積雪草提取物編制說明

1、國際商務標準積雪草提取物編制說明一、任務來源本標準的制定工作，是由中國醫(yī)藥保健品進出口商會提出而進行的，國際商務標準植物提取物編號為 WM。本標準由桂林萊茵生物科技股份有限公司、中國醫(yī)藥保健品進出口商會等單位負責起草。二、標準制定的意義積雪草提取物在國際市場上主要用于保健品及化妝品，國際上幾家大保健品公司及化妝品公司均有 用到此產品。用到積雪草提取物的保健品上1000種，廣泛應用于醫(yī)藥、食品、飲料、化妝品等工業(yè)。 每年國內該產品的出口額上千萬美金，市場前景十分看好。目前該提取物，在國內沒有相應的國家和行 業(yè)標準，因此無法對產品中有效成份積雪草苷、總苷的含量及污染物限量進行有效控制，各生產企業(yè)只

2、 能依靠自己制定的企業(yè)標準進行檢測及質量控制，由于不同企業(yè)的提取工藝和質量控制水平不同，產品 質量差異較大，又無統(tǒng)一標準，導致積雪草提取物在國內外銷售市場很容易出現(xiàn)質量糾紛，并存在食品 安全隱患，嚴重制約了積雪草深加工產業(yè)的發(fā)展，因此迫切需要制定積雪草提取物的出口商務標準。制 定本標準將使積雪草提取物的質量控制符合食品安全要求，同時能更好地滿足國內外市場的質量控制要 求，有助于提高積雪草提取物生產企業(yè)的質量控制水平和產品的市場競爭力，促進積雪草產業(yè)的發(fā)展。三、標準編寫規(guī)則本標準遵循GB/T1.1-2000標準化工作導則 第1部分:標準的結構和編寫規(guī)則；GB/T20001.2-2001 標準化工

3、作指南 第2部分：采用國際標準的規(guī)則和GB/T20001.4-2001標準編寫規(guī)則第4部分： 化學分析方法1康規(guī)則編寫。還參照相關國家標準編寫指南的要求。四、標準的制(修)訂與起草原則1、積雪草提取物廣泛應用于食品、化妝品、藥品等領域，由于沒有現(xiàn)行的積雪草提取物質量標準， 本標準在制定過程中，僅參照和引用了國內外相關食品、藥用植物等標準。2、積雪草提取物應用廣泛，規(guī)格也較多，本標準中選取最常規(guī)的25%積雪草總苷制定標準。3、本標準的重點放在安全性指標：重金屬、微生物等。4、積雪草總苷的成分在中國藥典含積雪草苷、和羥基積雪草苷；歐洲藥典中包括了積雪草苷、積雪 草酸，羥基積雪草苷、羥基積雪草酸4種

4、，這兩種歸類都與實際情況有差異，在日常貿易中也存在爭論。 需要根據(jù)實際情況重新確定積雪草總苷的成分。5、現(xiàn)在測試方法用的最多的是中國藥典和歐洲藥典上規(guī)定的方法，兩者各有差異，需要根據(jù)兩種方 法的優(yōu)缺點，在兩者的基礎上重新建立新方法。五、標準編制依據(jù)和主要內容1、積雪草提取物廣泛應用于食品、化妝品、藥品等領域，由于沒有現(xiàn)行的積雪草提取物質量標準， 本標準在制定過程中，僅參照和引用了國內外相關食品、藥用植物等標準。2、現(xiàn)在測試方法用的最多的是中國藥典2010版一部P389積雪草總苷4和European pharmacopoeia 7.0 (01/2008:1498) corrected 6.05中

