蛋白質化學答案

1、蛋白質化學一、填空題：.寡肽通常是指由2 個到 10 個氨基酸組成的肽。.我國于 1965年在世界上首次合成了具有生物活性的蛋白質-牛胰島素。.人工合成肽時常用的氨基保護基有一氧基、叔丁氧會基、聯(lián)苯異丙氧厥基、笏甲氧?；?。.人工合成肽時常用的活化竣基的方法有疊氮法、活化酯法、酸人法。保護竣基的方法有鹽化、酯化 。.常用的拆開蛋白質分子中二硫鍵的方法有氧化 法,常用的試劑為 過甲酸 ： 還原 法,常用的試劑為 3 -疏基乙醇或疏基乙酸。.蛋白質的二級結構有-螺旋、B-折疊、B轉角、 無規(guī)則卷曲 和 環(huán) 等幾種基本類型。.在a螺旋中C=O和N-H之間形成的氫鍵最穩(wěn)定，因為這三個原子以直線 排列。.

2、 Pauling等人提出的蛋白質 a螺旋模型，每圈螺旋包含3.6個氨基酸殘基,高度為 0.54nm 。每個氨基酸殘基沿軸上升 0.15nm ,并沿軸旋轉100 度。.膠原蛋白是由 4股肽鏈組成的超螺旋結構，并含有稀有的羥脯氨酸 與 羥賴氨酸殘基。. 一般來說，球狀蛋白質的 疏水性氨基酸側鏈位于分子內部,親水 性氨基酸側鏈位于分子表面。.血紅蛋白（Hb）與氧結合的過程呈現(xiàn)協(xié)同 效應,是通過 Hb的別構 現(xiàn)象實現(xiàn)的。.當溶液中鹽離子強度低時，可增加蛋白質的溶解度，這種現(xiàn)象稱鹽溶 。當溶液中鹽離子強度高時，可使蛋白質沉淀，這種現(xiàn)象稱鹽析 。.抗體就是免疫球蛋白。.利用蛋白質不能通過半透膜的特性，使它

3、和其他小分子物質分開的方法有透析 和 超濾 。.實驗室中常用的測定相對分子質量的方法有SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳 、凝膠過濾 和 超離心 等。. 脯氨酸不是a-氨基酸，它經常改變肽鏈折疊的方式。.常用的肽鏈 N端分析的方法有二硝基氟苯 法、 苯異硫富酸 法、 丹磺酰氯 法和 氨肽酶 法。C端分析的方法有 端解 法和竣肽酶 法等。.影響血紅蛋白與氧結合的因素有 氧分壓、二氧化碳分壓 、氫離子濃度 和2.3-二磷酸甘油酸等。.蛋白質超二級結構的基本組合形式為a a 、 B a B、3 3 3 B c B、3 -曲折和 6-折疊筒 等。.維持蛋白質的一級結構的主要作用力是 共價鍵 :維持蛋白質二級結

4、構的主要作用力為氫鍵 ：維持蛋白質三級結構的作用力有氫鍵、范德華力、疏水力 、鹽鍵 等。維持蛋白質四級結構的主要作用力為 次級鍵 。.穩(wěn)定蛋白質膠體狀態(tài)的因素是蛋白質分子上的同性電荷和 分子表面水膜 。.從理論上說，可用 Edman降解法測定任何非封閉多肽的全部氨基酸順序。V.雙縮月尿反應是肽和蛋白質特有的反應，所以二肽也有雙縮月尿反應。X.可用8mol/L尿素拆開蛋白質分子中的二硫鍵。X.維持蛋白質三級結構最重要的作用力是氫鍵。X.大多數(shù)蛋白質的主要帶電基團是由它N端的氨基和C端的竣基組成。X.蛋白質的氨基酸順序（一級結構）在很大程度上決定它的構象（三維結構）。V.蛋白質的亞基（或稱亞單位）

5、和肽鏈是同義的。X.在水溶液中，蛋白質溶解度最小時的pH值通常就是它的等電點。V.變性蛋白質溶解度降低是因為蛋白質分子的電荷被中和以及除去了蛋白質外面的水化層所引起的。X.免疫球蛋白是一種糖蛋白，它由兩條重鏈和兩條輕鏈組成。V.在多肽分子中只存在一種共價鍵即肽鍵。X.血紅蛋白和肌紅蛋白的功能都是運輸氧。X.逆流分溶和紙層析這兩個分離氨基酸的方法是基于同一原理。V.溶液的pH值可以影響氨基酸的等電點。X.到目前為止，自然界發(fā)現(xiàn)的氨基酸為20種左右。X.某蛋白質在 pH 6時向陽極移動，則其等電點小于6。，.多數(shù)寡聚蛋白質分子其亞基的排列是對稱的，對稱性是四級結構蛋白質分子的最重要的性質之一。V.

