34章DNA的復(fù)制和修復(fù)課件1

1、一、填空題 1、 嘧啶核苷酸從頭合成的第一個(gè)核苷酸是（ ），嘌呤核苷酸從頭合成的第一個(gè)核苷酸是（ ）。2、dTMP的直接前體是（ ）。3、人類對(duì)嘌呤代謝的終產(chǎn)物是（ ）4、嘧啶合成中氨甲酰磷酸的合成以（ ）作為氨的供體，尿素循環(huán)中氨甲酰磷酸由（ ）作為氨的供體。5、與嘌呤環(huán)和嘧啶環(huán)的原子來源都有關(guān)的氨基酸是（ ）。6、治療痛風(fēng)可用（ ）來作為黃嘌呤氧化酶的自殺性底物。7、5-FU的抗癌作用機(jī)理是（ ）。二、選擇題1.下列哪種物質(zhì)不是嘌呤核苷酸從頭合成的直接原料？A.甘氨酸 B.天冬氨酸 C.苯丙氨酸 D.CO2 E.一碳單位2.在細(xì)胞中自UMP合成dTMP的有關(guān)反應(yīng)涉及A.四氫葉酸衍生物傳遞一

2、碳單位 B. 四氫葉酸氧化成二氫葉酸 C.中間產(chǎn)物為dUDP D.受5-氟尿嘧啶的抑制 E.受6-巰基嘌呤的抑制3、嘌呤環(huán)1號(hào)N來源于（ ）A、Gln的酰胺N B、Gln的-氨基N C、Asn的酰胺N D、Asp的-氨基N 4、鳥嘌呤是（）A、2-氧-4-氨基嘌呤 B、 2-氨基-4-氧嘌呤 C、 2-氨基-6-氧嘌呤 D、 2-氧-6-氨基嘌呤 5、催化5-磷酸核糖和ATP作用生成5-PRPP的酶是（）A、核糖激酶 B磷酸核糖激酶C三磷酸核苷酸激酶D磷酸核糖焦磷酸激酶6、下列哪種化合物對(duì)嘌呤核苷酸的生物合成不產(chǎn)生直接反饋抑制作用（）A、TMP B、IMP C、AMP D、GMP7、最直接聯(lián)系

3、核苷酸代謝與糖代謝的物質(zhì)是（）A、葡萄糖 B、6-磷酸葡萄糖 C、1，6二磷酸葡萄糖D、5-磷酸核糖8、AMP分子中第六位碳原子上的氨基來源于（）A谷氨酰胺 B谷氨酸 C天冬氨酸 D天冬酰胺9、催化dUMP轉(zhuǎn)變?yōu)閐TMP的酶是（）A核苷酸還原酶 B胸甘酸合成酶 C脫氧胸甘激酶 D核苷酸激酶三判斷題1、嘌呤核苷酸的從頭合成是先閉環(huán)，再形成N糖苷鍵。2、dUMP轉(zhuǎn)變?yōu)閐TMP的甲基供體是攜帶甲基的FH4 。3、核苷酸的從頭合成和補(bǔ)救途徑都需要PRPP。4、氮雜絲氨酸的化學(xué)結(jié)構(gòu)與Gln相似，它干擾Gln在核苷酸合成中提供氨基作用。5、黃嘌呤氧化酶只能以黃嘌呤作為唯一底物。6、脫氧核苷酸是由核糖核苷三

4、磷酸經(jīng)還原生成的。DNA的復(fù)制和修復(fù) 復(fù)制：以親代DNA或RNA為模板，根據(jù)堿基配對(duì)的原則，在一系列酶的作用下，生成與親代相同的子代DNA或RNA的過程。幾個(gè)基本概念： 逆轉(zhuǎn)錄：以RNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下，生成DNA的過程。 翻譯：亦叫轉(zhuǎn)譯，以mRNA為模板，將mRNA的密碼解讀成蛋白質(zhì)的氨基酸順序的過程。 轉(zhuǎn)錄：以DNA為模板，按照堿基配對(duì)原則合成RNA，即將DNA所含的遺傳信息傳給RNA，形成一條與DNA鏈互補(bǔ)的RNA的過程。 DNA是生物界遺傳的主要物質(zhì)基礎(chǔ)。生物有機(jī)體的遺傳特征以密碼的形式編碼在DNA分子上，表現(xiàn)為特定的核苷酸排列順序即遺傳信息。 在細(xì)胞分裂前通過DNA的復(fù)制，

