藍舌病病毒分子生物學研究進展

1、藍舌病病毒分子生物學研究進展藍舌病病毒分子生物學研究進展藍舌病病毒Bluetnguevirus，BTV是一種蟲媒病毒，又稱綿羊鼻鏡腫痛、綿羊卡他熱病毒。該病以發(fā)熱、頰黏膜和胃腸道黏膜嚴重的卡他性炎癥為特征。病羊體溫升高，口腔黏膜受潰瘍損傷，部分滲出血液，口流涎，鼻流膿性分泌物，在鼻孔周圍形成干痂，口腔和舌發(fā)紺，因此稱為藍舌玻藍舌病病毒粒子為二十面體對稱，無囊膜，具有微絨毛狀外層，直徑70n80n?？偦蚪M19218bp，分子總質(zhì)量是1.3107庫倫，為分子質(zhì)量最大的RNA病毒。其基因組為10個節(jié)段的雙鏈RNA：其中4個小片段S7-S10、3個中片段4-6、3個大片段L1L3，節(jié)段基因組分別編碼

2、3個非構造蛋白NS1-NS3、7個構造蛋白VP1-VP7。1BTV基因構造1.1L1基因L1基因全長3944bp，編碼本文由論文聯(lián)盟搜集整理核心構造蛋白VP1。VP1蛋白是一種堿性蛋白質(zhì)，含有一個RNA病毒RNA聚合酶的典型序列GDD氨基酸序列。VP1在體外的復制活性較低，在37的條件下，可以維持24h。VP1可以復制全部的正鏈RNA片段，從藍舌病病毒最小的基因片段822bp到最大的基因片段3944bp，每一個片段都是完好的雙螺旋構造的雙鏈RNA，并對RNA酶有抑制作用，而對RNA酶敏感。1.2L2基因不同血清型的L2基因長度不同，約3000bp左右，且存在較大的差異。來自不同地區(qū)的同一血清型

3、的毒株之間也會存在較大差異。L2編碼BTV的外殼蛋白VP2，VP2是血清型特異性抗原，也是病毒血凝素抗原，在感染哺乳動物細胞時起粘附進入作用，且其具有二硫鍵骨架構造，表達有序。通過對血清型毒株的分析發(fā)現(xiàn)八聚肽在維持VP2整個蛋白構象中啟到保守性作用。1.3L3基因L3基因全長2772bp，編碼病毒顆粒的主要核心蛋白VP3，由901個氨基酸組成，蛋白序列相對保守，在自然狀態(tài)下為疏水性蛋白。VP3是主要的構造蛋白，內(nèi)部包繞著VP1、VP4、VP6和DsRNA基因組，Vp3自身具有光滑外表，可供VP7附著，vp3和vp7共同構成了病毒的核心，所以，VP3蛋白對于BTV的毒粒構造具有非常重要的作用。1

4、.44基因4基因全長2022bp，編碼VP4蛋白，共654個氨基酸，被認為具有某些催化活性。研究人員通過高度純化的VP4和含有VP4的重組的LPs證明了VP4具有RNA的5的三磷酸酶活性，VP4可以通過磷酰胺共價結合GP，并催化GTP-PPi的交換反響。1.55基因5基因全長1639bp，編碼VP5蛋白，共526個氨基酸。VP5是構成BTV外衣殼的蛋白，也是唯一的糖基化蛋白，為型特異性抗原。VP5可以結合哺乳動物的細胞，卻不可以進入，說明VP5不可以參與受體介導的內(nèi)吞作用，然而VP5可以使細胞膜失去穩(wěn)定性，從而使病毒的核心粒子進入到細胞質(zhì)內(nèi)。1.66基因6基因全長1770bp，在不同血清型的B

5、TV中，其核苷酸序列高度保守，對應NSl編碼非構造蛋白，共552個氨基酸。對BTV感染的細胞進展薄片分析，發(fā)現(xiàn)了大量具有BTV感染的重要細胞形態(tài)特征的病毒特異性微管。1.7S7基因S7基因全長1156bp，編碼VP7蛋白，共349個氨基酸，該基因編碼蛋白在BTV內(nèi)衣殼中占主要地位，具有著較強的疏水性和群特異性抗原決定位點。將病毒粒子中的VP5及VP2去掉，可發(fā)現(xiàn)VP7擁有浸透昆蟲細胞及粘合BTV病毒顆粒作用。用桿狀病毒載體共表達VP3和VP7，可以得到BTV的內(nèi)衣殼粒子，共表達VP2、VP5、VP3和VP7那么可以得到BTV病毒樣粒子，該病毒粒子具有良好的免疫原性，可以抵御病毒的侵襲。，1.8

6、S8基因S8基因全長1123bp，編碼非構造蛋白NS2，共357個氨基酸。NS2是BTV感染細胞的包涵體中的主要的成分，主要位于細胞核的附近。細胞中所表達的NS2蛋白足夠形成包涵體，并可募集VP3蛋白，這說明NS2蛋白在病毒的復制和組裝中起重要作用。在對BTV蛋白和核酸的互相作用進展研究時，ThernJ采用的是生物化學方法，并且采用紫外線交聯(lián)試驗證明了NS2蛋白和核酸親密聯(lián)絡。1.9S9基因S9基因全長1046bp，編碼核心構造蛋白VP6，由328個氨基酸組成。該基因經(jīng)過編碼后的VP6蛋白可以誘導產(chǎn)生高滴度的特異性抗體，具有高度的免疫原性。VP6蛋白具有核苷三磷酸酶和解旋酶活性，可以結合RNA，在病毒的早期復制中起重要作用。通過序列缺失實驗證明，VP6具有6個抗原表位，這些抗原表位是保守的并暴露于蛋白外表。1.10S10基因S10基因全長822bp，序列中含有2個符合閱讀框的甲硫氨酸密碼子，可以編碼兩種非構造蛋白NS3和NS3A。NS3蛋白的氨基酸序列高度保守，其核苷酸序列的保守性也可達82%99%。NS3和NS3A是環(huán)狀病毒編碼的唯一的一種膜蛋白。NS3和NS3A均具有一段較長的N末端和較短的端的胞漿區(qū)，并通過兩個跨膜區(qū)與一小段胞外區(qū)相連。NS3蛋白不存在于胞外，而是定位于感染BTV細胞上質(zhì)膜上的病毒穿透或出芽的位點上。這就說明了在BTV形態(tài)發(fā)生的最后階段中NS3和N