維生素類藥物分析

1、關(guān)于維生素類藥物的分析 第一張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月公元前3500年-古埃及人發(fā)現(xiàn)能防治夜盲癥的物質(zhì)，也就是后來(lái)的維A。1600年-醫(yī)生鼓勵(lì)以多吃動(dòng)物肝臟來(lái)治夜盲癥。1747年-蘇格蘭醫(yī)生林德發(fā)現(xiàn)檸檬能治壞血病，也就是后來(lái)的維C。1831年-胡蘿卜素被發(fā)現(xiàn)。1911年-波蘭化學(xué)家豐克為維生素命名。1915年-科學(xué)家認(rèn)為糙皮病是由于缺乏某種維生素而造成的維生素發(fā)展史第二張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月1916年-維生素B被分離出來(lái)。1917年-英國(guó)醫(yī)生發(fā)現(xiàn)魚肝油可治愈佝僂病，隨后 斷定這種病是缺乏維D引起的。1920年-發(fā)現(xiàn)人體可將胡蘿卜素轉(zhuǎn)化為維生素A 19

2、22年-維E被發(fā)現(xiàn)。1928年-科學(xué)家發(fā)現(xiàn)維B至少有兩種類型。1933年-維E首次用于治療。1948年-大劑量維C用于治療炎癥。第三張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月1949年-維B3與維C用于治療精神分裂癥。1954年-自由基與人體老化的關(guān)系被揭開(kāi)。1957年-Q10多酶被發(fā)現(xiàn)。1969年-體內(nèi)超級(jí)抗氧化酶被發(fā)現(xiàn)。1970年-維C被用于治療感冒。1993年-哈佛大學(xué)發(fā)表維生素E與心臟病關(guān)系的研 究結(jié)果。第四張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 VitA、D2、D3、 E、K1 等 脂溶性水溶性 VitB族(B1、B2、B6、B12) VitC、葉酸、煙酸、泛酸等。分類按

3、溶解度分第五張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié)維生素A的分析分類：A1、A2 、A3A1存在于動(dòng)物肝臟、血液和眼球的視網(wǎng)膜中，又稱為視黃醇,天然維生素A主要以此形式存在。脂溶性淡黃色片狀結(jié)晶，熔點(diǎn)64 。A2主要存在于淡水魚的肝臟中。 維生素A2的化學(xué)結(jié)構(gòu)與A1的區(qū)別只是在-白芷酮環(huán)的3,4位上多一個(gè)雙鍵。 第六張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月功能：維持視覺(jué)：維生素A可促進(jìn)視覺(jué)細(xì)胞內(nèi)感光色素的形成。維生素A可調(diào)試眼睛適應(yīng)外界光線的強(qiáng)弱的能力，以降低夜盲癥和視力減退的發(fā)生，維持正常的視覺(jué)反應(yīng),有助于對(duì)多種眼疾(如眼球干燥與結(jié)膜炎等)的治療。 2. 促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育：與

4、視黃醇對(duì)基因的調(diào)控有關(guān).視黃醇也具有相當(dāng)于類固醇激素的作用，可促進(jìn)糖蛋白的合成。促進(jìn)生長(zhǎng)、發(fā)育，強(qiáng)壯骨骼，維護(hù)頭發(fā)、牙齒和牙床的健康。 第七張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3. 維持上皮結(jié)構(gòu)的完整與健全視黃醇和視黃酸可以調(diào)控基因表達(dá)，減弱上皮細(xì)胞向鱗片狀的分化，增加上皮生長(zhǎng)因子受體的數(shù)量。 保持皮膚濕潤(rùn)，防止皮膚黏膜干燥角質(zhì)化，不易受細(xì)菌傷害，有助于對(duì)粉刺、膿包、癤瘡，皮膚表面潰瘍等癥的治療 。4. 加強(qiáng)免疫能力維生素A有助于維持免疫系統(tǒng)功能正常，能加強(qiáng)對(duì)傳染病特別是呼吸道感染及寄生蟲(chóng)感染的身體抵抗力；有助于對(duì)肺氣腫、甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)癥的治療。 第八張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于

