人教版高中生物選修1 血紅蛋白的提取和分離練習題測試題

1、自我小測1使用凝膠色譜法分離蛋白質實驗中，相對分子質量不同的蛋白質在凝膠中的行進過程，可表示為圖中（）2電泳過程中，什么樣的分子遷移速度最快？A.纖維狀、大分子B.纖維狀、小分子C.球狀、大分子D.球狀、小分子將人紅細胞置于盛有下列液體的離心管中，10min后離心，得到沉淀物和上清液,則上清液中K+含量最髙的離心管內盛有（）質量分數(shù)為10%的氯化鈉溶液質量分數(shù)為20%的蔗糖溶液質量分數(shù)為0.9%的氯化鈉溶液蒸餾水下列有關提取和分離血紅蛋白的實驗敘述錯誤的是（）該實驗的材料必須選用雞血通過透析法可以去除樣品中分子質量較小的雜質，此為樣品的粗提取凝膠色譜法是利用蛋白質的相對分子質量的大小分離蛋白質

2、電泳法是利用各種分子帶電性質的差異及分子的大小和形狀不同進行分離下列關于電泳的說法，不正確的是（）電泳是指帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程帶電分子會向著與其所帶電荷相反的電極移動蛋白質在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率完全取決于它所帶凈電荷的多少用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳，蛋白質電泳遷移率完全取決于分子的大小在血紅蛋白的整個提取過程中，不斷用磷酸緩沖液處理的目的是（）防止血紅蛋白被氧化血紅蛋白是一種兩性物質，需要酸中和磷酸緩沖液會加速血紅蛋白的提取過程讓血紅蛋白處在穩(wěn)定的pH范圍內，維持其結構和功能凝膠色譜分離法分離蛋白質時，凝膠的種類較多，但其作用都是（）改變蛋白質分子通過凝膠時的路徑吸附一部分

3、蛋白質，從而影響蛋白質分子的移動速度將酶或細胞固定在凝膠中與蛋白質分子進行化學反應，從而影響其移動速度8將經(jīng)處理破裂后的紅細胞混合液以2000r/min的速度離心10min后，離心管中的溶液分為四層，從上到下的順序依次是（）血紅蛋白、甲苯層、脂溶性物質層、沉淀層甲苯層、沉淀層、血紅蛋白、脂溶性物質層脂溶性物質層、血紅蛋白、甲苯層、沉淀層甲苯層、脂溶性物質層、血紅蛋白、沉淀層下列關于血紅蛋白提取和分離實驗中樣品處理步驟的描述，正確的是（）紅細胞的洗滌：加入蒸餾水，緩慢攪拌，低速短時間離心血紅蛋白的釋放：加入生理鹽水和甲苯，置于磁力攪拌器上充分攪拌分離血紅蛋白：將攪拌好的混合液離心、過濾后，用分液

4、漏斗分離透析：將血紅蛋白溶液裝入透析袋，置于pH為4.0的磷酸緩沖液中透析12h凝膠柱制作的順序一般是（）橡皮塞打孔挖凹穴玻璃管插入橡皮塞孔內蓋尼龍網(wǎng)用尼龍紗將橡皮塞上部包好將包好的橡皮塞插入玻璃管連接尼龍管、裝螺旋夾柱頂部插入安裝了玻璃管的橡皮塞一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一關于凝膠色譜柱的裝填，除哪項外均為正確解釋？（）交聯(lián)葡聚糖凝膠（SephadexG75）“G”表示凝膠的交聯(lián)程度、膨脹程度及分離范圍,75表示凝膠得水值色譜柱內不能有氣泡存在，一旦發(fā)現(xiàn)有氣泡，必須重裝用300mL物質的量濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液充分洗滌平衡凝膠12h凝膠用自來水充分溶脹

5、后，配成凝膠懸浮液下列對在凝膠柱上加入樣品和洗脫的操作，不正確的是（）加樣前要使柱內凝膠面上的緩沖液下降到與凝膠面平齊讓吸管管口沿管壁環(huán)繞移動，貼壁加樣至色譜柱頂端，不要破壞凝膠面打開下端出口，待樣品完全進入凝膠層后，直接連接緩沖液洗脫瓶開始洗脫待紅色的蛋白質接近色譜柱底端時，每5mL收集一管，連續(xù)收集流出液血紅蛋白是人和其他脊椎動物紅細胞的主要組成成分，負責血液中02或CO2的運輸。請根據(jù)血紅蛋白的提取和分離流程圖回答問題。（1）將實驗流程補充完整：A為，B為。凝膠色譜法是根據(jù)達到蛋白質分離的有效方法。（2）洗滌紅細胞的目的是去除，洗滌次數(shù)過少，無法除去；離心速度過高和時間過長會使一同沉淀，

