Survivin和PTEN在鼻咽癌組織表達及其臨床意義

1、Survivin和PTEN在鼻咽癌組織表達及其臨床意義【摘要】 目的 探討Survivin和PTEN蛋白在鼻咽癌（NPC）組織中的表達及其臨床意義。方法 應用免疫組織化學方法檢測68例NPC和20例鼻咽黏膜慢性炎組織中Survivin和PTEN表達,并分析其與臨床分期、病理組織類型和轉移的關系。結果 在NPC中,Survivin和PTEN陽性表達率分別為84.5%(49/68)和51.5%(35/68)。Survivin高表達和PTEN低表達與NPC的臨床分期、組織學分型和頸部淋巴結轉移相關（2=5.219.99,P0.05）。結論 Survivin和PTEN表達與NPC的分化程度和轉移相關，

2、檢測其表達可作為判斷NPC預后的客觀指標。 【關鍵詞】 鼻咽腫瘤 基因 Survivin 基因 PTEN 免疫組織化學 ABSTRACT Objective To study the expression and its clinical significance of Survivin and PTEN protein in nasopharygeal carcinoma (NPC). Methods Immunohistochemical method was used to determine the expression of Survivin and PTEN protein in

3、68 cases of NPC and 20 cases of chronic inflammation of nasopharyngeal mucosa.The relationship between the gene expression and clinicopathological features,metastasis was analyzed. Results The positive expression rate of Survivin and PTEN in NPC was 84.5%(49/68) and 51.5%(35/68),respectively. The hi

4、ghlevel expression of Survivin and the lowlevel expression of PTEN were positively correlated with the clinicopathological features,tissue types and neck lymph node metastasis in NPC (2=5.21-9.99,P0.05). Conclusion These data show a correlation between the Survivin and PTEN expression and the differ

5、entiation and metastasis in NPC. The detection of the expression may be used as an objective index to judge the prognosis of NPC. KEY WORDS Nasopharygeal neoplasms; Gene,Survivin; Gene, PTEN; Immunohistochemistry Survivin是凋亡抑制蛋白(IAP)家族新成員，在人類多種惡性腫瘤中廣泛表達，并與腫瘤的分化及預后密切相關，被認為是癌變的早期事件14。PTEN是一種抑癌基因，其在人類許

6、多原發(fā)性腫瘤和細胞株中發(fā)生缺失，并可導致腫瘤細胞無限制生長57。本研究應用免疫組化方法檢測Survivin和PTEN蛋白在鼻咽癌（NPC）組織中的表達情況，探討這兩種蛋白表達與NPC臨床病理特征的關系。 1 材料與方法 1.1 材料 1.1.1 標本來源 選取我院1998年1月2006年2月確診為NPC的標本存檔蠟塊68例。68例病人中，男48例，女20例，年齡1676歲，平均年齡（49.86.78）歲。按WHO上呼吸道和耳腫瘤的組織學分型（1991）標準分為：角化型鱗狀細胞癌20例，非角化型鱗狀細胞癌48例。其中頸部淋巴結有轉移者49例，頸部淋巴結無轉移者19例。按照1992年全國NPC的臨

7、床分期標準進行臨床分期：期23例，期45例。取與NPC標本同期的鼻咽黏膜慢性炎組織20例作為對照觀察。組織標本均經(jīng)40 g/L甲醛固定,石蠟包埋,4 m厚連續(xù)切片。 1.1.2 試劑 兔抗人Survivin多克隆抗體、鼠抗人PTEN單克隆抗體和LSAB試劑盒購自邁新生物技術公司（均為即用型）。 1.2 方法 1.2.1 免疫組織化學染色 采用微波LSAB法。切片經(jīng)常規(guī)脫蠟水化后，放入PBS(枸櫞酸緩沖液,10 mmol/L,pH 6.0)內(nèi)，用YWY 781A型醫(yī)用微波儀170 W輻射抗原修復處理5 min，冷卻后水洗。其他操作流程同常規(guī)LSAB法，所不同者為三步抗原孵育和正常羊血清封閉均用微

8、波儀130 W各輻射處理5 min,保溫2 min即可。用已知Survivin和PTEN陽性結腸癌組織作陽性對照，用PBS代替一抗作為陰性對照。H2O2DAB顯色。 1.2.2 結果判斷 Survivin和PTEN免疫組化染色陽性信號呈棕黃色,均以細胞質(zhì)顯示清晰棕黃色顆粒為陽性(+),無染色顆粒者為陰性(-)。 1.2.3 統(tǒng)計學處理 采用配對資料的2檢驗。 2 結 果 2.1 Survivin和PTEN在鼻咽良惡性病變組織中的表達 Survivin和PTEN陽性染色均定位于細胞質(zhì)。NPC組織中Survivin陽性表達率為84.5%(49/68)，鼻咽黏膜慢性炎組織中Survivin陽性表達率