5、的方法。本標準中的測試方法參照中國藥典方法，為了使羥基積雪草酸和積雪草酸獲得更好的峰形和分離度，進行了以下的改進：用磷酸調節(jié)了環(huán)糊精溶液的pH至4， 采用梯度洗脫條件，20分鐘前流動相比例與中國藥典方法無差異，20分鐘-60分鐘乙腈比例由24%變化至 45%，等度保持15分鐘。按E.P7.0中規(guī)定以積雪草苷為標準品乘以不同的校正因子，來計算羥基積雪草 苷、積雪草苷、積雪草酸、羥基積雪草酸的含量，歐洲藥典中羥基積雪草苷的校正因子為1.017、羥基 積雪草酸的校正因子為0.526、積雪草酸的校正因子為0.509。3、本標準設立了粒度的測定，并引用了中國藥典2010版中規(guī)定粒度的測定方法67。4、本

6、標準設立了總重金屬、砷、鉛、鎘、汞、銅的限量指標，這六項指標，是目前國內外食品中比 較常用的重金屬項目。其限量標準，參照并嚴于WM-T2-2004藥用植物及制劑外經貿綠色行業(yè)標準罔，測 試方法采用GB/T 5009.74-20039測定總重金屬;采用GB 5009.12-2010測定鉛含量、GB/T 5009.15-2003 測定鎘含量11、中國藥典2010版一部附錄IXB鉛、鎘、砷、汞、銅測定法測定砷、汞的含量12，并參 考了GB/T5009.11-2003、GB/T 5009.17-20033- 14。5、 本標準設立了水分不大于5%指標，參照了 GB7101-2003固體飲料衛(wèi)生標準 3

7、。引用了 GB 5009.3-2010食品中水分的測定U6作為檢測方法。6、本標準設立了灰分不大于3%的指標，該指標抽查多批25%積雪草總苷確立的。引用了 GB5009.4-2010 食品中灰分的測定切。7、本標準參考了 GB7101-2003固體飲料衛(wèi)生標準19中普通型及其他產品要求，綜合考慮，細菌指標 定為小于1000cfu/g,霉菌和酵母定為小于100cfu/g,大腸菌群為小于30MPN/100g，沙門氏菌、金黃色葡萄 球菌、大腸桿菌均為不得檢出。微生物檢測方法分別采用了 GB4789.2-2010食品安全國家標準食品微 生物學檢驗 菌落總數(shù)測定，GB4789.15-2010食品安全國家

8、標準食品微生物學檢驗霉菌和酵母計數(shù)， GB4789.3-2010食品安全國家標準食品微生物學檢驗大腸菌群計數(shù)，GB4789.4-2010食品安全國家標 準食品微生物學檢驗沙門氏菌檢驗，GB4789.10-2010食品安全國家標準食品微生物學檢驗金黃色 葡萄球菌檢驗，GB4789.38-2012食品安全國家標準食品微生物學檢驗大腸埃希氏菌計數(shù)20- 25。8、積雪草總苷為積雪草提取物中特定的成分，因此本標準中沒有設立鑒別的標準。本標準為推薦性國家標準。表1技術指標及編制依據(jù)項目指標參考標準粒度（80目篩通過率），%399%參考客戶要求及提取物特性重金屬（以Pb計）/（mg/kg）W10參照并嚴于

9、WM-T2-2004藥用植物及制劑 外經貿綠色行業(yè)標準（20mg/kg）的指標鉛(Pb) / (mg/kg)W3.0參照并嚴于WM-T2-2004藥用植物及制劑 外經貿綠色行業(yè)標準（5.0mg/kg）的指標鎘(Cd) / (mg/kg)W0.3參照WM-T2-2004藥用植物及制劑外經貿 綠色行業(yè)標準（0.3mg/kg）的指標砷(As) / (mg/kg)W1.0參照并嚴于WM-T2-2004藥用植物及制劑 外經貿綠色行業(yè)標準（2.0mg/kg）的指標汞(Hg) / (mg/kg)W0.1參照并嚴于WM-T2-2004藥用植物及制劑 外經貿綠色行業(yè)標準（0.2mg/kg）的指標銅(Cu) /

