動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體PPT

1、關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體PPT第一張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月電激處理使供體核進(jìn)入受體卵母細(xì)胞構(gòu)建重組胚胎卵母細(xì)胞采集、培養(yǎng)M期卵母細(xì)胞供體牛供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞代孕母?？寺∨ｓw細(xì)胞培養(yǎng)去核卵母細(xì)胞去核胚胎移植體細(xì)胞核移植過程（體細(xì)胞克隆動(dòng)物） 存在的問題（1）成功率非常低（2）克隆動(dòng)物表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷等健康問題（3）對(duì)克隆動(dòng)物食品的安全性問題也存在爭(zhēng)議。第二張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月專題2 細(xì)胞工程2.2.2 動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體主備人：姚雪豐 議課時(shí)間：第15周 上課時(shí)間：第17周環(huán)節(jié)：學(xué)習(xí)目標(biāo)1.掌握動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的區(qū)別和聯(lián)系。

2、2.簡(jiǎn)述動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體制備的過程。3.了解單克隆抗體在醫(yī)學(xué)實(shí)踐中的應(yīng)用，并說出其應(yīng)用實(shí)例。第三張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月閱讀教材5254頁，回答下列問題：環(huán)節(jié)：?jiǎn)栴}導(dǎo)學(xué)1.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)與動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)有什么不同？2.常規(guī)血清抗體與單克隆抗體有何區(qū)別？3.單克隆抗體怎么制備？4.單克隆抗體主要有哪幾方面的用途？第四張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月一、動(dòng)物細(xì)胞融合9:45環(huán)節(jié)：點(diǎn)撥精講細(xì)胞融合是正常的生命活動(dòng)兩個(gè)細(xì)胞正在融合 受精作用第五張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月1、概念：指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。2、結(jié)果形成單核的雜交

3、細(xì)胞3、原理細(xì)胞膜的流動(dòng)性4、誘導(dǎo)方式物理法：離心、振動(dòng)、電激化學(xué)法：聚乙二醇（PEG)生物法：滅活的病毒一、動(dòng)物細(xì)胞融合第六張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月 動(dòng)物細(xì)胞融合過程示意圖不同DNA的兩個(gè)細(xì)胞 滅活的病毒有絲分裂兩個(gè)完整的雜交細(xì)胞 技巧歸納滅活的病毒能作為誘導(dǎo)劑,不滅活的病毒不能作為誘導(dǎo)劑1.滅活的病毒能使細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)重新排布,細(xì)胞膜打開,細(xì)胞發(fā)生融合。2.不滅活的病毒會(huì)感染細(xì)胞,而不能誘導(dǎo)細(xì)胞融合。第七張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月5、過程：動(dòng)物細(xì)胞A動(dòng)物細(xì)胞B誘導(dǎo)，融合1個(gè)完整的雜交細(xì)胞AB（膜融合、質(zhì)融合）（核融合）細(xì)胞融合完成的標(biāo)志:細(xì)胞核

4、融合成一個(gè)核6、意義：突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交（種間、屬間、科間、動(dòng)植物之間）成為可能。 7、應(yīng)用： 成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段。最有價(jià)值的應(yīng)用制備單克隆抗體第八張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月動(dòng)物細(xì)胞融合雜種細(xì)胞愈傷組織雜種植株植物細(xì)胞A植物細(xì)胞B 原生質(zhì)體A原生質(zhì)體B植物體細(xì)胞雜交去壁原生質(zhì)體融合植物組織培養(yǎng)物理法化學(xué)法生物法：滅活的病毒動(dòng)物細(xì)胞A動(dòng)物細(xì)胞B雜種細(xì)胞常用方法8.植物體細(xì)胞雜交、動(dòng)物細(xì)胞融合的比較第九張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月主要用于制備單克隆抗體獲得雜種植株用途物理、化學(xué)方法（同左）滅活的病毒物理（離心

5、、振蕩、電刺激）化學(xué)（聚乙二醇）誘導(dǎo)方法使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合細(xì)胞融合的方法細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞全能性原理動(dòng)物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交比較項(xiàng)目8.植物體細(xì)胞雜交、動(dòng)物細(xì)胞融合的比較第十張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月例1下圖表示細(xì)胞融合技術(shù)的一些過程,請(qǐng)據(jù)圖回答:(1)若A、B細(xì)胞為動(dòng)物細(xì)胞,從A和B細(xì)胞到C細(xì)胞的過程中,常用作為來誘導(dǎo)融合。A、B融合為C的過程說明細(xì)胞膜具有特性。其融合完成的標(biāo)志是。得到的C細(xì)胞可稱為。滅活的病毒誘導(dǎo)劑流動(dòng)性細(xì)胞核融合雜交細(xì)胞(2)若A、B細(xì)胞為植物細(xì)胞,那么這樣的細(xì)胞已經(jīng)用酶降解去掉了 ,這種酶可能是酶