5、將遺傳信息由親代傳遞給子代，在后代的個(gè)體發(fā)育過程中，遺傳信息自DNA轉(zhuǎn)錄給RNA，并指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成，以執(zhí)行各種生命功能，使后代表現(xiàn)出與親代相似的遺傳性狀。 80年代以后在某些致癌RNA病毒中發(fā)現(xiàn)遺傳信息也可存在于RNA分子中，由RNA通過逆轉(zhuǎn)錄的方式將遺傳信息傳遞給DNA。 遺傳信息的傳遞方向即生物界遺傳信息傳遞的中心法則。1964-1970 發(fā)現(xiàn)勞氏肉瘤病毒的遺傳信息傳遞方式：逆轉(zhuǎn)錄 1953年，Watson和Crick提出中心法則：遺傳信息的單向流動(dòng)。 中心法則：病毒（復(fù)制）復(fù)制轉(zhuǎn)錄DNA RNA 蛋白質(zhì)翻譯逆轉(zhuǎn)錄RNA的復(fù)制存在于RNA病毒 DNA是生物遺傳的主要物質(zhì)基礎(chǔ)，生物機(jī)體的遺傳

6、信息以密碼的形式編碼在DNA分子上，表現(xiàn)為特定的核苷酸排列順序，并通過DNA的復(fù)制由親代傳遞給子代。在后代的生長發(fā)育過程中，遺傳信息自DNA轉(zhuǎn)錄給RNA,然后翻譯成特異的蛋白質(zhì)，以執(zhí)行各種生命功能，使后代表現(xiàn)出與親代相似的遺傳性狀。DNA復(fù)制的可能方式的假設(shè)全保留與全新復(fù)制分散復(fù)制半保留復(fù)制一、DNA的半保留復(fù)制2.半保留復(fù)制的實(shí)驗(yàn)證據(jù):1.定義： 1958年Meselson和Stahl用同位素15N標(biāo)記大腸桿菌DNA,首先證明了DNA的半保留復(fù)制。 以親代DNA雙鏈為模板以堿基互補(bǔ)方式合成子代DNA，這樣新形成的子代DNA中，一條鏈來自親代DNA，而另一條鏈則是新合成的，這種復(fù)制方式叫半保留

7、復(fù)制。第一節(jié) DNA的復(fù)制DNA半保留復(fù)制圖示： 半保留復(fù)制的證明： Meselson 和Stahl將同位素15N標(biāo)記的15NH4Cl加入大腸桿菌的培養(yǎng)基中培養(yǎng)12代，使大腸桿菌的DNA都帶上15N的標(biāo)記，然后將該大腸桿菌轉(zhuǎn)入14N的普通培養(yǎng)基中培養(yǎng)后，分離子一代、子二代、子三代、子四代DNA，進(jìn)行氯化銫密度梯度離心，實(shí)驗(yàn)證明了DNA的半保留復(fù)制。15N-DNA的密度大于14N-DNA的密度DNA的半保留復(fù)制的生物學(xué)意義： DNA在代謝上的穩(wěn)定性并非指DNA是一種惰性物質(zhì)，是處于不斷變異和發(fā)展之中 DNA的半保留復(fù)制表明DNA在代謝上的穩(wěn)定性，是保證親代的遺傳信息穩(wěn)定地傳遞給后代必要措施。二、

