微生物霉菌放線菌的形態(tài)_第1頁
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文檔簡介

1、霉菌(mjn)、放線菌形態(tài)觀察實(shí)驗(yàn)(shyn)四共十六頁 1、學(xué)習(xí)并掌握放線菌和霉菌形態(tài)觀察的基本(jbn)方法; 2、初步了解放線菌和霉菌的形態(tài)特征實(shí)驗(yàn)(shyn)目的共十六頁實(shí)驗(yàn)(shyn)原理放線菌和霉菌等微生物常具有發(fā)達(dá)的菌絲體。放線菌的菌絲一般無隔、分枝,菌絲直徑與細(xì)菌相似。霉菌的菌絲比放線菌大得多,分為無隔菌絲和有隔菌絲。菌絲從功能上可分為基內(nèi)菌絲、氣生菌絲和孢子絲。由于基內(nèi)菌絲(營養(yǎng)菌絲)與培養(yǎng)基結(jié)合緊密,很難直接用接種工具挑取,因此,如果采用常規(guī)的制片方法,將很難觀察到直觀和自然生長狀態(tài)下的菌絲體或孢子絲形態(tài)。本實(shí)驗(yàn)介紹的插片法、玻璃紙法、載玻片法等可以解決上述(shngsh)

2、不足。共十六頁插片法:平板(pngbn)接種 插上滅菌蓋玻片 菌絲沿培養(yǎng)基表面與蓋玻片的交接處生長而附著在蓋玻片上 取蓋玻片鏡檢觀察共十六頁玻璃紙法:滅菌的玻璃紙覆蓋在培養(yǎng)基上 在玻璃紙上接種 培養(yǎng)后,在玻璃紙上形成菌苔 揭下玻璃紙,直接鏡檢 (以上兩種方法(fngf)可觀察到放線菌自然生長狀態(tài)下的特征,便于觀察不同生長期的形態(tài))共十六頁 載玻片培養(yǎng)(piyng)觀察法 用無菌操作將培養(yǎng)基瓊脂薄層置于載玻片上,接種后蓋上蓋玻片培養(yǎng)。培養(yǎng)一定時(shí)間后,將載玻片的培養(yǎng)物直接放在顯微鏡下觀察。該法既可以保持霉菌自然生長狀態(tài)(zhungti),還便于觀察不同發(fā)育期的培養(yǎng)物共十六頁水浸片觀察法 將培養(yǎng)物置

3、于乳酸石炭酸棉藍(lán)染色液中,制成霉菌制片觀察。該制片的特點(diǎn)(tdin)是:細(xì)胞不變形;具有防腐作用不易干燥,能保持較長時(shí)間;且能防止孢子飛散;染液的藍(lán)色能增強(qiáng)反差共十六頁實(shí)驗(yàn)(shyn)器材1)菌種:青霉2)染色液:乳酸石炭酸棉藍(lán)3)儀器:載玻片、蓋玻片、解剖針、 鑷子、顯微鏡等共十六頁水浸片觀察法(1)加染液:加一滴乳酸(r sun)石炭酸棉藍(lán)液于潔凈的載玻片中央。(2)挑菌:用鑷子(或解剖針)從菌落的邊緣處挑取少量帶有孢子的霉菌菌絲,放入乳酸石炭酸棉藍(lán)染液中。(3)蓋片:用解剖針細(xì)心地把菌絲挑散開,加蓋玻片。(4)觀察:置于顯微鏡下觀察。先用低倍鏡觀察菌絲體形態(tài),再轉(zhuǎn)換高倍鏡。 共十六頁注意

4、:取菌時(shí),青霉和曲霉與培養(yǎng)基結(jié)合(jih)緊密,不易挑取,可連少量培養(yǎng)基一起挑取,再在染液中分離菌絲。共十六頁黑曲霉青 霉共十六頁黑曲霉(電鏡下)青霉(電鏡下)共十六頁根霉共十六頁實(shí)驗(yàn)(shyn)安排( 4人/組)一、器皿包扎和滅菌(mi jn) (1)培養(yǎng)皿9只(報(bào)紙包扎) (2)干熱滅菌(160 ,2h)二、制備無菌水 (1)250mL三角瓶:內(nèi)裝玻璃珠和90mL水 (2)試管6支:分裝9mL水/支 (3)牛皮紙包扎,高壓蒸汽滅菌(121, 20min)共十六頁顯微鏡下觀察(gunch)時(shí),氣生菌絲在上,基內(nèi)菌絲在下,氣生菌絲顏色較暗,而基內(nèi)菌絲比較透明。孢子絲的形狀多樣,有螺旋形、波浪形或分支形等,孢子也常呈橢圓形、圓形或桿形。共十六頁內(nèi)容摘要霉菌、放線菌形態(tài)觀察。放線菌的菌絲一般無隔、分枝,菌絲直徑與細(xì)菌(xjn)相似。霉菌的菌絲比放線菌大得多,分為無隔菌絲和有隔菌絲。本實(shí)驗(yàn)介紹的插片法、玻璃紙法、載玻片法等可以解決上述不足。玻璃紙法:滅菌的玻璃紙覆蓋在培養(yǎng)基上。(以上兩種方法可觀察到放線菌自然生長狀態(tài)下的特征,便于觀察不同生長期的形態(tài))。用無菌操作將培養(yǎng)基瓊脂薄層置于載玻片上,接種后蓋上蓋玻片培養(yǎng)。培養(yǎng)一定時(shí)間后,將載玻片的培養(yǎng)物直接放在顯微鏡下觀察。(1)加染液:加一滴乳酸石炭酸棉藍(lán)液于潔凈的載玻片中央。(2)挑菌

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