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1、細胞生長曲線的繪制實驗報告范文篇一:實驗五 微生物生長量的測定及生長曲線的繪制一、實驗?zāi)康膶W(xué)習(xí)了解微生物生長量測定的方法學(xué)習(xí)了解細菌生長曲線的繪制方法學(xué)習(xí)掌握血細胞計數(shù)板的使用方法(一)微生物生長量的測定計數(shù)法重量法生理指標法1、顯微鏡直接計數(shù)法(1)利用血細胞計數(shù)板計數(shù)(2)涂片計數(shù)2、活菌菌落計數(shù)法3、濾膜法(二)細菌生長曲線將單細胞細菌接種到恒定容積的液體培養(yǎng)基中,不補充營養(yǎng) 物或移去培養(yǎng)物,細菌以二分裂方式繁殖,以時間為橫坐標,細 菌數(shù)目的對數(shù)值為縱坐標,可畫出一條反映細菌在整個培養(yǎng)期間 菌數(shù)變化規(guī)律的曲線,稱為生長曲線(growth curve)篇二:細胞生長曲線的測定細胞生長曲線的
2、測定一、實驗?zāi)康恼莆諟y定細胞生長曲線的方法。二、實驗器具24孔細胞培養(yǎng)板、微量加樣器、eppendorf管、吸頭、吸頭 盒、顯微鏡、細胞計數(shù)板、載玻片、蓋玻片、吸管、試管架、普 通顯微鏡、細胞懸液、0.4%臺盼藍。三、實驗方法培養(yǎng)細胞:首先在24孔細胞培養(yǎng)板內(nèi)分別接種相同數(shù)量 的細胞,計數(shù)并記錄接種的細胞懸液密度,接種時間記為0小 時。計數(shù)細胞密度:從接種時間算起,每隔24小時計數(shù)3孔 的細胞密度,算出平均值。為提高準確率,對每孔細胞可計數(shù)2-3 次,如此操作至第七天結(jié)束。繪制曲線:以培養(yǎng)時間為橫坐標、細胞密度為縱坐標,將 全部結(jié)果在坐標紙上繪圖,即得所培養(yǎng)細胞的生長曲線。篇三:MTT法繪制生
3、長曲線實驗材料:1,5%FBS-L-DMEM, 5x104 個/ml 細胞懸液,5mg/mlMTT 溶液, DMSO,0.01M PBS,2, 96 孔板共 7 個,酶標儀,50ml 離心管, 1.5m 1離心管,0.22um濾膜,錫箔紙,MTT工作液(1ml/管)實驗步驟:分別選取生長良好的P1、P3、P5代BMSCs消化后制備成 細胞懸液,調(diào)整細胞密度為5x104/ml。接種到96孔板,每孔接種 200 u l細胞懸液進行培養(yǎng)(每孔1x104細胞)。培養(yǎng)16-48后,每天選擇6個培養(yǎng)孔各自加入MTT溶液 (5mg/ml)20ul,37C 繼續(xù)孵育。孵育4h后終止培養(yǎng),吸出孔內(nèi)上清,此時應(yīng)該
4、傾斜96 孔板,用槍頭小心的將上清液吸去,不可吸去下面的結(jié)晶顆粒, 慢慢吸去。每孔加入150ulDMS0,室溫振蕩10min,使結(jié)晶充分溶 解,于試驗孔平行設(shè)不加細胞只加培養(yǎng)液的空白對照1孔。注意事項:【1】 ;1,兩種方法分離小型豬骨髓間充質(zhì)干細胞的比 較分別取兩組0,1,3代細胞,制成1x103的細胞懸液,接種到 96孔板,每孔細胞懸液200微升,置37C、5%C02飽和濕度孵箱 內(nèi)孵育,各組每24小時分別取出4孔,每孔加入MTT (2mg/ml) 20微升37C孵育,4h后吸棄孔內(nèi)培養(yǎng)液,每孔加入150微升分 析純的二甲基亞砜,移至酶聯(lián)免疫檢測儀上振蕩10min,用分光光 度計在
5、492nm波長處測定每孔的吸光度值(0D492),以0D(492) 值為縱坐標,時間為橫坐標繪制生長曲線【2】來自:SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞體外分離培養(yǎng)的實驗 研究大鼠MSCs生長曲線測定:為了定量測定大鼠BMSCs的生長狀 況,對來源于同一動物的原代細胞進行連續(xù)培養(yǎng)。分別選取生長 良好的P1、P3、P5代BMSCs消化后制備成細胞懸液,調(diào)整細胞密 度為5x104/ml。接種到96孔板,每孔接種200 ul細胞懸液進行 培養(yǎng)(每孔1x104細胞)。次日起每天選擇6個培養(yǎng)孔各自加入 MTT溶液(5mg/ml)20ul,37C繼續(xù)孵育4h后終止培養(yǎng),吸出孔 內(nèi)上清,每孔加入150ulDMSO,室溫振蕩10min,使結(jié)晶充分溶 解,于試驗孔平行設(shè)
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