8、DNA復(fù)制的半不連續(xù)性1）岡崎片段和半不連續(xù)復(fù)制問題的提出：已知DNA兩條鏈反向且都能作為模板；已知DNApol聚合方向53； 岡崎等提出DNA的不連續(xù)復(fù)制模型，認(rèn)為：3 5走向的DNA是由許多53方向合成的DNA片段連接而成的。 岡崎片段： 以 5 3 走向DNA為模板合成的小片段。 約1000-2000bp。 半不連續(xù)復(fù)制的發(fā)現(xiàn) 同位素實(shí)驗(yàn)，用含3H的dT標(biāo)記用T4噬菌體感染的大腸桿菌 短時(shí)間內(nèi)分離的DNA均為DNA小片段一段時(shí)間后檢測到 DNA大片段。當(dāng)用DNA連接酶的缺失的變異株時(shí)，檢測到大量DNA片段的積累。證明DNA復(fù)制中有小片段合成。 測定DNA小片段，遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于合成DNA的一半。

9、似乎兩條鏈都是不連續(xù)合成的，后發(fā)現(xiàn)是由于U替代dT滲入DNA中，而被尿嘧啶-N-糖基酶切除所致。 在缺少尿嘧啶-N-糖基酶的突變植株中，DNA的U不再被切除，則檢測到一半3H標(biāo)記出現(xiàn)在小片段（岡崎片段）中。 1968日本學(xué)者岡崎：前導(dǎo)鏈滯后鏈岡崎片段前導(dǎo)鏈：以3 5 方向的親代鏈為模板連續(xù)合成的子代鏈。滯后鏈：以5 3方向的親代鏈為模板的子代鏈先逆復(fù)制叉移動(dòng)方向合成岡崎片段，再連接成滯后鏈。其復(fù)制過程的復(fù)制起點(diǎn)呈現(xiàn)叉子的形式,故稱復(fù)制叉 三、與DNA復(fù)制有關(guān)的酶和蛋白質(zhì)原料：四種脫氧核苷三磷酸 （dATP、dGTP dCTP dTTP)需要模板：以DNA為模板鏈，合成子代DNA，模板可以是雙鏈

10、，也可以是單鏈DNA。合成產(chǎn)物與模板互補(bǔ)。 需要引物：一小段RNA(或DNA）為引物，在大腸桿 菌中，DNA的合成需要一段RNA鏈作為引物，引物含3 -OH. 合成方向：5 3 (一) DNA聚合酶：1956年Kornberg等在大腸桿菌中首先發(fā)現(xiàn)DNA聚合酶，其后發(fā)現(xiàn)該酶在許多生物中廣泛存在。該酶的催化性質(zhì)如下：（二）大腸桿菌DNA聚合酶（1）5 3 聚合酶功能（但持續(xù)合成DNA的能力差）； （2）3 5外切酶活性（對(duì)雙鏈無作用，在正常聚合條件下，此活性不能作用于生長鏈，只作用于生長中不配對(duì)的單鏈，校對(duì)功能。）；（3）還具有5 3外切酶活性（雙鏈有效）；1、DNA聚合酶:1956年Kornb

11、erg首先從大腸桿菌中分離。該酶為單體酶,含一個(gè)鋅原子。為多功能酶，具有: 該酶缺失時(shí)大腸桿菌仍具有DNA合成酶活性，只是對(duì)DNA損傷的修復(fù)能力下降，容易導(dǎo)致變異和死亡。推測該酶主要是對(duì)DNA損傷的修復(fù)，以及在DNA復(fù)制時(shí)RNA引物切除及其缺口的填補(bǔ)。a. 聚合作用 在引物的3-OH末端，以dNTP為底物，按模板DNA上的指令由DNA pol逐個(gè)聚合上核苷酸。 酶的專一性主要表現(xiàn)為新進(jìn)入的脫氧核苷酸必須與模板DNA配對(duì)時(shí)才有催化作用。dNTP進(jìn)入結(jié)合位點(diǎn)后，可能使酶的構(gòu)象發(fā)生變化，促進(jìn)3-OH與5-PO4結(jié)合生成磷酸二酯鍵。DNA聚合酶催化的反應(yīng)： b. 35外切酶活性（校對(duì)作用） 35外切酶

