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文檔簡介
1、產(chǎn)品(chnpn)介紹售后服務(wù)部 2007-01共九十八頁產(chǎn)品分類:1、臨床化學(xué)檢驗(yàn)試劑 生化(shn hu)全系列2、臨床化學(xué)檢驗(yàn)儀器 藍(lán)寶石600全自動(dòng)生化分析儀 (Sapphire 600-Audit Diagnostics)共九十八頁國內(nèi)臨床(ln chun)生化試劑最齊全之一含已注冊(zhc)和正在申報(bào)中: 已注冊ALTASTALPGGTCHEAFU (試)TBA-ITBA-VTPALBTBILDBILPAADA (試)CR-苦CR-酶BUNUAB2-MG(試)GLU-HKGLU-OXGSPAMYTGTCHHDL-CLDL-CAPOA1APOBLPaCKCKMBLDHHBDHCaMg
2、PCu(試)ZnFeCO2ASO (試)CRP (試)RF (試)申報(bào)中5-NTGPDAAFPNAGCSFCYS-CMALBHbA1cD3-HACELDH1C3C4IgAIgGIgMTRF共九十八頁生化試劑(shj)分類:酶類: AMY,CK,CK-MB,HBDH,LDH,LDH1,ALT,AST,ALP,GGT,AFU,CHE, 5-NT,ADA,NAG,ACE,GPDA基質(zhì)(j zh)類: TP,ALB,GLU,GSP,TBIL,DBIL,UA,BUN,CR,TBA 1,5-AG,D3-H,CSF,CYS-C,TRP,血脂類: TG,TCH,HDL-C,LDL-C,APOA1,APOB,L
3、P(a)電解質(zhì): Ca,Mg,P,Cl,Cu,F(xiàn)e,Zn,CO2免疫類: ASO,RF,CRP,B2-MG,HBA1C,C3,C4,IgA,IgG,IgM,PA,MALB,AFP共九十八頁生化試劑(shj)臨床應(yīng)用肝功能TP,ALB,TBIL,DBIL,ALT,AST,ALP,GGT; TBA,AFU,AFP,ADA,CHE,5-NT,GPDA,PA腎功能UA,BUN,CR,B2-MG,NAG,mALB,UP,CSF,CYC心肌酶譜LDH-L,HBDH,CK,CK-MB,LDH1血脂TG,TCH,HDL-C,LDL-C,APOA1,APOB,LP(a)風(fēng)濕三項(xiàng)ASO,RF,CRP血糖GLU,G
4、SP,HBA1C,1,5-AG,D3-H心血管HS-CRP,ACE電解質(zhì)CA,MG,P,CL,CU,F(xiàn)E,ZN,CO2胰腺AMY其他C3,C4,IgA,IgG,IgM共九十八頁 肝膽疾病的生物化學(xué)(shn w hu xu)檢測共九十八頁1.肝臟(gnzng)的生理功能1.代謝功能:三大物質(zhì)(糖、蛋白質(zhì)和脂類)的同化、儲(chǔ)存和異化;核酸(h sun)代謝、維生素的活化和儲(chǔ)藏;激素的滅活及排泄;膽紅素、膽酸的生成;鐵、銅等金屬的代謝2.排泄功能:對膽紅素和某些染料的排泄3.解毒功能:生物轉(zhuǎn)化功能(同化、異化)4.物質(zhì)合成功能:凝血和纖溶因子、纖溶抑制因子的生成及對活性凝血因子的滅活清除共九十八頁2.
5、肝功能實(shí)驗(yàn)(shyn)的內(nèi)容蛋白質(zhì)代謝功能檢查 (TP、ALB、PA、AFP)膽紅素代謝檢查(TBIL、DBIL)膽汁酸代謝檢查(TBA)攝取(shq)、排泄功能檢查血清肝酶譜的檢查(ALT、AST、ALP、GGT、)共九十八頁蛋白質(zhì)代謝功能(gngnng)檢查肝臟是蛋白質(zhì)代謝的主要的器官,許多蛋白質(zhì)如白蛋白、糖蛋白、凝血因子、纖溶因子及各種轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白等都由肝細(xì)胞合成,當(dāng)肝細(xì)胞受損時(shí),合成上述蛋白的功能降低,蛋白質(zhì)的合成量就減少;-球蛋白雖然不是肝細(xì)胞合成,但當(dāng)肝實(shí)質(zhì)(shzh)細(xì)胞受損,間質(zhì)細(xì)胞增生時(shí),球蛋白的生成增加;因此,在肝臟疾病時(shí),可表現(xiàn)出血液中蛋白質(zhì)質(zhì)和量的改變;其主要表現(xiàn)為白蛋白減