6、疏水作用是使蛋白質空間結構穩(wěn)定的一種非常重要的次級鍵。V.凝膠過濾法分離蛋白質時，小分子物質比大分子物質先流出。X.所有的蛋白質都具有一、二、三、四級結構。X.在蛋白質和多肽中，只有一種連接氨基酸殘基的共價鍵，即肽鍵。X.變性后的蛋白質其分子量也發(fā)生改變。X23、蛋白質在等電點時凈電荷為零，溶解度最小。,三、選擇題有一多肽經酸水解后產生等摩爾的 Lys ， Gly 和 Ala 。如用胰蛋白酶水解該肽，僅發(fā)現(xiàn)有游離的 Gly 和一種二肽。下列多肽的一級結構中，哪一個符合該肽的結構？（ B ）（A） Gly-Lys-Ala-Lys-Gly-Ala （ B ） Ala-Lys-Gly（ C） Lys

7、-Gly-Ala（ D ） Gly-Lys-Ala （ E ） Ala-Gly-Lys測定小肽氨基酸序列的最好方法是（ D ）（A） 2, 4 一二硝基氟苯法（B）二甲氨基奈磺酸氯法（C）氨肽酶法（D）苯異硫氟酸法（PITC法）（E）竣肽酶法. Sanger 試劑是（B ）（A）苯異硫氟酸（異硫氟酸苯酯）（B） 2, 4一二硝基氟苯（C）丹磺酰氯（D）對氯汞苯甲酸（E） 3-疏基乙醇下列有關a 螺旋的敘述哪個是錯誤的？（ C ）（A）分子內的氫鍵使 a螺旋穩(wěn)定（B）減弱R基團間不利的相互作用使a螺旋穩(wěn)定（C）疏水作用使a螺旋穩(wěn)定。（D）在某些蛋白質中，a螺旋是二級結構中的一種類型（E）脯氨酸和

8、甘氨酸殘基使a螺旋中斷 TOC o 1-5 h z 每分子血紅蛋白所含鐵離子數(shù)為（D ）（A） 1 （ B） 2（C） 3 （D） 4（ E） 6每分子血紅蛋白可結合氧的分子數(shù)為（ D ）（ A ） l （ B） 2（ C） 3 （ D） 4（ E） 6血紅蛋白的氧合曲線呈（C ）（A）雙曲線（B）拋物線（C） S形曲線（D）直線（E）鐘罩形免疫球蛋白是一種（A ）（A）糖蛋白（B）脂蛋白（C）鐵蛋白（D）銅蛋白（E）核蛋白蛋白質的糖基化是翻譯后的調控之一，糖基往往與肽鏈中哪一個氨基酸殘基的側鏈結合？（D ）（A）谷氨酸（B）賴氨酸（C）酪氨酸（D）絲氨酸（E）甘氨酸10煤氣中毒主要是因為煤氣

9、中的一氧化碳（ C ）（ A ）抑制了巰基酶的活性，使疏基酶失活（ B ）抑制了膽堿酯酶的活性，使乙酰膽堿堆積，引起神經中毒的癥狀（C）和血紅蛋白結合后，血紅蛋白失去了運輸氧的功能，使患者因缺氧而死（D）抑制了體內所有酶的活性，使代謝反應不能正常進行（ D）以上說法都不對11 SDS 凝膠電泳測定蛋白質的相對分子質量是根據各種蛋白質（ B ）（ A ）在一定 pH 值條件下所帶凈電荷的不同 （ B ）分子大小不同（C）分子極性不同 （D）溶解度不同（E）以上說法都不對12在生理 pH 值條件下。具有緩沖作用的氨基酸殘基是（ C ）（A） Tyr （ B） Trp （C） His （D） Lys

10、（ E） Gly13維持蛋白質三級結構主要靠（ C ）（ A ）氫鍵（ B ）離子鍵（ C ）疏水作用（ D ）范德華力（ E ）二硫鍵14蛋白質用硫酸銨沉淀后，可選用透析法除去硫酸銨。硫酸銨是否從透析袋中除凈，你選用下列哪一種試劑檢查？（ B ）（A）苛三酮試劑（B）奈氏試劑（C）雙縮月尿試劑（D） Folin 一酚試劑（E）斐林試劑15將抗體固定在層析柱的載體上，使抗原從流經此柱的蛋白質樣品中分離出來，這技術屬于（D ）（A）吸附層析（B）離子交換層析（C）分配層析（D）親和層析（E）凝膠過濾16 .下列有關3 -折疊的敘述哪個是錯誤的？ （ A ）（A）球狀蛋白質中無3折疊的結構 （B）