10、(mg/kg)W5.0參照并嚴于WM-T2-2004藥用植物及制劑 外經貿綠色行業(yè)標準（20.0mg/kg）的指標水分，%W5.0參考客戶要求并嚴于中國藥典2010版積雪草總苷(干燥失重10.0%)的指標灰分，%W3.0參考客戶要求及提取物特性積雪草總苷w/%325參考客戶要求及提取物特性細菌總數(shù)/ (cfu/g)W1000綜合參照中國藥典微生物限度標準中不 含藥材原粉的制劑(1000 cfu/g)和含藥 材原粉的制劑(10000 cfu/g)霉菌及酵母菌數(shù)/ (cfu/g)W100參照中國藥典微生物限度標準(100 cfu/g)大腸菌群/ (MPN/100g)W30參照并嚴于GB7101-2

11、003固體飲料衛(wèi)生標準(40MPN/100g)大腸桿菌不得檢出參照GB7101-2003固體飲料衛(wèi)生標準沙門氏菌不得檢出參照GB7101-2003固體飲料衛(wèi)生標準金黃色葡萄球菌不得檢出參照GB7101-2003固體飲料衛(wèi)生標準六、名稱、分子式、相對分子質量及CAS編號1、中文名稱：積雪草提取物。2、英文名稱:Gotu Kola P.E3、分子式、結構式、分子量：積雪草提取物中積雪草總苷有4種組分。其結構式、分子量及分子式如 表2所示。R4表2積雪草總苷各組分組分R1R2R3R4分子量積雪草苷 AsiaticosideHHCH3Rha (1-4) -glc(1-6) -glc959.13羥基積雪

12、草苷 MadecassosideOHCH3HRha (1-4) -glc (1-6) -glc975.13積雪草酸 Asiatic acidHHCH3H488.70羥基積雪草酸Madecassic acidOHCH3HH504.70七、產品技術要求1、性狀描述：積雪草提取物為黃棕色，有積雪草的特殊氣味。2、積雪草提取物指標成分含量范圍：積雪草總苷325%。3、技術要求：積雪草提取物的技術要求見表3。表3積雪草提取物技術要求項目指標檢驗方法粒度（80目篩通過率），%399%附錄A中A.2（參照國藥典2010版一部附錄XI B第二法）重金屬（以Pb計）/（mg/kg）W10GB/T5009.74鉛

13、(Pb) / (mg/kg)W3.0GB5009.12鎘(Cd) / (mg/kg)W1.0GB/T5009.15砷(As) / (mg/kg)W1.0GB 5009.11汞(Hg) / (mg/kg)W0.1GB/T5009.17銅(Cu) / (mg/kg)W5.0GB/T5009.13水分，%W5.0GB 5009.3灰分，%W3.0GB5009.43積雪草總苷w/%25附錄A.3（檢測方法參照中國藥典2010版一 部P389,等度變更為梯度；系數(shù)計算參照 歐洲藥典7.0）細菌總數(shù)/ (cfu/g)V1000GB 4789.2霉菌及酵母菌數(shù)/ （cfu/g）V100GB 4789.15大

14、腸菌群/ (MPN/100g)V30GB 4789.3大腸桿菌不得檢出GB 4789.38沙門氏菌不得檢出GB4789.4金黃色葡萄球菌不得檢出GB4789.10八、方法驗證8.1 HPLC 檢測8.1.1儀器8.1.1.1分析天平，感量為0.01mg。8.1.1.2超聲波清洗儀；8.1.1.3高效液相色譜儀（附紫外DAD檢測器）。8.1.2試劑和溶液8.1.2.1甲醇，色譜純。8.1.2.2乙月青，色譜純。8.1.2.3磷酸，分析純。8.1.2.4超純水。8.1.2.5 2mmolp環(huán)糊精（pH=4）：稱取2.27gp -環(huán)糊精，加入1000ml超純水超聲溶解后，用磷酸調節(jié) 溶液至pH=4.

