大鼠心梗模型 good

1、大鼠心梗模型 1沿左側(cè)胸骨旁斜行切口，上界為兩前肢后緣連線，下界為第5肋間，依次切開皮膚、淺筋膜和深筋膜，并用止血鉗鈍性分離胸大肌和前鋸肌交界處，在靠胸骨緣處用止血鉗鈍性分離第3、4肋間進胸，用專用開胸器撐開3、4肋間暴露心臟，將棉紗放置在肺組織旁邊，防止損傷肺組織。，潮氣量約 3ml/100g，頻率為70次/min2待大鼠出現(xiàn)吞咽動作時，拔除氣管插管。術(shù)畢肌肉注射青霉素10活體取出心臟，迅速取材，去除左、右心房及右心室，沖洗后4%多聚甲醛溶液固定，沿左室長軸由心尖至心底做厚切片，將左室分為6片，石蠟包埋切片3用6一OProlene線縫針在距左心耳下緣1mm處，左冠狀靜脈主干附近的室間溝內(nèi)，將

2、LAD連同少量心肌組織一起縫扎，進針深度控制在12mm，寬度為23mm關(guān)胸過程中于切口內(nèi)放置排氣管(用小兒頭皮針的軟管自制)，關(guān)胸畢，抽空胸腔積氣后撥除。試停呼吸機，大鼠恢復(fù)自主呼吸后，撥出氣管插管，充分清除氣管內(nèi)分泌物。4根據(jù)文獻l”一和本實驗室條件建立模型:健康成年雄性sD大鼠，體重200一2509，術(shù)前禁食12h，不禁飲。3%戊巴比妥鈉30m叭g腹腔注射麻醉大鼠，起效后仰臥位固定于鼠板。用0號嬰兒喉鏡片經(jīng)口氣管插管，插入16G靜脈留置針，接小動物呼吸機控制呼吸。確定插管位置深度正確后，口角掛線固定導(dǎo)管，根據(jù)血氣結(jié)果，呼吸參數(shù)設(shè)定為潮氣量4一6ml，頻率60一70次/分，吸呼比1:1。備皮

3、，消毒，鋪單后，在左側(cè)腋下和劍突連線偏上Icm做一斜切口，長度約為2.scm，以心臟搏動最強點為中心。依次鈍性分離深淺筋膜、胸大肌、前鋸肌，顯露肋骨，可見心臟暗影。將皮膚與各層肌肉做一個荷包縫合備用。充分止血后，由第3、4肋間入胸(心搏最強點偏上一肋)，鈍性分離肋間肌，分離肋間肌范圍應(yīng)適當，不能太接近胸骨以免造成大出血。5開胸一定要鈍性分離從心跳最明顯處開胸沒有什么大血管，一些小的血管可以把組織先用止血鉗夾一下再剪開，那樣不會出血。呼吸機淺麻醉右側(cè)臥位脹肺引流管縫合肋間對合胸大肌與前鋸肌縫合皮膚抽吸胸腔積氣、積液拔除引流管碘附消毒術(shù)野，對合肌肉及皮下61.用套管針氣管插管的話，消毒后剪開皮膚，

4、鈍性分離皮下組織及肌肉暴露氣管，插套管針，只會留下一個針眼，術(shù)后縫合皮膚就行了，不會有什么危險，你的問題可能出在大鼠自主呼吸還不平穩(wěn)就拔管縫合了，這時候大鼠會窒息死亡。2.開胸一定要鈍性分離從心跳最明顯處開胸沒有什么大血管，一些小的血管可以把組織先用止血鉗夾一下再剪開，那樣不會出血。3.心臟擠出后用棉簽翻過來就看到很明顯的一條血管，是冠狀靜脈前降支，考下還有一條旋支。前降支起始處就在肺動脈圓錐和左心耳之間，具體結(jié)扎的高低還要看你需要的心梗面積是多大，自己要摸索。左心室的壁還是很厚的，差不多有23毫米，你可以解剖一只大鼠看看，我用的就是普通持針器，進針深度盡可能深一點吧，1毫米。4.關(guān)胸的時候捏

5、一下胸部排氣就行了，也有人說拿針管抽氣，但我覺得這種方法力度不好掌握。5.沒有二次開胸過，請其他高人給你指點吧。祝你早日成功 7動物的選則：健康雄性SD大鼠，建議使用250g左右體重的，耐受力強。而且小一點的胸壁較薄，開胸容易。麻醉：我用的是10% 水合氯醛，感覺效果還不錯，20分鐘左右待大鼠呼吸平穩(wěn)即可手術(shù)，23個小時后蘇醒。劑量0.40.45ml/100g體重，這個也有個體差異，要大家自己摸索一下。這里給大家一些建議：1.麻藥剛發(fā)揮作用的時候大鼠狀態(tài)不平穩(wěn)，這時候不要急于作手術(shù)，多觀察一會兒。2.麻醉程度宜淺不易深，如果麻藥打淺了，只要大鼠沒有過分掙扎，可適當局麻，千萬不可反復(fù)補麻藥，我的