6、,由此生成的A和B細(xì)胞稱為 。A、B到C細(xì)胞的過程中,常用的物理方法是;融合完成的標(biāo)志是;形成的D細(xì)胞還要應(yīng)用技術(shù)把D培養(yǎng)成植株。(3)若A為人細(xì)胞,B為鼠細(xì)胞,并分別用紅、綠熒光染料標(biāo)記細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì),在形成C細(xì)胞時(shí),細(xì)胞一半發(fā)紅色熒光,一半發(fā)綠色熒光。到D細(xì)胞階段,兩種顏色的熒光均勻分布,原因是 。細(xì)胞壁纖維素酶和果膠原生質(zhì)體離心、振動(dòng)、電激形成新的細(xì)胞壁植物組織培養(yǎng)細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)是可以運(yùn)動(dòng)的第十一張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月二、單克隆抗體什么是抗體？由何種細(xì)胞產(chǎn)生？主要分布在哪里？起何作用？效應(yīng)B細(xì)胞血清特異性免疫作用抗體：機(jī)體受抗原刺激后產(chǎn)生的，并且能與該抗原發(fā)生特異

7、性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。 第十二張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月讀下面一段文字資料，思考以下問題：長(zhǎng)期以來，為了獲得抗體，采用的是把某種抗原反復(fù)注射到動(dòng)物體內(nèi)，然后從動(dòng)物血清中分離出所需抗體的方法。用這種方法獲得的抗體，不僅產(chǎn)量低，而且抗體的特異性差，純度低，反應(yīng)不夠靈敏。人們發(fā)現(xiàn)，在動(dòng)物發(fā)生免疫反應(yīng)的過程中，體內(nèi)的B細(xì)胞可以產(chǎn)生多達(dá)百萬種以上的特異性抗體，但是每個(gè)B細(xì)胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。要想獲得大量的單一抗體，必須用單個(gè)B細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖，即克隆。 1、請(qǐng)從以上文字資料中找出單克隆抗體的概念2、怎樣才能獲得單克隆抗體？提示1：僅用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可行嗎？提示

8、2：我們所學(xué)的哪種細(xì)胞是可以無限增殖的？提示3：有什么方法能使B細(xì)胞產(chǎn)生抗體的能力和腫瘤細(xì)胞無限增殖能力同時(shí)具備呢？用單個(gè)B細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖（克?。?，得到的細(xì)胞群能夠分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體，這種抗體就叫做單克隆抗體。第十三張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月 接受抗原刺激后，能分泌針對(duì)該抗原的特異性抗體，在體液免疫中具有重要功能。B淋巴細(xì)胞本身是一種終末分化細(xì)胞，通常不再進(jìn)行細(xì)胞分裂，存活一段時(shí)間后便會(huì)死亡短命細(xì)胞B淋巴細(xì)胞 所以B淋巴細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)不能無限增殖，而癌細(xì)胞是可以無限增殖的。骨髓瘤細(xì)胞 : 惡性增殖的轉(zhuǎn)化細(xì)胞，只要營(yíng)養(yǎng)條件適合可永遠(yuǎn)分裂和存活長(zhǎng)命細(xì)胞。經(jīng)篩選

9、與馴化，現(xiàn)已建立多種骨髓瘤細(xì)胞株沒有抗體分泌物。 因此可以利用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與之融合，就可獲得既能無限增殖又能產(chǎn)生單一抗體的細(xì)胞。第十四張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月特點(diǎn)：產(chǎn)量低、特異性差、純度低、反應(yīng)不夠靈敏常規(guī)抗體制備一個(gè)B淋巴細(xì)胞：只分泌一種特異性抗體單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞 小鼠骨髓瘤細(xì)胞：能無限增殖融合 單克隆抗體 培養(yǎng) 向動(dòng)物體內(nèi)反復(fù)注射抗原，使動(dòng)物產(chǎn)生抗體，然后從血清中分離所需抗體。優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)，靈敏度高。第十五張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月雜交 細(xì)胞滅活的病毒等手段小鼠骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞經(jīng)免疫的小鼠提取雜交瘤細(xì)胞第一次篩選用特定的選擇性培養(yǎng)基第二次篩選能