6、少,纖維蛋白原減少,球蛋白的增多等;因此,測定血清中蛋白質(zhì)含量和分析其組分的變化,可以了解肝臟蛋白質(zhì)代謝的功能。共九十八頁1.總蛋白(dnbi)、白蛋白(dnbi)的檢測 總蛋白的檢測(jin c)雙縮脲法蛋白質(zhì)是由許多氨基酸通過肽鍵相互結(jié)合而成的,二價(jià)銅離子在堿性溶液中與蛋白中的肽發(fā)生反應(yīng)形成紫紅色絡(luò)合物,在540nm有吸收峰,并與蛋白含量 成正比。蛋白+ Cu2+ Cu 蛋白絡(luò)合物(紫紅色)共九十八頁白蛋白的檢測(jin c)溴甲酚綠終點(diǎn)法 血清中白蛋白與溴甲酚綠(BCG)在pH4.15環(huán)境中結(jié)合生成綠色復(fù)合物,溶液由黃色變?yōu)榫G色,在600nm有吸收峰,其顏色深淺與白蛋白濃度成正比,從而(
7、cng r)測出白蛋白含量。白蛋白+溴甲酚綠白蛋白-BCG復(fù)合物共九十八頁與溴甲酚紫法的比較(bjio)溴甲酚綠法操作簡單、快速,既可手工操作,也能自動(dòng)化分析,是目前國內(nèi)最常用(chn yn)方法。溴甲酚綠法除與白蛋白結(jié)合外,還與部分球蛋白結(jié)合,對血清白蛋白特異性較溴甲酚紫法稍差溴甲酚綠法測定白蛋白具有高靈敏度共九十八頁臨床意義血清總蛋白與白蛋白升高急性失水、腎上腺皮質(zhì)功能亢進(jìn)血清總蛋白與白蛋白降低肝細(xì)胞損害合成減少:肝炎、肝硬化、肝癌總蛋白60g/L,白蛋白25 g/L,低蛋白血癥營養(yǎng)不良:攝入不足丟失過多:腎病、燒傷、大出血消耗增加:結(jié)核(jih)、甲亢、惡性腫瘤共九十八頁血清總蛋白與白蛋
8、白升高 TP80g/L(高蛋白血癥)A 35g/L(高球蛋白血癥)慢性(mn xng)肝病、M蛋白血癥、自身免疫性疾病、慢性炎癥和感染如結(jié)核、麻風(fēng)、慢性血吸蟲病血清TP降低生理性減少(e.g.3y)、免疫功能抑制、先天性低TPA/G倒置肝功能損傷、M蛋白血癥。如慢性肝炎、肝硬化、肝癌、多發(fā)性骨髓瘤共九十八頁血清(xuqng)前白蛋白測定免疫比濁法 標(biāo)本中PAB與特異性抗體反應(yīng)形成不溶性復(fù)合物,可在340nm測定(cdng)該復(fù)合物的濁度,與同樣處理的標(biāo)準(zhǔn)品比較,得出標(biāo)本中PAB的含量。共九十八頁臨床意義降低:見于慢性感染、腫瘤、肝炎、肝硬化、肝癌,(因?yàn)榘胨テ诒華LB短,PA的變化遠(yuǎn)較ALB敏
9、感),故對早期肝炎、急性重肝具有特殊診斷(zhndun)價(jià)值升高:Hodgkin?。◥盒粤馨土龅囊环N獨(dú)特類型 )共九十八頁膽紅素代謝(dixi)檢查膽紅素主要是在網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)中,由衰老(shuilo)RBC的血紅蛋白分解后形成生成后在血液中與白蛋白聚合,此時(shí)尚未與其它化合物結(jié)合,稱為非結(jié)合膽紅素(間接膽紅素IBIL或游離膽紅素)非結(jié)合膽紅素被轉(zhuǎn)運(yùn)到肝臟,經(jīng)肝細(xì)胞攝取后,通過肝臟的生物轉(zhuǎn)化作用,與葡萄糖醛酸結(jié)合后 稱為結(jié)合膽紅素(直接膽紅素DBIL)共九十八頁膽紅素代謝(dixi)檢查結(jié)合膽紅素由膽道排入腸腔,被細(xì)菌還原成尿膽原尿膽原一部分被腸粘膜吸收進(jìn)入體內(nèi)被肝細(xì)胞攝取,其中大部分又轉(zhuǎn)變成膽紅
10、素隨膽汁排入腸腔,形成“肝腸循環(huán)”殘留腸腔的尿膽原氧化后,以糞膽素排出因此,當(dāng)膽紅素生成(shn chn)過多或肝細(xì)胞的攝取、結(jié)合、轉(zhuǎn)運(yùn)、排泄等過程發(fā)生障礙,可導(dǎo)致血中膽紅素增高,形成黃疸。共九十八頁總膽紅素(T-BIL) 改良化學(xué)氧化法總膽紅素在表面(biomin)活性劑存在下,被化學(xué)氧化劑氧化,生成膽綠素,測定450nm處吸光度的減少與總膽紅素的濃度成正比。 化學(xué)氧化劑 pH8.2 膽紅素膽綠素 表面活性劑共九十八頁直接(zhji)膽紅素(D-BIL) 改良化學(xué)氧化法直接膽紅素在間膽抑制劑和表面活性劑的存在下,被化學(xué)氧化劑氧化,生成(shn chn)膽綠素,測定450nm處吸光度的減少與直