15、超聲混合均勻后經0.45網濾膜過濾，即可。8.1.2.6標準品：積雪草苷（中國食品藥品檢定研究院）8.1.3色譜條件及系統(tǒng)適用性8.1.3.1色譜條件a） 色譜柱：Luna C18,250mmX 4.6mm, 5pmb）流動相：乙青:2mmol/Lg環(huán)糊精（磷酸調節(jié)pH=4） =24： 76 （V/V）梯度條件:TimeB% （乙腈）A%（P環(huán)糊精緩沖液）0.0024.0076.0020.0024.0076.0060.0045.0055.0075.0045.0055.0076.0024.0076.00c）檢測波長：205nm。d）流速：0.8mL/mine）進樣量：5以18.1.3.2系統(tǒng)適用

16、性理論塔板數(shù)按積雪草苷峰計算應不低于4000。8.1.4操作方法8.1.4.1對照品溶液的制備精密稱取積雪草苷適量，用甲醇配制成濃度約為0.8mg/ml的溶液，備用。8.1.4.2供試品溶液的制備稱取積雪草提取物（約含積雪草總苷30%）約150mg，置25ml容量瓶中，甲醇超聲溶解，冷卻至室 溫，甲醇定容至刻度，搖勻，過0.45p m濾膜，待測。8.1.4.2.1試驗結果6次試驗，供試品溶液與對照品溶液的圖譜見附錄1。8.2粒度的測定8.2.1儀器8.2.1.1天平：感量為0.1 mg。8.2.1.2分析篩。8.2.2操作步驟取接收盒，將分樣篩放在接收盒上，稱取約40g提取物粉末（mg）置于分

17、樣篩內，將篩蓋蓋好。將分樣篩保持水平狀態(tài)，左右往返輕輕篩動5min，稱量接收盒內的提取物粉末質量（m2，g）。8.2.3驗證試驗結果10次平行測定結果及相對標準偏差見表5。產品技術要求80目99%以上通過。表5 10次平行粒度測定結果樣品樣品重量接收盒內樣品重量80目通過率編號gG%140.025039.708899.21240.284040.022299.35342.102941.850399.40441.121840.817599.26540.804740.523199.31642.506342.183399.24742.302142.006099.30840.210239.948899.

18、35941.216140.923599.291041.510641.232599.33X99.30S0.00057CV%0.0578.2.4精密度要求取兩次平行測定結果的算術平均值為測定結果。兩次平行測定結果的絕對差值，不大于算術平均值 的 0.5%。8.3重金屬測定檢驗方法采用GB/T5009.74-2003食品添加劑中重金屬限量試驗8.3.1儀器8.3.1.1天平：感量為0.1mg8.3.1.2馬弗爐8.3.2操作步驟準確稱取5g樣品，精確至0.0001 g，按GB/T5009.74-2003食品添加劑中重金屬限量試驗 干法消 解進行測定。表6重金屬添加試驗結果8.3.3驗證試驗結果樣品編

19、號樣品10mg/kg 鉛含 量標準液10mg/kg鉛含量標準液+ 樣品20mg/kg鉛含量標 準液+ 樣品1暗色不明顯2暗色不明顯3暗色不明顯驗證結果見表6。4暗色不明顯5暗色不明顯6暗色不明顯7暗色8暗色9暗色10暗色11暗色12暗色13與10mg/kg鉛標準液顏色 相當14與10mg/kg鉛標準液顏色 相當15與10mg/kg鉛標準液顏色 相當16與10mg/kg鉛標準液顏色 相當17與10mg/kg鉛標準液顏色 相當18與10mg/kg鉛標準液顏色 相當19暗色加深20暗色加深21暗色加深22暗色加深23暗色加深24暗色加深8.4鉛、鎘、汞、砷、銅的測定鉛的檢驗方法采用GB/T5009.