10、產(chǎn)生特定抗體、培養(yǎng)條件下能無限增殖的雜交瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔提取單克隆抗體二、單克隆抗體的制備1. 單克隆抗體的制備過程 第十六張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月3.為何要進(jìn)行兩次篩選？4.如何進(jìn)行第2次篩選？培養(yǎng)在多孔培養(yǎng)板上，每孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞。第1次篩選得到雜交瘤細(xì)胞（多種）。第2次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞群。1.本過程利用了哪些原理？免疫原理，細(xì)胞融合原理和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理2.為什么選用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與B細(xì)胞融合？這樣融合成的雜交瘤細(xì)胞，繼承了雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，不僅具有B細(xì)胞分泌抗體的能力，而且還有無限增殖的本領(lǐng)，因而可以獲得大量單克隆抗體。思考：第十

11、七張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月2.單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)：3.單克隆抗體的應(yīng)用特異性強(qiáng)，靈敏度高，可大量制備（1）作為診斷試劑最廣泛應(yīng)用 具有準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速（2）用于治療疾病和運(yùn)載藥物“生物導(dǎo)彈” 單克隆抗體藥物 單抗導(dǎo)向，藥物為彈頭主要用于治療癌癥治療，單克隆抗體作為載體，運(yùn)載抗癌藥物，形成“生物導(dǎo)彈”，準(zhǔn)確殺傷癌變細(xì)胞。第十八張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月例2下圖是單克隆抗體的制備過程,請(qǐng)據(jù)圖回答問題:(1)抗體的化學(xué)本質(zhì)是,主要分布于中,也分布于組織液及外分泌液中。(2)若想通過過程獲得所需的B淋巴細(xì)胞,應(yīng)先對(duì)小鼠進(jìn)行的處理是 ,該處理的實(shí)質(zhì)是在小鼠體內(nèi)發(fā)生

12、的過程。制備單克隆抗體的B淋巴細(xì)胞一般從中采集。球蛋白血清注射(相應(yīng)的)抗原體液免疫脾(3)過程除了采用誘導(dǎo)植物細(xì)胞原生質(zhì)體融合的方法外,還可以用 作為誘導(dǎo)劑。細(xì)胞兩兩融合后,可出現(xiàn) 種融合細(xì)胞。(4)過程中雜交瘤細(xì)胞從培養(yǎng)基中吸收葡萄糖、氨基酸的方式是。(5)過程要挑選出能產(chǎn)生 的細(xì)胞群繼續(xù)培養(yǎng)。特定抗體滅活的病毒3主動(dòng)運(yùn)輸?shù)谑艔?，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月兩個(gè)“過程”動(dòng)物細(xì)胞融合過程單克隆抗體制備過程三個(gè)“一”一個(gè)誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法 滅活病毒一個(gè)新細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞一個(gè)優(yōu)勢(shì)單克隆抗體特異性強(qiáng)、 靈敏度高的優(yōu)勢(shì)重點(diǎn)環(huán)節(jié)：課堂總結(jié)第二十張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月1在

13、動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中， 正確的是（） A結(jié)果是相同的 B雜種細(xì)胞的形成過程基本相同 C操作過程中酶的作用相同 D誘導(dǎo)融合的手段相同環(huán)節(jié)：當(dāng)堂檢測(cè)2.能使動(dòng)物細(xì)胞融合的特有的誘導(dǎo)因子是()。A.離心B.滅活的病毒 C.電刺激 D.振動(dòng)B3、科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓疤細(xì)胞融合的是（ ） A.經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞 B.沒經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞C.經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞 D.沒經(jīng)過免疫的淋巴細(xì)胞A第二十一張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月4.要想獲得大量的單克隆抗體就必須用單個(gè)的B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖,形成細(xì)胞群。其原因是()。A.在體外培養(yǎng)條件下,B淋巴細(xì)胞可以無限增殖B.在動(dòng)物體內(nèi)B淋巴細(xì)胞可產(chǎn)生多達(dá)百萬種以上的抗體C.每一個(gè)B淋巴細(xì)胞都參與特異性免疫反應(yīng)D.每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體D5.某同學(xué)在學(xué)習(xí)“細(xì)胞工程”時(shí),列表比較動(dòng)植物細(xì)胞工程的有關(guān)內(nèi)容,你認(rèn)為錯(cuò)誤的是()。B第二