5、2022年6月富含維生素A的食物梨、蘋果、枇杷、櫻桃、香蕉、桂圓、杏子、荔枝、西瓜、甜瓜。水果類第九張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月蔬菜類 馬齒菜、大白菜、薺菜、番茄、茄子、南瓜、黃瓜、菠菜 第十張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月植物類綠豆、大米、胡桃仁 第十一張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)（一）結(jié)構(gòu)R: -H 維生素A醇 -COCH3 維生素A醋酸酯 -COC15H31 維生素A棕櫚酸酯一個(gè)共軛多烯側(cè)鏈的環(huán)己烯，有立體異構(gòu)體第十二張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 醋酸酯 相對(duì)生物效價(jià)維生素A 325.5 100% 新維生素

6、Aa 328 75%新維生素Ab 320.5 24%新維生素Ac 310.5 15%異維生素Aa 323 21%異維生素Ab 324 24%第十三張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（二）性質(zhì)1、具紫外吸收：在325328nm間有最大吸收2、不穩(wěn)定性： （易氧化變質(zhì)） 易被空氣中氧或氧化劑氧化 易被紫外光裂解 在加熱和金屬離子存在時(shí)，更易氧化變質(zhì)，生成無(wú)生物活性的環(huán)氧化物、維生素A醛及維生素A酸第十四張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 或有金屬離子存在時(shí)氧化第十五張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3、能與三氯化銻呈色：產(chǎn)生不穩(wěn)定的藍(lán)色。4、溶解性： 維生素A能

7、與氯仿、乙醚、環(huán)己烷或石油醚任意混合，在乙醇中微溶，在水中不溶第十六張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月二、鑒別試驗(yàn)（一）三氯化銻反應(yīng) 原理：維生素A在飽和無(wú)水三氯化銻的無(wú)醇氯仿溶液中，即顯藍(lán)色，漸變成紫紅色。注意：鑒別在無(wú)水、無(wú)醇（乙醇可以和碳正離子作用使其正電荷消失）條件下進(jìn)行。CHCl3水中水解為氯化氧銻第十七張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（二）紫外吸收光譜： 5個(gè)共軛雙鍵6個(gè)共軛雙健第十八張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月去水VitA（VitA3）VitA第十九張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第二十張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于20

8、22年6月（三）薄層色譜吸附劑：硅膠G展開(kāi)劑：環(huán)己烷-乙醚 (80:20)點(diǎn)樣量：各2l，不必?fù)]散溶劑，立即展開(kāi)顯色劑：三氯化銻溶液結(jié) 論：比較供試品溶液和對(duì)照品溶液所顯藍(lán)色斑點(diǎn)位置第二十一張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月BP 雜質(zhì)對(duì)照品法 顯色劑 三氯化銻USP 顯色劑 磷鉬酸 規(guī)定斑點(diǎn)顏色和Rf值第二十二張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月立體異構(gòu)體氧化降解產(chǎn)物合成中間體副產(chǎn)物UV法（一）三、含量測(cè)定維生素A2維生素A3環(huán)氧化物維生素A醛維生素A酸第二十三張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月1、方法建立的依據(jù)三點(diǎn)校正法第二十四張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作

9、于2022年6月2、測(cè)定原理方法的依據(jù)：主成分：在325 328nm有吸收雜質(zhì)：在310340nm范圍內(nèi) 吸收呈一條直線，且隨波長(zhǎng)的增大，吸收度變小。物質(zhì)對(duì)光的吸收具有加和性。第二十五張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3、三點(diǎn)波長(zhǎng)的選擇（1）第1點(diǎn)：選擇維生素A的最大吸收波長(zhǎng)(1) （2）第2點(diǎn)和第3點(diǎn)：在max兩側(cè)各選一點(diǎn) 等波長(zhǎng)差法：3-1=1-2 測(cè)定VA醋酸酯，規(guī)定： 1=328 nm，入2=316nm，3=340nm 等吸收度法：A2=A3=6/7A1 測(cè)定VA醇，規(guī)定： 1=325 nm，2 =310 nm, 3 =334 nm第二十六張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2

10、022年6月4、雜質(zhì)吸收(1)維生素A2和維生素A3(2)維生素A的氧化產(chǎn)物為環(huán)氧化物、維生素A醛和維生素A酸。(3)維生素A在光照下產(chǎn)生的無(wú)生物活性的聚合物鯨醇。(4)維生素A的異構(gòu)體。(5)合成時(shí)產(chǎn)生的中間體。 (1)(5)這些雜質(zhì)在310340 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)有吸收，因此，在測(cè)定維生素A含量時(shí)，必須考慮這些雜質(zhì)的干擾。三點(diǎn)校正法可以消除這些雜質(zhì)的影響。第二十七張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月5、測(cè)定方法（1）基本步驟:第一步 A的選擇 選擇依據(jù)： 所選A值中雜質(zhì)的干擾已被基本消除第二十八張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第二步：求百分吸收系數(shù)， 注意： C 為混

