玉米抗北方炭疽病鑒定技術(shù)規(guī)程-編制說明

1、PAGE PAGE 9玉米抗北方炭疽病鑒定技術(shù)規(guī)程地方標準編制說明一、工作簡況（一）任務(wù)來源2019年12月25日，由河西學(xué)院申請制定地方標準的立項，根據(jù)甘肅省糧食與栽培作物標準委員會推薦的地方標準制訂，甘肅省市場監(jiān)督管理局批準第4 批甘肅省地方標準制定計劃要求，制訂編號：2019-T-099，制訂名稱：玉米抗北方炭疽病鑒定技術(shù)規(guī)程。（二）起草單位及參與人員主要起草單位：河西學(xué)院參與起草單位：甘肅前進生物科技發(fā)展有限公司、金塔縣農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心、甘州區(qū)農(nóng)畜產(chǎn)品質(zhì)量檢測服務(wù)中心、甘州區(qū)種子產(chǎn)業(yè)發(fā)展中心、甘肅德光農(nóng)業(yè)有限公司、酒泉通盈種苗有限公司.主要起草人：雷玉明、鄭天翔、馬金、李棟、冒國偉、張

2、琪、陳海龍、吳堯、陸靜、越文勤、陳曉燕二、制定標準的必要性和意義（一）玉米北方炭疽病的發(fā)生現(xiàn)狀玉米北方炭疽病又稱“眼斑病”，是世界性普遍發(fā)生的玉米葉部病害。引起該病害的病原菌為Aureobasidiumzeae （Narita et Hiratsuka）Dingle，最早于年在日本發(fā)現(xiàn)，隨后在美國、加拿大、法國、新西蘭、德國、阿根廷、澳大利亞、保加利亞、波蘭、葡萄牙、克羅地亞、巴西、南斯拉夫、斯洛文尼亞和英國等國家都有發(fā)生。在我國，1978年在吉林省嚴重發(fā)生。近年來在遼寧、吉林、黑龍江、云南等地也有發(fā)生。自2013年以來，國家玉米產(chǎn)業(yè)體系病蟲害防控研究室崗位專家調(diào)查表明，該病在東北地區(qū)、西北地

3、區(qū)普遍發(fā)生。該病初期癥狀為點狀水浸狀斑，逐漸擴大至圓形至橢圓形病斑，病斑中間灰白色，邊緣褐色和紫色，周圍伴有黃色暈圈，病害發(fā)生嚴重時，病斑連片直至葉片枯死。該病害與彎孢菌葉斑病?；旌习l(fā)生，早期癥狀也較相似，生產(chǎn)上常容易混淆造成誤判。2013年調(diào)查表明，該病在西北地區(qū)普遍發(fā)生，發(fā)病率在470%，平均損失在30%左右。特別是近幾年來，甘肅省制種玉米田和新品種選育田、玉米品種生產(chǎn)區(qū)域試驗田等發(fā)生普遍，據(jù)2014-2016年甘肅省調(diào)查，該病害在一些抗病品種或組合上，田間病葉率49；在感病品種自交系或雜交種組合上，中度發(fā)生，病葉率達1530；在Mo17、掖單等雜交種組合上重度發(fā)生，病葉率達68%80。一

4、般在玉米種子生產(chǎn)田可造成3050的產(chǎn)量損失。目前大多數(shù)自交系和雜交品種均表現(xiàn)為感病。同時，玉米北方炭疽病會加重其他玉米病害的發(fā)生程度，例如莖腐病、根腐病和黑粉病等，給玉米種子生產(chǎn)帶巨大產(chǎn)量損失。另外，甘肅省作為全國最大的優(yōu)質(zhì)玉米種子生產(chǎn)基地，每年均進行200份玉米新品種區(qū)域生產(chǎn)測試，審定100個左右玉米新品種，測試中和審定中對玉米北方炭疽病進行多次田間調(diào)查分析，判斷其抗病性。由于玉米品種、環(huán)境條件的差異，各地炭疽病癥狀表現(xiàn)存在差異，給玉米制種企業(yè)、玉米種植戶及當?shù)刂参锉Ｗo部門帶來鑒定因難，但目還缺少統(tǒng)一鑒定技術(shù)標準，為此制定該標準。（二）標準制定的目的1.提供適宜于甘肅省玉米抗北方疽病的統(tǒng)一的

