aaBB和AAbb，這兩對基因位于非同源染色體上。兩品種在光照

7、強度大于800 1x時，都不能生長，這是由于它們中的一對隱性純合基因(aa或bb)作用的結(jié)果。取甲、乙兩品種的花粉分別培養(yǎng)成植株，將它們的葉肉細胞制成原生質(zhì)體，并將兩者相混，使之融合，誘導(dǎo)產(chǎn)生細胞團。然后，放到大于800 1x光照下培養(yǎng)，結(jié)果有的細胞團不能分化，有的能分化發(fā)育成植株。請完成下列問題：(1)甲、乙兩煙草品種花粉的基因型分別為_和_。(2)將葉肉細胞制成原生質(zhì)體時，使用_ 去除細胞壁。(3)在細胞融合技術(shù)中，常用的促融劑是_。(4)細胞融合后誘導(dǎo)產(chǎn)生的細胞團叫_。(5)在大于800 1x光照下培養(yǎng)，有_種細胞團不能分化；能分化的細胞團是由 _ 的原生質(zhì)體融合來的 (這里只考慮兩個原生質(zhì)體的相互融合