醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測

1、關于醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測第一張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月 一、前言： 1.醫(yī)院消毒是預防醫(yī)院內(nèi)感染的重要措施之一 2. 消毒效果的監(jiān)測是評價 3.消毒設備運轉是否正常 4.消毒藥劑是否有效 5.消毒方法是否合理 6.消毒效果是否達標的唯一手段第二張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月醫(yī)院消毒效果監(jiān)測時需遵循以下原則 監(jiān)測人員需經(jīng)過專業(yè)培訓，掌握一定的消毒知識； 熟悉消毒設備和藥劑性能; 具備熟練的檢驗技能; 選擇合理的采樣時間(消毒后、使用前); 遵循嚴格的無菌操作。第三張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月二、熱力滅菌效果的監(jiān)測方法 （一）壓力蒸汽滅菌效果監(jiān)測方法 1

2、、化學監(jiān)測法: 化學指示卡(管)監(jiān)測方法 既能指示蒸汽溫度，又能指示溫度持續(xù)時間 化學指示管(卡)放入大包和難以消毒部位的物品包中央 （舊版消毒技術規(guī)范是放入每一待滅菌的物品包中央）第四張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月 化學指示膠帶監(jiān)測法： 將化學指示膠帶粘貼于每一待滅菌物品包外第五張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月BD試驗 對預真空和脈動真空壓力蒸汽滅菌，每日進行一次B-D試驗。 設計原理 a. 使實驗包成為滅菌器內(nèi)殘留空氣的聚焦點，它相對較大的面積和可透氣布料易吸附、“捕捉”殘留空氣。 b.真空測試圖上的化學試劑對殘留空氣具有敏感性。第六張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于202

3、2年6月第七張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月第八張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月BD試驗方法 將測試圖置于實驗包中間位置； 然后，將實驗包放于滅菌器室內(nèi)排氣口處，關閉柜門； 進行1345分鐘滅菌處理完畢，打開柜門，觀察測試結果。第九張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月BD實驗包的制備 實驗包由4650cm8090cm純棉布巾組成，布巾先橫折為三層，再縱折成六層。將折好的布巾一條摞一條至25cm高度。摞放時，各層布巾按折疊側左右交替擺好，以使兩側厚度相等。布巾擺好后，將真空測試圖夾放于中央布巾之間，然后用布包巾包好，外面用化學指示膠帶固定好，成為一個實驗包。整個實驗包的

4、大小高約25cm，寬約23cm，長約27cm，重約5kg。第十張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月BD實驗條件 實驗規(guī)定在134蒸汽條件下，使用3.5分鐘觀察結果，最長不超4分鐘。 測試圖必須夾放于布包的中央層位置。 實驗包放在滅菌器底層，靠近柜門與排氣口處。 實驗在每天第一次滅菌前空鍋進行。第十一張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月結果判斷結果判斷合格：測試圖變黑且均勻，即中央部分和邊緣部分顏色一致，表示滅菌器抽真空系統(tǒng)良好。不合格：測試圖變色不均勻，通常中央比邊緣部分顏色淺，表示空氣排除不徹底，須檢查、修理后使用.第十二張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月B-D測試失敗原

5、因分析真空泵效果下降自控系統(tǒng)失靈, 抽氣時間縮短柜室密封性能下降, 不能維持規(guī)定的負壓空氣起始溫度低, 重力作用明顯送入蒸汽動能偏高, 將過多的空氣擠入試驗包試驗包與柜室容量相比過小, 產(chǎn)生小裝量效應B-D試驗未按規(guī)定進行第十三張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月 2、生物監(jiān)測法 指示菌株：指示菌株為耐熱的嗜熱脂肪桿菌芽孢(ATCC 7953或SSIK 31株)，菌片含菌量為5.Ol05cfu/片5.Ol06cfu片，在121O.5條件下，D值（殺滅90%微生物所需時間）為1.3min1.9min，殺滅時間(KT值)19min，存活時間(ST值)為3.9min。 培養(yǎng)基：試驗用培養(yǎng)基為溴

6、甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基。第十四張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月 檢測方法 將兩個嗜熱脂肪桿菌芽孢菌片分別裝入滅菌小紙袋內(nèi)，置于標準試驗包中心部位。 在下排氣壓力蒸汽滅菌柜室內(nèi)，排氣口上方放置一個標準試驗包(由3件平紋長袖手術衣，4塊小手術巾，2塊中手術巾，1塊大毛巾，30塊lOcmlOcm 8層紗布敷料包裹成(25cm30cm30cm大小)。 第十五張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月預真空和脈動真空壓力蒸汽滅菌器 預真空和脈動真空壓力蒸汽滅菌器滅菌柜室內(nèi)，排氣門上方放置一個標準測試包(由16條全棉手術巾4lcm66cm，將每條手術巾的長邊先折成3層，短邊折成2層然后疊放，