20、12-2003食品中鉛的測定（第一法）石墨爐原子吸收光譜法；鎘的 檢測方法采用GB/T5009.15-2003食品中鎘的測定（第一法）石墨爐原子吸收光譜法；碑、汞、銅的 檢測方法采用中華人民共和國藥典2010版一部附錄IXB鉛、鎘、砷、汞、銅的測定。8.4.1儀器8.4.1.1天平：感量為0.1mg。8.4.1.2原子吸收光譜儀（石墨爐、火焰、氫化物發(fā)生器）。8.4.2操作步驟準確稱取適量樣品，依據(jù)國標及藥典方法進行各個項目的測定。8.4.3驗證試驗結果驗證結果見表7。表7鉛、鎘、汞、神、銅試驗結果樣品 編號鉛結果mg/kg鎘結果mg/kg汞結果mg/kg神結果mg/kg銅結果mg/kg10.

21、220.31-0.231.8220.190.29-0.221.8530.230.28-0.201.7940.200.30-0.211.7550.180.30-0.211.8460.200.29-0.231.7570.220.32-0.211.8680.190.28-0.221.7690.210.30-0.241.81100.220.31-0.201.87X0.210.300.221.81S0.0170.0130.0130.046CV%8.104.335.912.548.4.4精密度要求取兩次平行測定結果的算術平均值為測定結果。兩次平行測定結果的絕對差值，鉛應不大于算術平 均值的20%，鎘應不大

22、于算術平均值的10%，砷應不大于算術平均值的15%，汞應不大于算術平均值的 20%，銅應不大于算術平均值的10%。8.5水分的測定檢驗方法采用GB/T5009.3-2010食品中水分的測定（第一法）直接干燥法。8.5.1儀器8.5.1.1天平：感量為0.1mg。8.5.1.2電熱恒溫干燥箱8.5.2操作步驟準確稱取2g樣品，精確至0.0001 g，按GB/T5009.3-2010食品中水分的測定（第一法）直接干燥法 測定。表8干燥失重10平行樣品測定結果8.5.3驗證試驗結果樣品編號稱量瓶重量G樣品重量g稱量瓶+樣品干燥至恒 重重量g干燥失重%132.59622.078034.63082.09

23、234.49242.058236.50632.15335.82602.034937.82002.01驗證結果見表8。433.61092.077435.64452.11531.07412.069133.10022.08638.01552.070240.04162.13736.49512.064538.51732.05835.02702.058837.04322.07936.13372.077638.16772.101034.04742.058636.06242.12X2.09S0.041CV%1.968.5.4精密度要求取兩次平行測定結果的算術平均值為測定結果。兩次平行測定結果的絕對差值，應不大

24、于算術平均值的5%。8.6灰分的測定檢驗方法采用GB/T5009.4-2010食品中灰分的測定。8.6.1儀器8.6.1.1天平：感量為0.1mg。8.6.1.2馬弗爐8.6.2操作步驟準確稱取3g樣品，精確至0.0001 g，按GB/T5009.4-2010食品中灰分的測定8.6.3驗證試驗結果驗證結果見表9。表9灰分10次平行樣測定結果樣品編號坩堝重量G樣品重量g坩堝+樣品灼燒至恒重 重量g灰分%154.13753.040254.17161.12259.04643.004159.07911.09354.44633.053554.48021.11454.27703.091054.31071.

25、09557.16083.064857.19451.10656.66223.020156.69601.12755.51553.068455.54891.09855.30743.002655.34071.11954.44403.039554.47681.081054.85853.040254.89191.10X1.10S0.014CV%1.278.6.4精密度要求取兩次平行測定結果的算術平均值為測定結果。兩次平行測定結果的絕對差值，不大于算術平均值 的 15%。8.7積雪草苷及積雪草總苷的測定8.7.1儀器和用具8.7.1.1分析天平，感量為0.01mg。8.71.2超聲波清洗儀。8.7.1.3高