6、達不到分離的效果。洗滌干凈的標志是。釋放血紅蛋白的過程中起作用的是。（3）在洗脫過程中加入物質的量濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液（pH為7.0）的目的是。如果紅色區(qū)帶，說明色譜柱制作成功。凝膠色譜技術是20世紀60年代初發(fā)展起來的一種快速而又簡單的分離技術，由于設備簡單，操作方便，不需要有機溶劑，對高分子物質有很高的分離效果，目前已經(jīng)被生物化學、分子生物學、生物工程學、分子免疫學以及醫(yī)學等有關領域廣泛應用，不但應用于科學實驗研究，而且已經(jīng)大規(guī)模地用于工業(yè)生產(chǎn)。據(jù)圖回答下面的問題。（1）a、b均為蛋白質分子，其中先從層析柱中洗脫出來的是，原因是（2）自己制作凝膠色譜柱時，在色譜柱底部d位置相

7、當于多孔板的結構可由替代。3）裝填凝膠色譜柱時，色譜柱內不能有氣泡存在，原因是洗脫用的液體應盡量與浸泡凝膠所用的液體(填“相同”或“不同”)，洗脫時，對洗脫液的流速要求。某生物興趣小組在“蛋白質的提取和分離”實驗中，準備從豬的血液中初步提取血紅蛋白，設計的“血紅蛋白提取、分離流程圖”如下：實驗準備配制緩沖液、血細胞懸液純化、純樣品處理蛋白質度鑒定洗滌、破一粗分離一凝膠色碎、離心等丨透析丨譜法、電泳等請回答下列有關問題。樣品處理中紅細胞的洗滌要用反復沖洗、離心。向紅細胞懸液中加入一定量的低濃度pH=7.0的緩沖液并充分攪拌，可以破碎紅細胞，破碎細胞的原理是血紅蛋白粗分離階段，透析的目的是，若要盡

8、快達到理想的透析效果，可以(寫出一種方法)。電泳利用了待分離樣品中各種分子的等的差異，而產(chǎn)生不同遷移速度，實現(xiàn)各種分子的分離。一同學通過血紅蛋白醋酸纖維薄膜電泳，觀察到正常人和鐮刀型細胞貧血癥患者的血紅蛋白電泳結果如圖所示。由圖可知攜帶者有種血紅蛋白，從分子遺傳學的角度作出的解釋是。TF常人負極正極負極正極j育攜帶者參考答案1解析：本題考查對凝膠色譜法分離蛋白質原理的理解，相對分子質量較大的蛋白質留在顆粒外面，相對分子質量較小的蛋白質進入顆粒內部；相對分子質量大的蛋白質通過凝膠間隙先被洗脫，相對分子質量小的蛋白質進入凝膠內部而后被洗脫。答案：B2解析：電泳就是利用了連續(xù)分離樣品中各種分子帶電性

9、質的差異以及分子本身的大小、形狀的不同。一般來說，球狀分子比纖維狀分子易移動，小分子比大分子易移動。答案：D解析：紅細胞在蒸餾水中滲透吸水漲破，所以細胞中K+流出，使上清液中K+含量較高。答案：D解析：因為雞血細胞中含有細胞核以及各種復雜的細胞器，會給提取血紅蛋白帶來一定的難度，故提取血紅蛋白一般選用哺乳動物的成熟紅細胞。答案：A解析：蛋白質在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率取決于它所帶凈電荷的多少以及分子的大小等因素，SDS能與各種蛋白質形成蛋白質SDS復合物，SDS所帶負電荷的量大大超過了蛋白質分子原有的電荷量，因而掩蓋了不同種蛋白質間的電荷差異，使電泳遷移率完全取決于分子的大小。答案：C解析：利

10、用磷酸緩沖液模擬細胞內的pH環(huán)境，保證血紅蛋白的正常結構和功能，便于分離觀察（紅色）和研究（活性）。答案：D解析：凝膠的種類較多，但每一種凝膠內部都有孔隙。相對分子質量不同的蛋白質通過凝膠時，相對分子質量小的容易進入凝膠內部的通道，路程較長，移動速度較慢。相對分子質量較大的蛋白質無法進入凝膠內部，只能在凝膠外部移動，路程較短，移動速度較快。相對分子質量不同的蛋白質分子因此得以分離。答案：A解析：混合液經(jīng)離心后，按密度大小排列，在離心管中從上到下的順序依次是，第1層為無色透明的甲苯層，第2層白色薄層固體是脂溶性物質沉淀層，第3層紅色透明液體是血紅蛋白溶液，第4層暗紅色沉淀物主要是紅細胞破碎物沉淀