12、活性是從35方向識(shí)別和切除不配對(duì)的DNA生長鏈末端的核苷酸。 錯(cuò)誤核苷酸進(jìn)入pol的結(jié)合位點(diǎn)不能與模板配對(duì)，無法改變酶的構(gòu)象而被35外切酶活性位點(diǎn)所識(shí)別并切除。 c. 53外切酶活性（切除修復(fù)作用） 53外切酶活性是從53方向水解DNA生長鏈前方的DNA鏈。它只作用具切口的雙螺旋DNA，并在切口以外的配對(duì)區(qū)切割。 53外切酶活性在DNA損傷的修復(fù)中可能起著重要作用。對(duì)岡崎片段5-末端RNA引物的去除依賴此種外切酶活性。DNA聚合酶的功能2、DNA聚合酶： 多亞基酶，聚合作用，聚合活力比DNA聚合酶高；持續(xù)合成DNA的能力差。該酶缺失時(shí)大腸桿菌仍具有DNA合成能力，推測該酶仍然不是真正的DNA聚

13、合酶。該酶具有3 5外切酶活性。其功能可能在修復(fù)紫外光引起的DNA損傷中起作用。3、DNA聚合酶 多亞基酶，含十種亞基:（），其中（）稱為核心酶，2稱為夾子，（2）組成復(fù)合物，其主要功能是幫助亞基夾住DNA，故稱為夾子裝配器，該酶DNA合成的持續(xù)能力強(qiáng)，主要與該結(jié)構(gòu)有關(guān)。另外，該酶合成速度大，活性高，缺失時(shí)大腸桿菌因DNA復(fù)制抑制而致死。因此認(rèn)為該酶DNA的真正復(fù)制酶。DNA聚合酶DNA聚合酶DNA聚合酶結(jié)構(gòu)基因不同種類的亞基數(shù)目相對(duì)分子質(zhì)量35外切酶53外切酶聚合速度（核苷酸/分）持續(xù)合成能力功能Pol A1103,0001,000-1,2003-200切除引物，修復(fù)Pol B788,000

14、2,4001,500修復(fù)Pol C10830,00015,000-60,000500,000復(fù)制大腸桿菌三種DNA聚合酶比較(三）DNA連接酶：連接DNA雙鏈中的單鏈切口作用特點(diǎn)： 大腸桿菌和其它細(xì)菌的DNA連接酶要求NAD+提供能量；在高等生物和噬菌體中，則要求ATP提供能量。T4噬菌體的DNA連接酶不僅能連接雙鏈DNA上的粘性切口，而且能連接無粘性末端的平頭雙鏈DNA。 DNA連接酶在DNA復(fù)制、損傷修復(fù)、重組等過程中起重要作用。1、拓?fù)洚悩?gòu)酶 拓?fù)洚悩?gòu)酶：催化DNA的拓?fù)溥B環(huán)數(shù)發(fā)生變化的酶，在DNA重組修復(fù)和其它轉(zhuǎn)變方面起重要作用。 除連環(huán)數(shù)不同外其它性質(zhì)均相同的DNA分子稱為拓?fù)洚悩?gòu)體

15、，引起拓?fù)洚悩?gòu)體反應(yīng)的酶稱為拓?fù)洚悩?gòu)酶。(四)與DNA合成有關(guān)的其它蛋白因子(大腸桿菌中)兩類拓?fù)洚悩?gòu)酶作用特點(diǎn):口2、解螺旋酶 （解鏈酶） 通過水解ATP將DNA兩條鏈打開。E.coli中的rep蛋白就是解螺旋酶，還有解螺旋酶I、II、III。每解開一對(duì)堿基需要水解2個(gè)ATP分子。 穩(wěn)定DNA解開的單鏈，防止復(fù)性和保護(hù)單鏈部分不被核酸酶水解。3、單鏈結(jié)合蛋白： 引發(fā)體可以沿模板鏈5 3方向移動(dòng),具有識(shí)別合成起始位點(diǎn)的功能，移動(dòng)到一定位置上即可引發(fā)RNA引物的合成。移動(dòng)和引發(fā)均需要ATP提供能量， n蛋白具有ATP酶的活力。引發(fā)體的移動(dòng)與復(fù)制叉移動(dòng)的方向相同，與岡崎片段的合成方向相反。4、引物