26、效液相色譜儀（紫外檢測器或二極管陣列檢測器）。8.7.2試劑和溶液8.7.2.1甲醇，分析純。8.7.2.2乙月青，色譜純。8.7.2.3磷酸（分析純8.7.2.4超純水。8.7.2.5 2mmol/Lp環(huán)糊精緩沖液：稱取2.27gp -環(huán)糊精，加入1000ml超純水超生溶解后，用磷酸調節(jié)溶 液至PH=4.超聲混合均勻后過0.45網膜濾過，即可。8.7.2.6標準品：積雪草苷對照品單體（購自中國食品藥品檢定研究院）。積雪草提取物定性對照品（供總苷含量測定時定性用，含羥基積雪草苷、積雪草苷、羥基積雪草酸、積 雪草酸4種成分）8.7.3色譜條件及系統(tǒng)適用性8.7.4色譜條件a）色譜柱：Luna C

27、 250mmX4.6mm, 5旦mb）流動相：乙青:2mmol/L8環(huán)糊精（磷酸調節(jié)PH=4） =24： 76 （V/V）TimeB% （乙青）A%（P環(huán)糊精緩沖液）0.0024.0076.0020.0024.0076.0060.0045.0055.00C）流速：0.8ml/mind）檢測波長：205nme）進樣量：5p lf）柱溫：25C8.7.4.1系統(tǒng)適用性理論塔板數(shù)按積雪草苷峰計算應不低于4000。8.7.5操作方法8.7.5.1先用10%的乙月青，90%的水以1ml/min的流速沖洗柱子30min，然后再調出方法。8.7.5.2標準品溶液的制備：積雪草苷對照品溶液的制備：精密稱取積雪

28、草苷適量，用甲醇溶解，配制成 濃度約為0.6 mg/mL的標準使用溶液，備用。8.7.5.3定性對照品溶液的制備：精密稱取積雪草提取物定性對照品適量，用甲醇超聲溶解，定容，備用。8.7.5.4樣品溶液的制備：精密稱取積雪草提取物（約含積雪草苷10%） 150 mg，置25 mL容量瓶中，甲 醇超聲溶解，冷卻至室溫，甲醇定容至刻度，搖勻，過0.45 gm有機濾膜，待測。8.7.5.5依次注射空白溶液、對照品溶液、定性對照品溶液、樣品溶液進行檢測，外標法定量。8.7.5.6測完后用10%的乙青，90%的水1ml/min的流速沖柱子30min，再用乙青沖柱子。8.7.5.7結果計算總皂苷含量以質量分

29、數(shù)W計，數(shù)值以表示，按式（A1）計算：Wi = Ia +（BX1.017）+（CX0.526）+（Dx0.509）xc x VxP 乂的。 （A1）A x m式中：A樣品中積雪草苷的峰面積；B樣品中羥基積雪草苷的峰面積；C樣品中羥基積雪草酸的峰面積；D樣品中積雪草酸的峰面積；c.一積雪草苷對照品的濃度，單位為毫克每毫升（mg/mL）；V一樣品的定容體積，單位為毫升（mL）；P積雪草苷對照品的純度，%；A.一積雪草苷對照品的峰面積；m樣品的稱樣量，單位為毫克（mg）；1.017羥基積雪草苷的校正因子0.526一羥基積雪草酸的校正因子0.509積雪草酸的校正因子羥基積雪草苷、積雪草苷、羥基積雪草酸

30、、積雪草酸的校正因子，按表11計，樣品液相圖譜如附錄2。表11名稱羥基積雪草苷積雪草苷羥基積雪草 酸積雪草酸分子量975.13959.13504.70488.70校正因子F1.0171.0000.5260.509保留時間：T羥基積雪草苷VT積雪草苷VT羥基積雪草酸VT積雪草酸。8.7.6驗證實驗結果驗證結果見表12,圖譜見附錄2。表12積雪草苷6次平行測定結果編號稱樣量（mg）積雪草昔 峰面積積雪草昔 含量（）積雪草總昔 峰面積積雪草總昔含量（）1221.131585.5421111.265453.5465535.712222.411601.3542411.315662.4550935.653

