鈣指示劑分光光度法測定微量鈣

1、一實驗部分(1-2)主要儀器和試劑試驗方法二試驗結(jié)果與討論2-4)繪制吸收曲線選擇測定波長有色配合物穩(wěn)定性試驗溶液酸度的影響顯色劑的用量配合物的組成工作曲線共存離子的影響及干擾的消除三 樣品分析(4-16 ).化學(xué)試劑：硫酸鈉氯化鉀氯化鈉硝酸鈉.水樣的分析工業(yè)水 自來水 TOC o 1-5 h z 四 結(jié)論（17）五參考文獻(xiàn)（17）六致謝（23）鈣指示劑分光光度法測定微量鈣摘要:研究了鈣指示劑與鈣離子作用的顯色體系，試驗了影響該顯色體系的靈敏度 和穩(wěn)定性的各項因素，確定了最佳操作條件，試驗表明，在 pH為5.4的乙酸-乙酸鈉緩沖 溶液介質(zhì)中，鈣與 3ml 0.1% （質(zhì)量分?jǐn)?shù)）的鈣指示劑反應(yīng)1

2、0min后顯色完全且達(dá)到穩(wěn)定，配合物所形成的配位比為1:1,最大吸收波長入max為620nm,方法的表觀摩爾吸光系數(shù)e為2.15 X 10 4l/（mol*cm）,在此波長及最佳操作條件下，鈣含量在01.5 g /ml質(zhì)量濃度范圍內(nèi)符合比爾定律。在試3了 13種常見共存離子干擾的基礎(chǔ)上對水樣及化學(xué)試劑硝酸鈉、 氯化鉀、氯化鈉、硫酸鈉，中微量鈣的測定，回收率在98.0%100皴間，結(jié)果滿意。關(guān)鍵詞1 :鈣指示劑；分光光度法；鈣的測定Calcium indicator spectrophotometric method determination micro calciumAbstract : H

3、as studied the calcium indicator and the calcium ion function colored system, experimented has affected this colored systems sensitivity and the stable each factor, had determined the best operating condition, the experiment indicated that in pH was in 5.4 ethanoic acid - sodium acetate cushion medi

4、um, the calcium and the calcium indicator formed the complex compound coordinate compared to was1:1, in the wave length was 620nm, the system apparent molar absorption absorptivityis 2.15 X 10000l/(mol*cm), under this wave length and the best operating condition, the calcium content conformed to the

5、 Bill law in 01.5 科 g/ml mass concentrationscope. In experiments 13 kind of commoncoexistence ion disturbance in the foundation to the water sample and the chemical reagent nitrate of soda, the potassium chloride, the sodium chloride, the sodium sulfate, the micro calciums determination, the result

6、is satisfied.Key word: calcium indicator ; Calcium determination ; Spectrophotometric method鈣對細(xì)胞的新陳代謝等生命活動起主導(dǎo)調(diào)控作用，科學(xué)已經(jīng)證實這說法。1、 鈣是生命進(jìn)化之源：10億年前有軟體動物，后來經(jīng)過鈣的積聚，4億年前出現(xiàn)魚 類。近代人壽命增長很快，但基因的進(jìn)化比較慢，對現(xiàn)代病的控制基因未能表達(dá)， 癌癥控制基因尚未形成。鈣是形成生命階梯進(jìn)化關(guān)鍵性物質(zhì)，是生命進(jìn)化之源。同樣是基因進(jìn)化之源。2、鈣離子參與人體全部生命活動。3、是人體的物質(zhì)基 礎(chǔ)，不論是硬件還是軟件，鈣是不可缺少的主要成分。 4、是