7、作成23cm23cml5cm大小的測試包) 。第十六張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月手提壓力蒸汽滅菌器 手提壓力蒸汽滅菌器用通氣貯物盒(22cml3cm6cm)代替標準試驗包，盒內(nèi)盛滿中試管，指示菌片放于中心部位的兩只滅菌試管內(nèi)(試管口用滅菌牛皮紙包封)，將貯物盒平放于手提壓力蒸汽滅菌器底部。第十七張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月檢測方法 經(jīng)一個滅菌周期后，在無菌條件下，取出標準試驗包或通氣貯物盒中的指示菌片，投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基中，經(jīng)561培養(yǎng)7d(自含式生物指示物按說明書執(zhí)行)，觀察培養(yǎng)基顏色變化。檢測時設陰性對照和陽性對照。第十八張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作

8、于2022年6月快速檢測(24小時出結果)第十九張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月結果判定 每個指示菌片接種的溴甲酚紫蛋白胨水培養(yǎng)基都不變色，判定為滅菌合格：指示菌片之一接種的溴甲酚紫蛋白胨水培養(yǎng)基，由紫色變?yōu)辄S色時，則滅菌過程不合格。 注意事項：監(jiān)測所用菌片須經(jīng)衛(wèi)生部認可，并在有效期內(nèi)使用，生物指示物監(jiān)測應1月1次。第二十張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月、干熱滅菌效果監(jiān)測方法 1、化學檢測法 檢測方法：將既能指示溫度又能指示溫度持續(xù)時間的化學指示劑3個5個分別放入待滅菌的物品中，并置于滅菌器最難達到滅菌的部位。經(jīng)一個滅菌周期后，取出化學指示劑，據(jù)其顏色及性狀的改變判斷是否達

9、到滅菌條件。 第二十一張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月 結果判定 檢測時，所放置的指示管的顏色及性狀均變至規(guī)定的條件，則判為達到滅菌條件；若其中之一未達到規(guī)定的條件，則判為未達到滅菌條件。 第二十二張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月 2、物理檢測法：(熱電偶檢測法) 檢測方法：檢測時，將多點溫度檢測儀的多個探頭分別放于滅菌器各層內(nèi)、中、外各點。關好柜門，將導線引出，由記錄儀中觀察溫度上升與持續(xù)時間。 結果判定：若所示溫度(曲線)達到頂置溫度，則滅菌溫度合格。 第二十三張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月 生物檢測法 指示菌株：枯草桿菌黑色變種芽孢(ATCC9372)，菌

10、片含菌量為5.0105cfu/片5.0106cfu/片。其抗力要求同上。 檢測方法：將枯草桿菌芽孢菌片分別裝入滅菌中試管內(nèi)(1片/管)。滅菌器與每層門把手對角線內(nèi)，外角處放置2個含菌片的試管，試管帽置于試管旁，關好柜門，經(jīng)一個滅菌周期后，待溫度降至80時，加蓋試管帽后取出試管。 第二十四張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月在無菌條件下 ，加入普通營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基(5ml管)，以361培養(yǎng)48h，觀察初步結果，無菌生長管繼續(xù)培養(yǎng)至第七日。 結果判定:若每個指示菌片接種的肉湯管均澄清，判為滅菌合格，若指示菌片之一接種的肉湯管混濁，判為不合格。對難以判定的肉湯管，取o1ml接種于營養(yǎng)瓊脂甲板，用

11、滅菌L棒涂勻，放361培養(yǎng)48h，觀察菌落形態(tài)，并做涂片染色鏡檢，判斷是否有指示菌生長，若有指示菌生長，判為滅菌不合格；若無指示菌生長，判為滅菌合格。 第二十五張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月 三、環(huán)氧乙烷(EO)滅菌效果監(jiān)測 滅菌效果監(jiān)測 每次滅菌均應進行程序監(jiān)測 每個滅菌物品的外包裝應粘貼包外化學指示膠帶，作為滅菌過程的標志；包內(nèi)放置化學指示卡，作為滅菌效果的參考。 每月應做生物監(jiān)測，移植物必須等生物監(jiān)測結果為陰性時方可使用。 第二十六張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月第二十七張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月第二十八張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月生物

12、指示物監(jiān)測法 一般每月用生物指示物監(jiān)測一次。生物指示物用枯草桿菌黑色變種芽孢(ATCC9372)，抗力要求為：菌量在5105cfu片5106cfu片，在環(huán)氧乙烷劑量為600mgL30mg/L，作用溫度為542，相對濕度為6010條件下，其殺滅90該微生物的D值為2.6min5.8min，存活時間應7.8min，死亡時間應58min。第二十九張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月生物指示劑的要求 菌量為5103cfu片5104cfu片。通常做常采用以下數(shù)量的生物指示物較為適宜： 滅菌器柜室可用體積小于5m3時，至少放置10個菌片； 滅菌器柜室可用體積為5m3至10m3時，每增加1m3，增加1