11、接膽紅素的濃度成正比。 化學(xué)氧化劑 pH3.0 膽紅素 膽綠素 間膽抑制劑共九十八頁與重氮鹽法的比較(bjio)重氮法中的改良J-G法有較高的靈敏度、精密度和較寬的線性,但試劑無法長期穩(wěn)定,溶血有負(fù)干擾,且疊氮鈉作為防腐劑時(shí)能破壞(phui)偶氮試劑,導(dǎo)致呈色不完全;改良化學(xué)氧化法與J-G法有很好的相關(guān)性(R=0.994);抗溶血(Hb7.4);不受脂肪乳、VitC、肝素等干擾因素的影響;雙試劑可以長期保持穩(wěn)定共九十八頁臨床意義 增高:見于肝臟疾病,如原發(fā)性膽汁性肝硬化、急性黃疸性肝炎(n yn)、慢性活動(dòng)性肝炎(n yn)、病毒性肝炎(n yn)、阻塞性黃疸、肝硬化; 肝外疾病如溶血性黃疸、
12、新生兒黃疸、膽石癥、胰頭癌、輸血錯(cuò)誤等也可見總膽紅素也增高。共九十八頁膽汁酸測定(cdng)酶循環(huán)法 (第五代膽汁酸測定方法學(xué))膽汁酸被3-羥基類固醇脫氫酶及Thio-NAD特異性地氧化,生成3-酮類固醇及Thio-NADH,3-酮類固醇在3-羥基類固醇脫氫酶及NADH存在下,生成膽汁酸和NAD+,循環(huán)往復(fù)從而放大微量的膽汁酸量,測定生成的Thio-NADH的吸光度與標(biāo)準(zhǔn)比較,得出(d ch)膽汁酸含量。共九十八頁酶循環(huán)(xnhun)法測定反應(yīng)式Thio-NAD+ Thio-NADH + H+ 膽汁酸 3-羥基(qingj)類固醇脫氫酶 3-酮類固醇 NAD+ NADH + H+共九十八頁臨床
13、意義總膽汁酸升高肝損害:肝炎、肝硬化、肝癌膽道阻塞:膽管梗阻引起的膽汁淤積小腸污濁(wzhu)綜合癥 與第一代膽汁酸測定試劑相比 成倍提高了測定靈敏度,克服了第一代酶比色法試劑在測定低值標(biāo)本時(shí)的重復(fù)性差的問題。 同時(shí)由于靈敏度提高的原因,循環(huán)酶法試劑更加容易受到其他試劑中所含膽酸鹽的交叉污染。應(yīng)該在通道或者測定順序設(shè)置上與那些試劑隔離開來。共九十八頁血清(xuqng)酶學(xué)檢查肝臟是酶含量(hnling)最豐富的器官,肝細(xì)胞損傷時(shí),許多酶如ALT、AST、GGT、ALP釋放入血,導(dǎo)致血漿酶水平升高1.肝臟疾病時(shí)酶活力改變的機(jī)制酶合成異常肝細(xì)胞釋放增加 共九十八頁2. 對肝臟(gnzng)疾病診斷
14、意義的分類反映(fnyng)肝細(xì)胞病變和壞死的酶(ALT,AST)反映肝、膽淤滯的酶反映肝纖維化的酶反映肝細(xì)胞合成功能的酶(CHE)共九十八頁反映(fnyng)肝細(xì)胞病變和壞死的酶 谷氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(谷丙轉(zhuǎn)氨酶,ALT)連續(xù)監(jiān)測(jin c)法 (IFCC)ALT催化L-丙氨酸的氨基轉(zhuǎn)移,生成丙酮酸。丙酮酸與NADH在LDH的催化下反應(yīng)生成乳酸和NAD+。NADH在340nm處有特異吸收峰,其被氧化的速率與血清中ALT的活性成正比,在340nm處測定NADH下降速率,即可測出ALT活性。共九十八頁 天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(谷草(gco)轉(zhuǎn)氨酶,AST)連續(xù)監(jiān)測法 (IFCC)AST催化L-天冬氨
15、酸的氨基轉(zhuǎn)移與MDH催化的反應(yīng)偶聯(lián),使NADH氧化生成NAD+。NADH在340nm處有特異吸收峰,其被氧化的速率與血清中AST的活性成正比,在340nm處測定NADH下降速率,即可測出AST活性。共九十八頁與賴氏法的比較(bjio)連續(xù)監(jiān)測法多用于自動(dòng)化生化(shn hu)分析儀,準(zhǔn)確性好、精密度高。賴氏法多用于手工操作,實(shí)驗(yàn)條件要求不高,便于基層醫(yī)療單位開展,但重復(fù)性差,準(zhǔn)確性差。共九十八頁臨床意義急性病毒肝炎ALT:500-1000U/L,并且ASTALT多見 一些藥物或毒物(dw)所致升高:氯丙嗪、異煙肼、奎寧和酒精、鉛、汞、四氯化碳、有機(jī)磷中毒共九十八頁腺苷脫氨酶(ADA) 酶比色法