11、合樣品的濃度第二十九張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第三步 求效價(jià)換算因數(shù)由純品計(jì)算而得：第三十張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第三十一張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第三十二張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第四步：求標(biāo)示量第三十三張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(2)第一法等波長(zhǎng)差法，高純度VA醋酸酯測(cè)量方法：計(jì)算各波長(zhǎng)下的吸收度與328nm波長(zhǎng)下的吸收度的比值第三十四張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月判斷 是否在326329nm之間在326329nm之間改用第二法是否 求算 并與規(guī)定值比較第三十五張，PPT共

12、一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 規(guī)定值 差值第三十六張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月判斷前提；最大吸收波長(zhǎng)在326329nm之間A的選取直接用A328A328 A328校正 第一法不適用 第三十七張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月03%15%3%第二法第二法第三十八張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月討 論VA醋酸酯的吸收度校正公式是用直線方程式法（即代數(shù)法）推導(dǎo)而來(lái)；VA醇的吸收度校正公式是用相似三角形法（幾何法或稱6/7定位法）推導(dǎo)而來(lái)。在應(yīng)用三點(diǎn)校正法時(shí)，除其中一點(diǎn)在最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定外，其余兩點(diǎn)均在最大吸收峰的兩側(cè)進(jìn)行測(cè)定。在測(cè)定前務(wù)必要校正波長(zhǎng)

13、。測(cè)定的樣品應(yīng)不得少于兩份。第三十九張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（3）第二法皂化法：適用于維生素A醇加熱回流第四十張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月判斷max是否在323327nm之間取未皂化樣品采用色譜法純化后再測(cè)定計(jì)算是否0.73 進(jìn)一步判斷0.73，雜質(zhì)含量過(guò)高第四十一張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月03%3%第四十二張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月二、三氯化銻比色法優(yōu)點(diǎn) 簡(jiǎn)便 快速max 618nm620nm標(biāo)準(zhǔn)曲線法缺點(diǎn)呈色不穩(wěn)定 （5 10s內(nèi)）水分干擾與標(biāo)準(zhǔn)曲線溫差1專屬性差三氯化銻有腐蝕性第四十三張，PPT共一百四十九頁(yè)

14、，創(chuàng)作于2022年6月（三）高效液相色譜法RP-HPLC同時(shí)測(cè)定人血清中VitA和VitE的含量1、儀器與分析條件：HPLC-UV、C18 (3003.9 mm）、甲醇水（96：4）、流速：1.2 ml/min、檢測(cè)波長(zhǎng)：08min (330 nm), 8 min后(292 nm）內(nèi)標(biāo)：維生素A醋酸酯第四十四張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月血清樣品的制備：LLE法制備分析方法的建立： 線性 LOD Recovery PrecisionChromatogram:第四十五張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月作業(yè)：維生素AD膠丸中維生素A醋酸酯的測(cè)定方法如下：取內(nèi)容物0.04

15、10g，加環(huán)己烷溶解并稀釋至50ml，搖勻，取出2ml加環(huán)己烷溶解并稀釋至25ml，搖勻，在下列5個(gè)波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度如下：已知：平均丸重（平均內(nèi)容物重）=0.0910g，標(biāo)示量10000IU/丸，求維生素A醋酸酯的標(biāo)示量%？波長(zhǎng)（nm）測(cè)得A值藥典規(guī)定的吸收度比值3000.2120.5553160.3090.9073280.3371.0003400.2730.8113600.1160.299第四十六張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第二節(jié) 維生素Bl的分析第四十七張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第四十八張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月二、結(jié)構(gòu)及性質(zhì)(一)

16、結(jié)構(gòu)氨基嘧啶環(huán)CH2噻唑環(huán)(季銨堿)HClCl-存在于米糠、麥麩和酵母中人工合成第四十九張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(二)性質(zhì)（1）溶解性： 在水中易溶，水溶液顯酸性 在乙醇中微溶，在乙醚中不溶（2）具有紫外吸收：max=246nm（HCl溶液）（3）硫色素反應(yīng)：具有熒光第五十張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（4）堿性 可與酸成鹽 與生物堿沉淀試劑反應(yīng)，生成組成恒定的沉淀。 （5）氯化物特性嘧啶環(huán) 伯胺噻唑環(huán) 季銨碘化汞鉀、三硝基酚、碘溶液、硅鎢酸等第五十一張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月三、鑒別試驗(yàn)(一)硫色素反應(yīng)維生素B1的專屬反應(yīng)原理：第五十