7、細(xì)胞的物質(zhì)基礎(chǔ)， 不論是細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核均含有鈣，線粒體、高爾基體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)都含有豐 富的鈣。5、是基因的物質(zhì)基礎(chǔ)，有鈣結(jié)合蛋白基因，鈣泵基因等。6、是信號系統(tǒng)的物質(zhì)基礎(chǔ)，人體內(nèi)信號、信息、調(diào)控、密碼均與鈣振蕩有關(guān)。7、細(xì)胞內(nèi)鈣的物質(zhì)波，給基因增加能量，改變基因內(nèi)環(huán)境，使基因的復(fù)制、調(diào)控、修復(fù)功 能正常化。99%勺鈣分布在骨骼和牙齒中，是構(gòu)成機體組織的主要成分，并使骨骼有一 定的硬度，起著支撐身體的作用。1%勺鈣分布在血液、細(xì)胞間液及軟組織中，具 有維持腦及心臟功能正常，負(fù)擔(dān)所有正常細(xì)胞生理狀況的調(diào)節(jié)及分泌激素、凝固 血液等作用，細(xì)胞沒有鈣便不能生存。鈣在人體中的作用如下：1.維持細(xì)胞的生

8、存和功能。細(xì)胞分裂繁殖，數(shù)目漸增，與單細(xì)胞漸漸改變功 能，都需要鈣的參加。鈣自細(xì)胞外進(jìn)入，喚醒細(xì)胞開始工作，否則細(xì)胞一直保持 睡眠狀態(tài)。鈣進(jìn)入細(xì)胞，發(fā)出電波，和布滿全身的神經(jīng)纖維，形成人體情報網(wǎng)絡(luò)， 信息的輸入經(jīng)過鈣的活動才傳到身體各部位。內(nèi)分泌腺細(xì)胞分泌激素時也必需由鈣離子經(jīng)過血液，到器官中傳遞信息。細(xì)胞的單個功能和互相聯(lián)絡(luò)的網(wǎng)絡(luò)都不能缺少鈣，甚至老化、疾病、死亡都可以用鈣的平衡說明。充分?jǐn)z入鈣質(zhì)，細(xì)胞才 能保持健康活躍，人也才能蓬勃和有朝氣。.降低神經(jīng)細(xì)胞的興奮性，所以說鈣是一種天然的鎮(zhèn)靜劑。缺鈣會導(dǎo)致神經(jīng)性 偏頭痛（占女性的10%-20%、煩躁不安、失眠。對嬰兒會引起夜驚、夜啼、盜 汗。

9、缺鈣還會誘發(fā)兒童的多動癥。.強化神經(jīng)系統(tǒng)的傳導(dǎo)功能。比如說你的手碰到一杯水，特別熱，很快就放下， 這中間就有一個神經(jīng)系統(tǒng)的運作過程： 感受器（皮膚）一傳人神經(jīng)一中樞神經(jīng)一 傳出神經(jīng)一效應(yīng)器（肌肉）。其中感受和沖動怎樣傳遞給神經(jīng)細(xì)胞，神經(jīng)細(xì)胞又 怎樣傳出去？這中間有一種物質(zhì)叫做神經(jīng)遞質(zhì)。鈣有助于神經(jīng)遞質(zhì)的產(chǎn)生和釋放。.降低（調(diào)節(jié)）細(xì)胞和毛細(xì)血管的通透性。缺鈣易導(dǎo)致過敏，水月中等。5,促進(jìn)體內(nèi)多種酶的活動。缺鈣時，腺細(xì)胞的分泌作用減弱。鈣還是酶的激活 劑。.鈣有鎮(zhèn)靜作用，當(dāng)體液中鈣濃度降低時，神經(jīng)和肌肉的興奮性增高，肌肉出 現(xiàn)自發(fā)性收縮，嚴(yán)重時出現(xiàn)抽搐，當(dāng)體液中鈣濃度增加時，則抑制神經(jīng)和肌肉的 興

10、奮性。.鈣對維持體內(nèi)酸堿平衡，維持和調(diào)節(jié)體內(nèi)許多生化過程是必需的，它能促進(jìn) 體內(nèi)多種酶的活動，是多種酶激活劑，如脂肪酶、淀粉酶等均受鈣離子的調(diào)節(jié)。 當(dāng)體內(nèi)鈣缺乏時蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物不能充分利用，導(dǎo)致營養(yǎng)不良、厭食、 便秘、發(fā)育遲緩、免疫功能下降。.鈣為一種凝血因子，在凝血酶原轉(zhuǎn)變?yōu)槟笗r起到催化作用，然后凝血酶 使纖維蛋白原聚合為纖維蛋白使血液凝固。鈣與磷脂結(jié)合，維持細(xì)胞膜的完整性 和通透性。鈣離子能使體液正常通過細(xì)胞膜，通常用來緩解由于過敏等癥所引起 的細(xì)胞膜滲透壓的改變。日常生活中，如果鈣攝入不足，人體就會出現(xiàn)生理性鈣透支，造成血鈣水平 下降。當(dāng)血鈣水平下降到一定閾值時，就會促使甲