16、 ADA腺嘌呤核苷+ H2O次黃嘌呤核苷+NH3 PN 次黃嘌呤核苷+Pi次黃嘌呤+磷酸核糖 XOD 次黃嘌呤+2H2O+2O2 2H2O2+尿酸 POD 2H2O2+4-AAP+TOOS醌化合物 在波長546nm處測定醌化合物生成(shn chn)速率,計(jì)算出ADA活力。 共九十八頁臨床意義 類似(li s)ALT,對反映急性肝損害的殘存病變和慢性肝損害比ALT為先,(并且ADA在鑒別結(jié)核性和非結(jié)核性胸腹腔積液上也有應(yīng)用)。 共九十八頁反映肝細(xì)胞合成(hchng)功能的酶膽堿酯酶(CHE)硫代丁酰膽堿法硫代丁酰膽堿在膽堿酯酶的作用下生成(shn chn)丁酸和硫代膽堿,硫代膽堿再與5、5二硫
17、代-2-硝基苯甲酸反應(yīng)生成5-巰基-2-硝基苯甲酸,通過在405nm處測定5-巰基-2-硝基苯甲酸的增高速率,可以計(jì)算出膽堿酯酶的活力。 臨床意義 CHE活力降低:肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞損害共九十八頁反映(fnyng)膽道梗阻的酶 堿性磷酸酶(ALP)的測定連續(xù)監(jiān)測法 (IFCC) 無色的對-硝基苯磷酸二鈉在ALP作用(zuyng)下,生成在405nm處有特異吸收峰的淡黃色對-硝基苯酚,通過測定在405nm處吸光度的變化速率計(jì)算ALP活性。共九十八頁臨床意義肝膽系統(tǒng)疾?。鹤枞渣S疸、急、慢性黃疸肝 炎、肝癌黃疸的鑒別骨骼疾?。豪w維(xinwi)性骨炎、佝僂病、骨軟化病、骨轉(zhuǎn)移癌、骨折愈合期生理性升高:生長
18、期的兒童和青少年 共九十八頁 -谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)連續(xù)監(jiān)測法 -谷氨酰-3-羧基-對硝基苯胺和雙甘肽在-GT作用下,生成對硝基苯胺及 -谷氨酰雙甘肽,所釋放(shfng)出的對硝基苯胺與-GT活性成正比,通過在405nm處測定對硝基苯胺的變化,可求出-GT活力。共九十八頁臨床意義膽道阻塞性疾病急、慢性病毒性(d xn)肝炎、肝硬化酒精性肝炎其他:脂肪肝、胰腺炎、前列腺腫瘤共九十八頁其它(qt)酶類酶類腫瘤(zhngli)標(biāo)志物檢測 -L-巖藻糖苷酶(AFU)與原發(fā)性肝癌診斷標(biāo)志(81.2%), 與甲胎蛋白(AFP)聯(lián)合檢測可提高肝癌檢出率肝纖維化的酶學(xué)檢查單氨氧化酶腺苷脫氨酶 (ADA)共
19、九十八頁思考題1.肝損害蛋白(dnbi)檢查的意義。2.血清酶學(xué)在肝膽疾病檢查的意義。名詞解釋1.結(jié)合膽紅素2.非結(jié)合膽紅素共九十八頁 腎臟(shnzng)疾病的生物化學(xué)檢測共九十八頁腎臟(shnzng)的生理功能排泄水分、代謝產(chǎn)物、廢物(fiw),保留有用物質(zhì)調(diào)節(jié)水分和滲透壓調(diào)節(jié)電解質(zhì)及酸堿平衡制造某些重要的生理活性物質(zhì)共九十八頁第一節(jié) 腎小球功能(gngnng)檢查腎小球?yàn)V過率(GFR)是反映腎小球?yàn)V過功能的客觀(kgun)指標(biāo),用單位時(shí)間內(nèi)兩腎生成的超濾液量即原尿的生成量來表示腎清除率是指雙腎于單位時(shí)間(min)內(nèi),能將多少毫升血漿所含的某物質(zhì)全部清除,結(jié)果以ml/min或L/24H表示
20、共九十八頁腎清除率共九十八頁腎清除率可分別(fnbi)測定腎小球?yàn)V過率、腎血流量、腎小管對各種物質(zhì)的重吸收和分泌作用全部由腎小球?yàn)V出,腎小管不吸收、不分泌,如菊粉: 可作為腎小球?yàn)V過率測定的理想物質(zhì),能完全反映腎小球?yàn)V過率由腎小球?yàn)V出,腎小管也排泌,如尿素(nio s)、肌酐等: 反映腎小球?yàn)V過率不如菊粉準(zhǔn)確全部由腎小球?yàn)V出,又被腎小管全部吸收,如葡萄糖,可作為腎小管最大吸收率的測定除腎小球?yàn)V過外,大部分通過腎小管分泌排出,如對氨馬尿酸等,可作為腎血流量的測定共九十八頁1.內(nèi)生肌酐清除率(Ccr) 肌酐為肌肉中磷酸肌酸的代謝產(chǎn)物,是反映腎小球的濾過功能的較好指標(biāo)原理血漿肌酐種類:內(nèi)源性和外源性