31、249.601800.1150511.326137.5300035.664251.001805.5613811.296139.1111335.695222.681604.3510311.305664.0134235.606220.741586.0430911.285454.6531635.82X11.2935.69S0.0220.075CV%0.190.218.7.7色譜系統(tǒng)穩(wěn)定性試驗取積雪草苷標準品溶液，連續(xù)進樣6針1）重復性：6次測試值的峰面積及保留時間的RSD值，以積雪草苷計，峰面積的RSD值應不高于1.0%，保留時間的RSD值應不高于2.0%。2）拖尾因子，以4個積雪草苷組分中拖尾因子

32、最大的計，應不高于2.0。3）理論塔板數(shù)，以4個積雪草苷組分中理論塔板數(shù)最小的計，應不低于4000。結果見表13、表14，圖譜見附錄3。表13重復性試驗結果編號積雪草保留時間積雪草峰面積129.7433370.84741229.7393375.26099329.6773380.94019429.7043374.34717529.6913377.26929629.7773388.88184X29.7223377.9240S0.0386.320.130.19CV%表14色譜系統(tǒng)穩(wěn)定性試驗結果編號項目結果15次測試峰面積的RSD值0.19%25次測試保留時間的RSD值0.13%3拖尾因子1.154理

33、論塔板數(shù)608898.7.8線性積雪草苷標準品溶液曲線的制備精密稱取積雪草苷312.93mg，置于50mL容量瓶中，加入甲醇溶液超聲溶解，放置至室溫，甲醇定 容至刻度，搖勻后做儲備液使用。用移液管移取適量，甲醇定容至刻度，依次逐級稀釋制備其儷個不 同濃度的溶液，將以上制備好的7個不同的標準品溶液各5以1分別注入HPLC儀，制備積雪草苷標準溶 液曲線，結果如表15、表16表15積雪草苷曲線的制備樣品 編號積雪草昔濃度mg/ml積雪草昔峰面積線性方程相關系數(shù)R210.0160221.2486520.0801108.07154Y=1272.48287X+22.65222630.4006538.558

34、59R2=0.9999641.00141329.3168952.50343248.6311065.00696412.5078176.25867950.19727表16積雪草苷的標準曲線8.7.9穩(wěn)定性考察取積雪草苷溶液，每1.5h進樣一次，連續(xù)進樣11針，前10針峰面積顯示樣品溶液峰面積變化不大，在11針時樣品溶液峰面積顯著增大。實驗說明積雪草苷樣品溶液在15小時內穩(wěn)定。結果如表17編號峰面積峰面積RSD12714.8781222717.6642432723.7342042721.7650252723.951110.31%62725.0594572732.9843482733.97082927

35、41.80933102734.27918112813.201598.7.10回收率試驗取已知含量的積雪草提取物加入一定量的積雪草苷標準品，配制成適宜的濃度，每個濃度配制3份， 進行HPLC分析。積雪草苷回收率結果應在98%-102%之間。回收率結果見表18表18積雪草苷回收率試驗結果樣品 編號積雪草昔結果mg積雪草昔本底mg積雪草昔結果-本 底mg積雪草昔加入值mg回收率%143.9918.6125.3825.15100.91243.1317.9625.1825.15100.12348.1822.7425.4425.15101.16458.0430.9927.0526.86100.70560.

36、7433.6827.0526.86100.70668.5141.5826.9326.86100.26九、標準起草過程2012.6第四屆植物提取物分會理事會第一次會議，植物提取物標準會員會成立，接受積雪草提取 物標準制定任務。2012.7 成立標準起草小組。開展制標文獻調研，完成資料搜集和整理工作。按照要求，確定本標準 的技術指標和檢驗方法，同時完成實驗材料的采購和準備。開展前期驗證試驗工作。2012.82012.9完成技術指標和分析方法的確定工作。對樣品各項技術指標的檢測方法進行了方法 驗證。按照GB/T1.1-2000、GB/T20001.2-2001和GB/T20001.4-2001的要求，編制標準文本初稿和編制 說明初稿。2012.92012.10修改整理上