11、狀旁腺分泌甲狀旁腺素。 甲狀 旁腺素具有破骨作用，即骨骼中的鈣離子被反抽出來，藉以維持血鈣水平。在缺 鈣初期，缺鈣程度比較輕的時候，只是發(fā)生可逆性生理功能異常，如心臟出現(xiàn)室 性早博、情緒不穩(wěn)定、睡眠質(zhì)量下降等反應(yīng)。持續(xù)的低血鈣，特別是中年以后， 人體長期處于負(fù)鈣平衡狀態(tài)，導(dǎo)致甲狀旁腺分泌亢進(jìn)，首當(dāng)其沖的是骨骼，由于 骨骼中的鈣離子持續(xù)大量釋出，導(dǎo)致骨質(zhì)疏松和骨質(zhì)增生。另一方面，在甲狀旁 腺持續(xù)升高的情況下，由于甲狀旁腺素具有促使細(xì)胞膜上鈣通道開啟而關(guān)不住， 以及阻抑鈣泵，使鈣泵功能減弱，造成細(xì)胞內(nèi)鈣含量升高。持續(xù)的細(xì)胞內(nèi)高鈣， 激發(fā)細(xì)胞像失控的野馬，無節(jié)制亢進(jìn)，造成細(xì)胞能量耗竭。與此同時，代謝

12、廢物 又得不到及時消除，便會構(gòu)成自身傷害，致使細(xì)胞趨向反常的鈣化衰亡。由于缺 鈣，導(dǎo)致骨質(zhì)疏松、骨質(zhì)增生、兒童佝僂病、手足抽搐癥以及高血壓、腎結(jié)石、 結(jié)腸癌、老年癡呆等疾病的發(fā)生。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證明，缺鈣會造成人體生理障礙，進(jìn)而引發(fā)一系列嚴(yán)重疾病。這里我們列舉一些與缺鈣有關(guān)的主要疾?。焊哐獕喝扁}會造成反常的鈣內(nèi)流，導(dǎo)致鈣在血管內(nèi)壁細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞內(nèi) 反常積貯，引起血管收縮，血管外周阻力增大，血壓異常升高。持續(xù)的鈣內(nèi)流， 促使血管壁彈性纖維和內(nèi)皮細(xì)胞鈣化、變性、甚至出現(xiàn)襲痕、斷裂。外周阻力進(jìn) 一步增大，血壓持續(xù)升高。由于血管內(nèi)壁損傷，脂類通透性增大，血脂浸入血管 壁的損傷處，造成膽固醇和其他脂類物

13、質(zhì)在血管壁上沉積。 血管內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)損傷 而分泌內(nèi)皮素和某些激活因子，引起血小板和白細(xì)胞在血管壁上粘附、 聚集。血 管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷，又激活補償性生理反應(yīng)，促使血管平滑肌和成纖維細(xì)胞反常 增生和內(nèi)膜下移位，致使動脈管壁增厚、變硬，于是層層疊疊、大大小小的動脈 粥樣硬化形成了。研究表明，對于某些高血壓病人來說，不用藥物而是增加鈣制 劑的量，有助于控制高血壓。美國南加利福尼亞大學(xué)醫(yī)學(xué)院的預(yù)防醫(yī)學(xué)副教授杰 姆斯德威爾對國家統(tǒng)計中心為期 13年的調(diào)查結(jié)果進(jìn)行計算，發(fā)現(xiàn)每天用鈣量 為1300毫克的人比每天用鈣量為300毫克的人患高血壓的比例低12%。冠心病許多研究表明，鈣離子還能降低血中膽固醇的濃度，從而