17、二張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第五十三張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月硫色素【O】第五十四張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月注意事項(xiàng)：(1)硫色素反應(yīng)為維生素Bl的專屬反應(yīng)，雖非定量完成，但在一定條件下形成的硫色素與維生素Bl濃度成正比，且回收恒定。故可用于維生素Bl及其制劑的含量測(cè)定。(2)本法為維生素B1所特有，故不受氧化破壞產(chǎn)物的干擾，測(cè)定結(jié)果較為準(zhǔn)確。但操作繁瑣，且熒光測(cè)定受多種因素干擾；(3)本法中使用的氧化劑，除鐵氰化鉀外、尚可用氯化汞或溴化氰。其中，溴化氰能將維生素Bl完全定量地氧化為硫色素，在較寬的濃度范圍內(nèi)與熒光強(qiáng)度成正比，且尿液中

18、某些代謝產(chǎn)物不干擾測(cè)定。故亦適用于臨床體液分析。 第五十五張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月VitB1H+H+H+H+（二）沉淀反應(yīng)第五十六張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月S元素反應(yīng)Cl-反應(yīng)（三）其他反應(yīng)()21PbSNaSVitBNO3PbNaOH第五十七張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月四、含量測(cè)定非水溶液滴定法（原料）和紫外分光光度法（制劑）、硫色素?zé)晒夥ǎ║SP（24）。（一）非水滴定法1、原理： 含有兩個(gè)堿性的已成鹽的伯胺和季銨基團(tuán)，在非水溶液中可與高氯酸作用，用于含量測(cè)定。喹那啶紅亞甲藍(lán)（紫紅天藍(lán)）第五十八張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于20

19、22年6月第五十九張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2、方法： 用冰醋酸作溶劑，滴加醋酸汞， 以喹哪啶紅亞甲藍(lán)混合物作指示劑， 高氯酸作滴定液第六十張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3、注意事項(xiàng)：（1）加醋酸汞。（2）滴定度為16.86mg/ml。 VB1有兩個(gè)堿性基團(tuán)，與高氯酸反應(yīng)的摩爾比為12（3）非水容量法可用于弱酸性特別是弱堿性藥物及其鹽類的含量測(cè)定。（4）此處僅適用于維生素B1的原料藥含量測(cè)定。第六十一張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（二）紫外分光光度法1、原理：第六十二張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2、VB1片的含量測(cè)定測(cè)定方法

20、： 以鹽酸溶液 (91000)作溶劑，在246nm測(cè)定吸收度，按Cl2Hl7ClN4OSHCl的吸收系數(shù) (百分吸收系數(shù))為421計(jì)算，即得。第六十三張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月片劑、注射劑= 421（每片）相當(dāng)于標(biāo)示量的%=A = ECL規(guī)格g/片g/100mlgChP第六十四張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（每ml）相當(dāng)于標(biāo)示量的%=規(guī)格g/mlml第六十五張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月差示分光光度法簡(jiǎn)稱A法 取兩份相等的供試液，一份加酸，另一份加堿或緩沖液或其他能夠發(fā)生某種化學(xué)反應(yīng)的試劑，有時(shí)也可不加任何溶液，然后將兩者分別稀釋至同樣濃度，

21、一份置樣品池中，另一份置參比池中，于適當(dāng)波長(zhǎng)處，測(cè)其吸收度的差值（A值） 在供試溶液的一定濃度范圍內(nèi)，A值與濃度C之間呈線性關(guān)系。優(yōu)點(diǎn)：在不同pH介質(zhì)中，或經(jīng)適當(dāng)化學(xué)反應(yīng)后，供試物發(fā)生了特征性的光譜變化，而賦形劑或其他共存物質(zhì)不受pH條件或化學(xué)試劑的影響，未引起光譜變化，從而消除了它們的干擾。 第六十六張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月差示分光光度法A法使用：1、利用最大吸收波長(zhǎng)進(jìn)行藥物的測(cè)定：紫外光譜對(duì)pH十分敏感時(shí)，可測(cè)得A（堿-酸）或A（pH7-酸）。2、利用最大吸收與最小吸收之差（即振幅）進(jìn)行藥物測(cè)定：某些藥物共存物在某pH范圍內(nèi)的光譜與pH無(wú)關(guān)（即吸收度不變）。而主藥有最