11、 3折疊靠鏈間氫鍵而穩(wěn)定（C）它的氫鍵是肽鏈的C=O與N H間形成的a 一角蛋白可以通過加熱處理而轉變成3折疊的結構3折疊有平行的3折疊和反平行的3折疊 TOC o 1-5 h z 17一個肽平面中含有的原子數(shù)為：（ C ）（A） 3（B） 4（C） 5（ D） 6（E） 718在一個肽平面中，能自由旋轉的價鍵有幾個？（A ）（A） 2（B） 3（C） 4（D） 5（E） 619下列關于蛋白質變性的敘述，正確的是：（ D ）（A）蛋白質變性后溶解度增加（B）蛋白質變性后不易被蛋白酶水解（C）蛋白質變性后理化性質不變（ D）蛋白質變性后喪失原有的生物活性（E）蛋白質變性后導致分子量下降20蛋白質

12、與氨基酸共有的性質是：（ D ）（A）膠體性質（B）沉淀反應（C）變性性質（D）兩性性質（E）雙縮月尿反應21下列哪種蛋白質是水不溶性的？（ D ）（A）血紅蛋白（B）酶蛋白（C）卵清蛋白（D）骨膠原蛋白（E）抗體蛋白22下列哪種試劑不會導致蛋白質變性？（D ）（A）尿素 （B）鹽酸月瓜（C） SDS （D）硫酸鏤 （E）二氯化汞23下列何種變化不是蛋白質變性引起的？（C ）（A）氫鍵斷裂（B）疏水作用破壞（C）亞基解聚（D）生物活性喪失（E）分子量變小-碳原子處于（ C ）24 形成穩(wěn)定的肽鏈空間結構， 非常重要的一點是肽鍵中的四個原子以及和它相鄰的兩個（ A ）斷繞動狀態(tài)（ B ）可以相對

13、自由旋轉（C）同一平面（D）隨不同外界環(huán)境而變化的狀態(tài)25維持蛋白質二級結構穩(wěn)定的主要因素是：（ B ）（A）靜電作用力（B）氫鍵 （C）疏水鍵 （D）范德華作用力26蛋白質變性是由于（B）（ A ）一級結構改變（B ）空間構象破壞27.破壞“螺旋結構的氨基酸殘基之一是：（ A ）亮氨酸（B ）丙氨酸28、當?shù)鞍踪|處于等電點時，可使蛋白質分子的（A）穩(wěn)定性增加 （B）表面凈電荷不變29、蛋白質分子中-S-S- 斷裂的方法是（C ）（ A ）加尿素（ B ）透析法四、名詞解釋：（C）輔基脫落（D）蛋白質水解C ）（C）脯氨酸 （D）谷氨酸D ）（C）表面凈電荷增加 （D）溶解度最小C ）加過甲酸

14、（ D ）加重金屬鹽鹽析：在蛋白質溶液中加入一定量的高濃度中性鹽（如硫酸氨） ，使蛋白質溶解度降低并沉淀析出的現(xiàn)象。鹽溶：在蛋白質溶液中加入少量中性鹽使蛋白質溶解度增加的現(xiàn)象。蛋白質的一級結構：指蛋白質多肽鏈中氨基酸的排列順序，以及二硫鍵的位置。蛋白質的二級結構：指在蛋白質分子中的局部區(qū)域內，多肽鏈沿一定方向盤繞和折疊的方式。蛋白質的三級結構：指蛋白質在二級結構的基礎上借助各種次級鍵卷曲折疊成特定的球狀分子結構的構象。蛋白質的四級結構：指多亞基蛋白質分子中各個具有三級結構的多肽鏈以適當方式聚合所呈現(xiàn)的三維結構。蛋白質的變性作用：蛋白質分子的天然構象遭到破壞導致其生物活性喪失的現(xiàn)象。蛋白質在受到

15、光照、熱、有機溶劑以及一些變性劑的作用時，次級鍵遭到破壞導致天然構象的破壞，但其一級結構不發(fā)生改變。蛋白質的復性：指在一定條件下，變性的蛋白質分子恢復其原有的天然構象并恢復生物活性的現(xiàn)象。a-螺旋：多肽鏈沿長軸卷曲而成的有規(guī)則的螺旋型構象。3-折疊：兩條或多條幾乎完全伸展的多肽鏈側向聚集在一起，由相鄰肽鏈主鏈間形成有規(guī)則的氫鍵維持的多肽構象 ; 或一條肽鏈內的不同肽段間靠氫鍵而形成的構象。超二級結構：指蛋白質分子中相鄰的二級結構單位組合在一起所形成的有規(guī)則的、在空間上能辨認的二級結構組合體。結構域：指蛋白質多肽鏈在二級結構的基礎上進一步卷曲折疊成幾個相對獨立的近似球形的組裝體。亞基：指具有獨立