14、起到保護 心臟的作用。有人觀察，讓膽固醇含量較高的男子食用含鈣量低的食物 10天（每 天410毫克鈣），檢查他們膽固醇含量；然后再讓他們吃含鈣量高的食物（每天 2200毫克鈣）。結(jié)果高鈣食物能減少膽固醇總量 6%,其中低密度脂蛋白減少 11%,而對人體有益的高密度脂蛋白數(shù)量則保持不變。專家認(rèn)為，長時期嚴(yán)重缺鈣會引發(fā)冠心病。尿路結(jié)石 多年來，醫(yī)生告訴腎結(jié)石病人限制食用鈣，理由是鈣為結(jié)石的一 種主要成分。但是，美國哈佛大學(xué)的醫(yī)學(xué)專家經(jīng)過多年研究后發(fā)現(xiàn)， 這可能是人 類在認(rèn)識上的一個大錯誤。他們提出，減少腎結(jié)石危險的方法恰恰是增加鈣攝入 量。大家知道，飲食中，特別是蔬菜中含有大量草酸鹽，一般情況下，

15、草酸鹽在 腸道內(nèi)與鈣結(jié)合成草酸鈣，隨糞便排出。如果飲食中鈣的攝入不足，就會使多余 草酸鹽，經(jīng)腸腔吸收而進(jìn)入血液，最終由腎臟提出。如果人體長期處于負(fù)鈣平衡 狀態(tài)，腎臟細(xì)胞不可避免會出現(xiàn)細(xì)胞反常鈣內(nèi)流損傷，腎臟回吸收功能減退，尿 鈣排出增多。高鈣尿液與尿中草酸鹽結(jié)合，形成大大小小草酸鈣結(jié)石。如果不忌 鈣，而是采取補鈣措施，尤其是補充水溶性鈣劑，那么，在胃腸道中鈣離子與飲 食中草酸鹽合成草酸鈣，隨糞便排出。另外，補充足量的鈣可扭轉(zhuǎn)負(fù)鈣平衡，腎 臟回吸收功能正常，尿鈣排出減少，結(jié)石的可能性也減少。結(jié)（直）腸癌高脂飲食會過度刺激膽汁的分泌，過量的脂肪酸和膽汁酸是 引起結(jié)（直）腸細(xì)胞癌變的觸發(fā)劑。有研究證

16、明，患有結(jié)腸直腸癌的病人，血清 膽汁酸的含量比正常人高出1倍左右，而癌變細(xì)胞中膽汁酸含量比正常細(xì)胞高 3 倍以上。如果用高膽汁酸的飼料喂小白鼠，結(jié)（直）腸癌的發(fā)生率明顯增加。如 果補充足量的碳酸鈣，鈣離子與脂肪酸和膽汁酸結(jié)合，形成不溶性脂肪酸鈣和膽 汁酸鈣，隨糞便排出，從而消除癌變的觸發(fā)因子，就能阻抑腸細(xì)胞癌變。手足搐搦癥 這種疾病是因嬰幼兒體內(nèi)缺少維生素 D而使腸道對鈣、磷的吸 收發(fā)生障礙。另外由于甲狀旁腺未能及時分泌更多甲狀旁腺素，以致血鈣降低， 引起神經(jīng)肌肉的興奮性增高，出現(xiàn)全身驚厥、手足痙攣和喉痙攣，常伴發(fā)陣發(fā)性 呼吸暫停和短時間窒息，引起缺血缺氧性腦損傷。據(jù)醫(yī)學(xué)觀察，大腦神經(jīng)對缺血

17、缺氧最為敏感，窒息10秒鐘，神經(jīng)功能開始出現(xiàn)障礙；窒息數(shù)分鐘，就會出現(xiàn) 血管神經(jīng)不可逆轉(zhuǎn)的損傷，輕則影響孩子智力，重則導(dǎo)致低能、癡呆。所以，做 好手足搐搦癥的預(yù)防工作是十分重要的，不管是母乳喂養(yǎng)還是人工喂養(yǎng)的孩子， 都必須補充足夠量的鈣。除了補鈣外，還要增加戶外活動，多曬太陽和補充適量 維生素D,以預(yù)防手足搐搦癥的發(fā)生。骨質(zhì)疏松人體長期缺鈣而引起負(fù)鈣平衡的另一個嚴(yán)重后果一一骨質(zhì)疏松。 很多研究表明，增加鈣的攝入量對骨質(zhì)損耗有著重要減緩作用， 在減少由骨質(zhì)疏 松引起的骨折率方面也有著重要作用，特別在食用鈣的同時服用維生素D,效果尤其明顯。很多專家認(rèn)為，補鈣應(yīng)在青春期就開始，這時候骨質(zhì)正在形成，效