22、大和最小吸收，兩者差值與主藥濃度成正比。第六十七張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月差示分光光度法A法使用：3、利用干擾雜質(zhì)等吸收波長(zhǎng)進(jìn)行測(cè)定：于干擾物的等吸收波長(zhǎng)處進(jìn)行測(cè)量，如測(cè)得供試物的相應(yīng)吸收度，即可消除共存物的干擾。4、利用最小吸收波長(zhǎng)(lmin)處的增色效應(yīng)進(jìn)行測(cè)定：某些藥物在堿性和酸性溶液中吸收重疊，但吸收值不同。但在堿性或酸性溶液中于lmax或lmin處可產(chǎn)生增色效應(yīng)，利用此效應(yīng)可測(cè)定藥物濃度。 第六十八張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（三）硫色素?zé)晒夥ㄔ?、熒光硫色素異丁醇鐵氰化鉀1VitBNaOH通過(guò)與對(duì)照品熒光強(qiáng)度的比較即可測(cè)得供試品含量第六十九張

23、，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2、實(shí)驗(yàn)操作 40 ml具塞試管3支對(duì)照品溶液5 ml；其中2支加入氧化試劑3.0 ml，再迅速加入異丁醇20 ml，振搖。第三支試管中加入3.5 mol/l的NaOH，同法操作為空白。 另取三支試管加入供試品，同法操作。 各試管中加入無(wú)水乙醇2 ml，分取異丁醇，進(jìn)行熒光測(cè)定。第七十張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3、結(jié)果計(jì)算式中：A和S分別為供試品和對(duì)照品溶液測(cè)得的平均熒光讀數(shù)； b和d則分別為其相應(yīng)的空白讀數(shù)； 0.2為對(duì)照品溶液的濃度（g/ml）； 5為測(cè)定時(shí)對(duì)照品溶液的取樣體積（ml）。第七十一張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于

24、2022年6月特點(diǎn)4、（1）靈敏度高，線性范圍寬（2）代謝產(chǎn)物不干擾，適用于體液分析（3）該法適用于VitB1的制劑含量分析（4）可用BrCN為氧化劑，反應(yīng)定量完全，適合于生物樣本分析第七十二張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第三節(jié)維生素C的分析功效：1、促進(jìn)膠原蛋白的合成2、治療壞血病 3、預(yù)防牙齦萎縮、出血 4、預(yù)防動(dòng)脈硬化 5、抗氧化劑 6、治療貧血7、防癌 8、保護(hù)肝臟的解毒能力和細(xì)胞的正常代謝 9、提高人體的免疫力 10、提高機(jī)體的應(yīng)急能力 第七十三張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月維生素C有四種光學(xué)異構(gòu)體，其中以L-構(gòu)型右旋體的生物活性最強(qiáng)。 藥典：維生素C

25、原料、片劑、泡騰片、顆粒劑和注射劑第七十四張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月一、結(jié)構(gòu)及性質(zhì)(一) 結(jié)構(gòu)具有烯二醇結(jié)構(gòu)和內(nèi)酯環(huán)在C4、C5有兩個(gè)手性碳原子性質(zhì)活潑具有旋光性 第七十五張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（二）性質(zhì)1、溶解性： 水中易溶 乙醇中略溶，在氯仿或乙醚中不溶 水溶液呈酸性第七十六張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月C3OH的pKa = 4.17C2OH的pKa = 11.57一元酸（與碳酸氫鈉成鹽）2、具有酸性第七十七張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月烯二醇結(jié)構(gòu)（抗壞血酸）二酮基結(jié)構(gòu)（去氫抗壞血酸）烯二醇結(jié)構(gòu)o -2H +2H3

26、、強(qiáng)還原性第七十八張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月有活性有活性無(wú)活性L-二酮古洛糖酸第七十九張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月L(+)抗壞血酸活性最強(qiáng)手性C（C4、C5）*4、光學(xué)活性第八十張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月與堿反應(yīng)內(nèi)酯環(huán)5、水解性第八十一張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月糖類的顯色反應(yīng)50結(jié)構(gòu)與糖類相似6、糖類的性質(zhì)第八十二張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月7、紫外吸收特性第八十三張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月二、鑒別試驗(yàn)（一）利用VC所具有的強(qiáng)還原性第八十四張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022