5、鑒定技術(shù)要求。近年調(diào)查發(fā)現(xiàn)，遼寧省、甘肅省河西走廊玉米制種基地上普遍發(fā)生此病，此病與彎孢菌葉斑病?；旌习l(fā)生,且癥狀與后者極為相近,診斷上常被混淆誤判。為明確病害歸屬、流行特點等，減少制種企業(yè)之間與種植戶、植物保護部門之間診斷混亂。因此，在不同地區(qū)制定相應(yīng)的地方標準，有助于對該項病害準確鑒定。2.提供適宜于甘肅省統(tǒng)一評價抗北方炭疽病的標準。由于目前對玉米北方炭疽病的研究較少，尚沒有建立該病害分級標準。同時，玉米品種、環(huán)境條件和不同生育期時期該發(fā)病程度存在明顯差別，癥狀差異較大，對鑒定結(jié)果具有較大影響。室內(nèi)致病測定時，自交系、雜交種在成株期的鑒定效果不理想，且在成株期鑒定需要較長時間，環(huán)境條件不好

6、控制，操作困難，鑒定結(jié)果不穩(wěn)定。因此，根據(jù)北方炭疽病的在玉米成熟期發(fā)病情況，參考玉米葉斑病分級標準，建立了玉米北方炭疽病病害分級標準，為玉米抗北方炭疽病育種和種質(zhì)創(chuàng)新研究，篩選出優(yōu)異的抗病核心種質(zhì)提供一個統(tǒng)一標準。3.為有效防治玉米北方炭疽病提供基礎(chǔ)理論依據(jù)。缺乏抗性品種是該病害流行的主要原因。據(jù)資料報道，不同品種間存在抗性差異，但差異不顯著，自交系和雜交品種均表現(xiàn)為感病。為此，制定該標準，規(guī)范甘肅省玉米品種的抗病性選育和玉米品種抗北方炭疽病鑒定，為推廣抗病品種提供理論依據(jù)。(三)標準制定的意義1.為政府在玉米有害生物科學(xué)預(yù)警和科學(xué)執(zhí)法提供規(guī)范性文件，提高了企業(yè)經(jīng)營生產(chǎn)者的預(yù)見性，增強了“預(yù)防

7、為主”和防患減災(zāi)意識，顯著地減少了農(nóng)戶、企業(yè)的經(jīng)濟損失，為抗病育種提供科學(xué)依據(jù)。對我國玉米產(chǎn)生具大的社會、經(jīng)濟、生態(tài)效益。2.為編制、評估和檢驗玉米種子、種植規(guī)劃提供重要依據(jù)。三、編制的原則和依據(jù)（一）原則本標準的編制依據(jù)中華人民共和國標準法和地方標準管理辦法的規(guī)定，按照GB/T1.1-2020標準的結(jié)構(gòu)進行編寫。（二）依據(jù)1.制訂依據(jù)玉米北方炭疽病發(fā)生規(guī)律進行編寫。2.制訂檢驗、鑒定玉米北方炭疽病技術(shù)參照植病研究法執(zhí)行。3.該標準是本項目組結(jié)合承擔的2013年甘肅省財政廳、甘肅省農(nóng)牧廳下達甘肅省農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新項目（GNCX-2013-10）“制種玉米病害綜合治理技術(shù)集成與示范推廣”的研究成果，

8、同時參考國內(nèi)對玉米北方炭疽病的相關(guān)研究進展，制定的甘肅省玉米抗北方炭疽病鑒定技術(shù)規(guī)程。4.建議將本標準作為推薦性地方標準批準發(fā)布，用于指導(dǎo)和規(guī)范我省玉米北方炭疽病檢驗檢疫、抗病育種及其鑒定。四、主要起草過程（一）調(diào)查研究任務(wù)下達后，起草單位組織主要起草人員，對河西走廊玉米北方炭疽病原菌檢驗、田間鑒定參考依據(jù)進行了調(diào)查研究，對種子管理部門、植物保護部門對玉米北方炭疽病及其檢驗檢疫科學(xué)依據(jù)咨詢，對種子生產(chǎn)企業(yè)、農(nóng)戶在對玉米北方炭疽病的診斷中存在問題、遇到困難進行實地調(diào)查。起草人員收集參考相關(guān)玉米病蟲害標準文本4個。目前相關(guān)玉米病蟲鑒定技術(shù)規(guī)程僅見幾種行業(yè)標準，如玉米抗病蟲性鑒定技術(shù)規(guī)范，第1部分：

9、玉米抗大斑病鑒定技術(shù)規(guī)范（NY/T 1248.1-2006），第2部分：玉米抗小斑病鑒定技術(shù)規(guī)程（NY/T 1248.2-2006）、第3部分：玉米抗絲黑穗病鑒定技術(shù)規(guī)程（NY/T 1248.3-2006）、第4部分：玉米抗矮花葉病鑒定技術(shù)規(guī)程（NY/T 1248.4-2006）。參考文獻5篇，1部著作。經(jīng)整理資料，編制標準草稿，起草小組討論后形成征求意見稿，向15家單位、企業(yè)發(fā)出征求意見，收到15份反饋意見報告。起草小組對征求意見認真進行討論，對征求意見稿進行修改，形成送審稿。（二）制訂主要技術(shù)內(nèi)容1.范圍 主要規(guī)定了本標準的適用區(qū)域。2.規(guī)范性引用文件目前尚未查閱到相關(guān)北方炭疽病行業(yè)標準和