18、果 會更好。鈣離子廣泛存在于自然界中，人體血清中鈣離子濃度是重要的生理指標(biāo)之 一，許多疾病都與血清中鈣離子濃度有關(guān)。1883年Ringer發(fā)現(xiàn)鈣離子是引起心 臟收縮不可缺少的因素以來，人們就逐漸認(rèn)識到，鈣離子在生物體中的功能，尤其 是在細(xì)胞中的功能。因此快速準(zhǔn)確地測定血清中鈣離子濃度具有十分重要的臨床 分析意義與理論價值。目前測定鈣離子濃度大致有以下幾種方法：1.分光光度法。 2. Clark法采用草酸直接沉淀鈣離子,然后用標(biāo)準(zhǔn)高鈕酸鉀溶液滴定。3.Roweyu 于1929年報道的光度法，是一種先用磷酸鹽沉淀，然后進(jìn)行比色測定的方法。4. 原子吸收和火焰分光光度法。5.熒光光度法，是用熒光鈣試

19、劑或類似的熒光化合 物測定血清中鈣離子濃度的方法。6.離子選擇電極法。本文研究了分光光度法測定水和化學(xué)試劑中微量鈣離子濃度的方法。水和化學(xué)試劑中微量鈣含量的測定在許多工業(yè)部門都是很重要和經(jīng)常性的，目前已有的方法較多，但仍不能滿足實際需求，如 EDTA絡(luò)合滴定法和重量法等靈敏度均較 低；離子選擇性電極所用的硬度電極性能不穩(wěn)定且使用壽命短不受歡迎；原子吸收光譜法儀器價格較高不便普及，具有較高靈敏度的分光光度法研究了鈣指示劑 與鈣的顯色反應(yīng)，確定了該方法測定水和化學(xué)試劑中鈣的最佳條件后，用于化學(xué)試劑中微量鈣和合成的有機磷水處理劑對工業(yè)循環(huán)水處理后的鈣測定，可得到較好結(jié)果，與EDTA絡(luò)合滴定法比較，結(jié)

20、果一致，對于空白鈣低的樣品，顯示出較 高的靈敏度。實驗結(jié)果表明，在pH為5.4的乙酸-乙酸鈉緩沖介質(zhì)中，鈣指示劑 與鈣生成藍(lán)色1: 1的配合物，在波長入為620nmi體系表觀摩爾吸光系數(shù)e為 2.15 X104l/(mol*cm)，在此波長及最佳操作條件下，鈣含量在01.5g/ml質(zhì) 量濃度范圍內(nèi)符合比爾定律?？梢姶朔椒ㄓ糜谖⒘库}的測定，具有穩(wěn)定性好、靈 敏度和準(zhǔn)確度高、試劑和儀器廉價、操作簡便快速 ，結(jié)果令人滿意等優(yōu)點。一、實驗部分主要儀器和試劑721型分光光度計 一臺；PHS 10B型酸度計(上海第三分析儀器廠)；pH為5.4的乙酸-乙酸鈉緩沖溶液；0.1% (質(zhì)量分?jǐn)?shù))鈣指示劑：稱取 0

21、.10g鈣指示劑2-羥基-1-(2-羥基-4- 磺酸-1-蔡偶氮)-3-蔡甲酸(C21H14N2O7S)或其鈉鹽與100g在105 c干燥的氯 化鈉，置于研缽中研細(xì)混勻。貯存于棕色磨口瓶中。100.0仙g/ml鈣儲備液：準(zhǔn)確稱取經(jīng)2h在120攝氏度烘干的基準(zhǔn)AR級碳酸 鈣0.2497gT小燒杯中，加少量去離子水潤濕，緩慢加入 3mol/l鹽酸使之完全溶 解，煮沸除去二氧化碳，冷卻后轉(zhuǎn)入容量瓶中，用去離子水稀釋至刻度，搖勻。10.00 1 g/ml鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液:移取100.0仙g/ml鈣儲備液10.00ml于100ml容量 瓶中，并用去離子水稀釋至刻度，搖勻。試驗方法于100ml的潔凈容量瓶中，依