27、年6月1、與硝酸銀反應(yīng)(1)方法：取本品0.2g，加水l0ml溶解。取該溶液5m1，加硝酸銀試液0.5m1，即生成銀的黑色沉淀。 (2)原理：烯二醇基，具強(qiáng)還原性 第八十五張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2、與2，6二氯靛酚反應(yīng)(1)方法：取本品0.2 g，加水l0ml溶解。取該溶液5m1，加2，6二氯靛酚試液12滴，試液的顏色即消失。第八十六張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月原理：氧化型玫瑰紅色還原型藍(lán)色OH（玫瑰色）（無(wú)色）第八十七張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3、與其他氧化劑反應(yīng)亞甲藍(lán)或高錳酸鉀 試劑褪色堿性酒石酸銅 磚紅色沉淀磷鉬酸 鉬藍(lán)第八十

28、八張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月或鹽酸吡咯50（二）利用維生素C所具有糖類性質(zhì)的反應(yīng)第八十九張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 H+吡咯第九十張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（三）利用VC所具有的紫外吸收特性 維生素C在0.0lmol/L鹽酸液中，在243nm 波長(zhǎng)處有惟一的最大吸收，利用此特征進(jìn)行鑒別。 BP中采用該法，并規(guī)定其吸收系數(shù)應(yīng)為545585之間（四）薄層色譜第九十一張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月三、雜質(zhì)檢查1.溶液的澄清度與顏色：有色雜質(zhì) 分光光度法2.鐵、銅離子：原子吸收分光光度法3.草酸的檢查： 第九十二張，PPT共一

29、百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月四、含量測(cè)定 具有較強(qiáng)的還原性，可被不同氧化劑定量氧化。（一）碘量法1、原理指示劑 淀粉指示液第九十三張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月H+第九十四張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 取本品約0.2g，精密稱定，加新沸過(guò)的冷水100ml與稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0.1mol/L）滴定，至溶液顯藍(lán)色，在30秒內(nèi)不褪。每1ml碘滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于8.806mg的C6H8O6方法2、第九十五張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3、注意事項(xiàng)防止樣品氧化 減慢VitC被O2氧化速度用新沸冷水

30、作溶劑 趕走水中O2應(yīng)用范圍廣 對(duì)維生素C原料、維生素C片、維生素C泡騰片、維生素C注射液、維生素C顆粒劑等的含量測(cè)定均采用。 差別僅在前處理：為了消除制劑中輔料對(duì)測(cè)定的干擾，滴定前要作些必要的處理。第九十六張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月4、附加劑干擾的排除片劑 滑石粉 過(guò)濾注射劑 抗氧劑 丙酮甲醛Na2SO3 NaHSO3 Na2S2O3 Na2S2O5 第九十七張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2，6 - 二氯靛酚滴定法（二）USPJP原理1、酚亞胺二氯靛酚，-62VitC第九十八張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月自身指示終點(diǎn)法方法2、第九十九張，P

31、PT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（2）快速滴定 2min內(nèi) （1）酸性環(huán)境 HPO3-HAc 穩(wěn)定VitC防止其他還原性物質(zhì)干擾（3）剩余比色測(cè)定 （定量過(guò)量）（測(cè)剩余染料）討論3、第一百?gòu)?，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（4）缺點(diǎn) 需經(jīng)常標(biāo)定貯存一周不穩(wěn)定干擾多 氧化力較強(qiáng)第一百零一張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（三）高效液相色譜法人血漿中VitC濃度的HPLC法測(cè)定1、色譜條件2、標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備3、血漿樣品的處理：酸性溶液沉淀蛋白法4、方法學(xué)考察5、測(cè)定第一百零二張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第一百零三張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于20

32、22年6月是抗佝僂病維生素的總稱。收載有：維生素D2、D3原料藥、維生素D2膠丸和注射劑、維生素D3注射劑等。第四節(jié) 維生素D的分析第一百零四張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月維生素D3膽骨化醇一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)維生素D2骨化醇24（一）結(jié)構(gòu)第一百零五張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（二）性質(zhì)：1、性狀：D2、D3無(wú)臭、無(wú)味，遇光易變質(zhì)2、溶解性：在植物油中略溶，水中不溶3、不穩(wěn)定性：含有多個(gè)烯鍵，不穩(wěn)定，易氧化變質(zhì)降低效價(jià)，毒性增加。4、旋光性：維生素D2有6個(gè)手性碳原子 維生素D3有5個(gè)手性碳原子5、顯色反應(yīng)：甾醇類化合物共有6、紫外吸收特性第一百零六張，PPT共一百