6、經(jīng)驗這樣的情況即使手術(shù)成功大鼠也活不長。關(guān)于呼吸：這是關(guān)系到手術(shù)成功與否的最主要因素。麻醉藥會使大鼠呼吸道產(chǎn)生分泌物，我一般都是在麻醉大鼠后腹腔注射阿托品0.1mg/只，但據(jù)我觀察我們學(xué)校動物中心的大鼠分泌物不多，不用藥也行，曾經(jīng)買過河南一批大鼠，分泌物極多，必須用藥。氣管插管我用的是臨床上的靜脈輸液套管針，創(chuàng)傷小，目前術(shù)后沒發(fā)生過呼吸道感染情況。關(guān)于呼吸機：我也用過江西特力公司的小動物呼吸機，但發(fā)現(xiàn)不太適用于大鼠這樣的小動物，潮氣量的調(diào)節(jié)非常粗略，不好控制?，F(xiàn)在我用的是我們學(xué)校自己生產(chǎn)的呼吸機，其實就是一個簡易的空氣泵，我自己又改裝了一下，現(xiàn)在是醫(yī)用氧和空氣的混合氣，呼吸頻率60/分鐘，潮氣

7、量3ml/100g。這里由于條件限制，所以潮氣量是比較粗略的，而且氧氣含量也無法測量，但是據(jù)我的經(jīng)驗，給純氧對大鼠的損傷比不上呼吸機還大，只要有呼吸肌支持，適當給些氧氣輔助一下，大鼠成活不成問題。關(guān)于手術(shù)切口：我是在胸壁正中剪開皮膚，然后在胸骨左側(cè)1CM左右鈍性分離皮下組織和肌肉，最后用血管鉗撐開胸腔，助手用自制小拉鉤拉開胸壁。這樣的好處是每一層的開口不在一個位置，關(guān)胸后胸腔自然就閉合，不會漏氣。我是在心臟搏動最明顯處打開胸腔，一般就是從劍突向上兩個肋間。關(guān)于心包膜：有的時候不破心包膜心臟也能擠出來，但大部分時候還是要破的，打開胸腔后會看到在心臟下方有脂肪樣?xùn)|西隨著心臟跳動而活動，用眼科彎鑷夾

8、起這層膜一拽心包膜就開了，這時候助手從胸部的左右壓迫胸壁，術(shù)者從腹部輕輕一壓心臟就出來了。關(guān)于結(jié)扎：針和線都是以前的師兄傳給我的，總之是很細的那種，型號我就說不太清楚了，結(jié)扎方法也和壇子里其他人寫的一樣，找到冠狀靜脈前降支，針穿過心肌一起結(jié)扎住，這里就不再羅嗦了。關(guān)于感染的問題：大鼠抗感染能力還是很強的，所以術(shù)前術(shù)中的消毒問題一般注意就行，術(shù)后抗生素在天氣不熱的情況下不給也行，但是還是給些抗生素好，可以減少炎癥造成的胸腔粘連。以上是我想到的一些體會，如果有不明白的地方，愿意和大家交流。 8用0號嬰兒喉鏡片經(jīng)口氣管插管，插入16G靜脈留置針，接小動物呼吸機控制呼吸。1011Pfu/ml Ad一h

9、PPARYl 自制Pfu/ml：plaque forming unit/ml，噬斑形成單位，指每毫升試樣中所含有的具有侵染性的噬菌體數(shù) 當噬菌體裂解平板培養(yǎng)基上細菌后，就形成一個空斑，計為一個plaque9TTC染色法并行TTC染色進行心肌梗死范圍的測定。TTC染色法：在體動物模型灌注結(jié)束后，結(jié)扎冠狀動脈，左心室注入2-3Evans藍2-3ml,確定未缺血心肌（呈藍色）和缺血心?。o藍色）。分離缺血區(qū)和非缺血區(qū)并以濾紙吸干，置于天平上稱重，將缺血區(qū)心室肌以平行于房室溝的方向切成7-8片，每片厚1-2mm，置入1氯化三苯基四氮唑（TTC）磷酸鹽緩沖液（PH 7.4）中37水浴10-15min。缺

10、血危險區(qū)因脫氫酶還原TTC而呈紅色，梗死區(qū)因脫氫酶流失而呈白色，將梗死區(qū)和非梗死區(qū)分離并分別稱重，梗死范圍以梗死心肌占缺血心肌重量的百分比表示。1011給藥實驗兔稱重 ,硫責(zé)妥鈉 ;30mg/kg靜脈麻醉,免仰臥位固定于手術(shù)臺上 ,Maclab/8s多功能生理儀行心電監(jiān)護。常規(guī)備皮、消毒,無菌條件下行胸正中切口,沿胸骨正中將胸骨切開,暴露心臟,保持兩側(cè)胸膜完整無破損,小心提起心包并剪開,可見與左冠狀動脈前降支(LAD)相伴行的心大靜脈,LAD走行于心大靜脈深方 ,表面覆蓋薄層心肌 ,肉眼不易見 。以心大靜脈為標志 ,取其中下1/3交界處以一根5/0外科縫合絲線結(jié)扎(Sham組冠脈只穿線不結(jié)扎),結(jié)扎前于心臟上滴少量利多卡因。觀察心尖部及部分左室前壁心肌變蒼白,并出現(xiàn)室壁運動減弱 , Maclab/8s多功能生理儀