22、次加入10.00 n g/ml鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液10.00ml, 3ml 0.1% (質(zhì)量分?jǐn)?shù))鈣指示劑，5ml pH為5.4的乙酸-乙酸鈉緩沖溶液，用水稀釋 至刻線，搖勻，放置10min,用1cm吸收池，以試劑空白溶液為參比溶液，在波 長為620nnft測定顯色液的吸光度。二、試驗結(jié)果與討論繪制吸收曲線選擇測定波長取兩個100ml潔凈的容量瓶，移取10.00仙g/ml鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液10.00ml于其中一 個100ml容量瓶中，然后在兩個容量瓶中依次加入 3ml 0.1% (質(zhì)量分?jǐn)?shù))鈣指示 劑，5ml pH為5.4的乙酸-乙酸鈉緩沖溶液，用去離子水稀釋至刻線，搖勻，放 置10min,用1cm的吸收池，以

23、試劑空白溶液為參比溶液，在波長為 550-660nm 間，每隔10nmM定一次吸光度，在峰值附近每隔2nmM定一次吸光度。以波長為入550560570580590600610616A0.2390.2740.2900.3310.3740.4430.4970.518入618620622624630640650660A0.5250.5280.5260.5220.5000.4510.4020.361吸光度與波長的表（1）由以上的數(shù)據(jù)與曲線可知，顯色體系的最大吸收峰在620nm處。有色配合物穩(wěn)定性試驗取兩個100ml潔凈的容量瓶，移取10.00 pg/ml鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液10.00ml于其中一 個100ml容

24、量瓶中，然后在兩個容量瓶中依次加入 3ml 0.1% （質(zhì)量分?jǐn)?shù)）鈣指示 劑，5ml pH為5.4的乙酸-乙酸鈉緩沖溶液，用去離子水稀釋至刻線，搖勻，放 置5min,立即用1cm的吸收池，以試劑空白溶液為參比溶液，在波長為 620nmi 測定吸光度，以后隔10、20、30、60、420min各測定一次吸光度。t/min510203060420A0.5250.5280.5280.5280.5270.527吸光度與顯色時間表（2）吸光度與顯色時間 系列1體系在室溫下很快顯色，放置 5min后可顯色完全并達(dá)到穩(wěn)定，本試驗用放置10 min后測定，顯色完全后體系至少可穩(wěn)定 7h溶液酸度的影響取11個1

25、00ml潔凈的容量瓶，各加入10.00 pg/ml鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液10.00ml ,然后 依次加入3ml 0.1% (質(zhì)量分?jǐn)?shù))鈣指示劑，5ml pH為3.6、4.0、4.4、4.8、5.0、 5.2、5.4、5.8、6.2、6.6、7.0、7.4的不同酸度的乙酸-乙酸鈉緩沖溶液，用去離 子水稀釋至刻線，搖勻。放置10min,用1cm的吸收池，以試劑空白溶液為參比 溶液，在波長為620nnft測定各溶液吸光度。編號1 #2#3#4#5#6#pH3.64.04.44.85.05.2A0.2010.3250.4300.5020.5200.525編號7#8#9#10#11 #12#pH5.45.86.26

26、.67.07.4A0.5300.5380.5440.4820.3630.223吸光度與pHS ( 3)吸光度與pH由表可知，溶液的pHft3.67.4之間逐漸，但在pH=4.806.20圍內(nèi)吸光度 最大且穩(wěn)定，實驗本試驗用pH為5.40的乙酸-乙酸鈉緩沖溶液控制酸度，用量在5ml左右可把pH空制在適宜范圍。顯色劑的用量取5個100ml潔凈的容量瓶，各加入10.00 pg/ml鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液10.00ml,然后 依次加入0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml 0.1% （質(zhì)量分?jǐn)?shù)）鈣指示劑，5ml pH為 5.4的乙酸-乙酸鈉緩沖溶液，用去離子水稀釋至刻線，搖勻。放置 10min,用1cm