21、血漿肌酐的代謝:大部分從腎小球?yàn)V過,不被腎小管重吸收,且腎小管的排泌量很少條件:在嚴(yán)格控制飲食和肌肉活動(dòng)相對(xingdu)穩(wěn)定的情況下,血漿肌酐的生成量和在尿中的排出量較恒定,其含量的變化主要受內(nèi)源性肌酐的影響內(nèi)生肌酐清除率(Ccr):指腎單位時(shí)間內(nèi),清除多少毫升血漿中的內(nèi)生肌酐共九十八頁病人檢查前的準(zhǔn)備(zhnbi) 病人連續(xù)進(jìn)食低蛋白食物3天,每天蛋白質(zhì)攝入量40g,禁食肉類,禁飲濃茶、咖啡,避免劇烈運(yùn)動(dòng)標(biāo)本采集 第四天早晨8時(shí)開始收集24小時(shí)尿液(加入甲苯防腐),當(dāng)日內(nèi)任何時(shí)間抽血2ml與尿液(測量尿液的總體積)同時(shí)送檢計(jì)算公式 每分鐘肌酐清除率=尿肌酐濃度每分鐘尿量/血漿肌酐濃度(單
22、位:ml/min)正常參考值 80-120 ml/min共九十八頁臨床意義判斷腎小球損害的敏感指標(biāo),可較早判斷腎小球損害對腎功能的初步估價(jià),可作為觀察腎移植成功(chnggng)與否的客觀指標(biāo),移植成功(chnggng),該指標(biāo)逐步回升,發(fā)生排斥,則下降慢性腎炎臨床分型的參考對臨床治療的指導(dǎo)意義藥物使用的參考共九十八頁2.血尿素氮和血肌酐的測定(cdng)原理 血尿素氮(BUN)和血肌酐(CREA)主要經(jīng)腎小球?yàn)V過而隨尿液排出,在腎實(shí)質(zhì)(shzh)受損時(shí),腎小球?yàn)V過率降低,導(dǎo)致BUN和Scr在血中的濃度增加。參考值BUN 1.47.1 mmol/LCERA 男性 44 97 mol/L 女性
23、35 80 mol/L共九十八頁尿素氮(BUN/UREA)的測定(cdng)臨床實(shí)驗(yàn)室常采用脲酶速率法、離子選擇電極法等。脲酶速率法 脲酶催化尿素水解產(chǎn)生NH3和CO2。在谷氨酸脫氫酶催化下,NH3與-酮戊二酸和NADH反應(yīng)生成NAD+。NADH在340nm處有特異性吸收峰,通過測定NADH下降速率與同樣處理的標(biāo)準(zhǔn)(biozhn)比較,得出尿素含量。共九十八頁肌酐(CREA) 的測定(cdng)氧化酶比色法 肌肝 + H2O 肌酸 肌酸 + H2O 肌氨酸+尿素(nio s) 肌氨酸+ H2O+O2氨基乙酸+ H2O2+HCHO H2O2 + 笨酚 + 4-氨基安替比林 醌 亞胺(紅色)4H2
24、O醌亞胺在546nm 處有最大吸收峰,其吸光度值與CREA含量成正比。共九十八頁與堿性(jin xn)苦味酸法( Jaffe法)比較氧化酶法測定血肌酐的特異性大大提高,可消除假肌酐如VitC、丙酮酸、丙酮、乙酰乙酸 等物質(zhì)的正干擾。因此在測得值上會(huì)較Jaffe法偏低(參考值應(yīng)作相應(yīng)調(diào)整)。氧化酶法試劑同時(shí)還能抗膽紅素和半胱氨酸等 Jaffe法的抑制物。酶法試劑也克服了苦味酸法中色素對自動(dòng)(zdng)生化分析儀比色杯和管路的污染,適合于臨床自動(dòng)(zdng)化分析儀使用 。與Jaffe法相比,酶法試劑的開蓋穩(wěn)定性也大大提高。避免了頻繁地定標(biāo)操作。共九十八頁臨床意義各種嚴(yán)重腎臟疾病引起腎功能不全時(shí)可
25、增高;上消化道出血、嚴(yán)重感染和飲食中蛋白質(zhì)過多,也可導(dǎo)致BUN暫時(shí)升高(shn o);由于血肌酐受其他影響較小,能反映患者腎功能情況,CREA明顯升高,提示預(yù)后差。共九十八頁3.血尿酸(UA)的測定(cdng)原理 UA是體內(nèi)嘌呤代謝終產(chǎn)物,小部分經(jīng)肝分解破壞,大部分經(jīng)腎小球?yàn)V過,在近端腎小管中98-100%被重吸收,故正常(zhngchng)情況下UA的清除率較低共九十八頁尿酸酶法 尿酸酶催化UA氧化生成尿囊素和H2O2,過氧化氫在過氧化物酶的存在下與笨酚、4-氨基安替比林氧化縮和成紅色醌式化合物,在546nm處有最大吸收峰,其吸光度值與UA含量成正比。臨床意義 血液尿酸增高常見于腎臟疾病、