11、。答案：D9解析：對紅細胞進行洗滌時，應加入生理鹽水，防止細胞破裂；將血紅蛋白從紅細胞中釋放時，需要加入蒸餾水，以便使紅細胞破裂釋放出血紅蛋白；透析時，應將透析袋置于pH為7.0的磷酸緩沖液中透析12ho答案：C解析：凝膠柱制作的一般流程是：選擇玻璃管一選擇合適的橡皮塞一打孔一挖凹穴f玻璃管插入橡皮塞孔內f蓋尼龍網(wǎng)f用尼龍紗將橡皮塞上部包好f將包好的橡皮塞插入玻璃管f連接尼龍管一裝螺旋夾一柱頂部插入安裝了玻璃管的橡皮塞。答案：B解析：本實驗中使用的交聯(lián)葡聚糖凝膠(SephadexG75),其中G表示凝膠的交聯(lián)程度、膨脹程度及分離范圍，75表示凝膠得水值，即每克凝膠膨脹時吸水7.5g；氣泡會攪亂

12、洗脫液中蛋白質的洗脫次序，降低分離效果，因此，一旦發(fā)現(xiàn)有氣泡，必須重裝；在洗脫過程中，應在約50cm髙的操作壓下，用300mL物質的量濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液充分洗滌平衡凝膠12h,以使凝膠裝填緊密；凝膠溶脹時，應使用蒸餾水將其充分溶脹，制成凝膠懸浮液。答案：D解析：打開下端出口，待樣品完全進入凝膠層后，關閉下端出口，再用同樣的方法小心加入適量的20mmol/L的磷酸緩沖液，然后連接緩沖液洗脫瓶開始洗脫。答案：C解析：凝膠色譜法是根據(jù)相對分子質量的大小分離蛋白質的有效方法，在蛋白質分離與提取過程中包括樣品的處理、粗分離、純化和純度鑒定四步，每一步均應用了不同的操作技術。答案：(1)血

13、紅蛋白的釋放樣品的加入和洗脫相對分子質量的大小(2)雜蛋白(血漿蛋白)血漿蛋白白細胞和淋巴細胞離心后的上清液中沒有黃色蒸餾水和甲苯準確模擬生物體內的生理環(huán)境，保持體外的pH和體內一致均勻一致地移動解析：用凝膠色譜法分離各種物質時，大分子物質先洗脫出來。大分子物質由于直徑較大，不易進入凝膠顆粒的微孔，而只能分布于顆粒之間，所以向下移動的速度較快。小分子物質除了可在凝膠顆粒間隙中擴散外，還可以進入凝膠顆粒的微孔中，即進入凝膠內，在向下移動的過程中，從一個凝膠顆粒內擴散到顆粒間隙后再進入另一個凝膠顆粒，如此不斷地進入和擴散，小分子物質的下移速度落后于大分子物質，從而落后于大分子物質洗脫出來。在色譜柱

14、中裝填凝膠的時候要盡量緊密，以減少凝膠顆粒之間的空隙。在裝填凝膠色譜柱時，不得有氣泡存在，因為氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質的洗脫次序，降低分離效果。凝膠色譜操作過程中，不能發(fā)生洗脫液流干，露出凝膠顆粒的現(xiàn)象。一旦發(fā)生上述兩種情況，凝膠色譜柱需要重新裝填。答案：(1)aa的相對分子質量大，無法進入凝膠內部的通道，只能在凝膠外部移動，路程較短，移動速度較快（2）尼龍網(wǎng)和尼龍紗（3）氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質的洗脫次序，降低分離效果（4）相同保持穩(wěn)定15解析：（1）洗滌紅細胞所用的溶液是生理鹽水，根據(jù)滲透作用原理，將紅細胞置于低滲溶液中，紅細胞會吸水漲破，釋放出血紅蛋白。（2）血紅蛋白粗分離階段，透析的目的是除去樣品中的小分子雜質。可通過增加緩沖液的量或及時更換緩沖液等方法縮短透析時間，盡快達到理想的透析效果。（3）由于各種分子帶電性質以及分子大小、形狀