16、合成酶與引發(fā)前體 引物合成酶：催化引物RNA的生成 引發(fā)前體:它由多種蛋白質(zhì)dnaA、dnaB、dnaC、n、n、n和i組成。引發(fā)前體再與引發(fā)酶結(jié)合組裝成引發(fā)體。 蛋白質(zhì)功能相對(duì)分子量（103）分子/細(xì)胞DNA旋轉(zhuǎn)酶（或拓?fù)洚悩?gòu)酶）DNA解鏈酶單鏈結(jié)合蛋白引物合成酶引入或松開超螺旋使雙鏈DNA解鏈穩(wěn)定單鏈區(qū)合成RNA引物40065746050300100（五）、參與DNA復(fù)制的酶與蛋白因子總覽圖四、DNA的復(fù)制過程1、復(fù)制的起點(diǎn)與方向（一）復(fù)制的起始 大腸桿菌雙鏈環(huán)狀DNA的復(fù)制（一個(gè)復(fù)制起點(diǎn)，雙向復(fù)制）3 真核細(xì)胞線狀染色體DNA的復(fù)制方式（多個(gè)復(fù)制起點(diǎn)，雙向復(fù)制） 單向滾環(huán)式復(fù)制（噬菌體X

17、174DNA單鏈環(huán)狀） 從復(fù)制原點(diǎn)到終點(diǎn)，組成一個(gè)復(fù)制單位，叫復(fù)制子（基因組獨(dú)立進(jìn)行復(fù)制的單位）。 DNA的復(fù)制有特定的起始位點(diǎn)，叫做復(fù)制原點(diǎn)。常用ori C(或o）表示。大腸桿菌的復(fù)制原點(diǎn)ori C由245個(gè)bp構(gòu)成，關(guān)鍵序列含兩組保守的重復(fù)序列：三個(gè)13bp的序列（富含A、T的序列）和四個(gè)9bp的序列；許多生物的復(fù)制原點(diǎn)也都是富含A、T的區(qū)段。復(fù)制原點(diǎn)由DnaA蛋白識(shí)別， 在原點(diǎn)由DnaB蛋白（解螺旋酶）將雙螺旋解開成單鏈狀態(tài)，分別作為模板，合成其互補(bǔ)鏈(DNA雙鏈的解開還需DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶 、 SSB),在原點(diǎn)處形成一個(gè)眼狀結(jié)構(gòu)，叫復(fù)制眼。2、起點(diǎn)的識(shí)別和雙鏈的解開（1）拓?fù)洚悩?gòu)酶解開超

18、螺旋。（2）Dna A蛋白識(shí)別并在ATP存在下結(jié)合于四個(gè)9bp的重復(fù)序列。（3）在類組蛋白（HU、ATP參與下, Dan A蛋白變性13個(gè)bp的重復(fù)序列,形成開鏈復(fù)合物。（4）Dna B借助于水解ATP產(chǎn)生的能量在Dna C的幫助下沿5 3 方向移動(dòng)，解開DNA雙鏈，形成前引發(fā)復(fù)合物。（5）單鏈結(jié)合蛋白結(jié)合于單鏈。（6）引物合成酶（Dna G蛋白）開始合成RNA引物。3、RNA引物的合成（二） 鏈的延伸1、岡崎片段的合成 真核生物的岡崎片段為：100-200bp 原核生物的岡崎片段為：1000-2000bp2、DNA鏈的延伸 在DNA聚合酶的催化下，以四種5 -脫氧核苷三磷酸為底物，在RNA引