26、痛風(fēng)、子癇、白血病與腫瘤及其他疾病如慢性鉛中毒引起的腎損害、長期(chngq)禁食等共九十八頁4. 2-微球蛋白原理 2-M在體內(nèi)主要由淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的一種小分子蛋白,正常人血中2-M濃度很低,可自由(zyu)通過腎小球,然后在近端腎小管幾乎被全部重吸收共九十八頁免疫比濁法 2-MG與特異性抗體反應(yīng)形成不溶性復(fù)合物,可在540nm測定該復(fù)合物的濁度,與同樣處理的標(biāo)準(zhǔn)品比較,得出血清(xuqng)中2-MG的含量。臨床意義尿液2-M升高(shn o)是反映近端小管受損的非常靈敏和特異的指標(biāo)腎小球?yàn)V過功能下降時(shí),血2-M水平升高共九十八頁第二節(jié)腎小管功能(gngnng)試驗(yàn)共九十八頁腎小管的功能較多
27、,除了具有強(qiáng)大的重吸收水份與一些物質(zhì)的能力外,還具有選擇分泌和排泄一些物質(zhì)的能力目前為止沒有(mi yu)理想的功能試驗(yàn)適用于臨床以尿液濃縮-稀釋試驗(yàn)和酚紅排泄試驗(yàn)作為腎小管的功能試驗(yàn)近年來尿酶和自由水清除值等的測定使腎小管功能試驗(yàn)變得簡單、靈敏、快速共九十八頁1.濃縮(nn su)稀釋試驗(yàn)評價(jià)腎小管的重吸收功能在日常或特定的飲食條件(tiojin)下,觀察病人的尿量和尿比重的變化,用以判斷腎濃縮與稀釋功能的方法稱為濃縮稀釋試驗(yàn)(concentration-dilution test)共九十八頁原理 腎臟調(diào)節(jié)水份和滲透壓的功能決定機(jī)體的尿量和尿比重的變化。 當(dāng)大量(dling)飲水后,遠(yuǎn)曲小管
28、和集合管對水的吸收減少,排尿增多,比重降低,表示其稀釋功能良好; 限制飲水后,對水的吸收增加,排尿減少,表示其濃縮功能良好。 在腎臟疾病時(shí),由于遠(yuǎn)曲小管和集合管的損傷,對水的重吸收功能減退,其濃縮-稀釋功能發(fā)生障礙共九十八頁方法莫氏(Mosenthal)試驗(yàn):病人(bngrn)正常飲食,日食三餐,每餐含水量不超過 500-600ml,此外不再進(jìn)食和飲水;注意飲食,其中要求水含量在500 - 600ml之間,早晨8時(shí)到晚上8時(shí),每2小時(shí)收集一次,晚8時(shí)到次晨8時(shí)12小時(shí)全部收集在清潔的標(biāo)本瓶中共九十八頁正常參考值24h尿量1000-2000 ml晝夜尿量之比3-4:112h夜尿0.009臨床意義
29、腎功能不全時(shí),夜間尿量可超過(chogu)750ml最高比重小于1.018表示腎濃縮功能不全尿比重相差很小,比重固定在1.010左右,表示腎濃縮功能嚴(yán)重障礙共九十八頁2.尿滲量(滲透壓)的測定(cdng)原理 液體的滲透壓是由溶液中溶質(zhì)的毫摩爾濃度決定的。尿液滲透壓反映(fnyng)尿中物質(zhì)的摩爾數(shù)。而與物質(zhì)微粒的種類及性質(zhì)無關(guān),測定尿滲量比測定尿比重更好地反映(fnyng)腎濃縮和稀釋能力正常參考值 尿液為600-1000mOsm/kgH2O,平均800mOsm/kgH2O, 血漿平均值為275-305 mOsm/kgH2O 尿滲量與血漿滲量比值為34:1共九十八頁3. 尿液酶的測定(cdn
30、g)尿液中含有數(shù)十種酶血清酶進(jìn)入尿液:當(dāng)腎小球?yàn)V過增加(zngji)而腎小管重吸收功能紊亂,血清酶進(jìn)入尿液,活性增強(qiáng)細(xì)胞酶釋放入尿液:腎小球病變、腎小管細(xì)胞破壞,間質(zhì)炎癥等使細(xì)胞破壞,細(xì)胞酶釋放入尿液使溶酶體酶增加泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤、炎癥、紅細(xì)胞、細(xì)菌等也可使尿酶增加常見的測定酶N-乙酰-氨基葡萄糖(NAG)、LDH、 - 谷氨酰轉(zhuǎn)移酶、溶菌酶共九十八頁 血清脂類的 生物化學(xué)(shn w hu xu)檢測共九十八頁概述(i sh)血漿脂類包括游離膽固醇(FC)、膽固醇酯(CE)、磷脂(PL)、甘油三酯(TG)、糖脂和游離脂肪酸(FFA)等血漿中最多的脂質(zhì)為膽固醇、PL和TG,游離膽固醇和膽固醇酯