13、個菌片； 滅菌器柜室可用體積大于10m3時，每增加2m3，增加1個菌片。生物指示物應放在那些在性能鑒定時發(fā)現(xiàn)是最難滅菌的部位，并均勻分布于整個滅菌物品中。第三十張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月 要求： 每次滅菌都應進行滅菌過程監(jiān)測。 檢測所用化學和微生物指示物必須經(jīng)衛(wèi)生部批準，并在有效期內(nèi)使用。第三十一張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月四、紫外線消毒效果的監(jiān)測 紫外線燈管輻照度值的測定 1、紫外線輻照計測定法： 開燈5min后，將測定波長為253.7nm的紫外線輻照計探頭置于被檢紫外線燈下，待儀表穩(wěn)定后，讀數(shù)。 第三十二張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月2、紫外線強度

14、照射指示卡監(jiān)測法 開啟紫外線燈5min后，將指示卡置紫外燈下垂直距離lm處，有圖案一面朝上，照射lmin(紫外線照射后，圖案正中光敏色塊由乳白色變成不同程度的淡紫色)，觀察指示卡色塊的顏色，將其與標準色塊比較，讀出照射強度。第三十三張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月 3、結果判定 普通30w直管型紫外線燈，新燈輻照強度90W/cm2為合格；使用中紫外線燈輻照強度70W/cm2為合格；30W高強度紫外線新燈的輻照強度180W/cm2為合格。注意：測定時電壓220V5V，溫度2025，相對濕度60%，紫外線輻照計必須檢定。指示卡應獲得衛(wèi)生許可批件。第三十四張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于202

15、2年6月五、醫(yī)療器械滅菌效果的監(jiān)測 無菌檢驗是檢查無菌物品是否無菌的一種方法。 注意： 1、無菌檢驗應在潔凈度為100級單向流空氣區(qū)域內(nèi)進行，應嚴格遵守無菌操作，避免微生物污染；對單向流空氣區(qū)域及工作臺面，必須進行潔凈度驗證。 2、采樣時間在滅菌后，保存有效期內(nèi)。第三十五張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月無菌檢驗前準備 洗脫液與培養(yǎng)基無菌性試驗：無菌試驗前3d，于需-厭養(yǎng)培養(yǎng)基與霉菌培養(yǎng)基內(nèi)各接種lml洗脫液，分別置3035與2025培養(yǎng)72h，應無菌生長。第三十六張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月小件醫(yī)療器械的采樣 取縫合針、針頭、刀片等小件醫(yī)療器械5件直接浸入6管需厭氧培養(yǎng)

16、管(其中一管作陽性對照)與4管霉菌培養(yǎng)管。培養(yǎng)基用量為15ml/管。第三十七張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月注射器采樣 取5付注射器，在5ml洗脫液中反復抽吸5次，洗下管內(nèi)細菌，混和后接種需-厭養(yǎng)菌培養(yǎng)管(共6管，其中1管作陽性對照)與霉菌培養(yǎng)管(共4管)。接種量：lml注射器為0.5ml，2ml注射器為lml，5ml10ml注射器為2ml，20ml50ml注射器為5ml。 培養(yǎng)基用量：接種量為2ml以下為15ml/管，接種量5ml為40ml/管。第三十八張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月大件醫(yī)療器械的采樣 手術鉗、鑷子等大件醫(yī)療器械取2件用沾有無菌洗脫液的棉拭子反復涂抹采樣

17、，將棉拭子投入5ml無菌洗脫液中，將采樣液混勻，接種于需厭氧培養(yǎng)管(共6管，其中1管作陽性對照)與霉菌培養(yǎng)基(共4管)。接種量為1ml/管，培養(yǎng)基用量為15ml/管。第三十九張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月培養(yǎng)時間 將需厭氧培養(yǎng)管以及陽性與陰性對照管均于3035培養(yǎng)5d，霉菌培養(yǎng)管與陰性對照管于2025培養(yǎng)7d，培養(yǎng)期間逐日檢查是否有菌生長。 如加入供試品后培養(yǎng)基出現(xiàn)混濁或沉淀，經(jīng)培養(yǎng)后不能從外觀判斷時，可取培養(yǎng)液轉種入另一支相同的培養(yǎng)基中或斜面培養(yǎng)基上，培養(yǎng)48h72h后觀察。第四十張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月3、注意事項 （1）送檢時間不得超過6h，若樣品保存于04