19、物的3端以磷酸二酯鍵連接上脫氧核糖核苷酸并釋放出焦磷酸。DNA鏈的延伸同時(shí)進(jìn)行前導(dǎo)鏈和滯后鏈的合成。兩條鏈方向相反。 前導(dǎo)鏈 滯后鏈 岡崎片段 半不連續(xù)復(fù)制岡崎模型（三）DNA復(fù)制的終止DNA復(fù)制的終點(diǎn)在DNA上存在著復(fù)制終止位點(diǎn)，某些蛋白因子可識(shí)別終止位點(diǎn)的序列，使DNA復(fù)制在終止位點(diǎn)終止。E.coli的DNA復(fù)制終點(diǎn)序列：AATTAGTATGTTGTAACTAAAGTTTAATCATACAACATTGATTTCA大腸桿菌的兩個(gè)復(fù)制叉在相距終點(diǎn)100kb時(shí)，復(fù)制速度減慢，從而協(xié)調(diào)2個(gè)復(fù)制叉到達(dá)的時(shí)間。大腸桿菌的兩個(gè)復(fù)制叉在相距終點(diǎn)100kb時(shí)，復(fù)制速度減慢，從而協(xié)調(diào)2個(gè)復(fù)制叉到達(dá)的時(shí)間。DN

20、A復(fù)制時(shí)，當(dāng)RNA引物被切除后，中間所遺留的間隙由DNA聚合所填充，最后由連接酶封口。形成兩條與親代鏈完全相同的兩條子代鏈。（四）、真核生物DNA復(fù)制的特點(diǎn)4、真核生物染色體在全部復(fù)制完之前起點(diǎn)不再重新開始復(fù)制；而在快速生長的原核生物染色體DNA復(fù)制中，起點(diǎn)可以連續(xù)發(fā)動(dòng)復(fù)制。真核生物快速生長時(shí)，往往采用更多的復(fù)制起點(diǎn)。1、真核生物染色體有多個(gè)復(fù)制起點(diǎn)，稱為自主復(fù)制序列（ARS）或復(fù)制基因(replicator);多復(fù)制眼，呈雙向復(fù)制，多復(fù)制子。2、岡崎片段長約200bp。3、真核生物DNA復(fù)制速度比原核慢，速度為10003000bp/min(僅為原核生物的1/201/50）。7、RPA：真核生

21、物的單鏈結(jié)合蛋白。5、真核生物有多種DNA聚合酶,DNA聚合酶（）是真正的復(fù)制酶，在PCNA存在下有持續(xù)的合成能力。PCNA稱為增殖細(xì)胞核抗原，相當(dāng)于大腸桿菌DNA聚合酶的-夾子，RFC蛋白相當(dāng)于夾子裝配器。6、真核生物線性染色體兩端有端粒結(jié)構(gòu)，它是由許多成串的重復(fù)短序列組成，端粒功能是穩(wěn)定染色體末段結(jié)構(gòu)，防止染色體間的末端連接，并可補(bǔ)償滯后鏈5-末段在消除RNA引物后造成的空缺，使染色體保持一定長度。端粒酶是含一段RNA的逆轉(zhuǎn)錄酶.逆轉(zhuǎn)錄（reverse transcription ） 1970年Temin等和Baltimore分別從勞氏肉瘤病毒和小白鼠白血病病毒等致病RNA病毒中分離出逆轉(zhuǎn)

22、錄酶，迄今已知的致癌RNA病毒都含有逆轉(zhuǎn)錄酶。 定義: 以RNA為模板，按照RNA中的核苷酸順序合成DNA的過程稱為逆轉(zhuǎn)錄，由逆轉(zhuǎn)錄酶催化進(jìn)行。 用特異抑制物（放線菌素D）能抑制致癌RNA病毒的復(fù)制，而對(duì)一般RNA病毒的復(fù)制無影響。已知放線菌素D專門抑制以DNA為模板的反應(yīng)，可見致癌RNA病毒的復(fù)制過程必然涉及到DNA。所以Temin于1964年提出前病毒的假說。 返回第二節(jié) 逆轉(zhuǎn)錄 以前病毒形式整合到宿主細(xì)胞DNA中而使細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化單鏈病毒RNA RNA-DNA雜交分子 雙鏈DNA（前病毒） 逆轉(zhuǎn)錄酶也和DNA聚合酶一樣，沿53方向合成DNA，底物為四種dNTP,并要求短鏈RNA作引物。 逆