31、稱為總膽固醇血漿脂類以脂蛋白復(fù)合體的形式存在(cnzi)血漿脂蛋白分類:CM、VLDL、IDL、LDL、HDL和Lp(a)共九十八頁1.血清(xuqng)總膽固醇測定TCH酶比色法 膽固醇酯在膽固醇酯酶的作用下分解生成膽固醇,膽固醇在膽固醇氧化酶及過氧化物(u yn hu w)酶作用下最終生成醌亞胺,醌亞胺的顏色深淺與膽固醇的濃度成正比。共九十八頁臨床意義 膽固醇的監(jiān)測用于評估罹患動(dòng)脈硬化的風(fēng)險(xiǎn)以及對脂類/脂蛋白的代謝紊亂進(jìn)行診斷和監(jiān)測治療。增高見于糖尿病昏迷患者,還常見于原發(fā)性高膽固醇血癥、動(dòng)脈粥樣硬化、腎病綜合征、總膽管阻塞、粘液性水腫、肥大(fid)性骨關(guān)節(jié)炎、老年性白內(nèi)障、牛皮癬等。降
32、低見于惡性貧血、溶血性貧血、甲狀腺功能亢進(jìn)、感染、營養(yǎng)不良、肝硬化、急性肝壞死等。共九十八頁2.甘油三脂TG磷酸甘油氧化酶法甘油三脂在脂肪酶、甘油激酶等酶的作用下,生成3-磷酸甘油,再經(jīng)磷酸甘油氧化酶(GPO)氧化生成磷酸二羥丙酮和過氧化氫(u yn hu qn),過氧化氫(u yn hu qn)與4-氨基安替比林在過氧化物酶作用下生成紅色醌類化合物。546nm下其顯色程度與TG成正比。共九十八頁臨床意義 血中的甘油三酯以乳糜微粒和前-脂蛋白中含量最高,它與動(dòng)脈(dngmi)粥樣硬化的形成密切相關(guān),甘油三酯的升高與冠心病的發(fā)生也有很大關(guān)系。增高:脂肪肝、阻塞性黃疸、動(dòng)脈粥樣硬化、高脂血癥等降低
33、:嚴(yán)重肝衰、甲狀腺功能減退等共九十八頁3.高密度脂蛋白膽固醇(HDL)一般通過HDL-C亞型含量間接反映HDL水平化學(xué)修飾酶法 膽固醇酯酶(CHER)和膽固醇氧化酶(CHOD)經(jīng)化學(xué)修飾后,對LDL、VLDL、乳糜微粒(wil)中的膽固醇反應(yīng)性降低,僅對高密度脂蛋白中的膽固醇起作用。 共九十八頁臨床意義HDL-膽固醇參與(cny)體內(nèi)膽固醇酯逆轉(zhuǎn)運(yùn),起到抗動(dòng)脈粥樣硬化作用,所以是冠心病的保護(hù)因子。HDL-膽固醇水平與AS性心、腦血管疾病發(fā)病率成負(fù)相關(guān)。HDL-C:CHOL能更好的預(yù)測心、腦動(dòng)脈粥樣硬化的危險(xiǎn)性。肝損害和腎病綜合征時(shí),HDL-C降低共九十八頁4.低密度脂蛋白膽固醇(LDL)LDL
34、是血清中攜帶膽固醇的主要顆粒(kl)LDL向組織及細(xì)胞內(nèi)運(yùn)送膽固醇,直接促使動(dòng)脈粥樣硬化選擇性溶解法 試劑中添加僅使LDL溶解的表面活性劑,LDL之外的脂蛋白(HDL、VLDL、乳糜微粒)由于受表面活性劑和糖化合物的阻礙而不能參與反應(yīng),在反應(yīng)液中以脂蛋白形式殘存。共九十八頁臨床意義 低密度脂蛋白(LDL)從肝臟攜帶(xidi)膽固醇到周圍血管,特別是到心臟上的血管(醫(yī)學(xué)上稱冠狀動(dòng)脈),可造成過多的膽固醇在血管壁上存積,引起動(dòng)脈粥樣硬化。 LDL水平升高與冠心病的發(fā)生呈正相關(guān)共九十八頁5.載脂蛋白A1Apo-A1是HDL的主要載脂蛋白成分(90%)Apo-A1有清除(qngch)組織內(nèi)脂質(zhì)和抗粥
35、樣動(dòng)脈樣硬化作用臨床意義Apo-A1血清水平與冠心病發(fā)病率負(fù)相關(guān)共九十八頁6.載脂蛋白BApo-B是LDL的主要載脂蛋白(98%)是動(dòng)脈粥樣硬化的風(fēng)險(xiǎn)指標(biāo)臨床意義Apo-B水平(shupng)與動(dòng)脈粥樣硬化和冠心病正相關(guān)膽汁淤積也可使血清Apo-B升高共九十八頁載脂蛋白的測定方法免疫透射比濁法血清(xuqng)中載脂蛋白的與試劑中相應(yīng)單克隆抗體相結(jié)合,形成抗原抗體復(fù)合物,產(chǎn)生混濁,其濁度的高低與血清(xuqng)中APOA-1成正比。共九十八頁7.脂蛋白a Lp(a)免疫透射比濁法人血清中Lp(a)與試劑中相應(yīng)的特異性單克隆抗體在適當(dāng)?shù)慕橘|(zhì)中,形成抗原-抗體復(fù)合物,產(chǎn)生一定的濁度,濁度的高低在