27、的吸收池，以試劑空白溶液為參比溶液，在波長為 620nnft測定各溶液吸光度。編號1 #2#3#4#5#6#V/ml01.02.03.04.05.0A00.2640.4960.5280.5280.528因此：對顯色劑用量為0 ,1.0, 2.0, 3.0, 4.0, 5.0m L時進(jìn)行了實驗，試驗表明：0.1% （質(zhì)量分?jǐn)?shù)）鈣指示劑用量在2.05.0ml內(nèi)吸光度最大且穩(wěn)定， 實驗選用3ml。2.5 配合物的組成取5個100ml潔凈的容量瓶，各加入10.00 g g/ml鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液5.00ml ,然后依次加入含鈣的質(zhì)量為25、50、75、100、125仙g的鈣指示劑，5ml pH為5.4的乙酸-

28、乙酸鈉緩沖溶液，用去離子水稀釋至刻線，搖勻。放置 10min,用1cm的吸收池，以試劑空白溶液為參比溶液，在波長為 620nnit測定各溶液吸光度。吸光度與配合物組成A 系列1m/仙g255075100125A0.1320.2480.2670.2670.267m/ug吸光度與配合物的組成的表（5）因此：配合物的組成由摩爾比法可測得配合物中鈣與鈣指示劑的絡(luò)合比為1: 1。2.6工作曲線取7個100ml潔凈的容量瓶，各加入10.00 1 g/ml鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液0、3.00、6.00、9.00、12.00、15.00、18.00ml,然后依次加入 3ml0.1%的鈣指示劑，5mlpH為5.4的乙酸-乙酸

29、鈉緩沖溶液，用去離子水稀釋至刻線，搖勻。放置 10min,用1cm編號1#2#3#4#5#6#7#的吸收池，以試劑空白溶液為參比溶液，在波長為 620nnft測定各溶液吸光度。V/ml0.003.006.009.0012.0015.0018.00A00.1610.3200.4770.6330.7900.95工作曲線表（6）工作曲線因此在選定實驗條件下，鈣含量在01.5仙g/ml內(nèi)符合比爾定律。從工作曲線計算出摩爾吸光系數(shù)e =2.15 X 104 l/（mol*cm）2.7共存離子的影響及干擾的消除測定50ug/100mL丐,結(jié)果表明：相對誤差不超過土 5%寸，下列13種共存離子不 干擾鈣測定

30、的允許量（以g計）為：鉀離子（8）,鈉離子（8）,二價鐵離子（0.0002 ）, 鋁離子（0.0002 ）, 二價銅離子（0.0004）,鋅離子（0.0004）,二價鈕離子 （0.0004 ）,鋼離子（0.0004）,三價鐵離子（0.0004 ）, 二價鎂離子（0.00012）, 氯離子（12）,硝酸根離子（8）,澳離子（4）。試驗常用的干擾抑制劑EDTA,灑石酸、檸檬酸、抗壞血酸、三乙醇胺，8- 羥基唾咻、硫代硫酸鈉等。對銅干擾的抑制效果，結(jié)果表明，加人檸檬酸可以消 除銅的干擾，并對其他元素?zé)o影響，同時三乙醇胺可以消除鐵、鋁的干擾。、樣品分析.化學(xué)試劑：硫酸鈉：準(zhǔn)確稱取10.0000g硫酸鈉

31、，用少量蒸儲水溶解后，定容于100m L容量瓶中.依次加入3ml 0.1%的鈣指示劑，5ml pH為5.4的乙酸-乙酸鈉緩沖溶 液，用去離子水稀釋至刻線，搖勻。放置10min,用1cm勺吸收池，以試劑空白溶 液為參比溶液，在波長為620nmt測定各溶液吸光度。由工作曲線計算出試液中 鈣含量，樣品分析結(jié)果見表（7）:試樣硫酸鈉測定結(jié)果/（ g g/g）7.10 7.09 7.10 7.09 7.10平均值/( gg/g)7.10相對平均偏差/（%）0.056加入量（g g）100.0測得量（卜g）99.1回收率99.1原子吸收光譜/（卜g/g）7.00硫酸鈉的測定數(shù)據(jù)表（7）氯化鉀：準(zhǔn)確稱取5.