23、轉(zhuǎn)錄酶是多功能酶，兼有3種酶的活性： RNA指導(dǎo)的DNA聚合酶活性； DNA指導(dǎo)的DNA聚合酶活性； 核糖核酸酶H的活性，專一水解RNA-DNA雜交分子中的RNA，可沿53方向起核酸外切酶的作用； 無校對(duì)功能，錯(cuò)誤率高，易產(chǎn)生變異。+RNA+DNA-RNA+DNA-DNA+致癌RNA病毒的逆轉(zhuǎn)錄過程 cDNA：反義DNA 幾乎所有真核生物mRNA分子的3末端都有一段polyA,當(dāng)加入寡聚dT作為引物時(shí)，mRNA就可作為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶催化下在體外合成與該mRNA互補(bǔ)的DNA，稱為cDNA。 不能把“中心法則”絕對(duì)化，遺傳信息也可以從RNA傳遞到DNA。促進(jìn)了分子生物學(xué)、生物化學(xué)和病毒學(xué)的研究，

24、為腫瘤的防治提供了新的線索。目前逆轉(zhuǎn)錄酶已經(jīng)成為研究這些學(xué)科的工具。 1983年,發(fā)現(xiàn)人類免疫缺陷病毒(human immune deficience virus,HIV),感染T淋巴細(xì)胞后即殺死細(xì)胞,造成宿主機(jī)體免疫系統(tǒng)損傷,引起艾滋病(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)，該病毒為逆轉(zhuǎn)錄病毒。逆轉(zhuǎn)錄酶發(fā)現(xiàn)的理論與實(shí)踐意義：第三節(jié) DNA損傷與修復(fù) DNA在復(fù)制時(shí)產(chǎn)生錯(cuò)配，病毒基因整合，某些物化因子如紫外光、電離輻射和化學(xué)誘變等，都可能使DNA的結(jié)構(gòu)及功能發(fā)生改變。從而引起生物突變，甚至導(dǎo)致死亡。 DNA的損傷基因修復(fù)“工程隊(duì)” 錯(cuò)配修復(fù) 直接修復(fù)

25、 切除修復(fù) 重組修復(fù) SOS修復(fù) 錯(cuò)配修復(fù) 通過一個(gè)酶系統(tǒng)修復(fù)DNA錯(cuò)配的堿基根據(jù)復(fù)制叉上DNA甲基化程度，切除尚未甲基化的子代鏈上的錯(cuò)配堿基1、參與錯(cuò)配修復(fù)的酶與蛋白質(zhì)Dam甲基化酶 ; MutH、MutL、MutS蛋白 ; 解螺旋酶 ; DNA聚合酶 ;外切酶、 、 ； DNA連接酶 ； SSB甲基化指導(dǎo)的錯(cuò)配修復(fù) 甲基化指導(dǎo)的錯(cuò)配修復(fù)(二) 堿基的切除修復(fù) （1）堿基切除修復(fù)(Base Excision Repair BER) DNA糖苷酶(glycosylase)識(shí)別損傷堿基并切開糖苷鍵 Ap內(nèi)切酶切開Ap位點(diǎn)附近的磷酸二酯鍵 DNA PolI除去DNA鏈的損傷部分(5 - 3外切)并合成 連接酶封閉 （2）核苷酸切除修復(fù)(Nucleotide Excision Repair NER) uvrABC核酸酶切下含有損傷部位的一段DNA片段(約12Nt)， DNA PolI填補(bǔ)缺口，連