36、足量抗體存在時(shí)與抗原的含量成正比。臨床意義:Lp(a)動(dòng)脈(dngmi)粥樣硬化的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。共九十八頁 風(fēng)濕(fn sh)三項(xiàng)的 檢測共九十八頁1. 抗鏈球菌溶血(rn xu)素O(ASO)免疫透射比濁法將抗人抗鏈球菌溶血素O抗體包被(bo bi)在膠乳顆粒上,可與血清中的抗鏈球菌溶血素O產(chǎn)生凝集反應(yīng),產(chǎn)生一定的濁度,濁度的高低在足量抗體存在時(shí)與抗原的含量成正比。共九十八頁臨床意義A.對協(xié)助風(fēng)濕熱有一定價(jià)值。風(fēng)濕熱病人在感染后4-6周60-80%可見(kjin)ASO增高,并伴有血沉增快及白細(xì)胞增多;若疑活動(dòng)風(fēng)濕,但ASO多次檢查均在正常范圍內(nèi)則有助于排除該病。B.急性腎小球腎炎病人ASO
37、也常有增高。C.確已感染溶血性鏈球菌,但ASO一直不見增高,可見于 1.該溶血性鏈球菌不產(chǎn)生或很少產(chǎn)生 很少量ASO.2感染早期即應(yīng)用大量糖皮質(zhì)激素。共九十八頁2. 類風(fēng)濕因子(ynz)RF免疫透射比濁法將人r-球蛋白包被在膠乳顆粒上,可與血清中的類風(fēng)濕因子(ynz)產(chǎn)生凝集反應(yīng),該反應(yīng)所產(chǎn)生的凝集成一定的濁度,濁度的高低在足量抗體存在時(shí)與抗原的含量成正比。共九十八頁臨床意義類風(fēng)濕因子陽性是診斷類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的重要依據(jù),但有些正常人也可出現(xiàn)類風(fēng)濕因子陽性,稱為化驗(yàn)引起的假陽性。另外許多其他疾病也可出現(xiàn)類風(fēng)濕因子陽性,如干燥綜合癥、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(hn bn ln chun)、各種肝病、慢性支氣
38、管炎、肺氣腫、梅毒、皮肌炎等。 因此類風(fēng)濕因子陽性不一定是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。診斷類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎要綜合判斷。類風(fēng)濕因子滴度還可反應(yīng)類風(fēng)濕活動(dòng)度,正常值1:20,大于它則為陽性,比值越大,活動(dòng)度越高共九十八頁3. C反應(yīng)(fnyng)蛋白 (CRP)免疫透射比濁法將抗人C反應(yīng)蛋白抗體包被在膠乳顆粒上,可與血清中的C反應(yīng)蛋白發(fā)生凝集(nngj)反應(yīng),該反應(yīng)所產(chǎn)生的凝集(nngj)形成一定的濁度,濁度的高低在足量抗體存在時(shí)與抗原的含量成正比。共九十八頁臨床意義C-反應(yīng)蛋白(CRP)是最有名的急性相蛋白,發(fā)生炎癥時(shí)(急性相反應(yīng))血液中CRP濃度會(huì)升高。健康個(gè)體血液中CRP濃度低于5 mg/L。在細(xì)菌感染、
39、術(shù)后或組織損傷(snshng)發(fā)生急性炎癥過程中,CRP濃度在6小時(shí)后上升,峰值可達(dá)500 mg/L。檢測CRP不僅可以用于檢出急性感染,還可以對急性風(fēng)濕性疾病和腸胃疾病的炎癥反應(yīng)過程進(jìn)行監(jiān)測。與紅細(xì)胞沉降速率(ESR)和白細(xì)胞計(jì)數(shù)比較,CRP有很多優(yōu)點(diǎn):CRP更敏感,它的升高出現(xiàn)較早且在康復(fù)后恢復(fù)到參考值范圍內(nèi)也快。共九十八頁 心肌(xnj)酶譜的 生化檢測共九十八頁1. 肌酸激酶 CKIFCC推薦法(N-乙酰半胱氨酸法 ) CK ADP + 肌酸磷酸 肌酸 + ATP HK ATP + 葡萄糖 ADP + G-6-P G-6-PDH G-6-P + NAD+ 6-磷酸葡萄糖酸 + NADH + H+ 在340nm波長處測定NADH的生成速率(sl),計(jì)算出CK活力。共九十八頁臨床意義升高:心肌梗塞46小時(shí)開始(kish)升高,1836小時(shí)可達(dá)正常值的確 2030倍,為最高峰,24天恢復(fù)正常。另外,病毒性心肌炎、皮肌炎、肌肉損
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