10、地方標準，故未列出引用文件。 3.術(shù)語與定義 規(guī)定了以下術(shù)語與定義適用于本標準，如玉米蜀黍出芽短梗霉菌、單孢分離等。 4.田間癥狀鑒定 主要涉及北方炭疽病田間癥狀類型鑒定。5.病原接種體制備 主要涉及病原物組織分離、開態(tài)鑒定，分離物純化，致病性測定。6.抗性鑒定圃設(shè)置 主要規(guī)定了鑒定圃設(shè)置、鑒定設(shè)計，種植要求。7.接種 主要規(guī)定了接種時間、接種方法、田間管理等體要求。8.病情調(diào)查 主要規(guī)定了調(diào)查時間、調(diào)查方法、病情分級、普遍率計算、病情指數(shù)計算等內(nèi)容。9.抗性評價 規(guī)定了玉米對北方炭疽病的有效性判定、抗性評價標準、重復(fù)鑒定、鑒定記載表格設(shè)計等內(nèi)容要求。10.鑒定報告 規(guī)定了抗性評價出具的具體要

11、求。五、試驗驗證過程一是采集田間病害標本，調(diào)查發(fā)生時期。明確了北方炭疽病是典型葉部病害和莖桿類病害，即可危害葉片，又可危害葉鞘、苞葉、莖桿。在甘肅省主要發(fā)生時期為玉米抽雄期之前，抽雄后為嚴重發(fā)生期，成熟癥狀最為典型。采集與觀察田間癥狀，根據(jù)病斑分布、病斑顏色、病斑大小等癥狀特點，結(jié)合人工接種發(fā)病的癥狀，歸納癥狀類型有兩種，即眼斑型、枯斑型，這為北方炭疽病田間診斷奠定了基礎(chǔ)。二是病原菌形態(tài)鑒定。經(jīng)病葉保濕培養(yǎng)、病原菌常規(guī)組織分離，獲得純培養(yǎng)物，觀察無性階段的分生孢子盤、分生孢子梗、分生孢子生長方式、顏色、大小、細胞數(shù)量等， PDA培養(yǎng)基菌落性狀，結(jié)合田間癥狀特點、病原菌形態(tài)特征和培養(yǎng)性狀，確定玉

12、米北方炭疽病的病原種類，為該病害鑒定關(guān)鍵性因素。三是病原菌生物學(xué)特性試驗，測定病原菌在不同環(huán)境因素影響下生長情況，用于判定田間病害的發(fā)生規(guī)律。通過不同溫度、不同Ph值、碳氮源、光照對菌絲、分生孢子生長的影響，尋找北方炭疽病菌菌絲生長溫度、ph、光照、碳氮源范圍及最適生長條件，結(jié)合室內(nèi)病原菌生物學(xué)特性，分析北方炭疽病在自然條件下發(fā)生規(guī)律與其生物學(xué)特性相關(guān)性，為深入開展田間病害發(fā)生規(guī)律奠定基礎(chǔ)。四是人工接種試驗的抗性測定方法與程序，作為抗性測定關(guān)鍵技術(shù)。首先是接種體制備，即獲得純培養(yǎng)物；菌繁殖與保存，獲得菌懸液和菌種；鑒定圃設(shè)置及抗性鑒定的設(shè)計；其次是抗性測定接種時間、接種量、接種方法、環(huán)境條件的控制等，為人工接種抗性測定奠定基礎(chǔ)。五是病情調(diào)查，為抗性評價奠定基礎(chǔ)。按病斑面積所占葉面積比例劃分為6級，規(guī)定在拔節(jié)期、大喇叭口期、抽雄期調(diào)查，按照根據(jù)癥狀特征調(diào)查發(fā)病情況，調(diào)查被接種部位的上、下葉片，根據(jù)對病害癥狀的描述，隨機抽取鑒定圃中間3行的玉米葉片80100個，逐葉進行調(diào)查記載嚴重度、普通率和病情指數(shù)。六是抗性評判和抗性報告。采用癥狀觀察與描述，病原分離與生物學(xué)特性測定，人工接種抗性評價與自然抗性評價等方法程序，規(guī)定了抗性記載表及抗性評判標準、程序，方法可操作性強，驗證準確性