高中生物-3.2月季的花藥培養(yǎng)課件-新人教版選修1

1、專題三 課題2月季的花藥培養(yǎng)1精選ppt單倍體育種過程：花藥離體培養(yǎng)單倍體幼苗二倍體植物體人工誘導(dǎo)染色體加倍秋水仙素處理單倍體育種意義2精選ppt花絲花藥：囊狀結(jié)構(gòu)，內(nèi)有很多花粉 花粉是由花粉母細胞（小孢子母細胞）經(jīng)過減數(shù)分裂而形成的，因此，花粉是單倍體的生殖細胞。 花粉的發(fā)育要經(jīng)歷：四分體時期、單核期、雙核期等階段。（一）被子植物的花粉發(fā)育雄蕊基礎(chǔ)知識3精選ppt（一）被子植物的花粉發(fā)育被子植物花粉的發(fā)育過程4精選ppt（二）產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑移栽花藥中的花粉胚狀體脫分化 愈傷組織 花藥中的花粉脫分化 分化 叢芽 再分化 叢芽 誘導(dǎo)生根主要取決于：5精選ppt（二）產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑

2、體細胞胚（胚狀體）： 在組織培養(yǎng)過程中，某些體細胞在形態(tài)上轉(zhuǎn)變?yōu)榕c合子發(fā)育成的胚非常相似的結(jié)構(gòu)，發(fā)育過程亦與合子胚類似，被稱為體細胞胚（胚狀體）。6精選ppt（三）影響花藥培養(yǎng)的因素材料的選擇培養(yǎng)基的組成月季花藥培養(yǎng)基配方i在1000mL MS培養(yǎng)基配方中添加2,4-D 0.4mgKT 0.2mgIAA 4mg調(diào)節(jié)pH至5.87精選ppt（三）影響花藥培養(yǎng)的因素材料的選擇 花期早期時的花藥比后期的更容易產(chǎn)生花粉植株。一般月季的花藥培養(yǎng)時間選在五月初到五月中旬，即月季的初花期。 選擇合適的花粉發(fā)育時期也是提高誘導(dǎo)成功率的重要因素。一般來說，在單核期，細胞核由中央移向細胞一側(cè)的時期，花藥培養(yǎng)成功率

3、最高。 為了挑選到單核期的花藥，通常選擇完全未開放的花蕾。8精選ppt（三）影響花藥培養(yǎng)的因素材料的選擇 花期早期時的花藥比后期的更容易產(chǎn)生花粉植株。一般月季的花藥培養(yǎng)時間選在五月初到五月中旬，即月季的初花期。 選擇合適的花粉發(fā)育時期也是提高誘導(dǎo)成功率的重要因素。一般來說，在單核期，細胞核由中央移向細胞一側(cè)的時期，花藥培養(yǎng)成功率最高。 為了挑選到單核期的花藥，通常選擇完全未開放的花蕾。9精選ppt 為什么花瓣松動會給材料的消毒帶來困難？ 花瓣松動后，微生物就可能侵入到花藥，給材料的消毒帶來困難。（三）影響花藥培養(yǎng)的因素10精選ppt（一）材料的選擇選擇花藥時，一般要通過鏡檢來確定其中的花粉是否

4、處于適宜的發(fā)育期。最常用的方法有醋酸洋紅法。但是，某些植物的花粉細胞核不易著色，需采用焙花青-鉻礬法，這種方法能將花粉細胞核染成藍黑色。實驗操作11精選ppt（二）材料的消毒1. 將花蕾用體積分數(shù)為70%的酒精浸泡30s2. 無菌水清洗3. 無菌吸水紙吸干花蕾表面的水分4. 放入質(zhì)量分數(shù)為0.1%的氯化汞溶液中 24min（也可質(zhì)量分數(shù)為1%的次氯酸鈣 溶液或飽和漂白粉溶液）5. 無菌水沖洗35次 12精選ppt（三 ）接種和培養(yǎng) 滅菌后花蕾，要在無菌條件下除去萼片和花瓣，并立即將花藥接種到培養(yǎng)基上。在剝離花藥時，要盡量不損傷花藥（否則接種后，容易從受傷部位產(chǎn)生二倍體的愈傷組織），同時還要徹底

5、去除花絲，因為與花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成。13精選ppt（三 ）接種和培養(yǎng) 通常每瓶接種花藥7-10個，溫度控制在25左右，不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。 一般經(jīng)過20-30天培養(yǎng)后，會發(fā)現(xiàn)花藥開裂，長出愈傷組織或釋放出胚狀體。將愈傷組織及時轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基上，以便進一步分化出再生植株。14精選ppt 如果花藥開裂釋放出胚狀體，則一個花藥內(nèi)就會產(chǎn)生大量幼小植株，必須在花藥開裂后盡快將幼小植株分開，分別移植到新的培養(yǎng)基上，否則這些植株將很難分開。 在花藥培養(yǎng)中，特別是通過愈傷組織形成的花粉植株，常常會出現(xiàn)染色體倍性的變化。（主要原因是營養(yǎng)核和生殖核融合造成的。）故需對培

6、養(yǎng)出來的植株作進一步的鑒定和篩選。（三 ）接種和培養(yǎng)15精選ppt植物組織培養(yǎng)技術(shù)與花藥培養(yǎng)技術(shù)的比較項目相同點不同點植物組織培養(yǎng)技術(shù)離體的植物組織經(jīng)脫分化形成愈傷組織，再分化成叢芽，誘導(dǎo)出根，然后進行移栽。外植體為體細胞，染色體數(shù)無需加倍?；ㄋ幣囵B(yǎng)技術(shù)取材為花藥，培養(yǎng)的為單倍體幼苗，植株弱小，高度不育，必須用秋水仙素處理，使染色體加倍，恢復(fù)正常植株的染色體數(shù)，而且為純種。16精選ppt選材是否恰當選材是否成功是花藥培養(yǎng)成功的關(guān)鍵。應(yīng)學(xué)會通過顯微鏡觀察處于適宜發(fā)育期的花粉。課題成果評價17精選ppt無菌技術(shù)是否過關(guān)如果出現(xiàn)了污染現(xiàn)象，說明某些操作步驟，如培養(yǎng)基滅菌、花蕾消毒或接種等有問題。課題

7、成果評價18精選ppt接種是否成功如果接種的花藥長出愈傷組織或釋放出胚狀體，花藥培養(yǎng)的第一步就成功了。要適時轉(zhuǎn)換培養(yǎng)基，以便愈傷組織或胚狀體進一步分化成再生植株。課題成果評價19精選ppt F2代紫色甜玉米的基因型組成可能為Aasusu或AAsusu。如果運用常規(guī)育種方法，將F2代中的紫色甜玉米與白色甜玉米（aasusu）進行測交，可以選擇出基因型為AAsusu純種紫色甜玉米。但這種方法比較繁瑣，耗時也較長，需要至少三年的選種和育種時間。*練習(xí)1*20精選ppt 如果利用花藥培養(yǎng)的技術(shù)，在F1代產(chǎn)生的花粉中就可能有Asu的組合，再將花粉植株進行染色體加倍，就可以直接得到紫色甜玉米的純合子（AAsusu）。這種方法可以大大縮短育種周期。21精選ppt*練習(xí)2* 植物組織培養(yǎng)技術(shù)與花藥培養(yǎng)技術(shù)的相同之處是：培養(yǎng)基配制方法、無菌技術(shù)及接種操作等基本相同。兩者的不同之處在于：花藥培養(yǎng)的選材非常重要，需事先摸索時期