9、為0，兩者相比較差異有顯著意義（2=28.50，P0.05）。NPC組織中PTEN陽性表達率為51.5%（35/68），鼻咽黏膜慢性炎組織中PTEN陽性表達率為100%（20/20），兩者比較差異有顯著性（2=12.03，P0.05）。 2.2 Survivin和PTEN表達與NPC臨床病理特征的關系 Survivin高表達和PTEN低表達與NPC的發(fā)病年齡無關，與臨床分期、組織學分型和頸部淋巴結轉移相關(2=5.219.99,P0.05）。見表1。 表1 Survivin和PTEN蛋白表達與NPC臨床病理指標的關系例（略） 2.3 NPC中Survivin與PTEN蛋白表達的關系 在NPC

10、Survivin陽性表達的49例中，PTEN陽性表達21例(42.86%)，在Survivin陰性表達的19例中，PTEN陽性表達14例(73.69%)，兩者比較差異有顯著性（2=5.21，P0.05）。 3 討 論 Survivin基因是1997年由耶魯大學的ALTIERI等利用效應細胞蛋白酶受體1（EPR1)cDNA在人類基因庫中雜交篩選并克隆出的一種凋亡抑制基因，屬于IAP家族新成員,具有顯著的抗凋亡作用。Survivin基因具有腫瘤特異性表達的特點，其表達與細胞周期密切相關，是G2/M期的調(diào)節(jié)基因，參與細胞周期調(diào)控、有絲分裂及腫瘤的惡性轉化，并與腫瘤的發(fā)生發(fā)展和預后密切相關13。目前,

11、針對NPC組織中Survivin基因表達狀況的研究甚少。本研究結果顯示，Survivin在鼻咽黏膜慢性炎組織中不表達，在NPC組織中陽性表達率顯著增高，并隨著臨床分期增高、癌細胞分化程度減低和淋巴結轉移，其陽性表達率均顯著性增高。提示Survivin表達與鼻咽黏膜上皮細胞的惡性轉化密切相關，其在腫瘤中的高表達可抑制正常細胞的凋亡過程，從而導致細胞的異常增生和惡性轉化,使癌細胞獲得永生性。Survivin在腫瘤細胞中表達越強，其對癌細胞的抑制能力越強，導致癌細胞的生存能力和腫瘤的惡性程度也隨之增高，癌細胞更容易侵襲周圍組織而發(fā)生轉移。表明Survivin的高表達是判斷NPC預后不良的標志之一。因

12、此，我們認為檢測NPC組織中Survivin表達，不僅對判斷腫瘤的發(fā)生、臨床進展、惡性程度和預測病人的預后是一種重要的分子生物學參考指標，而且可能成為腫瘤基因診斷性標志物和腫瘤治療的新靶點。 PTEN基因是1997年在人類染色體1023上克隆到的一種新型抑癌基因。通過結構預測顯示，PTEN與細胞骨架蛋白和張力蛋白高度同源，提示PTNE可能參與細胞骨架重組并影響細胞遷移能力。當PTEN抑癌基因突變或缺失可能構成一個新的信號轉導途徑，在調(diào)節(jié)細胞的增生和死亡、細胞的轉移和粘連等方面均起重要作用，與人類惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展關系密切4。有作者認為，PTEN突變或缺失可以促進血管內(nèi)皮因子的形成，使血管內(nèi)皮

13、細胞增殖和腫瘤微血管形成，從而使腫瘤的侵襲轉移能力增強5。本實驗結果顯示，在NPC組織中PTEN陽性表達率明顯低于鼻咽黏膜慢性炎組織。隨著NPC臨床分期的增高、腫瘤分化程度減低和頸部淋巴結轉移，PTEN陽性表達率也顯著減低。提示PTEN表達與NPC的發(fā)生、細胞惡性轉化密切相關，在NPC的細胞分化、臨床進展和轉移過程中起著重要的抑制作用。在臨床病理活檢中，檢測PTEN蛋白表達有助于深入了解腫瘤的發(fā)生發(fā)展，并可為腫瘤早期診斷、預后判斷和臨床基因治療提供依據(jù)。 有關NPC中Survivin與PTEN表達之間的相關性研究文獻尚未見報道。本文結果顯示，在NPC中這兩種基因蛋白表達之間呈顯著負相關。提示NPC形成和轉移的發(fā)生是由多基因或多因子協(xié)同作用的結果。 【參考文獻】 1SHARIAT S F, LOTAN Y, SABOORIAN H, et al. Survivin expression associated with feartures of biologically aggressive prostate carcinomaJ. Cancer, 2004,10(4):751757. 2王東升,周巖冰,王海波. Survivin及P53蛋白在胃癌組織中的表達J. 青島大學醫(yī)學院學報, 2005,41(4):302306. 3谷化平,尚培中.