16、三級結構的多肽鏈單位。蛋白質的沉淀作用：在外界因素影響下，蛋白質分子失去水化膜或被中和其所帶電荷，導致溶解度降低從而使蛋白質變得不穩(wěn)定而沉淀的現(xiàn)象稱為蛋白質的沉淀作用。蛋白質的等電點：指蛋白質所帶正電荷與負電荷相等，即凈電荷為零時溶液的 pH 值。五、問答題假定有 lrnmol 的五肽，酸水解生成2mmol 谷氨酸， lmmol 賴氨酸，沒有能夠定量回收其他氨基酸。將原來的五肽用胰蛋白酶水解成兩個肽段， 在 PH7.0 進行電泳， 一個肽段移向陽極， 另一個則移向陰極。 用 FDNB處理胰蛋白酶水解的一個肽段，再用酸水解，生成DNP-谷氨酸。用胰凝乳蛋白酶處理原來五肽生成兩個肽段及游離谷氨酸。

17、試從上述實驗結果寫出該五肽的氨基酸序列。解：因為酸水解時，色氨酸易被破壞不能回收，所以應有2mmol 色氨酸；五肽組成為： 2Glx 2Trp 1Lys胰蛋白酶水解成兩個肽段：說明 Lys 不是末端氨基酸胰凝乳蛋白酶處理： X-Trp-Lys-Trp-Glu生成 DNP-谷氨酸：Glx-Trp-Lys-Trp-Glu胰蛋白酶水解： Glx-Trp-Lys 和 Trp-Glu ， Trp-Glu 向陽極移動， Glx-Trp-Lys 向陰極移動，所以是Glx 。有一個 A 肽：經酸水解分析得知由 Lys、 His、 Asp、 Glu2、 Ala 、 Val、 Tyr 和兩個 NH3 分子組成。當

18、 A 肽與 FDNB 試劑反應后，得DNP-Asp ；當用羧肽酶處理后得游離Val 。如果將A 肽用胰蛋白酶降解時，得到兩種肽，其中一種（Lys、Asp、Glu、Ala、Tyr）在pH6.4時，凈電荷為零；另一種（His、Glu、Val）可給出DNP- His, 在 pH6.4 時，帶正電荷。此外， A 肽用糜蛋白酶降解時，也得到兩種肽，其中一種（ Asp、 Ala 、Tyr）在pH6.4時呈中性，另一種（Lys、His、Glu2、Val）在pH6.4時，帶正電荷。問 A肽的氨基酸序列如何？.比較“-螺旋和3-折疊片結構的異同。a-螺旋：多肽鏈主鏈繞中心軸旋轉，形成的棒狀螺旋結構-折疊片：兩條

19、或多條幾乎完全伸展的多肽鏈（或肽段）側向聚集在一起，通過相鄰肽鏈主鏈上的氨基和 羰基之間形成的氫鍵連接成片層結構并維持結構的穩(wěn)定。相同點：均為蛋白質二級結構，穩(wěn)定力均為氫鍵。不同點：a -螺旋的氫鍵為鏈內氫鍵，一條鏈形成的右手螺旋結構，肽鏈旋轉；3-折疊片一般為兩條鏈以上，形成分子間氫鍵，為片層狀結構，肽鏈伸展測得一種蛋白質含0.426 鐵，計算其最低相對分子量。最低分子量=55.85+ 0.426 % =13110一種純酶，按質量算含亮氨酸1.65 和異亮氨酸2.48 ，試計算其最低分子量。亮氨酸分子量=131 ，又亮氨酸：異亮氨酸=1.65：2.48=2： 3即此酶中至少有 2個亮氨酸，3個異亮氨酸，則最低分子量 =2X 131 X 100+ 1.65=158006用 Sephadex G-200 凝膠過濾分析，下列蛋白質出現(xiàn)的順序是：醛縮酶（Mr=159000）;血清白蛋白（Mr=65000）;血紅蛋白（Mr=64000） ; 3-乳球蛋白（Mr=36000）;核糖核酸酶（Mr=12000）7、蛋白質的變性作用，機制及影響因素。蛋白質變性的定義：指天然蛋白質分子受到物理因素（熱、紫外照射、高壓等）或化學因素（有機溶劑、酸、