18、，則不得超過24h。 （2）被采樣本表面積30m2，設4角及中央5點，4角的布點部位距墻壁lm處。 2、采樣方法：將普通營養(yǎng)瓊脂平板（直徑為9cm）放在室內(nèi)各采樣點處，采樣高度為距地面1.5m采樣時將平板蓋打開，扣放于平板旁，暴露5min，蓋好立即送檢。第四十九張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月平板暴露法結果計算公式 細菌總數(shù)(cfu/m3)=50000N/(AT) 式中A為平板面積(cm2);T為平板暴露時間(min)；N為平均菌落數(shù)(cfu)。 第五十張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月衛(wèi)生學標準 I類區(qū)域：細菌總數(shù)10cfu/m3(或0.2cfu/平板)，未檢出金黃色葡萄球

19、菌、溶血性鏈球菌為消毒合格； 類區(qū)域：細菌總數(shù)200cfu/m3(或4cfu平板)，未檢出金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌為消毒合格： 類區(qū)域：細菌總數(shù)500cfu/m3(或l0cfu平板)，未檢出金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌為消毒合格。第五十一張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月注意事項 1、在消毒處理后、操作前進行采樣。2、采樣前，關好門、窗，在無人走動的情況下，靜止10min進行采樣。 第五十二張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月九、消毒液的監(jiān)測 有效氯含量測定 ,可以用試紙法測定。 使用方法： 1、消毒劑溶液有效成分濃度在測定范圍內(nèi)時，取試紙浸于消毒液中，即刻取出，半分鐘內(nèi)在自

20、然光下與標準色塊比較，讀值。 2、消毒液濃度高于試紙測定范圍時，可先稀釋消毒劑，再測定。注意：試紙浸濕后時間超過1分鐘，顏色逐漸消退，結果不準確。第五十三張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月戊二醛濃度測定 試紙法：1、從小瓶中取出一條；2、將指示色塊完全浸沒于戊二醛溶液，一秒內(nèi)取出；3、沾下瓶蓋上的紙墊，去除多余的液體；4、橫置于瓶蓋上，注意不要將色塊面朝下以免受到污染；5、等候58分鐘判讀結果。第五十四張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月使用中消毒液染菌量測定 1、涂抹法：用無菌吸管吸取消毒液1.0ml，加入9.0ml含有相應中和劑的采樣管內(nèi)混勻，用無菌吸管吸取上述溶液0.2ml

21、，滴于干燥普通瓊脂平板，每份樣品同時做2個平行樣，一平板置20培養(yǎng)7d，觀察霉菌生長情況，另一個平板置35溫箱培養(yǎng)72h記數(shù)菌落數(shù)，同時按十五的原則檢測致病菌。 消毒液染菌量(cfu/ml)=每個平板上的菌落數(shù)50第五十五張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月 2、傾注法 用無菌吸管吸取消毒液1.Oml，加入到9.0ml含相應中和劑的無菌生理鹽水采樣管中混勻，分別取0.5ml放入2只滅菌平皿內(nèi)，加入已熔化的4548的營養(yǎng)瓊脂15ml18ml，邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固，一平板置20培養(yǎng)7d，觀察霉菌生長情況；另一個平板置361培養(yǎng)72h，計數(shù)菌落數(shù)，同時按十五的原則檢測致病菌。 消毒液染菌量

22、(cfu/ml)=每個平板上的菌落數(shù)20第五十六張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月注意事項 消毒液染菌量100cfu/ml，并未檢出致病菌為合格。 采樣后1h內(nèi)檢測。 第五十七張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月十、餐具消毒效果監(jiān)測 采樣時間：在消毒后、使用前進行采樣。 采樣方法：將2.0cm2.5cm無菌濾紙片于無菌洗脫液中浸濕均勻，貼在食具表面，經(jīng)5min取下，每10張濾紙合為一份樣本(相當于50cm2采樣面積)，投入含50m1生理鹽水的lOOml三角燒瓶中，于4h內(nèi)送檢。 第五十八張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月注意事項 紡織品：細菌總數(shù)5cfu/cm2，大腸菌群

23、末檢出。 餐具若用化學消毒劑消毒，采樣液中應加入相應中和劑。 第五十九張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月十一、衛(wèi)生潔具消毒效果監(jiān)測 采樣時間：在消毒后、使用前進行采樣。 采樣方法：便器、尿壺等容器可用沾有含相應中和劑的無菌生理鹽水的棉拭子，反復涂擦容器的內(nèi)表面及內(nèi)口處，剪占手接觸部位后，將棉拭子投入5ml無菌生理鹽水試管中，立即送檢。 拖把、抹布等物品可用無菌的方法剪取lcm3cm，直接投入5ml含相應中和劑的無菌生理鹽水中，立即送檢。 第六十張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月結果判定 未檢出致病菌為消毒合格。 第六十一張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月十二、內(nèi)鏡消毒滅菌效果的監(jiān)測 采樣時間：在消毒