32、0000g氯化鉀，用少量蒸儲水溶解后，定容于100mL 容量瓶中.依次加入3ml 0.1%的鈣指示劑，5ml pH為5.4的乙酸-乙酸鈉緩沖溶液， 用去離子水稀釋至刻線，搖勻。放置10min,用1cm勺吸收池，以試劑空白溶液為 參比溶液，在波長為620nnft測定各溶液吸光度。由工作曲線計算出試液中鈣含 量，樣品分析結(jié)果見表（8）:試樣氯化鉀測定結(jié)果/（ g g/g）13.98 13.88 14.08 14.12 14.08平均值/( gg/g)14.03相對平均偏差/（%）0.56力口入量（小g）100.0測得量（g）99.4回收率99.4原子吸收光譜/( g g/g)14.03氯化鉀的測定

33、數(shù)據(jù)表(8)氯化鈉：準(zhǔn)確稱取15.0000g氯化鈉，用少量蒸儲水溶解后，定容于100m L容量瓶中.依次加入3ml 0.1%的鈣指示劑，5ml pH為5.4的乙酸-乙酸鈉緩沖溶 液，用去離子水稀釋至刻線，搖勻。放置10min,用1cm勺吸收池，以試劑空白溶 液為參比溶液，在波長為620nmt測定各溶液吸光度。由工作曲線計算出試液中 鈣含量，樣品分析結(jié)果見表(9):試樣氯化鈉測定結(jié)果/( g g/g)4.20 4.14 4.17 4.19 4.14平均值/( gg/g)4.17相對平均偏差/(%)0.53力口入量(小g)100.0測得量(g)97.8回收率97.8原子吸收光譜/( g g/g)4

34、.18氯化鈉的測定數(shù)據(jù)表(9)硝酸鈉：準(zhǔn)確稱取10.0000g硝酸鈉，用少量蒸儲水溶解后，定容于100m L容量瓶中.依次加入3ml 0.1%的鈣指示劑，5ml pH為5.4的乙酸-乙酸鈉緩沖溶 液，用去離子水稀釋至刻線，搖勻。放置10min,用1cm勺吸收池，以試劑空白溶 液為參比溶液，在波長為620nmt測定各溶液吸光度。由工作曲線計算出試液中 鈣含量，樣品分析結(jié)果見表(10)：試樣硝酸鈉測定結(jié)果/( g g/g)8.12 8.15 8.19 8.12 8.17平均值/( gg/g)8.15相對平均偏差/(%)0.29加入量(g g)100.0測得量(叱g)99.6回收率99.6原子吸收光

35、譜/( g g/g)8.14硝酸鈉的測定數(shù)據(jù)表(10)由以上四種化學(xué)試劑數(shù)據(jù)可知，本法測定結(jié)果與原子吸收光譜法相一致， 五 次測定相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小干2%方法加標(biāo)回收率在98%100戒問。.水樣的分析：工業(yè)水：準(zhǔn)確移取2.00m LX業(yè)水牛品于100mL容量瓶中，依次加入3ml 0.1%的鈣指示劑，5ml pH為5.4的乙酸-乙酸鈉緩沖溶液，用去離子水稀釋至刻 線，搖勻。放置10min,用1cmi勺吸收池，以試劑空白溶液為參比溶液，在波長為 620nnit測定各溶液吸光度。由工作曲線計算出試液中鈣含量，樣品分析結(jié)果見 表11 :試樣工業(yè)水測定結(jié)果/( g g/g)39.17 39.16 39.17 39.18 39.16平均值/( gg/g)39.17相對平均偏差/(%)0.015加入量(g g)100.0測得量(卜g)99.5回收率99.5EDTAt ( pg/g)39.18工業(yè)水的測定數(shù)據(jù)表(11)自來水：準(zhǔn)確移取2.00m L自來水牛品于100mL容量瓶中，依次加入3ml 0.1% (質(zhì)量分?jǐn)?shù))白鈣指示劑，5ml pH為5.4的乙酸-乙酸鈉緩沖溶液，用去離 子水稀釋至刻線，搖勻。放置10min,用1cm勺吸收池，以試劑空白溶液為參比溶 液，在波長為620nnft測定各溶液吸光度。由工作曲線計算出試液中鈣含量，樣 品分析結(jié)果見表(12