33、四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月二、鑒別試驗(yàn)（一）顯色反應(yīng)1. 醋酐-硫酸反應(yīng) D2 黃 紅 紫 綠 D3 黃 紅 紫、藍(lán)綠 綠 2.三氯化銻反應(yīng) 橙紅色漸變粉紅3.三氯化鐵反應(yīng) 橙黃色4.二氯丙醇和乙酰氯反應(yīng) 綠色漸變漸變迅即迅即第一百零七張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（二）比旋度鑒別維生素D2維生素D3溶 劑 濃 度 比旋度值無(wú)水乙醇無(wú)水乙醇40mg/ml5mg/ml+102.5+107.5+105+112注意事項(xiàng)：應(yīng)于容器開(kāi)啟30分鐘內(nèi)取樣 在溶液配制后30分鐘內(nèi)測(cè)定第一百零八張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（三）區(qū)別反應(yīng)：以96%乙醇為溶劑，加乙醇和85%硫

34、酸D2顯紅色，在570nm處有最大吸收D3顯黃色，在495nm處有最大吸收4.其他方法： TLC、HPLC、制備衍生物測(cè)熔點(diǎn)。第一百零九張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月三、雜質(zhì)檢查維生素D2中麥角甾醇的檢查：加洋地黃皂苷溶液，混合，放置18h不得發(fā)生渾濁或沉淀。前維生素D的光照產(chǎn)物第一百一十張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月四、含量測(cè)定方法 中國(guó)藥典 采用正相高效液相色譜法(NP-HPLC）測(cè)定維生素D的含量，定量方法為內(nèi)標(biāo)法，內(nèi)標(biāo)物為鄰苯二甲酸二甲酯。 根據(jù)樣品的具體情況按以下三個(gè)方法進(jìn)行分析。第一百一十一張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第一法：用于無(wú)

35、維生素A醇及其它雜質(zhì)干擾的情況系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：測(cè)定重復(fù)性和分離度。固定相：硅膠流動(dòng)相：正己烷-正戊醇（997：3）照射第一百一十二張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第二法：用于有雜質(zhì)的干擾的情況，步驟如下：1皂化處理：皂化、乙醚提取、洗滌提取液、蒸發(fā)除乙醚、制備供試液A。2凈化：供試液A經(jīng)液相色譜分離，準(zhǔn)確收集含有維生素D及前維生素D混合物的全部流出液，制備成供試液B。 固定相：ODS 流動(dòng)相：甲醇-乙腈-水（50：50：2） 3含量測(cè)定：取供試液B按第一法測(cè)定。第一百一十三張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第三法：用于經(jīng)第二法處理后仍有雜質(zhì)的干擾的情況1制備供試液：取

36、供試液A，凈化，水浴加熱，正已烷溶解，得供試液C。 制備對(duì)照液：對(duì)照品儲(chǔ)備液（異辛烷溶解），稀釋、加熱。2含量測(cè)定：在第一法的色譜條件下，交替精密進(jìn)樣。 對(duì)照液和供試液，按外標(biāo)法定量第一百一十四張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月討論1、采用的是正相高效液相色譜法2、測(cè)定過(guò)程中應(yīng)避免VitD的氧化3、皂化應(yīng)劇烈振搖，水浴溫度40，提取溶劑大多采用己烷或戊烷以消除苯的毒性4、若供試品中沒(méi)有VitA醇及其它雜質(zhì)干擾時(shí)，可以直接進(jìn)樣分析5、注意色譜系統(tǒng)適用性樣品VitD、前VitD的制備方法第一百一十五張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月一、結(jié)構(gòu)及性質(zhì)(一)結(jié)構(gòu) 維生素E為苯并二

37、氫吡喃醇衍生物，苯環(huán)上有一個(gè)乙?；姆恿u基，故又稱生育酚醋酸酯。有、和四種異構(gòu)體，其中以異構(gòu)體的生理作用最強(qiáng)。第五節(jié) 維生素E的分析第一百一十六張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月dl生育酚醋酸酯第一百一十七張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(二)性質(zhì)1、溶解性 微黃色或黃色透明的粘稠液體 易溶于乙醇、丙酮、乙醚、石油醚中，不溶于水2、具有紫外吸收：苯環(huán)上有酚羥基 VE的0.lmg/ml無(wú)水乙醇溶液在284nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度時(shí)，其吸收系數(shù)為41.045.0。第一百一十八張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3、易水解氧化：在無(wú)氧或其他氧化劑存在時(shí)，對(duì)熱穩(wěn)定在有氧

38、或其他氧化劑存在時(shí)，遇光、空氣可被氧化 第一百一十九張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月二、鑒別試驗(yàn)（一）硝酸反應(yīng)原理：7515橙紅色第一百二十張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（橙紅色）生育紅HNO3強(qiáng)氧化劑第一百二十一張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（二）三氯化鐵反應(yīng)第一百二十二張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 = 41.045.5max = 284nmmin = 254nm0.01%無(wú)水乙醇中UV法（三）第一百二十三張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月薄層板 硅膠G展開(kāi)劑 環(huán)己烷 -乙醚（4 ：1）顯色劑 硫酸（105 5） 結(jié)

39、果各物質(zhì)的Rf值分別為：-生育酚為0.5-生育酚醋酸酯為0.7-生育酮為0.9（四）TCL法第一百二十四張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月三、特殊雜質(zhì)1、酸度 目的：制備過(guò)程引入的游離醋酸 方法：以NaOH滴定液（0.1mol/L0.5ml）體積控制。2、游離生育酚的檢查 原理：利用游離生育酚的還原性，用硫酸鈰滴定液 (0.0lmol/L)滴定，以二苯胺為指示劑，雜質(zhì)的限量為2.15%。第一百二十五張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月硫酸鈰滴定液（0.01mol/L）二苯胺（亮黃灰紫）（二）試劑第一百二十六張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（M生育酚= 430

40、.8） 取本品0.10g，加無(wú)水乙醇5ml溶解后，加二苯胺試液1滴，用硫酸鈰液（0.01mol/L）滴定，消耗硫酸鈰液（0.01mol/L）不得過(guò) 1.0ml。 第一百二十七張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2.15限量（三）第一百二十八張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月藥典規(guī)定消耗硫酸鈰液（0.01mol/L）1.0ml若硫酸鈰液濃度不是0.01mol/L，應(yīng)重新計(jì)算硫酸鈰的消耗量第一百二十九張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月四、含量測(cè)定（一） GC法（法定方法）GC特點(diǎn)選擇性好靈敏度高速度快分離效能好揮發(fā)性低、不穩(wěn)定、極性強(qiáng)衍生化易受樣品蒸氣壓限制第一百

41、三十張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 中國(guó)藥典（2005年版）規(guī)定：VE的原料藥、片劑、注射劑、膠丸、粉劑等都采用氣相色譜法。1、色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 載氣：氮?dú)?固定相：硅酮 (OV-I7) 涂布于經(jīng)酸洗并硅烷化處理的硅藻土或高分子多孔小球上，涂布濃度為2%;第一百三十一張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 柱溫：265; 進(jìn)樣口溫度高于柱溫3050 檢測(cè)器：氫火焰離子化檢測(cè)器; 柱效：理論塔板數(shù)按維生素E峰計(jì)算應(yīng)不低于500 分離度：維生素E峰與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰的分離度應(yīng)大于22、校正因子測(cè)定 內(nèi)標(biāo)：正三十二烷，加正己烷溶解稀釋成含 1.0mg/lml 進(jìn)樣量：131

42、3、測(cè)定方法 取131注入氣相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算，即得。第一百三十二張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(二)HPLC用外標(biāo)法可以測(cè)定dl生育酚1、色譜條件：色譜柱：內(nèi)徑4mm,長(zhǎng)1530Cm的不銹鋼柱;填充以粒徑5l0m的十八烷基硅烷鍵合硅膠固定相流動(dòng)相：甲醇-水 (49:1)紫外檢測(cè)器;波長(zhǎng)為292nm維生素E比醋酸維生素E先出峰，且二峰的分離度應(yīng)大于2.6。需做重現(xiàn)性試驗(yàn)，即重復(fù)試驗(yàn)3次，峰高的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于0.8%。第一百三十三張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2、測(cè)定方法：取供試品液和對(duì)照品液各20l注入高效液相色譜儀中，記錄峰高HX和Hr3、計(jì)算：供試品中維生素E的量mx(mg)=式中：mr為生育酚對(duì)照品的量，Hx、Hr為生育酚供試品、對(duì)照品中檢測(cè)得峰高。第一百三十四張，PPT共一百四十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（三）熒光分光光度法1、藥物本身具有熒光2、溶劑產(chǎn)生的拉曼光譜影響測(cè)定方法的靈敏度和準(zhǔn)確度3、采用同步熒光掃描法測(cè)定